青霉素酰化酶的生产及其在制造—6APA上的应用

引言由Sakaguchi等发现的“penicin”,后鉴定为6-氨基青霉烷酸(6-APA),从而揭开了β-内酰胺类抗生素新纪元。对6-APA的兴趣是在有机化学家致力于酰化此种分子取得成功,并获得象氨苄青霉素、羟氨苄青霉素等具有更宽抗菌谱,且于口服时具有足够稳定性的各种半合成青霉素之后出现的。生产这些半合成青霉素所需关键中间体——6-APA是通过裂解青霉素C(PenG)或青霉素V(PenV)侧链后获得的。最初曾试图     

青霉烷砜对氨苄青霉素实验治疗的增效作用

本文报告青霉烷砜对氨苄青霉素实验治疗大肠杆菌与克雷白氏杆菌感染小鼠的增效作用.氨苄青霉素与青霉烷砜对大肠杆菌480感染小鼠的ED50均值分别为(154.6±13.01)×2与(33.84±4.83)×2.当氨苄青霉素剂量降至20mg/kg,保护率为0;当青霉烷砜的剂量降至5mg/kg时,保护率也为0.当氨苄青霉素20mg/Kg联合青霉烷砜5mg/kg时,联合组总量为25mg/kg,低于各自的半数有效量,却出现明显的保护作用.与氨苄青霉素用ED50量求得的保护率比较,两者的平均保护率分别是0.97与0.53,t测验结果P<0.001,差异极显著.氨苄青霉素5mg/kg加青霉烷砜3mg/kg,对克雷白氏杆菌感染的小鼠平均保护率为0.92.与氨苄青霉素半数有效量20mg/kg的平均保护率相比,联合用药组为0.92,氨苄青霉素组为0.43,差异极显著.本文研究结果表明,青霉烷砜与氨苄青霉素联合,对阴性杆菌引起的小鼠感染败血症有明显体内协同杆菌作用.     

Aztreonam与氨苄青霉素混合配伍的稳定性

Aztreonam(Azt)是一种新型单环β-内酰胺抗生素。对需氧菌、革蓝氏阴性菌包括假单孢菌属均有较高的抗菌作用。然而Azt必须与其它抗生素联合,治疗那些革蓝氏阴性菌和阳性菌复合感染的病例。本文研究了Azt与氨苄青霉素在5％葡萄糖和生理盐水中单独与配伍时的稳定性。作者按临床使用剂量(Azt10～20mg/ml,氨苄青霉素5～20mg/ml,Azt20mg/ml+氨苄青霉素20mg/ml、Azt20mg/ml+氨苄青霉     

酶法制备半合成青霉素的研究

本文主要介绍以6-APA为母核、d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐(或p-羟基-d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐)为侧链,用酶缩合法制备氨苄青霉素(或羟氨苄青霉素)的研究概况,并分别阐述了温度、pH、配比、酶量和侧链化合物结构对酶促反应的影响。附参考文献33篇。     

青霉素族药物与血浆扩张剂的相互作用

本文应用一系列青霉素族药物[青霉素G钾(下简称P)、氨苄青霉素钠(Amp)、羧苄青霉素二钠、苯唑青霉素钠、邻氯青霉素钠、磺苄青霉二钠等]粉针200mg,分别加高分子血浆扩张剂[为右旋糖酐(D)、6-羟乙基淀粉(HES)、葡萄糖羟乙基淀粉(H)以及polygeline]至50 ml,混合后于20±1°孵化0、6、24小时,然后应用光谱法及超滤技术分别测定混合物中P 的降解及青霉噻唑酯(Penicilloate)的含量,并应     

国外关于合成药及其中间体工艺简讯

氨苄青霉素(BRL 1341)的新合成法及有关研究 J.Hetero.Chem.,1976,83(3),561 本文报道,在合成氨苄青霉素(Ampicillin)时,采用乌洛托品(六次甲基四胺)与N-α-溴代苯乙酰-6-APA反应形成季铵盐(Ⅰ)如:     

反相液相色谱法测定人血清中的几种常用青霉素

本文建立了一种快速灵敏的HPLC法,可用于同时测定人血清中青霉素(Ⅰ)、氨苄青霉素(Ⅱ)、青霉素Ⅴ(Ⅲ)、邻氯青霉素(Ⅳ)、双氯青霉素(Ⅴ)和乙氧萘青霉素(Ⅵ)的浓度。标准溶液取上述各青霉素标准品配成1mg/ml的水溶液作贮备液,4℃贮存。内标物贮备液为1mg/mlβ—羟乙基茶碱的乙腈溶液,于测定当日以水稀释至20μg/ml作为内     

Temocillin—从发现到生产

40年前,β-内酰胺类抗生素在治疗感染症中的位置已被确定,现在它们所占费用是抗生素费用160亿美元的一半以上。目前使用的约60个β-内酰胺抗生素是由6-氨基青霉烷酸(6-APA)或7-氨基头孢烷酸(7-ACA),经氨基酸化制备得到。由于6-APA和7-ACA的可用性,酰化工艺的简单性,以及抗菌性能可变性导致半合成青霉素和头孢菌素的广泛使用。 6-取代青霉素 Beecham对青霉素的兴趣是众所周知的,其中广泛使用的羟氨苄青霉素和替卡西林是该公司的实验室在1957年6-APA分离后首次制成的。1970年该公司决定了从x替     

产生酰化酶菌种的选育

青霉素酰化酶(penicillin acylase)是半合成抗菌素工业上的一种重要酶类,它可用于青霉素或重排酸(7-苯乙酰氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸)的裂解,以生产6-氨基青霉烷酸(6-APA)或7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA);也可用于缩合制取氨苄青霉素、羟氨苄青霉素及其他半合成青霉素或头孢菌素。但目前国内广泛使用的产生酰化酶的菌种,酶产量较低,因此我们开展菌种选育工作。以大肠杆菌B-EC-1及B-EC-2二株为出发菌株,经紫外线(UV)诱变二次累积处理,选育到1.236菌株,使酰化酶产量由原来的24.84单位/     

新的广谱脲酰青霉素类抗生素的研究

随着6-APA母核的分离,人工合成得到了许多有用的半合成青霉素衍生物。它们多数能保持青霉素G的特点,同时也能扩大抗菌谱。对革兰氏阴性杆菌有效的品种主要有氨苄青霉素(Ampicillin)、羧苄青霉素(Carbenicillin)和替卡西林(Ticarcillin),     

国外用固定化酶制备6-氨基青霉烷酸概况

6-氨基青霉烷酸(6-APA)是半合成抗菌素的母核。在6-APA的氨基上用化学方法加上合适的侧链,可获得高效、广谱、服用方便的半合成抗菌素,例如氨苄青霉素、甲氧苯青霉素、邻氯苯甲异噁唑青霉素、苯甲异噁唑青霉素和羧苄青霉素等。由于这些新青霉素在临床上广泛应用,使6-APA需要量日益增长。     

酶法半合成青霉素与头孢菌素

自从1950年 Sakaguchi 和 Murao发现青霉素酰化酶以来,随着对其研究的不断深入,利用青霉素酰化酶制备6-氨基青霉烷酸(6-APA)已经工业化。1960年Rolinson 等及 Claridge 等发现大肠杆菌(E.coli)或产碱杆菌(Alcalig-enes faecelis)的青霉素酰化酶能从6-APA 和苯乙酸合成青霉素 G;Kaufmann     

HPLC法测定头孢羟氨苄及其有关物质含量

目的建立头孢羟氨苄有关物质的HPLC分析方法。方法采用ODS柱(Polaris250mm×4.6mm,5μm),以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(用10mol/L氢氧化钾调节pH值为5.5)-乙腈(96∶4)为流动相,流速为0.7ml/min,检测波长为230nm。结果头孢羟氨苄、有关物质α-对羟基苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)的线性范围分别为0.125～1.0mg/ml(r=0.9997)、0.312～20μg/ml(r=0.9999)、0.312～20μg/ml(r=0.9999)。结论本方法可用于头孢羟氨苄及其有关物质含量的测定,方法准确、灵敏、简便。     

氨苄青霉素钠溶液稳定性探讨

氨苄青霉素钠静脉滴注时,常与各种输液配伍,关于配伍后溶液的稳定性,报道不一,有报道氨苄青霉素钠在5%葡萄糖中4h 即损失10%(浓度为10～20mg/ml);而氨苄青霉素钠在1/6mol/1乳酸钠溶液中     

羟氨苄青霉素的极谱分析

羟氨苄青霉素已有多种定量测定方法,如碘量法、微生物法、荧光法与高压液相层析法。本文报道,可直接应用极谱分析法测定胶丸和尿液中的羟氨苄青霉素。羟氨苄青霉素经酸性水解所得的电活性产物(可能是吡嗪衍生物),在半波电位-0.90V(对饱和甘汞电极)和pH5.0的条件下,显示出一受扩散控制的还原极谱波,波形良好。该法准确度高、重现性好、灵敏度15μg/ml,尤具有选择性的优点、无须除去胶丸中的赋形     

HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄的活力

目的 建立一种HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄活力的方法。方法 酶与其底物7-ADCA及D-对羟基苯甘氨酸甲酯，在20℃的溶液中，搅拌转速为250r/min条件下反应10min，通过测定反应液中头孢羟氨苄的含量，从而换算出合成酶活力的数值。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用lmol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0)-甲醇(98:2)；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；检测波长：230nm。结果 头孢羟氨苄在0.24~0.39mg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000)，回收率均在99%~101%范围内，RSD为0.40%。结论 该测定方法专属性强、准确可靠、重现性好，适用于青霉素酰化酶合成酶活力的检测。     

HPLC-萤光法测定大肠杆菌青霉素酰胺酶的活力

制药工业中对研究用青霉酰胺酶裂解青霉素以制备半合成新抗生素的原料6-APA 十分重视。曾报道,测定青霉素酰胺酶活力的方法有电位滴定法、光谱法、气相色谱法等等,但灵敏度与专属性均较差。作者研究了萤光法与HPLC 法相互补充的测定方法。萤光法是基于6-APA 与萤光胺反应十分敏感的特点(敏感度在10~(-9)克分子)故特别适宜于酰酶活力的动力学研究。而HPLC 法可同时对裂解液中存在的6-APA、苯醋酸和底物青霉素G 进行快速连续测定,是一种重现性、敏感性相当高的测定方法。方法:0.003～100mg 的青霉素G,溶于10ml0.4 M 磷酸缓冲液,加100μl 酶溶液于37°水解。间隔一定时间,吸取1.5 ml 的水解混合液加0.5 ml(0.015 mg/ml)萤光胺丙酮溶液,10分钟后,用萤光分光光度计,于470及390nm 处读数。另取100 μl 的该溶液,用0.9ml 冷水稀释,注2 μl 于Perkin Elmer 3B 型HPLC 仪中,层析柱Merck RP-18(10 μm),流动相为含55%甲醇的0.1 M pH 3.5磷酸盐缓冲液,流速1ml/分,温度20°,用LC-75UV 检测器。青霉素酶(青霉酰胺酶制剂中的杂质)存在时,由     

利迈先(克拉霉素)等三联疗法根除幽门螺旋杆菌疗效观察

目的 :观察利迈先、洛赛克、羟氨苄青霉素三联疗法根除幽门螺旋杆菌的疗效。方法 :将65例Hp阳性十二指肠溃疡患者随机分为两组。治疗组32例 ,给予利迈先500mg、洛赛克20mg、羟氨苄青霉素1000mg ,bid ,治疗7天 ;洛赛克治疗时间再延长1周。对照组33例 ,给予洛赛克20mg、羟氨苄青霉素1000mg,bid ,治疗7天 ;洛赛克治疗时间亦延长1周。在治疗前和疗程结束4周以后 ,用快速尿素酶试验和免疫组化染色法检测Hp。结果 :治疗组Hp 根除率为90 6 % ,明显高于对照组的69 7 % (P<0 01)。两组不良反应少 ,均能耐受。结论 :利迈先、洛赛克、羟氨苄青霉素三联疗法安全、耐受性好 ,Hp 根除率高     

羟羧氧酰胺菌素治疗儿童细菌性脑膜炎

流感杆菌和脑膜炎球菌是儿童细菌性脑膜炎常见的致病菌。通常主张以青霉素治疗脑膜炎球菌性脑膜炎,以氨苄青霉素和氯霉素治疗流感杆菌性脑膜炎。但由于耐氨苄青霉素和氯霉素流感杆菌菌株的增加,以及氯霉素对造血系的毒性,必须寻求新的抗菌药替代。本文以羟羧氧酰胺菌素(moxalactam)治疗流感杆菌(25例)和脑膜炎球菌(5例)所致的儿童急性脑膜炎,同时与氨苄青霉素加羟羧氧酰胺菌素治疗组比较作一临床疗效及     

β-内酰胺酶抑制剂CP-45899体外抗菌活性的研究

CP-45899是一个化学合成的β-内酰胺酶抑制剂,其体内外抗菌协同作用国外已有报道。1981年我所合成了CP-45899,本文介绍它与青霉素、氨苄青霉素在体外对耐青霉素、氨苄青霉素的革兰氏阳性、阴性菌的协同抗菌作用。 实验用菌株均为1979年至1982年在四川地区收集的临床致病菌共106株。最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)是用肉汤二倍稀释法测定,菌接种量约为10~6个/ml。做MIC时肉眼未见生长管,吸0.1ml作平皿培养,37℃培养24小时,无菌落生长为MBC。β-内酰胺酶由四川制药厂提供的腊样芽孢杆菌63503菌株所产生,每毫升约80万单位。CP-45899与酶作用时间以及加入青霉素的时间各为30分钟,金黄色葡萄球菌209P为检