多重连接探针扩增技术在胚胎停止发育染色体非整倍体异常分析中的应用

目的：探讨多重连接探针扩增（multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA）技术在分析胚胎停止发育（以下简称胚胎停育）流产绒毛组织染色体非整倍体异常中的应用,探讨染色体非整倍体异常导致胚胎停育与胎儿性别、患者年龄间的关系。方法：收集324例临床诊断为胚胎停育患者的流产绒毛组织,采用MLPA技术进行染色体检测,并分析检测结果与胎儿性别及患者年龄间的相关性。结果：在324例胚胎停育患者中,检出绒毛染色体非整倍体异常共68例（20.99%）,其中常染色体三体33例（13-三体12例、18-三体6例、21-三体15例）,常染色体缺失3例（13-单体1例、21-单体2例）,性染色体数目异常32例（45-XO 15例、47-XXY 13例、47-XXX 1例、47-XYY 3例）。常染色体数目异常组与染色体数目正常组间的胎儿性别分布差异无统计学意义（P>0.05）。对绒毛染色体数目正常组[平均年龄（32±6）岁]、常染色体数目异常组[平均年龄（34±7）岁]、性染色体数目异常组[平均年龄（28±6）岁] 3组患者的年龄进行比较,发现差异有统计学意义（P<0.05）。结论：MLPA技术可以作为一种辅助检测手段,用于检测胚胎停育流产绒毛组织染色体的非整倍体异常,染色体数目异常导致的胚胎停育与胎儿的性别无关,但与患者的年龄有关,胚胎常染色体数目异常组的孕妇年龄大于染色体数目正常组及性染色体数目异常组。     

染色体核型分析与荧光原位杂交用于胚胎停育患者病因学诊断

目的 探讨染色体核型分析技术及荧光原位杂交（FISH）技术两种检测方法在胚胎停育患者胎儿病因学诊断中的应用。 方法 对78例胚胎停育患者清宫后的妊娠组织行细胞培养后做染色体核型分析;若培养失败,采用FISH进行分析。 结果 78例胚胎停育患者的妊娠组织,染色体培养且成功用于核型分析者38例,其中检出正常核型23例、异常核型15例、常染色体三体8例、三倍体1例、性染色体异常3例、结构异常3例。40例染色体培养失败,采取FISH检测,检出正常染色体15例,异常染色体25例,其中常染色体三体占19例、三倍体2例、45XO 4例。 结论 胚胎停育的主要原因是胚胎染色体异常导致。通过染色体核型分析及FISH检测对胚胎停育的妊娠组织进行分析,两种方法对异常核型和常染色体数目异常的检出有明显差异,对胚胎坏死时间长的妊娠组织,FISH成功率更高。临床上应结合两种检测方法用于胚胎停育的原因分析,为下次妊娠提出指导意见。       

单核苷酸多态性微阵列芯片与荧光原位杂交在流产绒毛组织遗传学分析中的比较研究

目的比较单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)技术与荧光原位杂交(FISH)技术在流产组织遗传学分析中的优势与局限性。方法选择2016年11月至2019年8月该院确诊为稽留流产的632例患者为研究对象,选取其中181例为试验组,采用SNP-array技术检测流产绒毛组织的全基因组DNA拷贝数变异(CNVs)。另外451例为对照组,采用FISH技术检测绒毛染色体。结果试验组SNP-array技术检测均成功,检出染色体异常104例,检出率为57.46%,包括染色体非整倍体83例,整倍体10例,CNVs 11例。对照组共451例,FISH技术检测出染色体异常197例,检出率为43.68%,16-三体105例,45,X染色体30例,22-三体18例,21-三体11例,13-三体6例,18-三体3例,嵌合体及其他染色体异常4例。SNP-array技术检出率高于FISH技术,差异有统计学意义(χ2=9.829 7,P0.05)。结论 SNP-array技术在胚胎停育遗传学病因诊断中有重要价值,与FISH技术比较,SNP-array技术检测范围更广,检出率更高。     

IVF胚停患者绒毛染色体及相关免疫指标分析

目的 研究辅助生殖技术后胚胎停育患者绒毛染色体同年龄、胚停史及自身免疫性抗体之间的关系。方法 回顾性分析2016年2月～2018年8月进行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embyro transplantation,IVF-ET)助孕术后孕早期胚胎停育行绒毛染色体检查的患者113例。同时检测患者抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)、抗心磷脂抗体(anti-cardiolipin antibody,ACA)抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroperoxidase,ATA)、抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin,ATG)。结果 ①113例患者染色体正常64例,染色体异常者49例;② 35岁以上患者染色体异常率显著高于35岁以下患者(67.57% VS 31.58%,P0.000 1);③既往有无胚停史、胚停次数与绒毛染色体异常之间并无显著联系;④染色体正常组中测出ACA、ANA、ATA/ATG阳性率虽高于染色体异常组,但差异不显著。结论 随着年龄增加,染色体异常比例显著增高;既往有无胚停史与染色体是否异常之间并无显著联系。     

淋巴细胞免疫与非免疫治疗封闭抗体缺乏致胚胎停育效果观察

目的分析胚胎停育的原因,比较封闭抗体缺乏致胚胎停育的淋巴细胞免疫治疗与非免疫治疗的效果。方法102例早期胚胎停育患者,选择其中复发性流产2次以上、封闭抗体缺乏、无子宫发育异常和染色体异常、男方精液无异常患者58例,根据男方传染病检验结果和自愿选择治疗方案原则分为免疫治疗组30例和非免疫治疗组28例,非免疫治疗组给予促排卵、黄体支持及辅助生殖技术等治疗,免疫治疗组在非免疫治疗组治疗基础上,抽取患者丈夫(或健康第三方)静脉血提取淋巴细胞皮下注射,比较2组妊娠结局。结果 102例中胚胎染色体异常64例(62.74%),封闭抗体缺乏81例(79.41%),多囊卵巢综合征60例(58.82%);免疫治疗组封闭抗体转阳率为76.67%,妊娠率为80.00%;非免疫治疗组妊娠率为78.57%,2组妊娠率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论胚胎染色体异常是胚胎停育的主要原因;淋巴细胞免疫治疗与非免疫方法治疗封闭抗体缺乏所致胚胎停育均可获得理想妊娠率。     

初次自然流产与复发性自然流产绒毛组织细胞遗传学分析

目的:探讨绒毛细胞染色体核型异常与初次自然流产及复发性流产的关系.方法:根据104例早期自然流产孕妇的临床资料分为复发性自然流产组(57例)和初次自然流产组(47例).清宫时取绒毛组织,按常规技术方法制备绒毛细胞染色体,G显带后进行核型分析.结果:复发性自然流产组染色体数目异常22例(39％),初次自然流产组染色体数目异常30例(67％).复发性自然流产组绒毛细胞染色体核型异常率以及常染色体三体发生率均低于初次自然流产组(P均＜0.05),两组X单体发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:早期胚胎染色体数目异常是导致早期流产的主要原因.除细胞遗传学异常外,复发性自然流产的防治需积极寻找其他致病因素.     

湖南郴州地区106例自然流产绒毛细胞染色体核型分析

目的探讨自然流产与绒毛组织细胞染色体异常的关系。方法对106例自然流产患者取绒毛组织原位培养进行染色体G显带核型分析。结果培养成功102例,成功率为96.23%,检出染色体异常共35例(34.31%),其中染色体数目异常30例(85.71%);结构异常4例(11.43%);数目合并结构异常1例(2.86%)。结论染色体异常是早期自然流产的重要原因之一,胚胎染色体检测对分析自然流产原因具有重要意义,可为临床咨询提供重要的理论依据。     

荧光原位杂交技术检测130例自然流产绒毛染色体结果的观察与分析

目的应用荧光原位杂交技术(FISH)对130例自然流产患者的绒毛染色体进行检测,探讨并评估FISH在诊断自然流产绒毛染色体异常中的价值。方法采用13、21和16、22及18、X、Y三组染色体探针,对130例自然流产患者的绒毛标本进行FISH检测。结果 130例自然流产的绒毛染色体FISH检测中,检测成功129例,检测成功率99.2%,其中异常染色体细胞数>10%者65例,核型异常率为50.3%。结论 FISH技术不受标本污染限制,能快速、准确地诊断自然流产绒毛染色体数目畸变,与常规染色体核型分析相结合,可为临床自然流产的病因探讨提供更为准确的依据。     

骨桥蛋白及基质金属蛋白酶在胚胎停育患者妊娠组织中的表达

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)及基质金属蛋白酶MMP-2在胚胎停育患者妊娠组织中的表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测26例胚胎停育患者(实验组)及20例正常早孕要求流产患者(对照组)绒毛及蜕膜组织中骨桥蛋白(OPN)及基质金属蛋白酶(MMP-2)mRNA的表达量.结果 胚胎停育患者绒毛组织中OPN及MMP-2的表达均明显低于正常早孕患者绒毛组织中的表达(P＜0.05),二者呈正相关.结论 OPN及MMP-2在胚胎停育发生机制中起到一定作用.     

早期胚胎停育绒毛中Survivin与Bcl-2基因表达的研究

目的探讨Survivin及Bcl-2在早期胚胎停育中的临床意义。方法前瞻性研究,采用免疫组化法检测济南市第五人民医院妇科30例正常早期妊娠、27例早期胚胎停育绒毛中Survivin及Bcl-2的表达情况。结果 Survivin在胚胎停育组绒毛中的表达阳性率(51. 85%)低于正常早期妊娠组(93. 33%),差异具有统计学意义(P <0. 01);正常早期妊娠组中,Survivin++表达率、+++表达率均高于胚胎停育组,差异具有统计学意义(P <0. 05)。Bcl-2在胚胎停育组绒毛中的表达阳性率(62. 96%)低于正常早期妊娠组(96. 67%),差异具有统计学意义(P <0. 01)。胚胎停育组绒毛中Bcl-2++表达率低于正常早期妊娠组(P <0. 01)、+++表达率低于正常早期妊娠组(P <0. 05),差异均具有统计学意义。结论 Survivin、Bcl-2在胚胎早期发育过程中起重要作用,两者低表达或缺失可能导致胚胎停育。