尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞凋亡与Fas、FasL表达的研究

目的 :研究尖锐湿疣 (CA)患者外周血淋巴细胞 (PBLC)凋亡及Fas、FasL的表达情况 ,探讨CA免疫发病机制。方法 :采用流式细胞仪 (FCM)的直接免疫荧光标记法检测CA患者PBLC表面Fas、FasL的表达与细胞凋亡率。结果 :CA患者PBLC凋亡率及Fas、FasL表达水平均明显高于对照组 (P <0 0 1 ) ,PBLC凋亡率与Fas、FasL表达水平呈正相关 (r =0 6781 ,P <0 0 1 ;r <0 72 82 ,P <0 0 1 )。结论 :CA患者体内免疫功能异常与淋巴细胞凋亡过度有关 ,Fas/FasL在介导凋亡中可能起重要作用     

辐照血液淋巴细胞凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax表达的研究

目的研究60Co辐照血液淋巴细胞凋亡相关基因Fas/FasL、Bc l-Bax的蛋白表达水平。方法利用淋巴血细胞分离液分离辐照前后血液的淋巴血细胞,应用单色流式细胞术(FCM)检测凋亡相关蛋白的表达。结果经35 Gy剂量的60Coγ射线辐照的全血,淋巴细胞凋亡基因蛋白Fas、FasL表达显著升高,P<0.05,Fas/FasL的比值无显著性差异(P>0.05);而凋亡基因Bc l-2、Bax蛋白表达明显下降,P<0.05,但Bc l-2/Bax的比值下降更加显著,P<0.01。结论60Co辐照可促使离体全血淋巴细胞凋亡,并且可应用凋亡相关蛋白Fas、FasL、Bc l-2/Bax比值作为判断离体全血淋巴细胞经60Co辐照后是否灭活的参考指标。     

慢性阻塞性肺疾病患者T淋巴细胞亚群凋亡与Fas、FasL、Bcl-2表达的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+T细胞凋亡状态及其细胞表面Fas、FasL、Bcl-2抗原的表达,以探讨T淋巴细胞亚群凋亡不足/过度与这些抗原表达的关系。方法选取急性加重期(AE-COPD)及稳定期COPD患者30例,另设正常对照组20例,采用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群细胞凋亡率及其表面Fas、FasL、Bcl-2抗原表达水平。结果 (1)与正常对照组相比,COPD急性加重期及稳定期患者CD4+T凋亡率均增加,CD8+T凋亡率均降低,P<0.05;与COPD稳定期相比,COPD急性加重期患者CD4+凋亡率增加,CD8+凋亡率降低,P<0.05;(2)与正常对照组相比,COPD急性加重期及稳定期患者CD4+Fas、CD4+FasL的表达均增加,CD4+Bcl-2表达降低,P<0.01;与COPD稳定期相比,COPD急性加重期患者CD4+Fas、CD4+FasL的表达均增加,CD4+Bcl-2表达降低,P<0.05;且COPD稳定期、急性加重期CD4+凋亡率均与CD4+Fas、CD4+FasL正呈相关,与CD4+Bcl-2负相关;(3)与正常对照组相比,COPD急性加重期及稳定期患者CD8+Fas、CD8+FasL的表达均增加(P<0.05);与COPD稳定期相比,COPD急性加重期患者CD8+Fas、CD8+FasL的表达增加(P<0.05),三组之间CD8+Bcl-2表达无统计学意义(P>0.05);CD8+凋亡率与CD8+Fas、CD8+FasL、CD8+Bcl-2表达无相关性。结论 (1)COPD患者CD4+T凋亡增加,凋亡途径Fas/FasL及Bcl-2可能起重要作用;(2)COPD患者CD8+凋亡与其表达Fas、FasL、Bcl-2无相关性,凋亡途径Fas/FasL及Bcl-2可能不起主要作用,其具体机制有待进一步研究。     

Bay 11-7082增强Fas介导的HL-60细胞凋亡作用

本研究观察NF-κB抑制剂Bay 11-7082对HL-60细胞Fas/FasL系统的作用及对Fas介导的HL-60细胞凋亡的影响。用RT-PCR和流式细胞术检测Bay 11-7082干预后HL-60细胞Fas、FasL和XIAP的mRNA和蛋白表达水平的变化;用ELISA方法检测Bay 11-7082干预前后sFasL水平的变化;流式细胞术检测Bay 11-7082干预前后CH-11(活性Fas抗体)诱导HL-60细胞凋亡的变化。结果表明:用Bay 11-7082干预后,HL-60细胞FasL和XIAP的mRNA和蛋白水平较对照组明显下降,差异具有显著性(p<0.05),Fas的mRNA、蛋白水平的变化和sFasL水平的变化无显著的差异(p>0.05);Bay 11-7082干预后HL-60细胞对CH-11诱导细胞凋亡敏感性显著增强。结论:Bay 11-7082可能通过下调FasL和XIAP水平增强HL-60细胞Fas介导的凋亡。     

辐照血液凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的检测及意义

目的检测经~(137)Csγ射线辐照红细胞悬液后淋巴细胞凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达水平,并分析其临床意义。方法利用Fas-异硫氰酸荧光素(FITC)、FasL-FITC、Bcl-2-FITC、Bax-FITC荧光标记抗体,应用单色流式细胞术检测辐照血液与未辐照血液的淋巴细胞凋亡相关蛋白的表达。结果经25 Gy剂量的~(137)Csγ射线辐照的红细胞悬液,淋巴细胞凋亡蛋白Fas、FasL表达显著升高(P0.05),Fas/FasL的比值差异无统计学意义(P0.05);而凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达明显下降(P0.05),且Bcl-2/Bax的比值下降更加显著(P0.01)。结论 ~(137)Csγ射线辐照可促使离体血液淋巴细胞凋亡,并且可应用凋亡相关蛋白Fas、FasL、Bcl-2/Bax比值作为判断离体血液淋巴细胞经~(137)Csγ射线辐照后是否灭活的参考指标。     

铜负荷大鼠肝脏FAS、FASL的表达及其意义

目的:观察铜负荷大鼠肝脏Fas和FasL的表达情况,探讨细胞凋亡在铜损伤肝脏中的意义。方法:建立铜负荷大鼠模型,TUNEL法观察铜负荷大鼠肝脏凋亡改变,免疫组化法测定肝组织Fas和FasL的表达。结果:凋亡指数(AI)随铜负荷时间上升,从正常对照组的(2.23±1.34)%上升到铜负荷模型组的(15.78±2.42)%(P<0.01);与正常对照组相比较,铜负荷组Fas和FasL在肝细胞中的表达显著增强(P<0.01)。结论:过多的铜可以诱导肝脏的凋亡,Fas/FasL系统介导了铜负荷大鼠肝细胞的凋亡。     

HBV相关性肝细胞癌病人Fas检测及意义

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）相关性肝细胞癌病人外周血淋巴细胞表面所表达的Fas／FasL与血清sFas／sFasL的变化规律及意义。方法对47例HBV相关性肝细胞癌病人、50例无症状HBV携带者及57例健康志愿者（健康对照组）外周血淋巴细胞的凋亡率、膜性Fas／FasL表达和血清sFas／sFasL含量进行检测。结果与无症状HBV携带组及健康对照组比较,HBV相关性肝细胞癌组外周血淋巴细胞早期凋亡率增高,膜性Fas表达率升高,而FasL表达率则显著降低,差异有显著性（F=6．13～15．34,q=4．02～32．10,P〈0．01）;血清sFas含量升高,sFasL含量降低,差异有显著性（F=7．30、4．20,q=6．19～42．35,P〈0．01）。无症状HBV携带组与健康对照组各指标比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HBV相关性肝细胞癌病人体内依赖Fas介导的细胞毒性T淋巴细胞失去杀伤性识别作用,对淋巴细胞的清除能力下降,导致肿瘤细胞获得异常生存能力。     

血液透析患者细胞凋亡抑制基因BcL-2表达对外周血淋巴细胞凋亡的影响

目的探讨细胞凋亡抑制基因BcL-2表达对血液透析(HD)患者外周血淋巴细胞凋亡的影响.方法采用荧光双标单抗免疫标记淋巴细胞法和流式细胞术检测血液透析患者外周血淋巴细胞BcL-2表达水平.结果①血液透析患者的细胞凋亡抑制基因(BcL-2)表达较正常人明显降低(P＜0.01),HD后,BcL-2表达白细胞介素2水平有所增加,并与白细胞介素2(IL-2)浓度变化呈显著正相关,而与白细胞介素2可溶性受体(sIL-2R)水平呈负相关;②与正常对照组相比,血液透析患者活化诱导的CD3 细胞凋亡增强,且随着透析时间的延长,其凋亡率逐渐增加,呈现时间依赖性;③在体外培养的淋巴细胞上清液中,血液透析患者的sIL-2R对外源性重组白细胞介素2(rIL-2)的反应性较正常人增高,细胞表面IL-2R的自发表达亦较正常组明显升高(P＜0.01),而体内实验表明,血浆sIL-2R变化与血肌酐水平呈显著正相关,并与透析时间有关.结论BcL-2和IL-2表达异常可促使外周血淋巴细胞凋亡,并与血液透析患者免疫损伤的发生、发展相关.     

罗格列酮对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及其基因表达的影响

目的:观察急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡率、凋亡调控基因Fas/FasL的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法:通过结扎雄性Wistar大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死模型,心肌梗死后24 h随机分为心肌梗死组(A组,n=18)和罗格列酮干预组(B组,n=18),另设假手术组(C组,n=18)。B组每日给以罗格列酮灌胃(4 mg/kg),持续6周。A、C组每日给以等量生理盐水灌胃。6周后检测心肌非梗死区中细胞凋亡率、细胞凋亡基因Fas mRNA和Fas/FasL蛋白的表达量。结果:给药6周后急性心肌梗死组A、B组心肌细胞中心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL及其蛋白表达与C组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,B组中心肌细胞凋亡指数,Fas/FasL基因及其蛋白表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠心肌梗死后心肌细胞中细胞凋亡率、Fas/FasL基因及蛋白表达显著增高;而罗格列酮可以降低大鼠心肌梗死后心肌细胞中Fas/FasL基因及蛋白表达,减少心肌细胞凋亡。     

大肠腺癌Fas-FasL表达及其浸润淋巴细胞FasL的表达和临床病理研究

目的:探讨大肠腺癌Fas-FasL表达及其浸润淋巴细胞FasL表达的临床病理意义。方法:采用免疫组织化学方法分别检测40例大肠正常粘膜上皮、20例良性增生息肉、44例腺瘤和50例腺癌(含各分期)的Fas-FasL的表达,结合流式细胞仪检测大肠腺癌组织细胞的凋亡率。结果:免疫组织化检测40例正常粘膜上皮、20例增生性息肉、44例腺瘤、25例高分化腺癌、15例中分化腺癌、10例低分化腺癌,Fas表达逐渐下调,FasL逐渐上调。大肠腺癌组织、腺瘤与正常粘膜上皮的Fas-FasL阳性率表达均有显著性差异(P<0·05),正常粘膜上皮与增生性息肉的Fas-FasL阳性率表达无显著性差异(P>0·05),不同分化程度的大肠腺癌组织中Fas-FasL的表达均无显著性差异(P>0·05)。流式细胞仪检测50例大肠腺癌组织细胞凋亡率显示,在Fas蛋白阳性组中,浸润淋巴细胞FasL表达量与癌细胞凋亡指数呈正相关(P<0·05)。Fas蛋白阴性组中大肠腺癌凋亡指数与浸润淋巴细胞FasL表达无相关性(P>0·05)。结论:①Fas和FasL从正常粘膜上皮到腺瘤至癌变均有上调或下调的表达,推测Fas-FasL系统在大肠粘膜上皮癌变过程中可能起重要作用。②大肠腺癌细胞免疫逃避的机制之一可能是不表达或是低表达Fas。     

慢性肾衰竭患者血清sFas、sFasL水平变化及其与颈总动脉病变的相关性研究

目的探讨尿毒症心血管疾病（CVD）患者血清可溶性Fas、FasL（sFas、sFasL）水平与相关因子和颈总动脉血管内膜-中层厚度（IMT）的相关性。方法选择第二军医大学长征医院肾内科尿毒症血液透析（HD）伴CVD患者组103例，慢性肾病（CKD）[15〈GFR〈50ml／（min·1．73m^2）]伴CVD未透析患者组30例，正常对照组30例入选。采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）测定血清sFas、sFasL、C反应蛋白（CRP）、白蛋白浓度。免疫组化观察桡动脉血管内皮细胞的FaS、FasL表达；采用荧光逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）测定Fas、FasL mRNA的含量；彩色超声波测量颈总动脉血管内膜-中层厚度（IMT）。结果HD、CKD组血清中可溶性FasL显著高于正常对照组（P〈0．01），HD与CKD组水平差异无统计学意义，血清中可溶性Fas显著低于正常对照组（P〈0．01）。HD组血管壁Fas、FasL表达明显高于正常对照组。荧光RT-PCR Fas、FasL mRNA定量分析HD组较正常对照组高50．00％。63．49％（40／63）HD组患者IMT增厚。双变量线性相关分析发现，sFasL与CRP及IMT均呈明显的正相关r=0．58，r=0．64），P〈0．01：与白蛋白水平及肌酐清除率呈负相关（r=-0．53r=-0．62），P〈0．01；sFas则与之相反。结论血清sFasL水平及血管壁Fas、FasL高表达可能与动脉粥样硬化相关，其确切机制值得进一步研究。     

再生障碍性贫血患者Fas抗原的表达及血浆可溶性Fas,FasL？…

目的 探讨Ｆａｓ（ＣＤ９５）／ＦａｓＬ（ＣＤ９５Ｌ）系统在再生障碍性贫血（再障）中的表达及临床意义。方法 用酶联免疫夹心法检测３２例再障患血浆可溶性Ｆａｓ,ＦａｓＬ（ｓＦａｓ,ｓＦａｓＬ）,用流式细胞术检测骨髓ＣＤ３４＾＋细胞,ＣＤ３４＾－细胞和外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣｓ）Ｆａｓ抗原的表达。结果 再障患骨髓ＣＤ３４＾＋细胞Ｆａｓ表达率显高于正常对照,且重型再障组较慢性再障组显增高,重型     

多器官功能障碍综合征患者血清sFas和sFasL浓度的变化

目的探讨多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）患者血清sFas和sFasL浓度在MODS诊断以及病情严重程度和预后判断中的临床意义以及与血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的相关性。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定36例MODS患者血清sFas、sFasL和TNF-α浓度，以急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅲ（APACHEⅢ）评分和改良MODS评分评估病情严重程度，比较MODS组与对照组[包括非全身炎症反应综合征（SIRS）对照组和健康对照组]以及MODS组内死亡和存活患者之间血清sFas、sFasL浓度的差异，分析患者血清sFas、sFasL和TNF-α浓度与病情严重程度及血清sFas和sFasL与TNF-α浓度的相关性。结果MODS患者血清sFas、sFasL浓度均明显高于非SIRS对照组和健康对照组（P〈0．05或P〈0．01），且与病情严重度评分均呈正相关（P均〈0．01）。MODS患者中死亡组较存活组血清sFas、sFasL浓度明显升高（P均〈0．05）。MODS患者血清TNF-α浓度较非SIRS对照组和健康对照组明显增高，并与MODS组血清sFas、sFasL浓度呈高度正相关（P均〈0．01）。MODS患者血清sFas、sFasL浓度随器官衰竭个数增加而升高。结论血清sFas、sFasL可用于临床MODS辅助诊断和协助判断病情严重程度及预后。TNF-α可能促进了MODS中Fas／FasL系统表达上调。     

Serum soluble Fas (CD95) and Fas ligand profiles in chronic kidney failure

Apoptosis, or programmed cell death, is an active form of cell death that is initiated by a number of stimuli and is intricately regulated. Apoptosis in both excessive and reduced amounts has pathophysiologic implications. Accelerated programmed cell death has been observed in leukocytes among patients with chronic renal failure (CRF). This has been ascribed in part to the retention of uremic toxins. The Fas/Fas ligand (FasL) system is a key regulatory apoptotic pathway. Membrane-bound Fas is a cell-surface receptor that transduces apoptosis after interaction with membrane-bound or soluble FasL (sFasL). By contrast, soluble Fas (sFas) binds sFasL and inhibits its activity. In an attempt to examine the balance between these soluble factors in uremia, we measured soluble sFas and sFasL levels in the serum of healthy control subjects and patients with various degrees of CRF and examined the distribution of the various molecular mass fractions of these proteins in uremic serum. In brief, serum was obtained from 15 healthy volunteers, 17 patients with CRF, 11 patients undergoing maintenance hemodialysis (HD), and 7 patients undergoing peritoneal dialysis (PD). Serum sFas and sFasL were measured by enzyme-linked immunosorbent assay, and their molecular distribution was determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis followed by immunoblot. Compared with results in healthy control subjects, sFas levels were significantly higher in patients with CRF and in patients undergoing dialysis. There was a significant inverse correlation between sFas levels and creatinine clearance. Serum sFasL levels were not different among the four groups. However, the sFas-to-sFasL ratio was significantly lower in healthy control subjects as compared with patients with CRF and patients undergoing dialysis. Immunoblots and densitometric analyses of sFas and sFasL depicted a known 48-kd sFas, a known 27-kd sFasL, and a 60-kd sFas-sFasL protein aggregate signal. In conclusion, serum sFas levels are increased in patients with various degrees of CRF and may bind circulating sFasL, thereby minimizing mediation of cellular apoptosis.     

Soluble Fas and soluble Fas ligand levels in patients with acute hepatic failure

PURPOSE: The Fas ligand (FasL)/Fas system is an apoptosis induction system that plays an important role in homeostasis and biophylaxis. We measured tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), soluble FasL (sFasL), and soluble Fas (sFas) in patients with acute hepatic failure to determine the relation between such failure and apoptosis. MATERIALS AND METHODS: We assayed 21 blood samples from patients with acute hepatic failure and 8 from patients with sepsis but without acute hepatic failure. Serum TNF-alpha, sFas, and sFasL levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: sFasL levels were significantly higher in the patients with acute hepatic failure than in the patients with sepsis (0.68 +/- 0.42 ng/mL vs. 0 ng/mL, P =.0001). No significant differences were observed in sFas levels between the two groups. A significant correlation was observed between TNF-alpha and sFas levels (r = 0.657, P =.0008); a negative correlation was observed between TNF-alpha and sFasL levels (r = 0.454, P =.038). CONCLUSIONS: Our results suggest that pathologic aggravation of acute hepatic failure are related to changes in the FasL/Fas system and that TNF-alpha and sFasL, in particular, may play hepatoprotective roles.     

慢性乙型重症肝炎及肝癌与血清可溶性Fas可溶性Fas配体 …

目的 探讨血清可溶性Ｆａｓ／可溶性Ｆａｓ配体水平与慢性乙型重症肝炎以及乙肝病毒相关性肝细胞癌变之间的关系。方法 用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测２１例无症状乙肝病毒携带者,２０例慢性乙型重症肝炎及２２例乙肝病毒相关性肝细胞癌患者血清ｓＦａｓ、ｓＦａｓＬ水平。结果 与无症状乙肝病毒携带者比较,慢性乙肝重症肝炎患者血清ｓＦａｓ、ｓＦａｓＬ水平均增高,其差异有显著意义;乙肝病毒相关性肝细胞癌患者ｓＦａｓ水     

原发性胆汁肝硬化患者血清可溶性Fas和FasL的检测

目的分析原发性胆汁肝硬化患者血清可溶性Fas和可溶性FasL水平情况,探讨其在发病机制中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法检测原发性胆汁性肝硬化患者20例,系统性红斑狼疮患者16例,HBsAg阳性患者26例,各项指标正常体检者24例。结果原发性胆汁性肝硬化(PBC)血清中的sFas明显高于HBsAg阳性患者和正常体检者(P<0.05),和系统性红斑狼疮患者无明显区别(P>0.05)。sFasL,PBC明显高于HBsAg 阳性患者(P<0.05)但与狼疮患者和正常体检者无明显区别(P>0.05)。结论对于原发性胆汁性肝硬化患者,sFas要比sFasL相对敏感。     

可溶性Fas及其配体在小儿病毒性心肌炎中临床意义研究

目的　探讨可溶性Fas及其配体在小儿病毒性心肌炎中的表达以及与细胞凋亡和免疫反应的关系 ,旨在为病毒性心肌炎的诊断和治疗提供新的线索和依据。方法　采用ELISA法测定了 4 4例病毒性心肌炎患儿和 2 0例健康儿童血清中sFas和sFasL的表达水平 ,并进行前瞻性对比研究。结果　病毒性心肌炎患儿血清sFas和sFasL表达水平较健康儿童明显增高 (P <0 .0 1)。病毒性心肌炎患儿血清sFas与sFasL表达水平呈正相关性 (r=0 .6 5 0 9,P <0 .0 1)。儿童血清sFas和sFasL表达水平无性别差异 (P >0 .0 5 )。结论　①血清sFas及sFasL表达增高与病毒性心肌炎疾病过程有关。②sFas表达增高可进一步证实病毒性心肌炎发病与免疫因素有关。③血清sFas表达增高可望作为T淋巴细胞激活的标志以及病毒性心肌炎诊断和治疗的重要依据。     

慢性乙型肝炎患者治疗前后血清sFas和sFasL的变化及其临床意义

目的　探讨各类慢性乙型肝炎(CHB)治疗前后血清可溶性Fas(sFas)和sFas配体(sFasL)的水平变 化及其意义。方法　用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测118例各种类型CHB患者经前列腺素E1等药物治疗前 后血清sFas、sFasL的水平,并与30名健康献血者比较。结果　118例各种类型CHB患者的sFas明显高于正常 对照组(P<0.01、0.01、0.01、0.05),且重型肝炎(FH)>CHB重度>CHB中度>CHB轻度(P均<0.01),sFas 的升高与总胆红素(TBil)呈显著性正相关(r=0.605,P<0.01);FH和CHB重度的sFasL明显高于正常对照组 (P均<0.01)。恢复期各组sFas和sFasL均比治疗前明显降低(P均<0.01)。结论　血清sFas、sFasL的水平 与CHB病情密切相关,监测二者变化有助于判断病情和观察疗效。