维生素E琥珀酸酯对人晶状体上皮细胞增殖的影响

目的研究维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLECs)增殖的影响。方法人晶状体上皮细胞株HLECs-B3以VES刺激24h、48h、72h、96h,VES浓度为5μg/ml、10μg/ml和20μg/ml,用MTT比色法测定VES对细胞增殖的抑制作用;以流式细胞仪分析细胞周期。结果VES对人晶状体上皮细胞的增殖具有显著的抑制作用,表现为时间和剂量依赖关系。并且将细胞周期阻滞于G0/G1期。结论VES对体外培养的人晶状体上皮细胞的增殖具有抑制作用,为临床筛选防治后发性白内障的药物提供依据。     

三氧化二砷对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用的实验研究

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对体外培养的人视网膜色素上皮（RPE）细胞的增生抑制及凋亡诱导作用。方法 不同浓度的As2O3理细胞，倒置显微镜下观察细胞形态，四唑盐（MTT）比色法检测人RPE细胞对As2O3的药物敏感性，流式细胞仪检测细胞周期变化和凋亡率。结果 药物处理后细胞出现凋亡形态改变。MTT比色法结果显示，As2O3作用血清组人RPE细胞后各实验组与对照组之间吸光度比较有统计学意义，药物剂量分别为：作用24h为6．25μmol／L（P=0．018）、48h为6．25μmol／L（P〈0．01）、72h为1．56μmol／L（P〈0．01）；作用无血清组细胞48h后为12．5μmol／L（P〈0．01）。流式细胞仪分析结果显示As2O3作用人RPE细胞周期改变表现为S期阻滞及G2／M期延长。As2O3处理人RPE细胞后出现凋亡峰。结论 As2O3可抑制体外培养的人RPE细胞的生长并诱导其凋亡，有望为临床防治增生性玻璃体视网膜病变（PVR）提供新的药物干预。     

光催化剂TiO2对牛晶状体上皮细胞作用的实验研究

目的研究经长波紫外线（UVA）激发后光催化剂二氧化钛（TiO2）对细胞的杀伤作用和机制，探讨光催化剂TiO2应用于防治后发性白内障的可能性。方法将牛晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）与不同浓度的TiO2共同孵育。按TiO2浓度分为对照组（0 μg／ml）和实验组（100μg／ml、150μg／ml和200μg／ml）,分别予UVA激发0、20、30和40min。采用MTT比色法测定经UVA激发的TiO2对牛LEC的杀伤效应。按TiO2浓度分为对照组（0μg／ml）和实验组（200μg／ml）。对照组UVA激发0、40min，实验组UVA激发0、30和40min。采用DNA琼脂糖凝胶电泳探讨光催化杀伤机制。按TiO2浓度分为对照组（0μg／ml）和实验组（200μg／ml）。分别予UVA激发0和30min。采用电镜技术观察光催化后细胞形态学变化。结果MTT比色法测定结果：在UVA激发下，TiO2对牛LEC杀伤率随着TiO2浓度增加和激发时间延长而增加，TiO2作用浓度达到150μg／ml且激发时间超过30min或浓度达到200μg／ml，其杀伤作用与相同UVA激发时间对照组相比，差异有统计学意义。200μg／ml TiO2组照射30min以上．提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示,样品电泳迁移速率大于对照组,并在电镜下观察到大量细胞有坏死超微结构改变。结论在UVA的激发下,光催化剂TiO2可以明显杀伤牛LEC,杀伤效应具有时效和量效关系。TiO2的应用可能成为防治后发性白内障的新途径。     

不同成分培养基对原代兔晶状体上皮细胞生长的影响

目的:研究不同培养基对兔晶状体上皮细胞(LEC)培养的影响。方法:使用组织块贴壁法原代培养兔LEC,倒置显微镜观察不同培养基(DMEM低糖、高糖、F12)下兔LEC形态、生长速度的情况。结果:DMEM低糖和高糖培养基使培养2wk后的细胞开始出现分化,并停止生长,晶状体上皮细胞明显成纤维细胞化。DMEM/F12培养基使细胞生长良好,传至第5代时细胞开始发生转化变为成纤维细胞。结论:DMEM低糖和高糖培养基造成兔LEC增殖抑制,DMEM/F12培养基适合兔LEC的生长。     

核心蛋白多糖对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用

目的探讨核心蛋白多糖(Decorin)对兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)增生的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系,为药物防治后发性白内障提供新的选择。方法 MTT比色法分别测定不同浓度的Decorin(0.1mg·L-1、1.0mg·L-1、10.0mg·L-1)作用于LEC不同时间后的细胞生长抑制率;采用流式细胞技术测定细胞周期,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β的水平,RT-PCR测定TGF-βmRNA的表达,免疫细胞化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。结果 ELISA示每100万个细胞中对照组TGF-β含量为(427.24±41.34)ng,0.1mg·L-1、1.0mg·L-1和10.0mg·L-1Decorin组TGF-β的含量分别为(236.01±28.63)ng、(117.86±18.14)ng、(111.72±26.72)ng,与对照组比较差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。MTT比色法实验结果显示,作用24h对照组抑制率为(3.62±1.34)%,0.1mg·L-1、1.0mg·L-1和10.0mg·L-1Decorin组抑制率分别为(4.14±2.08)%、(12.93±2.47)%、(23.47±1.78)%,LEC生长抑制率增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);随着Decorin作用时间延长,生长抑制率增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。随药物浓度及作用时间延长,LEC出现明显的G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞所占比例明显升高(P<0.05)。RT-PCR示Decorin组TGF-βmRNA表达明显减少,与MTT法检测结果呈现大致相同的趋势,免疫细胞化学观察,对照组α-SMA表达较多,细胞肥大,细胞质呈棕色,Decorin组α-SMA较少表达。Decorin表现出明显的抑制作用。结论 Decorin对LEC有抑制增生和诱导凋亡作用,且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系,可望成为后发性白内障的防治药物。     

叶黄素对牛晶状体上皮细胞增殖及迁移的影响

目的观察叶黄素（lutein）对体外培养的牛晶状体上皮细胞（bovine lens epithelial ceHs，BLECs）增殖和移行的影响．为药物防治后发性白内障（after-cataract）提供新的选择。方法首先进行BLECs原代培养和传代培养。取第2～3代BLECs。分别采用MTT法、划线法．研究不同浓度及作用时间的叶黄素对体外培养的BLECs增殖及移行的影响。结果①与对照组相比．当浓度〉μmol／L时，叶黄素能够明显抑制BLECs的增殖．差异有显著性（P〈0．01）。相同作用时间不同浓度组之间抑制作用比较，随药物浓度的增加，抑制作用加强，各浓度组之间差异有显著性（P〈0．01）。而相同药物浓度组随着作用时间的延长，抑制作用加强，各时间点差异亦有显著性（P〈0．01）。②浓度为1μmol和2μmol／L的叶黄素能明显抑制BLECs的的移行，与对照组相比，差异有显著性（P〈0．01）。两组间愈合率比较，差异亦有显著性（P〈0．01）。结论①在浓度≥1μmol时，叶黄素能有效抑制BLECs的增殖。②浓度为1μmol／L和2μmol的叶黄素能抑制BLECs的移行，其强度呈一定时间依赖性。③叶黄素可能成为药物治疗后发性白内障的新选择。     

8-氯腺苷对抑制人晶状体上皮细胞增生的体外研究

目的探讨8-氯腺苷(8-chloroadenonosine)是否对体外培养的晶状体上皮细胞增生有抑制作用。方法取第2、3代传代培养的晶状体上皮细胞做药物抑制试验。加入不同浓度的8-氯腺苷(2,4,8,16μmol/L)作用24、48、72和96小时后,用MTT比色测定法和流氏细胞仪检测法确定药物对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用。结果 8-氯腺苷在4-16μmol/L的浓度下能抑制晶状体上皮细胞的增生。并且其抑制程度呈时间、剂量依赖性。结论该结果可为临床筛选防治后发性白内障的药物提供依据。     

后发性白内障的发病机制和药物防治的研究现状及前景

后发性白内障是现代白内障术后最常见的并发症。术后晶状体囊残留的晶状体上皮细胞的增殖、迁移、纤维化生是形成后发性白内障的主要原因。目前防治后发障的研究主要集中在药物除去或破坏残留晶状体上皮细胞。实验研究许多细胞毒药以及抑制晶状体上皮细胞生长和纤维化药物可以预防后发障,但目前临床上还没安全、有效的防治白内障方法。     

外源性细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因对人晶状体上皮细胞周期的影响

目的 研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21基因转染对人晶状体上皮细胞(1ens epithelial cells,LEC)周期调控的影响,在基因水平探讨防治后发性白内障的可能性。方法 构建含人p21基因真核表达的载体质粒pcDNA3／p21,采用基因转染技术将质粒DNA转染至永生性人LEC系HLE-B3,使用流式细胞仪观察细胞生长和周期的变化,并采用逆转录聚合酶链式反应方法检测p21mRNA的表达;分别采用免疫组化和免疫印迹(western blotting,WB)方法检测p21蛋白的表达。结果 体外构建的载体质粒pcDNA3／p21经酶切鉴定含有人p21基因全长cDNA片段。基因转染后细胞HLE—B3经传代培养,48h后出现缓慢生长且部分细胞漂浮死亡的现象,G1期细胞明显增多。与对照细胞比较,转染后细胞的p21mRNA表达明显增多;p21蛋白表达明显增强,在经筛选的阳性克隆细胞中WB方法可检测到相对分子质量为21000的阳性蛋白带。结论 外源性p21基因可在人LEC系HLE．B3中过度表达,并对细胞周期调控产生抑制作用。基因转染抑制LEC增殖可能成为防治后发性白内障的新途径。     

姜黄素对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨姜黄素（Cur）对表皮生长因子（EGF）诱导的牛晶状体上皮细胞（LEC）增殖的抑制作用及其量效与时效关系。方法MTT测定不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后细胞增殖的情况，流式细胞术（FCM）检测不同浓度的Cur作用于牛LEC不同时间后增殖细胞核抗原（PCNA）的表达状况。结果（1）MTT法结果表明，高、中、低不同浓度的Cur作用24h后，其增殖抑制率分别为66．65％、22．43％、8．72％，呈明显的剂量-效应关系，20mg／L的Cur作用6、12、24、48、72h后，其增殖抑制率分别为9．97％、19．81％、22．43％、41．67％、81．59％，呈明显的时间-效应关系。（2）FCM检测表明，Cur对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用，也呈明显的时间-效应关系和剂量-效应关系。结论Cur能有效抑制EGF诱导的LEC增殖，可望成为防治后发性白内障的理想药物。     

ET-1的眼科研究进展

内皮素1(ET-1)是体内已知的作用力最强、持续时间最长的缩血管肽,目前在眼科有了较广泛深入的研究,本文就其在糖尿病视网膜病变等眼底疾病、青光眼、角膜疾病中的作用研究作一阐述.     

米诺环素对糖尿病视网膜病变的作用机制研究进展

糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）是糖尿病最常见且最严重的眼部并发症之一,现已成为２０～７４岁人群致盲的首要原因。其病理改变主要包括早期的神经细胞凋亡以及后期新生血管形成。米诺环素作为一种半合成四环素类抗生素,除了具有抗菌、抗炎症反应外还有抗新生血管、保护神经细胞的作用,越来越多的研究着重于米诺环素对ＤＲ的抑制作用,本文通过文献回顾,对米诺环素抑制ＤＲ的作用机制及研究进展进行综述,并对米诺环素在ＤＲ的研究方向进行展望。     

红细胞增多症影响早产儿视网膜病变的临床观察

目的 观察红细胞增多症对早产儿视网膜病变(ROP)的影响.方法 回顾分析262例早产儿的临床资料.患儿中红细胞增多症46例,占17.56%;其中,男性27例,女性19例.无红细胞增多症216例,占82.46%;其中,男性155例,女性61例.有无红细胞增多症两组患儿在出生体重(t=0.730,P=0.466)、胎龄(t=1.603,P=0.110)、吸氧人数(χ1=0.04,P>0.90)、吸氧时间(t=1.225,P=0.223)、吸氧浓度(t=1.823,P=0.071)之间比较,差异均无统计学意义.所有受检早产儿均由有经验的服科医生采用双目间接检眼镜检查眼底,确定有无ROP并进行分期.回顾分析时,着重分析有无红细胞增多症与ROP发生和分期之间的相互关系.结果 262例早产儿中发生ROP 120例,占45.80%.其中,红细胞增多症组发生ROP 25例,占红细胞增多症患儿的54.34%;无红细胞增多症组发生ROP 95例,占无红细胞增多症患儿的43.98%.有无红细胞增多症两组ROP发生率比较,差异无统计学意义(χ2=1.64,P>0.1).120例ROP患儿中,ROP<3期者104例,占86.67%;≥3期者16例,占13.33%.25例发生ROP的红细胞增多症患儿中,ROP<3期者18例,占发生ROP的红细胞增多症患儿的72.00%;≥3期者7例,占发生ROP的红细胞增多症患儿的28.00%.95例发生ROP无红细胞增多症患儿中,ROP<3期者的86例,占发生ROP的无红细胞增多症患儿的90.53%;≥3期者9例,占发生ROP的无红细胞增多症患儿的9.47%.有无红细胞增多症两组间在<3期和≥3期ROP发生率之间比较,差异有统计学意义(x2=4.38P<0.05).120例ROP患儿中,阈值前病变106例,占88.33%;阈值及以上病变14例,占11.67%.25例发生ROP的红细胞增多症患儿中,阈值前病变19例,占发生ROP的红细胞增多症患儿的76.00%;阈值及以上病变6例,占发生ROP的红细胞增多症患儿的24.00%.95例发生ROP无红细胞增多症患儿中,阈值前病变87例,占发生ROP的无红细胞增多症息儿的91.58%;阈值及以上病变8例,占发生ROP的无红细胞增多症患儿的8.42%.有无红细胞增多症两组间阈值前病变和阈值及以上病变ROP发生率比较,差异无统计学意义(χ2=3.27,P>0.05).结论 红细胞增多症不影响ROP发生率,但可能影响ROP的严重程度.     

眼位对主动追踪效果的实验影响

目的研究眼位对主动追踪效果的影响。方法以金属环模拟虹膜及瞳孔,其上置3.5 mm厚透明PMMA板模拟角膜,将该模拟装置置于MEL-70准分子激光主动追踪系统下,分别标记模拟装置在中央位置及位置偏移5 mm及10 mm后主动追踪系统所指示切削中心位置,观测两种位置偏移引起的追踪效果偏差量。结果偏差量分别为0.15mm及0.25 mm。结论眼位对主动追踪有影响,这种影响对常规屈光手术是可接受的,对高阶像差的影响则不容忽视。     

屈光不正对微扫视性眼球运动的影响

目的观察屈光不正对人眼微扫视性眼球运动的影响。方法前瞻性病例对照研究。收集2010年10月至2011年3月在天津市眼科医院就诊的屈光不正患者17例和无屈光不正的受试者17例,按照屈光状态与眼别进行分组。屈光不正者未戴镜矫正条件下17只主导眼为ADa组,17只非主导眼为ANa组;屈光不正者戴镜矫正条件下17只主导眼为ADb组,非主导眼为ANb组;正常受试者主导眼为ND组,非主导眼为NN组。采用高速眼球运动记录系统对受试者双眼分别进行注视性眼球运动记录。采用自编的Matlab程序对微扫视性眼球运动成分进行识别、提取和分析。对各组微扫视幅度、峰值速度、发生频率、微扫视间隔时间等量化指标的组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）,两两比较采用Turkey检验,以P〈0．05为差异有统计学意义。结果6组间平均微扫视幅度的差异无统计学意义,但ADa组（5．42％±0．26％）、ANa组（5．48％±0．25％）较ADb组、ANb组、ND组、NN组幅度变异度大,差异有统计学意义（F=38．67,P〈0．01）;ADa组[（55．25±2．40）°／s]、ANa组[（54．51±1．77）°／s]微扫视峰值速度较ADb组、ANb组、ND组、NN组小（F=311．84,P〈0．01）;ADa组[（1．56±0．03）Hz]、ANa组[（1．57±0．05）Hz]微扫视发生频率较ADb组、ANb组、ND组、NN组低（F=155．25,P〈0．01）;ADa组[（558±23）ms]、ANa组[（555±22）ms]微扫视间隔时间较ADb组、ANb组、ND组、NN组长（聘102．12,P〈0．01）;屈光不正者戴镜或不戴镜及正常受试者主导眼与非主导眼比较,各项指标差异无统计学意义。屈光不正者戴镜条件下与正常受试者比较,各项指标差异也无统计学意义。结论屈光不正可影响人眼微扫视性眼球运动的行为,表现为微扫视幅度变异度增加、峰值速度降低、发生频率降低及微扫视间隔时间延长。戴镜可矫正屈光不正患者微扫视的异常。     

改良型抗青光眼滤过手术疗效观察

目的:探讨改良型抗青光眼手术的临床疗效。方法:2004-01/2006-01在我科住院的双眼慢性闭角型青光眼20例40眼,每位患者一侧眼行传统的小梁切除虹膜周切术(传统术),另一侧行改良型抗青光眼手术(改良术),将两组疗效对照,随访观察18mo以上。结果:改良术组远期眼压控制与传统术组相比,P<0.05,具有统计学差异。结论:改良型抗青光眼手术是常用抗青光眼手术的联合,较易掌握,且远期疗效较理想。     

Assessment of the quality of information on treatment of keratoconus on YouTube

International Ophthalmology - To evaluate the reliability, quality and effectiveness of YouTube videos addressing treatment of keratoconus. This is a retrospective, cross-sectional and...     

眼睑恶性肿瘤延误诊治因素的临床分析

目的:探讨眼睑恶性肿瘤延误诊治的原因。方法:对35例患者的职业、病变部位、病变特点、病变时间和诊疗过程等方面进行临床分析。结果:约74%患者为农民和工人,病程时间长,平均3.6年,20%的患者发生肿瘤侵袭和转移,病变初起表现为米粒大结节或色素痣,均有肿块快速增大的病史,部分患者病变有破溃、出血、溃疡的过程。结论:户外劳作者是易患人群,就诊不及时,未能引起患者和首诊医师足够的重视是主要因素。早期正确治疗极为重要。     

Studies on the mechanism of action of timolol and on the effects of suppression and redirection of aqueous flow on outflow facility

Long-term use of drugs that suppress aqueous humor formation, such as timolol and dorzolamide, or that redirect aqueous humor outflow from the trabecular meshwork, such as prostaglandin F2alpha analogues, could cause underperfusion of the trabecular meshwork and a secondary decrease in outflow facility. We investigated the mechanism of suppression of aqueous humor formation by timolol in monkey eyes by measuring aqueous humor ascorbate levels. We also determined whether suppression of aqueous humor formation with and without redirection of aqueous humor away from the trabecular meshwork could lead to a subsequent reduction in outflow facility, and whether this reduction was correlated with increased fibronectin levels in anterior chamber aqueous humor. In cynomolgus monkeys, unilateral dose/aqueous humor formation response curves were generated for timolol, dorzolamide, and a combination of timolol + dorzolamide. Aqueous humor formation and/or outflow facility were measured in both eyes after approximately four days, four weeks and seven weeks of twice daily treatment with 3.5 microg timolol + 1.0 mg dorzolamide to one eye and 30% DMSO to the other. In some monkeys, 5 microg prostaglandin F2alpha-isopropyl ester (PG) was added to timolol + dorzolamide for 4-week treatments. Intraocular pressure and corneal endothelial transfer coefficients (k(a)) were also measured at four weeks. Aqueous humor fibronectin levels were determined in four monkeys after approximately 9.5 weeks of timolol + dorzolamide treatment. Aqueous humor formation, intraocular pressure, and aqueous humor ascorbate levels were also determined in rhesus monkeys at baseline and after a single unilateral topical administration of 25 microg timolol. Compared to baseline for the same eye, aqueous humor formation was significantly decreased in treated eyes at all doses of timolol and at 1.8 and 4 mg dorzolamide. Compared to the opposite control eye, aqueous humor formation was lower in treated eyes after 3.5 and 5 microg timolol and after all doses of dorzolamide. Aqueous humor formation after treatment with 3.5 microg timolol + 1.0 mg dorzolamide was decreased in treated vs. control eyes, after four days and was suppressed in both treated and control eyes after four weeks of treatment, but not when PG was added. There was no difference in k(a) values with or without the addition of PG. Intraocular pressure was significantly lower in both treated and control eyes vs. baseline after approximately 6.5 weeks treatment with timolol + dorzolamide when taken 2 hr after the last dose and after approximately 3.5 weeks treatment with timolol + dorzolamide + PG when measured 6 hr after the last dose. Outflow facility after treatment with timolol + dorzolamide was unchanged after four days, tended to be lower in the treated vs. control eyes after four and seven weeks, and was significantly lower in treated vs. control eyes after four weeks treatment with timolol + dorzolamide + PG (0.352 +/- 0.052 vs. 0.515 +/- 0.096 microl min(-1) mmHg(-1), p < or = 0.02). Both treated vs. control eye aqueous humor fibronectin levels were below the level of detection for our assay (0.01 microg ml(-1)). The 25 microg timolol dose decreased ipsilateral, but not contralateral intraocular pressure (12.6 +/- 1.7 vs. 15.2 +/- 0.9; p < 0.05) and aqueous humor formation (1.40 +/- 0.08 vs. 2.03 +/- 0.09 microg ml(-1), p < or = 0.01). There was no difference in anterior chamber ascorbate levels in treated vs. control eyes or compared to their respective baselines. Our findings indicate that timolol affects neither ciliary epithelial transport of ascorbate nor aqueous fibronectin levels. Our data also indicate that decreasing aqueous humor formation over a period of time can lead to reduction in outflow facility, particularly when combined with therapy that redirects aqueous from the trabecular meshwork. Future intraocular pressure-lowering therapies for glaucoma may better be directed at enhancing flow through the trabecular pathway as opposed to decreasing aqueous humor formation or rerouting aqueous humor away from the trabecular meshwork.