急性CO中毒大鼠脑的病理改变及白细胞介素-1β,γ-干扰素表达的免疫组化研究

目的 研究大鼠急性一氧化碳中毒（ACOP）后脑中自细胞介素。1β（IL-1β）、 γ-干扰素（γ-IFN）表达的特点。方法体重240-280g雄性SD大鼠，经预实验确定染毒剂量，于动物实验高压氧舱内行急性一氧化碳（CO）暴露，于染毒后3，7，10，20d取脑组织，常规制备石蜡病理切片，行HE染色及IL-1β，γ-IFN免疫组化染色，观察ACOP后大鼠脑皮质及海马神经元的病理性改变及脑中IL-1β，γ-IFN表达的情况。结果 病理学检查发现，与对照组相比，CO暴露组大鼠染毒后3—20d脑中皮质及海马有明显的神经元变性坏死，以7和10d最为明显，免疫组化染色发现HE染色显示的神经元变形坏死区域有大量神经元细胞和胶质细胞表达IL-1β，γ-IFN。结论 ACOP后大鼠脑中出现IL-1β，γ-IFN的迟发性表达，CD4’T淋巴细胞介导的免疫炎症反应可能参与了ACOP后迟发性神经元损伤的过程。     

西宁地区幽门螺旋杆菌感染与非感染溃疡病患者血清6种细胞因子的对比观察

目的：了解西宁地区幽门螺杆菌（HP）感染与非感染溃疡病患者血清IL-1β、1L-2、IL-4、IL-6、IL-8、TNF—α的变化。方法：用放射免疫法测定30例HP感染与25例HP非感染溃疡病患者血清6种白介素水平含量。结果：HP感染者血清IL-4含量显著低于非HP感染者（P〈0．01），其余五种细胞因子均无显著性变化（P〉0．05）。结论：西宁地区HP感染者IL-4明显降低，这可能是溃疡病发病率高的主要机制。     

幽门螺杆菌oipA基因与胃黏膜组织中IL-17表达的关系

目的探讨幽门螺杆菌(HP)oipA基因与慢性胃病及胃癌患者胃黏膜组织中IL-17表达的关系及其意义。方法收集200例慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃溃疡(GU)及胃癌(GC)患者胃黏膜活检标本,并分为3组:HP-组,HP+(cagA+vacA+)oipA-组,HP+oipA+组。应用PCR方法检测HP+标本中oipA基因的分布情况;免疫组化SP法检测各胃黏膜组织中IL-17的表达水平,分析HP oipA基因不同状态与IL-17表达的关系。结果在HP+标本中,oipA基因阳性率为70.7%(104/147),其中CAG标本oipA检出率为56.5%(26/46),GU标本oipA基因检出率为77.6%(45/58),GC标本oipA基因检出率为76.7%(33/43)。GU及GC标本的oipA检出率高于CAG(P<0.05)。CAG、GU及GC患者中,HP-、HP+oipA-、HP+oipA+3组患者的IL-17表达均依次增高(P<0.05)。CAG患者中HP+oipA+患者IL-17的表达明显高于HP+oipA-患者(P<0.05);GU与GC患者中,HP+oipA-患者的IL-17表达均高于HP-患者,HP+oipA+患者IL-17表达均高于HP+oipA-患者(P<0.05)。oipA+的CAG、GU及GC标本中IL-17表达逐渐增高,差异有统计学意义(2χ=17.387,P<0.05)。结论 HP oipA阳性的胃黏膜IL-17表达水平高于HP oipA阴性者。     

γ-IFN雾化吸入对大鼠重型颅脑损伤继发肺损伤支气管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6水平的影响

目的 探讨γ-干扰素（γ-IFN）雾化吸入对大鼠重型颅脑损伤继发肺损伤后支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）水平的影响。方法 采用大鼠颅脑局部气压冲击伤模型,将74只雄性SD大鼠随机分为正常组（N）和脑损伤组（T）,T组又分为对照组（C）、庆大霉素组（Gen）和γ-IFN组3个亚组,分别给予生理盐水、生理盐水＋庆大霉素、生理盐水＋γ-干扰素雾化吸入,监测各组BALF中TNF-α和IL-6水平。结果 γ-IFN组TNF-α伤后1、3天、IL-6在伤后3天时均明显低于C组和Gen组,而IL-6在伤后7天时却显著高于C组和Gen组。结论 重型颅脑损伤后,早期雾化吸入γ-IFN可降低大鼠BALF中TNF-α和IL-6水平。     

PCR-HP-DNA法与抗HP-IgG法对幽门螺杆菌阳性检出率比较

为比较PCR HP DNA法与抗HP IgG法对幽门螺杆菌(HP)检测的价值,我们对1 0 0例胃、十二指肠疾病患者分别用这两种方法做了检测,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　对象　本组1 0 0例,其中男35例,女6 5例,年龄1 8～79岁,平均4 8 5岁。慢性胃炎(CG) 6 8例、胃溃疡(GU ) 1 5例,十二指肠球部溃疡(DU) 1 4例,胃癌(GC) 3例。诊断均经胃镜检查证实。1 2　标本收集及检测方法　(1 )标本收集:每位患者取病变部位的胃黏膜组织,置于- 70℃冰箱保存,备用于PCR HP DNA的检测;在胃镜检查前抽取静脉血3ml,送检后及时分离血清,用于血清HP I…     

地塞米松对哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ水平及肺组织NF-κB的影响

目的：探讨地塞米松对支气管哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ水平及肺组织中NF-κB的影响。方法：实验分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组。用卵白蛋白（OVA）致敏、激发建立哮喘豚鼠模型。ELISA法检测豚鼠BALF中IL-4，IFN-γ含量。免疫组化法观察NF-κB在豚鼠支气管上皮的表达。结果：哮喘组BALF中的IL-4、IFN-γ含量及PC20水平都与正常对照组有显著差别（P〈0．05），而地塞米松治疗组豚鼠BALF中IL-4含量明显低于哮喘模型组（P〈0．05），其IFN-γ含量和PC20水平较后者显著升高（P〈0．05）。哮喘模型组和地塞米松治疗组豚鼠气道中NF-κB阳性细胞百分比有显著差异（P〈0．05）。结论：地塞米松能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平，升高IFN-γ含量，同时降低气道高反应性和NF-κB在哮喘豚鼠支气管上皮中的表达。     

HIF-1α,VEGF-C在胃腺癌中表达及与淋巴结转移的关系

目的：研究缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子-C在胃腺癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系。方法：用免疫组化染色（S-P）法检测44例胃腺癌组织,20例胃正常组织中HIF-1α、VEGF-C的表达。结果：HIF-1α在胃腺癌组织标本中阳性率为59.01%（26/44）,正常胃粘膜组织标本中表达阳性率25.00%（5/20）,两组差异显著（P〈0.05）;VEGF-C在胃腺癌组织标本中阳性表达率为52.27%（23/44）,正常胃粘膜组织标本中表达阳性率20.00%（4/20）,两组差异显著（P〈0.05）;HIF-1α,VEGF-C在低分化腺癌中阳性率最高,但与癌组织分化程度间差异无显著意义（P〉0.05）,而在T1、2,T3、4表达差异显著（P〈0.05）,在淋巴结转移组与无淋巴结转移组表达差异显著（P〈0.05）;两者在年龄、性别、肿瘤部位方面无显著差异;在HIF-1α、VEGF-C共同表达组,淋巴结转移率显著高于非共同表达组;HIF-1α、VEGF-C在胃腺癌组织表达成正相关（rs=0.85,P〈0.05）。结论：HIF-1α、VEGF-C在胃腺癌组织中表达上调,其阳性表达可能在胃腺癌发生、发展和淋巴结转移过程中起重要作用;胃腺癌组织中HIF-1α和VEFG-C蛋白阳性表达成正相关;HIF-1α和VEFG-C联合检测对预测胃腺癌淋巴结转移,可能有一定的价值。     

幽门螺杆菌感染的慢性胃炎患儿细胞因子检测及临床意义

目的检测幽门螺杆菌（HP）感染相关的慢性胃炎外周血白细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素6和8（IL-6和IL-8）,探讨其临床意义。方法选择84例HP感染患儿作为病例组,50例健康小儿作为对照组。IL-2、sIL-2R、IL-6、IL-8分别采用ELISA、双抗体夹心ELISA法检测。结果病例组IL-2水平均显著低于对照组（P〈0.01）,而sIL-2R、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组（P〈0.01）。结论 HP感染相关的慢性胃炎患儿细胞免疫功能低下且紊乱,该类患儿机体的免疫功能障碍在本病的发生中起一定作用,且参与了胃黏膜损伤的病理过程。     

垂体腺瘤细胞VEGF表达与IL-1α和IL-6分泌的关系

目的：探讨HP75垂体腺瘤细胞株VEGF表达与细胞因子分泌的关系。方法：HP75细胞常规培养，采用ELISA方法分别检测VEGF、IL-1α和IL-6的水平。结果：（1）HP75细胞呈时间依赖性分泌VEGF、IL-1α和IL-6；（2）较大剂量的IL-1α呈剂量依赖性的刺激VEGF表达；（3）IL-6对VEGF的分泌无显著影响；（4）IL-1α和IL-6中和抗体对VEGF分泌无显著影响。结论：VEGF的表达与IL-1α的分泌密切相关，提示细胞因子在垂体腺瘤的生长过程中发挥一定作用。     

幽门螺杆菌感染后胃窦部G、D细胞变化的研究

为探讨幽门螺杆菌（Hp）感染后胃窦部内分泌G细胞（分泌胃泌素）、D细胞（分泌生长抑素）的变化，用免疫组织化学方法对40例慢性胃炎（CG）（包括10例为Hp阴性患者）、40例活动期胃溃疡（GU）和45例活动期十二指肠球部溃疡（DU）患者（其中各包括15例Hp阴性患者）的胃窦粘膜内G、D细胞进行标记后，运用医学图像分析系统对G、D细胞进行定量分析。结果显示：Hp感染后，G细胞数目变化不大（P＞0．05），但胞体灰度值增加（P＜0．05）；D细胞数目减少（P＜0．05），D细胞胞体灰度值无明显变化；各组G／D细胞数目比值有差异（P＜0．01）；Hp阳性的DU较GU组G细胞胞体灰度值增加，D细胞数目减少，差异有显著性意义（P＜0．01），G／D细胞数目比值增大。本研究结果提示，Hp感染后胃窦部G、D细胞变化对某些疾病的发生发展起一定作用。     

自身免疫性胃炎根除幽门螺杆菌后的相关研究

目的探讨自身免疫性胃炎根除幽门螺杆菌（Hp）后对血清壁细胞抗体（PCA）、血清胃泌素、血清维生素B12、胃内pH值的影响。方法 104例患者均经胃镜及血清壁细胞抗体（PCA）诊断为自身免疫性胃炎（AIG）,Hp感染由13C尿素呼气试验或快速尿素酶试验检查证实。患者随机分为两组：治疗组54例,对照组50例。治疗组采用经典根除幽门螺杆菌方案,共服药10d。治疗结束后4～8周,检测Hp根除情况。对照组不用任何对Hp有影响的药物,且与治疗组在同一时间作Hp检测、胃镜及PCA、血清胃泌素、血清维生素B12等检查。结果治疗组Hp根除率为83.8%,对照组根除率为0%（χ2=76.2,P〈0.01）,在患者根除Hp后PCA阳性率下降,转阴率为72.2%,对照组PCA转阴率为0%（χ2=57.3,P〈0.01）,具有统计学意义。治疗组治疗与对照组比较自身免疫性胃炎根除Hp后,PCA阳性率明显下降,血清胃泌素降低,胃内pH值及血清维生素B12升高（P〈0.01）,均具有统计学意义。治疗组上腹部胀痛症状改善明显,对照组中原有上腹部胀痛症状无改善,治疗组贫血明显改善,对照组贫血改善不明显。结论自身免疫性胃炎根除Hp后,PCA阳性率下降,血清胃泌素降低,胃内pH值及血清维生素B12升高。对于Hp感染的自身免疫性胃炎建议根除Hp。     

肠道上皮细胞损伤与Th1分泌干扰素γ关系的研究

 目的 探讨辅助性T细胞在肠黏膜损伤中的作用.方法 大鼠上皮细胞系(IEC-6)用刮匙轻刮IEC-6单细胞层产生"十"字缺损区,分别将大鼠重组IFN-γ(5 ng/ml)和IL-4(5 ng/ml)加入到细胞培养液中,培养IEC-6细胞16 h,观察细胞缺损区的面积,评价不同因子对细胞损伤后修复的影响.结果 IFN-γ抑制EC-6细胞损伤后的修复(P＜0.05);在有或无H2O2 0.25 mM氧化应激的情况下,IL-4 可以促进IEC-6 细胞损伤后的修复,但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Th1细胞可能通过分泌INF-γ调节IEC-6细胞损伤后的修复.     

负载猪源性CTLA4Ig的猪胰岛细胞阻断直接识别途径在异种移植中的作用

目的：探讨负载供体源性CTLA4Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,诱导异种胰岛细胞抑制免疫耐受的可行性及有效性。方法：使用本实验小组前期构建的携带供体源性（猪）CTLA4-Ig的腺病毒载体（Adv-pCT-LA4-Ig）转染猪胰岛细胞,植入糖尿病大鼠肾包膜下,建立猪-大鼠异种胰岛移植模型,监测移植术后大鼠血糖变化及IL-4、γ-IFN的水平变化,检测移植物中pCTLA4-Ig、猪源性胰岛素（p-Insulin）表达情况。结果：1.大鼠血糖在移植术后即开始明显下降,于第3 d左右降至正常,三组大鼠血糖分别在移植术后6、7、35 d左右开始升高;2.三组大鼠术后胰岛平均存活时间为7.43±1.72 d、7.22±1.72 d、34.50±4.14 d,实验组胰岛细胞存活时间较对照组明显延长（P〈0.01）;3.细胞因子变化：（1）γ-IFN：对照组在移植术后第1 d开始轻度升高,于第3 d后开始明显升高,第7 d达到高峰,此后缓慢升高;实验组在移植术后第1～28 d波动较小,同术前相比无明显变化,在移植后第28 d开始上升,第35 d开始急剧上升;（2）IL-4：实验组在移植术后第1 d开始下降,第7 d达到谷值;对照组在移植术后第3～5 d轻微上升,在移植后第28 d开始下降至移植术前水平,第35 d开始急剧下降;4.病理学检查：实验组移植物无明显破坏,炎细胞浸润不明显;免疫组化可见大量pCTLA4-Ig、p-Insulin表达。结论：转染供体源性CTLA4-Ig的胰岛细胞通过阻断直接识别途径,可诱导异种胰岛细胞产生较长时间的免疫耐受。     

树突状细胞诱导抗胃癌效应的实验研究

目的探讨树突状细胞（DC）抗胃癌效应的作用。方法分离正常人外周血单个核细胞（PBMC），加入GM－CSF和IL－4培养，于第5d加入TNF—α继续培养，诱导分离DC。将淋巴细胞与DC混合培养4d后，加入胃癌细胞MKN45、MKN28及SGC7901抗原培养至10d，诱导产生肿瘤特异性的CTL。ELISA检测IL－12和IFN－γ的水平，MTF法检测DC诱导的CTL对MKN45、MKN28、SGC7901和A549体外杀伤效应，流式细胞术检测CTL对肿瘤细胞周期、凋亡的影响。结果培养10d后，IL－12、IFN－γ的分泌量明显提高，DC对同种不同分化类型的胃癌细胞株MKN45、MNK28和SGC7901均有强烈的杀伤效应，杀伤活性显著高于A549（P〈0．01）。与A549比较，MKN45、MKN28和SGC7901的细胞周期显著抑制、凋亡率增加（P〈0．01）。结论DC体外可诱导出高效而特异的抗胃癌效应，显著抑制胃癌细胞分裂增殖，促进其凋亡。     

肺癌H460细胞与单个核细胞相互作用对MMP-1、-2、-9表达的影响

目的：研究单个核细胞和肺癌H460细胞三维立体混合培养对MMP-1、MMP-2和MMP-9表达的影响,并观察MMPs对胶原的降解作用。方法：活性胶原立体培养分为空白对照组（CG）、H460细胞组（HG）、单个核细胞组（MG）、混合组（HMG）共4组,观察癌细胞的生长状况。用明胶酶谱法测定不同时间点各组MMP-2和MMP-9表达,用Western blotting法测定MMP-1。结果：各组细胞在立体胶原内生长良好。MG未明显分泌MMP-1、MMP-2和MMP-9,HG和HMG均分泌MMP-1、MMP-2和MMP-9,但HMG分泌量明显多于HG。结论：炎症细胞和癌细胞混合培养后,细胞间相互作用促进MMPs分泌增多。基质金属蛋白酶可降解细胞外基质,进而促进肺癌的侵袭和转移。     

人骨髓间充质干细胞Toll样受体3和4活化对IL-10、IL-12和IL-6分泌的影响

目的：研究人骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）中Toll样受体（TLR）3和4的活化对IL-10、IL-12和IL-6分泌的影响。方法：用RT—PCR法检测体外培养的BM—MSCs中是否存在TLR3和TLR4的表达;用不同剂量的聚肌胞和脂多糖分别进行诱导后,用ELISA法检测培养上清中IL-10、IL-12和IL-6的变化。结果：BM—MSCs中有较高水平的TLR3和TLR4mRNA表达。聚肌胞可明显促进IL-6分泌（P〈0．05）,且0．025g／L组明显强于0．0025g／L组（P〈0．01）;明显抑制IL-10分泌（P〈0．01）,且0．25g／L组明显强于0．025g／L组（P〈0．05）;对IL-12的分泌无明显影响。脂多糖可明显促进IL-6的分泌（P〈0．01）,而对IL-12和IL—10的分泌无明显影响。结论：BM—MSCs中有较高水平的TLR3和TLR4表达。TLR3活化影响BM—MSCs对IL-6和IL-10的分泌,TLR4活化影响IL-6的分泌,TLR3或TLR4活化均不影响IL-12的分泌。     

高剂量和标准剂量EMZ为基础的三联疗法根除Hp 临床疗效比较

目的 比较高剂量和标准剂量埃索美拉唑（EMZ）为基础的三联疗法根除幽门螺杆菌（Hp）的临床疗效,为临床工作提供参考.方法 选择本院2012年8月～ 2014年2月收治的Hp阳性的慢性胃炎（CG）患者120例,随机分为观察组和对照组.观察组60例使用高剂量（40 mg/次）EMZ联合阿莫西林（AMX）和克拉霉素（CLT）治疗,对照组60例则使用标准剂量（20 mg/次）EMZ联合AMX和CLT治疗.两组均治疗10 d.治疗后统计两组Hp根除情况以及主要临床症状计分变化,并综合评价两组疗效.结果 观察组Hp根除成功54例,根除率为90.0％;对照组Hp根除成功43例,根除率为71.7％,两组根除率有统计学差异（P＜0.01）;治疗后,观察组上腹痛、胀满和反酸症状计分分别为（0.7±0.2）分、（0.8±0.4）分和（0.5±0.2）分,对照组分别为（1.5±0.4）分、（1.3±0.7）分和（1.4±0.4）分,观察组评分显著低于对照组（P＜0.01）;观察组治疗有效率（85.0％）显著高于对照组（68.3％）（P＜0.05）.结论 高剂量EMZ联合AMX和CLT对于Hp的根除效果更好,是临床治疗CG的较佳选择.     

幽门螺杆菌感染与儿童慢性特发性血小板减少性紫癜的临床研究

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）感染与儿童慢性特发性血小板减少性紫癜（chronic idiopathic thrombocytopenic purpura,cITP）的关系。方法：采用C13尿素呼气试验（C13-UBT）和Hp粪便抗原（HpSA）检测17例cITP患儿Hp感染率。全部患儿均给予Hp三联根除治疗1周：阿莫西林片50mg/（kg.d）,tid;克林霉素片15mg/（kg.d）,tid;奥美拉唑肠溶片0.8mg/（kg.d）,qd;4周后再次行HpSA检查,了解Hp根除情况。治疗前、后对血小板计数（PLT）和血小板抗体（PAIgG）进行检测,随访半年。结果：经C13-UBT和HpSA检测,9例Hp（＋）。6例治疗后达到完全反应（CR）或部分反应（PR）,PAIgG明显下降。与Hp（-）患儿在治疗后PLT及PAIgG等方面比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：Hp感染与儿童cITP有关,部分Hp（＋）患儿抗Hp治疗有效。为临床治疗cITP提供了一条新的非免疫抑制治疗途径。     

奥美拉唑对十二指肠溃疡幽门螺杆菌分布的影响

目的探讨奥美拉唑对十二指肠溃疡患者胃内幽门螺杆菌分布的影响。方法分析我院幽门螺杆菌感染的58例患者的胃镜活检组织切片,活检部位分别为窦小弯及体大弯,观察窦体两部位幽门螺杆菌的检出率、密度及胃炎活动程度的变化。结果①胃窦区用药前、用药后4周及3个月幽门螺杆菌的检出率分别为98.3%、60.3%和68.8%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。②胃体大弯用药后4周和3个月幽门螺杆菌的密度较用药前增加（P〈0.05）。结论奥美拉唑可使幽门螺杆菌在胃内的定植部位发生改变。