人类eag相关基因编码的钾通道Ikr与长QT综合征

人类eag相关基因(HERG)编码快速激活的延迟整流钾通道(Ikr)的α亚基、Ikr电流主要参与心肌动作电位的复极过程。HERG发生突变或药物作用于Ikr都可诱发长QT综合征。后者的发病机制及治疗方法和措施是目前临床研究的热点。     

人类eag相关基因编码的钾通道Ikr与长QT综合征

人类eag相关基因(HERG)编码快速激活的延迟整流钾通道(Ikr)的α亚基、Ikr电流主要参与心肌动作电位的复极过程.HERG发生突变或药物作用于Ikr都可诱发长QT综合征.后者的发病机制及治疗方法 和措施是目前临床研究的热点.     

罗红霉素对转染HERG基因人胚肾上皮细胞HERG钾通道的抑制作用

目的:研究罗红霉素对转染HERG基因人胚肾上皮细胞(HEK-293)HERG钾通道的抑制作用.方法:采用磷酸钙瞬时转染法分别将野生型、Y652A和F656C突变型HERG基因转染HEK-293细胞.观察不同浓度的罗红霉素对野生型HERG钾通道电流量效曲线、激活和失活曲线的影响,以及对突变型HERG钾通道电流的作用;HERG钾通道电流的记录采用全细胞膜片钳技术.结果:罗红霉素(0.1、1、3、10、30、100和300 μmol/L)浓度依赖性地抑制野生型HERG钾通道电流,其,IC50为(55.8±9.1)μmol/L,对野生型HERG钾通道电流的激活曲线和失活曲线无影响(激活曲线:tv1/2=1.011,tk=1.824;失活曲线:tv1/2=0.749,tk=0.859,P均>0.05);与野生型HERG比较,Y652A和F656C突变型HERG可显著减弱100、300和1000 μmol/L罗红霉素对HERG钾通道电流的阻断作用(tY652A=18.908、18.184和26.738,tF656C=2.926、4.260和4.143,P均<0.05).结论:罗红霉素能阻断HEK-293细胞HERG钾通道,Y652A和F656C是罗红霉素与HERG钾通道结合的关键位点.     

HERG钾离子通道与药物心脏毒性的安全性评价

人类ether-a-go-go相关基因(HERG)编码的快速延迟整流钾离子通道(Ikr)的α亚基介导的快速延迟整流钾电流在心肌动作电位复极过程中发挥着重要作用。HERG功能的缺失及药物抑制影响心脏动作电位复极过程,并会引起QT间期延长,同时可能诱发尖端扭转型室性心动过速,导致心律失常。HERG钾离子通道作为抗心律失常药物治疗的标靶,同时也越来越体现出在新药安全性检测和新药开发过程中的重要作用。     

HERG通道阻断剂对胃癌细胞增殖能力的影响

目的探讨HERG通道阻断剂对胃癌细胞增殖能力的影响。方法应用HERG通道阻断剂干预胃癌细胞的HERG电流后,采用MTT法对胃癌细胞进行生长曲线的描绘;采用平板克隆形成实验检测胃癌细胞的克隆形成能力;采用流式细胞计数检测胃癌细胞细胞周期分布的变化。结果HERG通道阻断剂对胃癌细胞的增殖有抑制作用,而对GES细胞的增殖则无明显抑制作用;随着药物剂量的增加及作用时间延长,其抑制作用显著增强。HERG通道阻断剂降低了胃癌细胞的克隆形成能力（P〈0．05）,阻止胃癌细胞由G1期进入S期。结论HERG通道阻断剂可抑制胃癌细胞的增殖和克隆形成能力,并抑制胃癌细胞G1／S期转化,说明HERG电流在胃癌细胞的增殖中发挥作用,HERG蛋白是一个潜在的胃癌生物治疗的靶分子。     

不同浓度藏红花酸对HERG钾通道蛋白表达的影响

目的 了解不同浓度藏红花酸对HERG钾通道蛋白的影响.方法 采用Western blotting法、免疫荧光化学染色法和激光共聚焦显微镜检测法,检测不同浓度藏红花酸对稳定转染有HERG通道的HEK-293细胞中HERG钾通道蛋白表达的影响.结果 1、3、10和30 μmol·L-1藏红花酸对HERG钾通道蛋白的表达均无明显影响.结论 藏红花酸对HERG钾通道蛋白的表达无明显影响,作为抗心律失常药物成分具有较好的安全性.     

HERG钾通道对调节性细胞容量下降的作用

目的 研究HERG钾通道在细胞容量调节中的作用,并初步探讨其机制.方法 应用时滞显微摄影技术检测HEK293细胞和HERG-HEK293细胞在不同渗透压时的细胞容量.结果 ①在低渗外液中,经过调节性细胞容量下降(RVD)过程,HEK293细胞RVD率为(77.8±3)%(n=20,P<0.01);HERG-HEK293细胞RVD率为(174±2.6)%(n=20,P<0.01) .容量调节性氯通道阻断剂NFA 10nmol/L、DIDS 100μmol/L,对上述2种细胞RVD过程均有明显抑制作用;②加HERG通道阻断剂Cisapride 100nmol/L后,HERG-HEK293细胞RVD率为(47.4±5)%(n=20,P<0.01).结论 HERG通道可能部分参与细胞容量调节,可能是调节性细胞容量下降的机制.     

HERG1基因表达与大肠癌诊断相关性研究

目的:比较HERG1(Human ether-a-go-go-related gene)基因在大肠癌组织(癌变组)、癌旁组织(癌旁组)和腺瘤组织(腺瘤组)中的表达水平,为大肠癌早期诊断和治疗提供更有特异性和敏感性的生物学标志和分子治疗靶点。方法:利用免疫组化方法检测42例大肠癌标本和其相应癌旁组织标本、50例腺瘤标本中的HERG1蛋白表达水平。结果:HERG1基因在42例大肠癌标本中均有表达(100%),癌旁组织中无表达(P<0.01),在50例腺瘤标本(直径≥0.4 cm)表达15例(30.0%),两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HERG1基因在原发性大肠癌组织中高表达,这一基因可能成为敏感的大肠癌标志物。     

心肌电生理异质性与药物相关性长QT综合征的研究进展

心肌电活动的合体细胞概念被心肌细胞电生理异质性取代,许多药物诱发心律失常的作用与心肌细胞电生理异质性有关.药物由于使跨室壁电异质性增大,可导致长QT综合征,特别是尖端扭转性室速.本文综述了生理状态下心肌细胞的电生理异质性及其离子电流基础,进一步阐述了各类药物导致长QT综合征的特征和机制.     

遗传性长QT综合征HERG基因真核表达载体的构建和在HEK293细胞中的表达

目的构建HERG基因的真核表达载体，并在人胚胎肾细胞（HEK293）中进行表达。方法先将pGH19-HERG通过限制性酶SacⅠ和EcoR Ⅰ酶切得到HERG cDNA，将pIRES2-EGFP用SacⅠ和EcoRⅠ进行双酶切，把HERGcDNA定向克隆到pIRES2-EGFP中，即构建了HERG基因的真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG。然后利用电穿孔法将pIRES2-EGFP-HERG转染HEK293细胞。结果在卵母细胞异源表达载体pGH19-HERG基础上，获得了真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG，并在HEK293细胞中成功进行了表达。结论在HERG基因卵母细胞异源表达载体的基础上，构建了HERG基因的真核表达载体piRES2-EGFP-HERG，利用电穿孔法将其转染至HEK293细胞中并成功地进行了表达，为下一步进行膜片钳的研究奠定基础。     

HERG1基因在大肠癌表达的敏感性与特异性

目的:比较HERG1(human ether-a-go-go-related gene)钾通道及CEA在大肠癌组织中的表达水平,为大肠癌早期诊断和治疗提供更有特异性和敏感性的生物学标志和分子治疗靶点。方法:利用免疫组化方法检测55例大肠癌标本中的HERG1蛋白及CEA蛋白表达水平,以25例大肠息肉标本作为对照组。结果:HERG1在大肠癌标本中表达的敏感度为100%,特异度为92.0%,而CEA大肠癌标本中表达的敏感度为87.3%,特异度为28.0%。结论:HERG1在原发性大肠癌组织中表达的敏感度与特异度均高于CEA(P<0.05),HERG1可能成为一个高度敏感的大肠癌标志物和基因治疗新靶点。     

一中国先天性长QT综合征家系的基因突变分析

目的：检测并分析一中国先天性长QT综合征（Congenital long QT syndrome,LQTS）家系的基因突变.方法：分析根据家系的临床症状及心电图,初步判断出基因分型,聚合酶链反应法扩增基因的全部外显子并用DNA直接测序法检测基因突变.结果：患者临床表现符合HERG基因突变所致LQT2,DNA测序发现HERG基因1682位点C→T错义突变,致使氨基酸第561位密码子丙氨酸被缬氨酸取代（A561V）,该突变位于HERG基因突变热点区域,为国内首次发现.结论：发现中国人HERG基因新突变,中国LQT2家系中患者具有与欧美及日本患者相同的致病突变.     

先天性长QT综合征HERG-E637K突变体的构建

目的 构建先天性长QT综合征相关HERG基因E637K突变体。方法 采用直接PCR法扩增E637K突变体,将扩增的E637K连接到pGEM-T载体。结果 成功构建HERG基因E637K突变体pGEM-HERG-E637K,构建的突变体经DNA直接测序显示HERG基因Cdna1909位点碱基G突变为A。结论 用该方法构建了HERG基因E637K突变体,为突变基因的进一步功能研究奠定了基础。     

与HERG相关的红霉素和司帕沙星联合抗肿瘤作用

目的探讨与钾离子通道HERG相关的药物在肿瘤治疗中的靶向调节作用。方法采用Western blot检测相关蛋白的表达水平。采用MTT法观察SPFX-ERM对细胞增生的抑制作用;采用两药相互作用指数CDI评价是否存在协同作用。采用流式细胞术检测细胞周期。建立小鼠移植肝癌模型,观察连续灌胃给予SPFX-ERM的抑瘤效果。结果 HERG蛋白在人结肠癌细胞HCT116和HT-29中均高表达。MERG蛋白在小鼠肝癌H22细胞中也高表达。SPFX-ERM能明显抑制人结肠癌HCT116和HT-29细胞的增生,并且细胞对两药联合的敏感性要显著高于单用SPFX或ERM。高剂量的SPFX-ERM能抑制HERG蛋白的表达。SPFX-ERM可以引起G2期细胞阻滞。动物体内实验表明,SPFX-ERM能明显抑制小鼠移植性肝癌H22在体内的生长,协同作用显著,其CDI值均在0.7以下。结论联合SPFX-ERM作为与HERG有关的调节剂有显著的抗肿瘤作用。     

KCNE基因家族与长QT综合征

KCNE基因家族是一组基因结构上相似,编码产物结构功能相近的一组基因,它们的蛋白产物被称作Mink相关肽(mink-related peptides MiRPs),是构成电压门控钾通道的辅助亚单位-β亚单位,与相应的钾通道的α亚单位相互作用形成稳定具有特定功能的复合体-完整的钾通道。这些MiRPs各自     

布比卡因的心脏毒性与HERG通道功能

人类HERG相关基因（humanether—a—go—go—relatedgene）编码的钾离子通道,是人类心肌重要的电压依赖性、快激活、延迟整流型钾离子通道,在心肌动作电位复极过程中起着至关重要的作用。多菲利特（dofetilide）、E-4031、和MK-499等药物能抑制延迟整流型钾电流,从而延长动作电位时程,其心电图主要表现为QT间期的延长。有实验研究显示微摩尔浓度的布比卡因即可阻断HERG通道,延长QT间期。而某些HERG通道激动剂具有增加该通道电流缩短QT间期的作用。本文从HERG通道的结构和功能、HERG激动剂作用机理、HERG通道与长QT综合征、布比卡因心脏毒性的关系等几个方面进行综述。     

KCNQl和KCNH2基因与先天性长QT综合征的关系

目的 分析离子通道基因KCNQl和KCNH2与先天性长QT综合征(long-QT syndrome,LQTS)的关系,以探讨LQTS发生的分子遗传机制。方法 在一个LQTS(Jervell Lange—Nielsen综合征型)大家系中,采用PCR—直接测序技术,对KCNQl和KCNH2基因的所有外显子和附近的部分内含子进行序列到定。结果 KCNQl基因存在两种突变,其中一个位于外显子区域,但为同义突变,另外一个位于内含子区域;KCNH2基因也存在两种突变,均位于内含子区域。这四种单核苷酸有多态性,与现有报道不同。结论 在该LQTS家系中,KCNQl和KCNH2基因存在四种突变,但均为非致病突变,提示KCNQ1和KCNH2基因以外的基因可能才是LQTS致病基因。KCNQl基因和KCNH2基因存在新的单核苷酸多态性。     

柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠模型心肌细胞HERG K+通道蛋白的研究

目的：探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌中HERG K+通道蛋白表达的影响,为柴胡三参胶囊的临床应用提供实验依据,为缺血性心律失常的中医药治疗提供更多的治疗途径。方法将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、柴胡三参胶囊（青蒿）组、柴胡三参胶囊（常山）组、稳心颗粒组、胺碘酮组,每组各10只,药物组在结扎左冠状动脉前降支前10 d开始预先给药,连续10 d,观察大鼠结扎左冠状动脉前降支后心电图改变及心肌中 HERG K+通道蛋白表达。结果柴胡三参胶囊能够降低缺血性心律失常的发生率(P<0.05)、显著性的降低大鼠心肌细胞HERG K+通道蛋白的失活(P<0.01)。结论柴胡三参胶囊抗缺血性心律失常的效果明显,心肌细胞HERG K+通道蛋白是其作用靶点。     

先天性长QT综合征患者的护理

先天性长QT综合征是一种极少见的心脏离子通道异常,引起心肌复极异常,在体表心电图上通常表现为长QT间期伴T波形态改变。该综合征的患者易发生晕厥、多形性室速（尖端扭转性室速）及心脏性猝死。如不治疗,1年病死率接近20％,15年病死率超过50％。埋藏式心脏复律除颤器（ICD）是对心脏性猝死十分有效的二级预防和显著降低总病死率的一线治疗方法。