TX小鼠的铜代谢特点和肝脏病理学特征

【目的】对TX小鼠的铜代谢特征和肝脏的组织病理学及超微结构进行研究。【方法】TX小鼠16只以及同系DL小鼠16只分别作为病例组和对照组,测定各自的血清铜、铜蓝蛋白等铜生化指标,用光学显微镜常规HE染色及电镜观察肝脏病理学特点。【结果】按于体质量的肝铜含量成年TX小鼠显著高于对照小鼠,[(701.9±234)mg/g vs.(15.6±3.8)mg/g,P<0.01]。光镜下肝细胞排列紊乱,细胞肿胀,部分胞核增大呈空泡状,伴有大量的炎性细胞浸润,同时可见活跃增生的卵圆细胞。电镜下可见多数肝细胞的溶酶体结构有较多的颗粒状电子致密物沉积,伴有线粒体增多肿胀。【结论】TX小鼠铜代谢特点和肝铜沉积的组织病理学特征与Wil-son病相符,是Wilson病研究较理想的动物模型。     

环磷酰胺预处理脐血移植小鼠模型的建立及其对骨髓龛位的影响

【目的】建立环磷酰胺 (CTX)预处理脐血移植 (UCBT)小鼠模型 ,并探讨预处理后骨髓龛位腾出的特点和机制。【方法】分别以 10 0 ,2 0 0 ,380mg/kg 3种剂量CTX腹腔注射BALB/c小鼠 ,检测注射后 1周内外周血象、骨髓及外周血CD34 细胞含量、骨髓细胞凋亡及病理学改变。用C5 7BL/ 6鼠脐血 (FNPB)作供体移植经“致死量”CTX预处理的BALB/c鼠 ,动态观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及移植物抗宿主病 (GVHD)情况。【结果】在CTX处理后 3～ 4d内 ,骨髓造血细胞损伤渐加重 ,血窦结构紊乱 ,细胞碎屑弥漫分布 ,外周血与骨髓CD34 细胞水平进行性降低至最低值 ,下降的速度和程度与CTX剂量呈正比。骨髓细胞凋亡发生率的峰值出现在第 1天 ,第 3天恢复正常。FNPB移植能明显提高受鼠存活率 ,重建部分造血与免疫功能 ,未见明显GVHD表现 ,并在受体内检出供体细胞的植入。【结论】成功建立CTX化疗预处理小鼠脐血移植模型。干细胞占据的龛位是在化疗预处理后 4d逐渐完成腾空 ,凋亡是参与此过程的机制之一。     

间充质干细胞联合NK细胞输注抑制DC减轻aGVHD

【目的】 观察骨髓MSC联合NK细胞输注对小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的影响,初步探讨其作用机制?【方法】 分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,体外培养MSC;取C57BL/6小鼠脾脏细胞,磁珠分选NK细胞;建立C57BL/6→BALB/c小鼠异基因骨髓移植模型,接受移植小鼠随机分为4组,每组10只小鼠,MSC和NK细胞移植组,MSC移植组,NK细胞移植组和培养基对照组?根据aGVHD分值,肝?脾?小肠aGVHD病理损害和平均存活时间,评价aGVHD的程度?ELISA法检测小鼠血清中IFNγ和IL-12的含量?流式细胞术检测受鼠脾脏细胞CD11c和CD86的表达情况?【结果】 根据GVHD分值,肝?脾?小肠aGVHD病理损害和平均存活时间综合评价,与培养基对照组比较,MSC联合NK细胞移植组,MSC移植组和NK细胞移植组,发生aGVHD的程度均减轻,以MSC联合NK细胞移植组减轻最为明显?IFNγ的含量,NK细胞组明显高于MSC联合NK细胞移植组,MSC移植组和培养基对照组?IL-12的含量,MSC联合NK细胞移植组低于NK细胞移植组和培养基对照组,MSC移植组低于培养基对照组?脾脏DC细胞的含量,MSC联合NK细胞移植组未成熟DC(CD11c+CD86-)和成熟DC(CD11c+CD86+)均低于MSC移植组,NK细胞组和培养基对照组?【结论】 MSC联合NK细胞输注降低DC细胞数量,减轻aGVHD,延长小鼠生存时间?     

RunX3对小鼠骨髓造血干细胞功能的影响

目的研究RunX3基因对造血干细胞自我更新和分化能力的影响。方法流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测RunX3转基因小鼠骨髓干细胞的功能。结果移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血细胞占总外周血细胞的比例与野生对照鼠相比无明显差异,移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血中髓系细胞占总外周血髓系细胞的比例较野生型对照鼠高。结论RunX3基因缺失对骨髓造血干细胞的自我更新没有影响,但其可能参与了骨髓造血干细胞的分化过程。     

1～6 月龄TX小鼠铜代谢和肝损害情况研究

[目的]研究不同月龄TX小鼠的铜代谢情况、肝脏功能和病理学损害特点,为以TX鼠为模型的研究在选择不同月龄动物方面提供适合的时间点.[方法]选取1～6月的每月龄TX小鼠和同系DL小鼠雌雄各3只,分别作为病例组和对照组,测定肝、脑、肾、血清中的金属铜含量,测定血清铜蓝蛋白及谷草转氨酶等指标,肝脏标本HE染色观察组织病理学改变,电镜下观察超微结构.[结果]TX小鼠自第2月起肝、脑的干体质量铜含量较对照组明显增高(P＜0.05),肝脏增高幅度更甚,至4月龄时两组差异尤为显著,同期肾铜增高及血清铜降低与对照组相比有统计学意义(P＜0.05);血清铜蓝蛋白明显降低;转氨酶的升高以第5月时为著;病理改变光镜下主要为变性坏死,胞核空泡样变,电镜下见线粒体、溶酶体中大量电子致密物沉积,以第4月时最重.[结论]理想的Wilson病模型和肝损害动物模型,症状前治疗的探索可选用1月龄的TX鼠,出现临床症状后治疗的探索应选用2月龄小鼠,病情高峰时期的实验可考虑选用4、5月龄的动物.     

骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌病理及Dystrophin的表达变化

【目的】研究骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌组织病理变化及dystrophin的动态表达变化。【方法】7～9周mdx鼠20只平均分为4组,放疗后移植1.2×107个/只同种异基因全骨髓干细胞,于移植后4周、8周、12周及16周应用HE染色观察细胞形态及核中心移位(CNF),免疫组化及Westernblot方法检测dystrophin表达变化,C57鼠和未治疗mdx鼠各5只作阳性和阴性对照。【结果】C57鼠腓肠肌横切面可见肌细胞大小形态基本一致,无核中移现象。各细胞移植治疗组和对照组mdx鼠均有大量的炎细胞浸润,核中心移位明显。未治疗mdx鼠CNF最高,可达70%左右,移植后4周、12周和16周,CNF比例分别为55%、50%和44%。免疫荧光结果C57鼠肌膜呈完整的网状绿色荧光,mdx鼠肌膜基本未见绿色荧光;移植后4周肌膜dystrophin阳性纤维数大约占细胞总数的1%,随时间延长表达渐渐增多,8周、12周和16周时阳性细胞数分别占细胞总数的5%、10%和15%。Westernblot结果mdx鼠无dystrophin的表达,野生型C57鼠表达量最多,移植后4周mdx鼠仅见微弱表达,随时间延长表达量渐增,移植后16周表达量较移植8周明显增加。【结论】骨髓干细胞移植后mdx鼠腓肠肌CNF随移植时间延长逐渐减少,dystrophin的表达随时间延长增多,提示骨髓干细胞移植后长久持续参与受损骨骼肌的修复与再生。     

青蒿鳖甲汤加减对MRL/lpr狼疮鼠Th17细胞及肾脏病理的影响

【目的】探讨中药复方青蒿鳖甲汤加减对自发性红斑狼疮模型MRL/lpr小鼠Th17细胞及肾脏病理的影响。【方法】选用8~10周雌性MRL/lpr小鼠分为模型组、中药组、泼尼松组和联合用药组,各8只;8~10周龄雌性C57BL/6小鼠8只为正常对照组。中药组给予青蒿鳖甲汤加减水煎剂浓缩液(剂量为19.25 g·kg-1·d-1),泼尼松组给予醋酸泼尼松片水溶液(剂量为8.75 mg·kg-1·d-1),联合用药组同时给予上述2种药物,模型组和正常对照组给予生理盐水。给药7周后取小鼠脾脏及肾脏,采用流式细胞术检测脾脏单个核细胞悬液中Th17细胞的表达;光镜下观察小鼠肾脏病理改变并进行狼疮肾炎肾组织活动性指数(AI)评分。【结果】模型组小鼠Th17细胞比例显著高于正常对照组(P0.05);各给药组Th17细胞比例均显著低于模型组(P0.05),泼尼松组Th17细胞比例显著高于中药组(P0.05)。中药组、泼尼松组及联合用药组镜下均见肾脏病理改变明显较模型组轻,其狼疮肾炎肾组织活动性指标AI评分显著低于模型组(P0.05)。各组MRL/lpr小鼠AI评分与Th17细胞水平呈正相关(r=0.77,P0.01)。【结论】青蒿鳖甲汤加减可抑制MRL/lpr狼疮鼠Th17细胞的表达,可改善其狼疮肾炎肾组织活动性病理变化。     

小鼠骨髓源性干细胞迁移到缺血再灌注损伤肾脏内表达CK18和RCA的观察

目的观察小鼠骨髓源性干细胞(bone marrow derived stem cells,BMSCs)在缺血再灌注(I/R)损伤肾脏内表达细胞角蛋白18(Cytokeratin 18,CK18)和蓖麻凝集素(Ricinus communis,RCA)的情况.方法制备BALB/c雌鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,亚致死剂量60Co照射后通过尾静脉移植同系雄鼠骨髓细胞,于移植后不同时相点采用PCR检测受体鼠骨髓中Sry基因表达,免疫组化染色结合Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)观察受体肾脏中骨髓源性干细胞的分化情况.结果骨髓移植15 d后,PCR检测到受体鼠骨髓中有Sry基因表达;骨髓移植30 d后,连续切片免疫组化染色结合Y-FISH观察到受体鼠肾脏中存在Y /CK18 和Y /RCA 细胞.结论静脉移植的骨髓源性干细胞可迁移到I/R损伤肾脏,并在局部微环境诱导下表达肾小管上皮细胞的表型特征CK18和RCA.     

间充质干细胞在致敏受者造血干细胞移植中的作用

【目的】 本实验拟研究骨髓间充质干细胞(MSC)在致敏受者造血干细胞移植中的作用?【方法】 体外分离BALB/c小鼠骨髓细胞,通过贴壁培养方法获得MSC,应用流式细胞仪检测细胞表面分子标记?通过异基因脾细胞输注方法建立致敏动物模型;绿色荧光染料标记骨髓MSC,分别移植到非致敏及致敏受者体内,并于移植后不同时间点检测MSC的归巢情况?致敏BALB/c小鼠经照射预处理,联合应用同基因MSC与异基因骨髓细胞移植,每日观察小鼠的生存情况?【结果】 体外培养第4代MSC表现为长梭形,阴性表达造血细胞表面分子而阳性表达粘附分子?动物体内实验发现移植后第48小时,MSC在非致敏受者体内主要归巢于骨髓,而在致敏受者体内主要归巢于脾脏?造血干细胞移植实验中,致敏小鼠接受同基因骨髓MSC与异基因骨髓细胞移植,结果发现致敏小鼠在移植后第12 ~ 16天全部死亡,生存中位数时间是14 d?【结论】 成功培养小鼠骨髓MSC;移植后MSC在致敏受者体内主要归巢于脾脏组织;联合应用MSC移植并不能有效促进异基因造血干/祖细胞在致敏受者体内植入?     

急性排斥期静脉注射供体脾脏细胞对异体小鼠皮片存活的影响

【目的】研究急性排斥期静脉注射供体脾细胞对异体小鼠皮片存活的影响,并初步探讨其机制。【方法】96只受体C57BL/6小鼠随机分为A组(阳性对照组)、B组(实验组)、C组(对照组)、D组(阴性对照组),每组24只。各组小鼠均进行同种异体皮片移植,A组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,B组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,第7天球后静脉注射供体脾细胞,第10天环孢素A减量至15 mg·(kg·d)-1;C组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,第7天球后静脉注射生理盐水,第10天环孢素A减量至15 mg·(kg·d)-1;D组只进行同种异体皮片移植。大体观察移植皮片存活情况并绘制生存曲线,术后第11天取各组小鼠移植皮片行病理切片染色以评估免疫排斥病理分级,荧光定量PCR检测术后第1、4、7、8、10天小鼠脾脏白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)m RNA变化及第11天脾脏IL-10、转化生长因子β(transforming growth factor,TGF-β)m RNA水平,第8、10、15天行流式检测各组小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)比例变化。【结果】B组的移植皮片平均存活时间较C组延长3.18天,差异具有统计学意义(P<0.01)。对照皮肤排斥病理分级,第11天病理HE染色示A、B组病理分级为0级,而C、D组为3级。B组小鼠脾脏调节性T细胞比例在第8天到第10天有明显升高的变化,其余各组无明显变化。对比第10天脾脏调节性T细胞比例,B组较C组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。B组小鼠脾脏IL-2 m RNA在第7到8天有明显的升高,其余各组无明显变化。对比第11天脾脏IL-10、TGF-βm RNA的比值,B组较C组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】急性排斥期静脉注射供体脾脏细胞,能增加脾脏调节性T细胞数量,提高抑制性细胞因子IL-10、TGF-βm RNA水平,从而显著延长同种异体皮片移植物存活时间。     

肾骨髓联合移植与嵌合体发生及急性排斥反应的关系

目的　研究肾骨髓联合移植与嵌合体发生及急性排斥反应的关系。方法　采用供体骨髓与肾脏联合移植 ,进行 2 4例造血干细胞微嵌合体诱导 ,采用聚合酶链反应 (PCR)技术检测受者嵌合状态 ,与单纯肾脏移植组 37例比较嵌合发生率及急性排斥反应发生率。结果　随访 1年 ,肾骨髓联合移植组术后嵌合体发生率 (87 5 % ,2 1/ 2 4 )明显高于单纯肾脏移植组 (40 5 % ,15 / 37) ,差异有显著意义 (P 0 0 0 1) ;嵌合阳性组急性排斥反应发性率 (19 4 % ,7/ 36 )与嵌合阴性组 (44 % ,11/ 2 5 )相比差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　肾骨髓联合移植可诱导嵌合体发生并增加受者对供体器官的免疫耐受 ,降低急性排斥反应发生率 ,嵌合现象与免疫耐受具有相关性     

苯并[a]芘对小鼠肝脏和肾脏中丙二醛和过氧化氢酶的影响

目的探讨苯并[a]芘(B(a)P)对小鼠肝脏和肾脏脂质过氧化及抗氧化能力的影响。方法采用B(a)P口腔灌胃连续染毒3 d后,取肝、肾组织作匀浆,采用TBA比色法测定鼠肝脏和肾脏内的丙二醛(MDA)的含量,钼酸铵比色法测定鼠肝脏和肾脏内的过氧化氢酶(CAT)的含量。结果肝中各剂量染毒组的MDA含量增加,其中5 mg/kg、10 mg/kg剂量组与油剂对照组比较差异有显著性(P0.05)。肾脏中各剂量染毒组的MDA含量均有所增加,其中10 mg/kg剂量组与对照组比较差异有显著性(P0.05)。肝脏中各剂量染毒组的CAT的含量低剂量增加高剂量减少,肾脏中各剂量染毒组的CAT的含量增加。结论B(a)P可引起MDA含量增加诱导小鼠肝肾的脂质过氧化损伤。     

骨髓间充质干细胞两种示踪方法的优缺点比较

【目的】探讨荧光染料CM-DiI直接标记和慢病毒感染法EGFP标记人骨髓间充质干细胞（hMSC）用于体内示踪的优缺点。【方法】利用FUGW质粒构建携带EGFP基因的慢病毒载体,并感染P3代hMSC,荧光倒置显微镜下观察细胞的感染效果及传代前后细胞EGFP表达情况的变化;CM-DiI直接标记P3代hMSC,观察CM-DiI标记对细胞生物学特性的影响及传代前后细胞标记效果的变化。分别将CM-DiI和EGFP标记的P3代hMSC移植入新生大鼠左侧脑室,2周后取大鼠脑组织行冰冻切片,比较两种标记方法用于体内示踪的效果。【结果】慢病毒感染hMSC 48h后,约40%细胞表达绿色荧光,体外培养1个月,EGFP阳性细胞数增至50%左右,荧光强度基本保持不变,细胞生长不受病毒转染的影响。CM-DiI标记hMSC 12h后,95%以上细胞呈现很强的红色荧光,1个月后,阳性细胞减少至50%左右,荧光强度也有一定程度降低,未见染料对细胞形态和生长产生明显影响。CM-DiI标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片可以找到红色荧光的标记细胞,EGFP标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片未找到绿色荧光细胞。【结论】CM-DiI和EGFP均可在体外高效标记hMSC,但CM-DiI标记的hMSC体内示踪效果优于EGFP标记。     

用微核试验检测螟铃畏对胎鼠的影响

以前的试验表明螟铃畏能引起小鼠骨髓微核率和染色体畸变率增加,在代谢研究中表明~(35)S-螟铃畏可通过胎盘传递给胎鼠。为进一步阐明螟铃畏能否经胎盘对胎鼠造成危害,以胎鼠肝的微核试验进行研究。实验动物用昆明种小鼠,设螟铃畏100mg/kg、50mg/kg 组)每一剂量分别做骨髓和胎肝微核)、食油对照组和环磷酰胺阳性对照组(30mg/kg)。小鼠交配后以查到阴栓     

清养透解法对自发性红斑狼疮模型小鼠血管损伤因子的影响

【目的】观察清养透解法干预自发性红斑狼疮模型(MRL/lpr)小鼠血管损伤的作用。【方法】将24只8～10周雌性MRL/lpr小鼠按体质量随机分为中药组、西药组、中西医结合组、模型对照组4组,每组6只,另取8～10周龄雌性BALB/c小鼠6只为正常对照组。中药组予以清养透解合剂灌胃(剂量为9.5 g.kg-1.d-1),西药组予以强的松灌胃(剂量为10 mg.kg-1.d-1),中西医结合组予以强的松并清养透解合剂灌胃,模型对照组予以生理盐水灌胃,连续给药6周,正常对照组则不予任何处理。6周后取血做血栓调节蛋白(sTM)、血管假性血友病因子(vWF)检测,并取小鼠肾脏在透射电子显微镜下观察其病理变化。【结果】与正常对照组比较,模型对照组血清sTM、vWF水平显著上升(P<0.01);与模型对照组比较,中药组、中西医结合组可显著降低血清sTM、vWF水平,西药组可显著降低vWF水平(P<0.05或P<0.01);西药组、中西医结合组均能改善MRL/lpr小鼠肾组织病理改变。【结论】清养透解合剂能降低系统性红斑狼疮模型小鼠血清vWF、sTM的表达,保护血管内皮,改善肾组织慢性炎症病理改变。     

肠辐射损伤模型鼠的间充质干细胞移植研究

目的:探讨脐带间充质干细胞(MSC)治疗急性肠型放射病的实验理论依据。方法:体外分离培养人脐带间充质干细胞,移植入肠辐射损伤模型鼠,对肠道放射损伤模型鼠移植CM-DiI荧光标记后的人间充质干细胞,利用人β2-微球蛋白PCR技术及激光共聚焦显微镜观察供体细胞在模型鼠肠道粘膜及组织中的定位,DAI评分和体重变化评价小鼠一般状态,组化染色观察肠道粘膜的病理变化。结果:模型鼠的一般状况在移植MSC 5周明显改善,组织病理学观察也明显好转,组织PCR结果显示MSC除定向分布到辐射损伤部位小肠,在骨髓、肝脏、肺脏、脾脏也有一定的分布。结论:脐带间充质干细胞移植有助于肠辐射损伤模型鼠的恢复,有望用于人急性肠型放射病的治疗。     

非清髓性干细胞移植治疗狼疮鼠

【目的】探索用非清髓性干细胞移植治疗BXSB狼疮鼠的有效性及安全性。【方法】实验组用氟哒拉宾、环磷酰胺作预处理 ,对照组用马利兰 环磷酰胺作预处理 ,动态观察两组外周血细胞变化 ,流式细胞仪检测移植后受者CD3 -CD5 、CD3 CD5 的改变 ,聚合酶链反应 短串联重复序列分析移植后BXSB鼠嵌合状态 ,免疫荧光法检测移植前后受者的肾病理变化。【结果】实验组白细胞、血小板、血红蛋白下降最低值分别为 (0 6± 0 2 )× 10 9/L、(2 7 0± 7 6 )× 10 9/L、(48 0± 1 2 ) g/L ,均分别高于对照组 (P 均 <0 0 5 ) ,白细胞上升至 1 0× 10 9/L的时间在实验组为 (17 5± 6 3)d ,比对照组明显缩短 (P <0 0 5 ) ,尿蛋白减少、抗ds DNA抗体转阴、肾免疫荧光减少在两组间差别无显著性 (P均 >0 0 5 ) ,移植后 8周实验组CD3 -CD5 、CD3 CD5 开始上升 ,出血、体质量下降、肺部感染发生率、死亡率实验组明显低于对照组 (P均 <0 0 5 ) ,移植 30d后实验组DNA指纹图提示为混合嵌合体。【结论】非清髓性干细胞移植可有效改善BXSB鼠狼疮表现 ,该方法抑制骨髓的功能较弱 ,造血恢复较快 ,与移植相关的并发症、死亡率发生率低 ,是一种较安全、有效的治疗狼疮鼠的方法     

骨髓间充质干细胞两种示踪方法的优缺点比较

  【目的】 探讨荧光染料CM-DiI直接标记和慢病毒感染法EGFP标记人骨髓间充质干细胞(hMSC)用于体内示踪的优缺点&#65377;【方法】 利用FUGW质粒构建携带EGFP基因的慢病毒载体,并感染P3代hMSC,荧光倒置显微镜下观察细胞的感染效果及传代前后细胞EGFP表达情况的变化;CM-DiI直接标记P3代hMSC,观察CM-DiI 标记对细胞生物学特性的影响及传代前后细胞标记效果的变化&#65377;分别将CM-DiI和EGFP标记的P3代hMSC移植入新生大鼠左侧脑室,2周后取大鼠脑组织行冰冻切片,比较两种标记方法用于体内示踪的效果&#65377;【结果】 慢病毒感染hMSC 48 h后,约40%细胞表达绿色荧光,体外培养1个月,EGFP阳性细胞数增至50%左右,荧光强度基本保持不变,细胞生长不受病毒转染的影响&#65377;CM-DiI标记hMSC 12 h后,95%以上细胞呈现很强的红色荧光,1个月后,阳性细胞减少至50%左右,荧光强度也有一定程度降低,未见染料对细胞形态和生长产生明显影响&#65377;CM-DiI标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片可以找到红色荧光的标记细胞, EGFP标记的hMSC移植后2周脑冰冻切片未找到绿色荧光细胞&#65377; 【结论】 CM-DiI和EGFP均可在体外高效标记hMSC,但CM-DiI 标记的hMSC体内示踪效果优于EGFP标记&#65377;     

骨髓间充质干细胞移植重建极重度放射损伤小鼠造血功能

目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cell,mMSC)单独输注对重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响.方法:将体外培养扩增的雄性C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞输注给受致死剂量全身照射(8 Gy)的雌性C57BL/6小鼠,检测移植后外周血象、骨髓有核细胞数、病理变化、粒-单核细胞系祖细胞集落(CFU-GM)计数及性染色体比例,以未输注MSCs的小鼠作对照.结果:对照组小鼠(n=6)在照射后20 d内全部死于造血功能衰竭;MSCs组移植后血象明显下降,但2周后迅速恢复,28 d时恢复到照射前的60%左右,42 d外周血象基本恢复.MSC促进骨髓有核细胞数及CFU-GM快速恢复,有利于骨髓组织学的明显恢复改善.移植后42 d,仍可在受致死量照射的受体鼠内检测到供体MSC,但不能长期植入.结论:小鼠骨髓间充质干细胞单独输注可促进重度放射损伤小鼠的造血功能恢复,其植入时间长短可能与输注的细胞量有关.     

供体NKT细胞输注促进小鼠皮肤移植耐受及其机理的研究

目的探讨供体NKT细胞静脉输注诱导移植耐受的作用及其机制。方法C57BL/6和BALB/c小鼠分别为供体和受体,建立皮肤移植模型。对照组:术后注射生理盐水;NKT组:术前静脉注射供体鼠NKT细胞(5×106个/只),术后腹腔注射生理盐水;CsA组:术后腹腔注射环孢素(CsA)(4mg/kg);NKT CsA组:手术前1日静脉注射供体鼠NKT细胞(5×106个/只),术后腹腔注射CsA(4mg/kg)。术后逐日观察移植皮肤存活情况及小鼠一般状况;术后14天对植皮BALB/c小鼠做混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)、迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)等确定耐受的状态;并通过过继转移实验及脾细胞中细胞因子mRNA表达情况,进一步探讨耐受形成的机制。结果采用此诱导方案,移植皮片存活时间明显延长,耐受可被过继转移,Th2型细胞因子IL-10、IL-4在耐受小鼠中明显升高。结论供体NKT细胞静脉输注能诱导异基因小鼠皮肤移植耐受,抑制细胞、Th1/Th2偏移在耐受中起了一定作用。