HPLC法测定加味逍遥散复方中丹参酮ⅡA的含量

目的 建立加味逍遥散复方中丹参酮ⅡA的测定方法。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（inertsil ODS-3柱 250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相:乙腈-0.1%磷酸,进行梯度洗脱;检测波长:270 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:20℃。结果 丹参酮ⅡA在0.0001~0.0005 μg范围内呈现良好的线性关系[r=0.9991,平均回收率为97.36%（RSD=1.38%,n=6）]。结论 本方法专属性强,准确度高,重现性良好,可用于加味逍遥散的质量控制。     

丹参酮ⅡA通过iNOS缓解小鼠肺纤维化

目的探讨丹参酮ⅡA对小鼠肺纤维化的影响及其机制。方法将A549细胞和博来霉素诱导的肺纤维化小鼠分为对照组、模型组和丹参酮ⅡA干预组,RT-PCR及Western blot检测不同组间i NOS的表达水平,ELISA检测下游TNF-α、IL-1β及IL-6的表达。结果丹参酮ⅡA干预组小鼠肺组织切片和模型组相比肺泡隔纤维增生灶减少,肺组织iNOS表达水平明显降低(P0.05),肺灌洗液中TNF-α、IL-1β及IL-6水平明显降低(P0.05);A549体外实验发现丹参酮ⅡA干预组较IFN-γ刺激组iNOS表达明显降低(P0.05),细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β及IL-6水平明显降低(P0.05)。结论丹参酮ⅡA通过iNOS通路调控下游炎性因子的释放,从而缓解小鼠肺纤维化。     

丹参酮ⅡA对急性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用

目的探讨丹参酮ⅡA对急性肾功能衰竭(AFR)大鼠肾小管上皮细胞及肾功能的作用。方法将64只大鼠分为4组:对照组、模型组、丹参酮低剂量组和丹参酮高剂量组,每组又分为48 h组和72 h组两个亚组。应用肌肉内注射甘油制备大鼠AFR模型。然后腹腔内注射不同浓度的丹参酮ⅡA进行干预。然后在48 h和72 h检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和24 h尿蛋白定量;同时制作组织切片,观察肾组织结构改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织Ki-67的表达。结果丹参酮高剂量72 h组的各项病理损害指标均低于其他各组(P<0.05);丹参酮高剂量48 h及72 h组的Ki-67阳性细胞计数明显高于其他各组(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA对急性损伤的肾小管上皮细胞具有减轻病变和促进再生的作用,可明显改善ARF大鼠的肾功能。     

参麦+丹参酮ⅡA磺酸钠在慢性肺源性心脏病中的应用

目的探讨和分析参麦+丹参酮ⅡA磺酸钠在慢性肺源性心脏病中的应用。方法我院近4年来一共接受了101例慢性肺源性心脏病患者。从中抽取40例患者进行临床研究,根据研究的要求被分为对照组和实验组两组,每组人数相同。对照组对患者采用基础治疗的方法,而实验组对患者在进行基础治疗后,再采用参麦+丹参酮ⅡA磺酸钠进行治疗。把对照组和实验组的治疗效果和其他指标进行详细的对比。结果实验组的治疗有效率和患者满意度远远高于对照组。并且实验组的患者治疗后在6min步行距离和心率改善情况都明显的优于对照组(P<0.05)。结论在临床上,慢性肺源性心脏病是一种十分常见的疾病,通常情况下会导致患者动脉扩张和血液粘稠。目前临床中采用参麦+丹参酮ⅡA磺酸钠来治疗此病,效果非常的好,值得在临床上大力推广。     

丹参酮ⅡA预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用研究

目的探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参酮ⅡA预处理组,后两组进行冠状动脉左前降支结扎30min后再灌注120min。期间全程监测心率和血流动力学指标。实验结束后取心脏做Trc染色及HE染色,观察心肌梗死面积和组织学改变。结果模型组大鼠心脏功能明显下降并发生心肌梗死提示造模成功。与模型组比较,丹参酮ⅡA组在缺血30min,再灌注30、60、120min各时间点,左心室收缩末压、左室内压最大上升及下降速率明显增高、心率基本恢复正常。组织学染色显示,与模型组比较,丹参酮ⅡA组心肌梗死区面积降低、心肌细胞变性坏死程度明显减轻。结论丹参酮ⅡA预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对小鼠肾间质纤维化及CTGF的影响

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对UUO小鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及其作用机制。方法清洁级雄性CD1小鼠20只,随机分为:A组(单纯对照组)、B组(UUO造模组)、C组(STS低剂量组)、D组(STS高剂量组)。每组各5只,行右侧输尿管结扎术,单纯对照组只找到输尿管并不结扎,STS组小鼠在手术前3天开始腹腔内注射STS,低、高剂量组STS浓度分别为15 mg/kg.d、30 mg/kg.d,其他2组予同等剂量的生理盐水。UUO 7天后处死小鼠提取肾组织,Masson染色观察肾小管间质胶原纤维分布,Realtime PCR观察肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原、α-SMA的mRNA表达,Western blot观察肾组织中α-SMA蛋白质表达。结果与对照组相比,UUO小鼠Ⅰ型胶原、α-SMA、CTGF的表达增加,RIF明显(P<0.01),STS可明显抑制UUO小鼠肾组织Ⅰ型胶原、α-SMA、CTGF的表达(P<0.05),减轻RIF。结论 STS具有抑制UUO小鼠肾间质纤维化的作用,且这种作用可能与其对CTGF的抑制有关。     

丹参酮ⅡA逆转高糖诱导一氧化氮生成减少及机制研究

目的：观察丹参酮ⅡA对高糖引起内皮细胞中一氧化氮生成量减少的影响,并探讨相关的作用机制。方法：将内皮细胞随机分为空白对照组,等渗对照组,高糖处理组,溶剂对照组,丹参酮ⅡA组。一氧化氮特异性探针检测法检测内皮细胞一氧化氮含量。分别采用酶联免疫吸附(ELISA)和Griess法检测环磷酸鸟苷(cGMP)和总硝基化合物的含量。免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分别检测内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白和mRNA水平的变化。结果：丹参酮ⅡA可抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞中一氧化氮生成量(P<0.05), cGMP含量以及总硝基化合物生成的减少(P<0.05),并能逆转eNOS蛋白表达的降低(P<0.05)。结论：丹参酮ⅡA通过上调eNOS蛋白表达抑制一氧化氮生成的减少。     

丹参酮ⅡA对高原缺氧大鼠认知功能障碍的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对高原缺氧(HH)大鼠认知功能障碍的预防作用及其可能机制。方法:将54只成年雄性SD大鼠分为对照组(control)、高原缺氧组(HH)和TanⅡA治疗组(TanⅡA)。通过低压氧舱模拟高原环境,低氧28 d造模。利用Morris水迷宫试验评估大鼠认知功能;利用膜片钳技术记录海马长时程增强(LTP),评估各组大鼠认知功能;取海马组织低温匀浆,利用试剂盒检测其SOD、GSH-Px、GSH、MDA等氧化应激相关指标,评价各组大鼠海马氧化应激状态。结果:HH组大鼠在水迷宫试验中逃避潜伏期较control组延长(P 0. 05),缺氧大鼠在目标象限游动时间百分比下降;与HH组相比,TanⅡA治疗组逃避潜伏期缩短(P 0. 05),在目标象限游动时间百分比升高(P 0. 05),HH组LTP幅度较对照组显著降低(P 0. 05),TanⅡA干预后,海马LTP较模型组明显增强(P 0. 05);相对control组,HH组大鼠海马SOD、GSH-Px、GSH水平显著降低(P 0. 05)、MDA水平明显升高(P 0. 05),TanⅡA治疗组可显著逆转上述结果(P 0. 05)。结论:TanⅡA可通过降低高原缺氧大鼠海马氧化应激水平、提高其清除氧自由基能力保护海马神经元,进而减轻大鼠认知功能障碍。     

丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的蛋白组学机制研究

目的 建立大脑缺血再灌注（I/R）损伤小鼠模型,探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA)对其神经保护作用及可能的蛋白组学机制。方法 将70只C57BL/6N雄性小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注损伤模型对照组、丹参酮ⅡA治疗组。模型组采用大脑中动脉栓塞法（tMCAO）制作脑I/R损伤模型,丹参酮ⅡA治疗组采用10 mg/kg丹参酮ⅡA腹腔注射长时程干预28 d,进行神经功能评分及脑梗塞体积测定,取损伤半侧脑组织进行蛋白组学检测。结果 丹参酮ⅡA治疗可以降低脑I/R损伤后的神经功能评分,减少脑梗塞面积;蛋白组学分析显示丹参酮ⅡA治疗组与模型组比较,有109个差异蛋白表达,模型组与假手术组比较,有168个差异蛋白表达,3组比较差异表达蛋白45个,丹参酮ⅡA治疗后蛋白表达谱差异主要与脂质代谢调节、铁代谢等蛋白水平相关。结论 丹参酮ⅡA能保护脑缺血再灌注损伤,其长时程保护作用机制可能与调控脂质代谢及铁代谢等多个通路的共同作用有关。蛋白组学特征为研究丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的分子基础提供了一定的科学依据。     

丹参酮ⅡA通过阻断MAPK抑制糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的研究丹参酮ⅡA(TSN)对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的关系。方法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,BrdU掺入DNA的ELISA法测定细胞内DNA合成水平,同位素示踪法测定MAPK活性。结果原代培养的大鼠VSMCs内MAPK活性较高,使用TSN和U0126后,可明显抑制细胞的增殖和MAPK活性。结论TSN对糖尿病VSMCs内DNA的合成具有明显抑制作用,其机制可能是阻断了MAPK信号传导通路。     

益心舒丸治疗冠心病心绞痛的疗效评价及分析

目的：探讨益心舒丸治疗冠心病心绞痛的临床疗效。方法将68例冠心病心绞痛患者随机分为治疗组和对照组各34例。对照组采用血塞通片进行治疗,治疗组采用益心舒丸进行治疗,两组治疗疗程均为8w,比较两组治疗效果。结果治疗组显效率、总有效率(58.82%、97.06%)明显高于对照组,两组治疗期间均无严重不良反应发生。结论益心舒丸符合中医"通"为主、"补"为法治疗原则,能有效改善冠心病心绞痛临床症状,提高治疗效果。     

HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量

目的 建立HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量。方法 色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水（20∶80）,流速为1.0 ml/min,检测波长为244 nm,柱温30 ℃。结果 对乙酰氨基酚浓度在10.16~30.48 μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9998（n=5）;平均加样回收率为100.04%,RSD=0.95%（n=6）。结论 HPLC法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,适用于测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚的含量。     

山楂含片中熊果酸的含量测定

目的：建立山楂片中熊果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定熊果酸。色谱柱院phenomenex Kinete x2.6u XB-C18100A柱(100 mm×4.6 mm,5μm),流动相院以乙腈-0.1%磷酸水洗脱,流速1.0ml/min,检测波长院210nm,柱温40℃。结果阴性对照无干扰,熊果酸在13.5~53.9ng范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.3%,RSD=0.9(n=9),该法操作简便,方法稳定,专属性强,可作为三箭草和堂山楂含片的质量控制方法。     

HPLC法测定卤米松乳膏中有关物质

目的 建立HPLC法检测卤米松乳膏中的有关物质.方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以0.03％ 冰醋酸为流动相A,乙腈为流动相B,按一定程序进行梯度洗脱;流速为0.8 ml/min;检测波长为238 nm;柱温为35℃;进样体积为20μl.结果 该法专属性...     

高效液相色谱法测定芦荟排毒胶囊中芦荟大黄素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定芦荟排毒胶囊中芦荟大黄素的方法。方法:采用W aters 2690型高效液相色谱仪(美);检测器:996 PDA二极管阵列检测器;色谱柱:D iamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(80:20);流速:1m l/m in;于254nm波长处以外标法测定。结果:在0.0748-7.48 g/m l范围内浓度与峰面积有良好的线性关系(r=0.9999)。平均回收率为99.2%,RSD为3.18%。结论:方法简便可靠,可用于测定芦荟排毒胶囊中芦荟大黄素的含量。     

HPLC法测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量

目的 建立米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂含量测定的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用HPLC测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量.色谱条件:辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-水(91:1:8)洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量20μ...     

HPLC法同时测定人血浆中帕罗西汀和喹硫平浓度

目的 建立同时测定人血浆中帕罗西汀和喹硫平浓度的高效液相色谱( HPLC)法.方法 采用HPLC法进行测定:Inertsil ODS-C18柱(4.6×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-磷酸二氢钠(0.05 mol/L磷酸二氢钠)(39∶61),流速为1.0mL/m in,检测波长为210nm,柱温为40℃,以乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比75∶25)为萃取剂.结果 帕罗西汀在10～640μ g/L、喹硫平在20 ～ 1200μg/L范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,检测限分别为5μg/L,8μg/L.结论 该方法简单、快速、灵敏、准确,可用于临床帕罗西汀与喹硫平的血药浓度监测和药动学研究.     

HPLC法测定不同产地附子中主要成分的含量

目的 考察不同产地的西南附子中新乌头原碱,次乌头原碱和乌头原碱的含量。方法 采用HPLC进行测定,色谱柱为Diamonsil C18 柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相A为四氢呋喃-乙腈（15∶25）;流动相B为醋酸铵溶液（0.1 mol/L）,检测波长λ=235 nm;流速1 ml/min;柱温25 ℃。结果 不同产地的西南附子样品中生物碱类成分的含量有着明显差异,新乌头碱的含量以贵州小河的最高为0.17%,贵州兴义的最低为0.06%;次乌头碱的含量以四川江油的最高为0.28%,贵州花江的最低为0.13%;乌头碱的含量以云南腾冲与贵州水口寺的最高为0.04%,四川江油与贵州龙里的最低为0.01%。结论 西南附子中三种乌头碱的总含量以四川江油和云南腾冲产者最高。另外,HPLC测定法简单、易行,可为附子的产区扩大研究提供科学依据。     

HPLC法测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量

目的 建立高效液相色谱（HPLC）法测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量。方法 选择固定相为十八烷基硅烷键合硅胶（直径为5 μm）,尺寸为250 mm×4.6 mm色谱柱,以乙腈-磷酸盐缓冲液（15∶85,v/v,用磷酸调节pH至2.5±0.1）为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为255 nm,柱温为35 ℃。结果 EDTA-2Na浓度在2.0~32.0 μg/ml范围内线性方程为A=2.317×104C-1.235×103（r=0.9998）,EDTA-2Na的平均回收率为100.40%,RSD 为0.92%（n=9）。结论 本方法简便、可靠、准确度高、重复性好,可用于测定注射用泮托拉唑钠中EDTA-2Na的含量。     

Simultaneous Determination of Contents of Three Active Components in Jiejia Tincture by HPLC Method

The objective of the study was to determine the contents of three active components in Jiejia tincture by establishing HPLC method. Test articles were prepared by ultrasonic extraction. Separation was performed using a Kromasil C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) chromatographic column, and gradient elution was performed with acetonitrile-0.3% phosphoric acid solution as the mobile phase at a volumetric flow rate of 0.80 mL/min. The contents of catechin, baicalin and berberine in Jiejia tincture were determined at the wavelength of 276 nm and a column temperature of 30 □. The results revealed that catechin showed a good linear relationship at the range of 100∼800 µg/mL (r=0.9997); baicalin showed a good linear relationship at the range of 15∼120 µg/mL (r=0.9996), and berberine at the range of 7∼56 µg/mL (r=0.9995). Their average recovery rates were 99.67% (RSD 1.01%, n=6), 98.7% (RSD 1.93%, n=6) and 100.5% (RSD 2.88%, n=6) respectively. The study concluded that the high-performance liquid chromatography established in this study was simple, accurate and reproducible, and can also be used in the determination of catechin, baicalin and berberine contents in Jiejia tincture.