p16基因甲基化与地方性砷中毒发病关系的条件logistic回归分析

目的探索p16基因甲基化与地方性砷中毒(地砷病)发病的关系。方法以病区对照和非病区对照进行两项1：1配对病例对照观察，病例组选自病区确诊地砷病患者共40例，对照组分别选自病区与非病区的非患者和正常人，进行年龄、性别匹配。采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)技术，测定病区人群血标本p16基因甲基化水平，并用条件logistic回归分析方法处理资料。结果病例与病区对照分析结果表明：p16甲基化(P=0．1343)对地砷病发病的影响无显著意义；而饮水砷(P=0．0039)和饮水年限(P=0．0154)对地砷病发病的影响有显著意义。病例与非病区对照分析结果表明：p16甲基化(P=0．0019)对地砷病发病的影响有极显著意义。结论p16基因甲基化与地砷病发病可能存在病因联系。     

饮水型砷暴露人群p16基因甲基化的研究

目的研究砷暴露人群p16基因甲基化发生情况。方法分别在饮水型砷中毒病区选取40例典型确诊地砷病患者、40名病区非患者及40名非病区的正常人（2个对照组），并进行年龄、性别匹配，采用甲基化特异性PCR技术测定人群血标本p16基因甲基化水平。结果地砷病患者及对照人群p16基因的甲基化率分别为65．0％、47，5％和20．0％；随着饮水砷浓度的增高，p16基因甲基化率也是逐渐增高。结论饮水砷暴露可引起人群p16基因甲基化发生率升高。     

克山病发病危险因素的病例对照研究

目的探讨克山病发病的危险因素，为制定克山病防治措施提供依据。方法在黑龙江省克山病病区选取41例克山病患者作为病例组．另选134例健康人作为对照组，采用氢化物发生原子荧光光度法检测病例组和对照组全血含硒量．采用5，5’-二硫双-2-硝基苯甲酸（DTNB）分光光度法检测全血谷胱苷肽过氧化物酶（GSH—Px）活力：同时对病例组和对照组进行克山病危险因素的问卷调查，先用单因素卡方检验筛选有意义变量，再引入多因素Logistic回归模型进行综合分析。结果全血含硒量病例组[（34．86±13.14）μg／L]明显低于时照组[（40．97±13．62）μg／L]，两组比较差异有统计学意义（t=2．254，P〈0．05）；GSH—Px活力病例组[（104．10±34．19）U／L]明显低于对照组[（118．57±25．49）U／L]．两组比较差异有统计学意义（t=2．312，P〈0.05）。在问卷调查中，经卡方检验和多因素Logistic回归分析，发现年人均收入水平[比值比（OR）=2.570]、肉类（OR=0．284）和蛋类（OR=0．347）的摄入次数与克山病发生有统计学联系，结论在克山病病区人群中，机体内全血含硒量和GSH—Px活力的下降、年人均收入水平低很可能是克山病发病的危险因素，动物性蛋白摄入的增加可能对克山病的发病起到保护作用：     

岩舒注射液对小鼠H22移植瘤p16表达及甲基化状态的影响

目的研究岩舒注射液对小鼠H22移植瘤的作用及其机制。方法用小鼠H22移植瘤模型观察岩舒注射液的抗肿瘤作用，造模成功后分为岩舒注射液组和对照组，测定两组瘤重的差别；采用免疫组化法检测两组p16基因表达；采用限制性内切酶酶切、聚合酶链反应检测两组p16基因启动子区甲基化状态。结果岩舒注射液组与对照组相比抑瘤率为59．49％，有显著差异（P〈0．01），p16蛋白表达增加（P〈0．01），p16基因甲基化状态降低（P〈0．01）。结论岩舒注射液有抑瘤作用，增加p16蛋白表达，降低p16启动子区域甲基化水平可能是其主要的作用机制。     

燃煤型砷中毒患者p16基因缺失及启动区CpG岛甲基化的观察

目的检测燃煤型砷中毒(地砷病)患者p16基因缺失及启动区甲基化的变异,探讨p16基因异常改变在地砷病发生发展乃至癌变过程中的作用。方法采用多重PCR法对103例砷中毒患者和110例正常对照人群p16基因第1、第2外显子缺失情况进行检测;同时采用甲基化特异性PCR法(MSP)和PCR产物测序技术对95例砷中毒患者和100例正常对照人群p16基因启动区甲基化情况进行分析。结果(1)正常对照组p16基因缺失率为5．45％;病例组为14．56％,以第2外显子缺失为主,其中轻、中、重度中毒组p16基因缺失率分别为9．09％、12．50％和19．51％;非癌变组和癌变组p16基因缺失率分别为8．70％和38．89％。以上差异有统计学意义(P<0．05或P<0．01)。(2)对照组p16基因甲基化阳性率为2．00％;病例组为42．11％,其中轻、中、重度中毒组p16基因甲基化阳性率分别为26．32％、41．67％和50．00％;非癌变组和癌变组阳性率分别为21．74％和55．56％。以上差异均有统计学意义(P<0．05或P<0．01)。结论p16基因缺失及启动区甲基化在地砷病的发生发展乃至癌变过程中起重要作用。     

乳腺癌组织p16基因甲基化与ER、PR、HER2及p53表达的关系

目的探讨乳腺癌组织中p16基因甲基化与相关受体表达的相关性,进一步提高乳腺癌的诊断水平。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测86份乳腺癌组织及40份乳腺癌患者血清中p16基因的甲基化状态;采用免疫组化sP法检测乳腺癌组织中雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER2）及p53基因表达,分析各指标之间及与乳腺癌之间的关系。结果乳腺癌组织及血清中p16基因甲基化率分别为29．1％、27．5％;15例ER、PR、HER2均为阴性表达者（三阴乳腺癌）,p16基因甲基化率为86．67％（13／16）,非三阴乳腺癌71例,p16基因甲基化率为16．9％（12／71）,P〈0．01。p16基因甲基化与ER、PR蛋白表达呈负相关（r=-0．425、-0．512,P均〈0．05）,与HER2表达呈正相关（r=0．443,P〈0．05）;与p53表达无明显相关性。结论p16基因甲基化是乳腺癌中常见的分子改变,其与ER、PR、HER2联合检测可作为乳腺癌早期诊治及预后判断的重要指标。     

p15基因在多发性骨髓瘤中的甲基化异常及其意义

目的：探讨p15基因甲基化与多发性骨髓瘤的发生、发展及预后的关系。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）研究33例多发性骨髓瘤（MM）及20例对照组的p15基因甲基化情况。结果：33例MM患者中有24例p15基因发生甲基化，20例对照组中无p15基因甲基化存在，差异有统计学意义（P〈0.01）。MM患者组中8例Ⅰ期、Ⅰ例Ⅱ期骨髓象为分化成熟的浆细胞型MM，p15基因未发生甲基化；在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中为浆细胞型或混合型中的幼稚浆细胞病例易发生甲基化，两者差异有统计学意义（PdO．01）。在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期中p15基因甲基化率分别为27．27%（3／11例）、92．31％（12／13例）、100%（9／9例），Ⅱ、Ⅲ期甲基化率明显高于Ⅰ期（均P〈0．01）。结论：p15基因甲基化可能是MM发病的原因之一，与MM的发展及预后有一定的关系。     

2005年全国地方性砷中毒重点监测报告

目的掌握2005年全国地方性砷中毒（简称地砷病）病情及防治措施落实进度．为全国地砷病防治提供依据。方法按《全国地方性砷中毒监测方案》规定方法进行。结果①饮水型病区总改水率为36．23％（96／265），最低为0，最高为100％，改水工程水含砷量合格率为72．44％（113／156）；燃煤污染型病区总改炉率为73．69％（7424／9719），总改灶率为63．71％（2582／4053），铁炉总合格率为66．58％（245／368），烧煤台灶总合格率为73．75％（118／160）。（2）13个落实改水措施的监测点中有4个监测点改水工程水含砷量〉0．05mg／L：燃煤污染型病区3个监测点，改炉改灶并正常使用的居民户和改炉改灶但不正常使用的居民户辣椒含砷量中位数，均有2个监测点超过国家标准，兴仁县监测点单份样品最高超标近72倍。有1个监测点的改炉改灶但不正常使用的居民户玉米含砷量中位数超过国家标准。③饮水型地砷病病区14个监测点中患病率〉30％的有1个，在10％一30％的有5个，〈10％的有8个；燃煤污染型病区3个监测点患病率在20％～25％。结论①饮水型病区改水率很不平衡，改水后水含砷量依然超标的工程达25％以上；②燃煤污染型病区粮食砷污染以辣椒为重；③饮水型病区以轻病区为主，燃煤污染型病区病情重于饮水型病区。     

内蒙地砷病病区人群的形态砷暴露研究

对内蒙地砷病病区人群通过饮水而暴露于不同形态砷化合物的种类和水平进行了研究，结果表明，病区饮水中砷主要以无机砷形式存在，其中Ａｓ（Ｖ）水平高于Ａｓ（Ⅲ），有机砷普遍以低浓度水平存在于水中。在该病区开展饮水中不同形态砷暴露水平与地砷病发病关系的横断面流行病学研究所得数据资料，无论单因素分层分析还是多元逐步Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，结果均显示不同形态砷暴露对地砷病的发病有着不同的影响，地砷病的患病率随     

结肠癌中心和边缘组织增殖能力的差异及相关基因的表达

目的探索结肠癌组织不同区域肿瘤细胞是否存在增殖能力的差异，且这种区域性差异和多重抑痛基因p16及其可变读码框架pl4基因的表达情况及其甲基化状态的相关性。方法免疫组化法测定癌块不同区域增殖蛋自Ki67和P16、P14的表达差异，激光显微切割技术结合甲基化特异性PCR、巢式逆转录PCR观察同一癌块不同区域癌细胞p16及p14基因甲基化状态的改变及其mRNA的表达情况。结果在42份癌组织标本的中心，增殖蛋自Ki67均呈强阳性表达，而P16和P14蛋白表达缺失；在癌组织标本的边缘．有13份Ki67表达阳性（30．1％）。不同区域癌细胞的增殖能力差异有统计学意义（P〈0．05）．且与年龄、性别、Dukes分期、p14的表达无关，但与p16的表达显著相关（X^2=25．37，P〈0．01）。且p16基因的甲基化状态和mRNA的表达也存在明冠的区域性差异（P〈0．05）。结论人结肠癌组织中存在肿瘤细胞增殖能力的区域性差异，在癌组织边缘肿瘤细胞侵袭力增强的同时增殖能力下降，癌边缘区P16基因去甲基化后的再表达可能是这一细胞事件的分子原因。     

山西省山阴县地方性砷中毒病区饮水砷与皮肤病变间关系调查

目的 分析山西省山阴县地方性砷中毒(简称地砷病)病区居民饮水砷暴露与皮肤病变间的关系,为地砷病防治研究提供流行病学依据.方法 在山西省山阴县地砷病病区抽取17个村的189例地砷病患者和59例非患者(对照)作为调查对象.入户采集所有调查对象饮用水,用水砷快速检测试剂盒半定量检测水砷,并用高效液相色谱一等离子体质谱联用仪(HPLC-ICP-MS)定量检测水砷.地砷病皮肤病变按<地方性砷中毒诊断标准)(WS/T211-2001)进行诊断.结果 在抽取的134份水样中,砷超标率达64.9%(87/134).水砷中位数为91.43μg/L.饮水砷暴露水平(＞50μg/L为高砷暴露,≤50μg/L为低砷暴露)与掌跖角化、色素沉着和脱失间的关联强度OR(95%CI)值分别为2.46(1.22～4.94)、3.34(1.50-7.44)和2.86(1.50-5.46).随着水砷暴露水平(按≤10、≤50、≤200、＞200μg/L分组)升高,患掌跖角化、色素沉着和色素脱失组间OR值呈增加趋势,尤其是水砷＞200μg/L组以≤10μg/L组作为参考,OR值分别为6.15、13.96、11.41,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).皮肤色素Ⅲ度脱失患者水砷暴露水平(318.300μg/L)明显高于0、Ⅰ、Ⅱ度脱失患者(86.670、131.800、110.590μg/L,P＜0.05).结论 山阴县属于中度砷暴露地区,水砷暴露是皮肤病变的危险因素.随着水砷暴露量增加,病变程度加重.     

内蒙古饮水型地方性砷中毒病区人群皮肤损伤危险因素分析

目的 探讨内蒙古饮水型地方性砷中毒病区人群皮肤损伤(角化和色素异常)的危险因素.方法 采用整群抽样方法对内蒙古巴彦淖尔市临河区、杭锦后旗、五原县的5个乡10个社中902名居民进行问卷调查,并进行体检,观察皮肤改变情况.采集所有调查对象的手指甲、饮用水水样,利用电感耦合等离子质谱仪(ICPMS)测定水砷,中子活化分析(INAA)法测定指甲含砷、硒量.对数据进行单因素和多因素非条件Logistic回归分析.结果 单因素Logistic回归分析显示皮肤角化的危险因素为年龄、使用农药、指甲含砷量、吸烟、吸烟时间、饮酒、水砷、氟中毒和饮含砷水时间,保护因素为职业、指甲含硒量和维生素;色素异常的危险因素为年龄、使用农药、指甲含砷量、吸烟、吸烟时间、吸烟量、饮酒、氟中毒、水砷和饮含砷水时间,保护因素为性别、职业和指甲含硒量;多因素Logistic逐步回归分析结果显示年龄、使用农药和水砷为皮肤角化的危险因素(OR值分别为1.387、1.583、1.321,P均＜0.05),职业和维生素为其保护因素(OR值为0.307、0.260,P均＜0.05);年龄、使用农药、指甲含砷量、氟中毒和水砷为皮肤色素异常的危险因素(OR值分别为1.724、2.636、2.741、3.699、1.863,P均＜0.05),而性别是其保护因素(OR值为0.255,P＜0.05).结论 慢性砷中毒患者皮肤损伤的发生与多种因素有关,可以采取改水除砷、健康宣教、合理摄入营养素等综合措施进行防治.     

饮水型地方性砷中毒影响因素的流行病学研究

目的 探讨饮水型地方性砷中毒的影响因素.方法 选择甘肃省甘南藏族自治州夏河县萨索玛村为调查点.依据<地方性砷中毒诊断标准>(WS/T 211-2001),对在村的全部人员进行了地方性砷中毒病情和流行病学问卷调查,内容包括性别、年龄、民族、居住年限、饮水量、饮茶情况、奶类摄入量、豆类摄入量、肉类摄入量、鱼类摄入量、蛋类摄入量、蔬菜类摄入量、水果类摄入量13项指标.根据地方性砷中毒临床诊断结果,将调查对象分为非中毒(对照)组、轻度中毒组、中度中毒组、重度中毒组,进行相关影响因素的多因素Logistic回归分析;采集调查村集中饮用水水样,利用氢化物发生原子荧光法测定含砷量;采集调查对象尿样66份,按病情分为对照组和砷中毒组,用氢化物发牛原子荧光法测定尿中3价无机砷(iAs~Ⅲ)、一甲基砷酸(MMA)、二甲基砷化物(DMA)和5价无机砷(iAs~Ⅴ)4种形态砷的量,以所测4种砷形态量之和为近似总砷(Tas)值,以iAs~Ⅲ和iAs~Ⅴ之和为总无机砷(iAs).结果 调查村水砷为0.97 mg/L;共调查155人,检出地方性砷中毒病例90人,检出率为58.1%;砷中毒组与对照组比较,MMA(300.85、177.48μg/L)明显升高(χ~2=6.1823,P<0.05),DMA(417.18、586.93μg/L)明显降低(χ~2=4.1726,P<0.05);多因素Logistic回归分析表明,居住年限和蛋氨酸摄入量与饮水型地方性砷中毒病情显著相关,居住年限长是饮水型地方性砷中毒病情的主要危险因素(OR=1.513,P<0.05),蛋氨酸摄入量增加是饮水型地方性砷中毒病情的保护因素(DR=0.591,P<0.05).结论 地方性砷中毒病情主要与高砷暴露年限有关,增加蛋氨酸的摄入量是可能的保护因素.     

郑州市饮水型地方性砷中毒调查

目的掌握郑州市居民饮水砷状况以及是否存在地方性砷中毒。方法根据饮水型地方性砷中毒分布规律，在全市重点地区选择调查点进行饮水砷测定及砷中毒情况调查。结果全市6个县(市)34个乡(镇)286个自然村共采集测定水样622份，水砷在0—0．1860mg/L之间。首次在位于郑州市东部平原地区的中牟县检测出高砷水井6眼，水砷最高为0．1860mg／L，最低为0．056mg/L，高砷水埋深26—40m。其他县(市)水砷均在0．05mg／L以下，全部在国家规定标准以内。在对水砷超标的重点乡走访调查中，未发现砷中毒病人。结论郑州市存在高砷地区，但是尚未发现地方性砷中毒的流行。     

山西省应县地方性砷中毒流行病学调查报告

目的查清应县地方性砷中毒病区的流行范围、分布特征和危害程度。方法采用拉网调查方式对应县居民进行流行病学调查,测定饮水中含砷量、含氟量、临床砷中毒患者尿砷以及当地自产粮食中含砷量。结果经检测有197眼饮水井砷超标,超标率达16.49%,不同含砷量的水中含氟量不同(F=21.83,P<0.01),水砷有随井深增加而增高(F=187.53,P<0.01),水氟有随井深增加而降低(F=27.98,P<0.01)。居民尿砷超标率达26.37%,粮食砷均低于国家限量卫生标准,查出临床砷中毒患者216人。确定地方性砷中毒病区村18个,均为轻病区,病区人口16482人。结论应县高砷暴露区域广,居民饮用高砷水时间短,病情轻,低氟低砷水源多埋深于50m左右,应因地制宜地选择安全水源,以保证综合的降氟除砷改水工程防治措施的顺利实施。     

山西省地方性砷中毒流行现状

目的探讨山西省地方性砷中毒病区暴露人群的病情程度和发病特点以及高砷水的分布规律，为科研防治工作提供科学依据。方法根据《中国地方性砷中毒分布调查实施方案》的要求，重点调查和抽样调查相结合，采用统一调查表对居民饮水砷和暴露人群进行流行病学调查。水砷检测用半定量快速试剂盒法，水氟检测用氟离子选择电极法。结果结合既往调查结果，目前山西省包括病区在内的高砷区共分布在8个市(地)、18个县(市、区)、44个乡(镇)、116个村，病人临床表现主要以色素脱失或色素脱失并角化为主。发病率随年龄增大而增加，男女患病率差异显著，男性高于女性，高砷水与当地地质结构和水文地质条件有着密切关系。结论山西省高砷暴露区域广、人数多、病情重，氟砷中毒并存。     

饮水型砷中毒病区居民血清尿素氮浓度检测分析

目的探讨饮用高砷水对机体尿素氮水平的影响。方法以2个地区（高砷区和对照区）的常住成年居民为调查对象,采集晨尿及空腹静脉血,同时采集受访者家中饮用水水样。用原子吸收法测水总砷,用苦味酸比色法检测尿肌酐,采用酶偶联速率法测尿素氮。结果饮水型砷中毒病区居民血清尿素氮平均水平（5.08 mmol/L）高于非高砷区居民（3.60 mmol/L）,二者差异显著（P=0.0239）;饮水型砷中毒病区居民饮用水总砷浓度与血清尿素氮水平呈正相关关系（r=0.293,P=0.023）。结论饮用高砷水对居民肾脏存在潜在危害。     

中国饮水型地方性砷中毒病区和高砷区水砷筛查报告

目的查清中国饮水型地方性砷巾毒病区和高砷区的分布,为防治与科研工作提供科学依据。方法根据《中国地方性砷中毒分布调查实施方案》的要求,普查和抽样调查相结合,采用统一试剂盒半定量法进行筛检居民饮水砷。结果调查覆盖面为11个省(区)及新疆生产建设兵团的129个县和12个师．水砷超标有43个县和3个师。共筛查水井208830眼,高砷井检出率为2．62％,内蒙古自治区检出率最高为8．05％,黑龙江省最低为0．09％。高砷暴露人口110612人,其中儿童19961人。结论西部地区高砷井分布范嗣较广,且地方性砷中毒流行较重,防治工作重点应放在西部地区。     

甘肃省合作市地方性砷中毒流行病学调查

目的了解甘肃省合作市饮水高砷水源的分布和地方性砷中毒（地砷病）的流行情况，为进一步开展防治工作提供科学依据。方法对全市不同类型的饮水水源进行采样检测，同时进行地方性砷中毒病情调查。结果合作市的砷超标水样分布在4个乡19个自然村，呈点状分布，覆盖范围约700km^2，受威胁人群约1万人。在调查的987人中，检出地砷病可疑病例61例．检出率6．18％；高砷水源区人群尿砷平均值为0．0834mg／L，低砷水源区人群尿砷均值为0．0396mg／L，二者间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论甘肃省合作市部分地区饮水含砷量超标．并存在地方性砷中毒的流行。