核酸检测在血液传染病筛查的应用价值

目的 探讨核酸检测在血液传染病筛查[乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)]的应用价值.方法 选取2018-2019年在该院住院因手术或输血需要检测乙肝五项和抗HCV、HIV抗原抗体的500例患者血清标本.化学发光法检测乙肝五项、抗HCV、HIV抗原抗体,提取核酸定性检测HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA.比较两种方法的检测结果,不一致的标本检测病毒载量确认最终结果.结果 检测出11例HBV化学发光与核酸定性结果不一致标本,未检出HCV和HIV化学发光与核酸定性结果不一致标本.2例HBsAg阳性HBV DNA定性阴性检测标本检测载量均小于20 IU/mL.9例HB-sAg阴性HBV DNA定性阳性样品中2例未检测到HBV DNA载量,6例标本检测到HBV DNA载量小于20 IU/mL,1例标本HBV DNA载量为23.6 IU/mL.结论 HBV、HCV、HIV病原体核酸检测有利于检测出窗口期和免疫状态异常的感染者.     

血站核酸定性检测实验室统计学质量控制方法的建立

目的 建立血站实验室8人份PCR混检和TMA单人份三联检两类核酸定性检测系统的室内质控统计学控制方法,用以监测日常检测工作的稳定性。方法 收集2019年1—8月CHITAS12000/ABI7500 PCR核酸扩增系统外部质控品的HIV/HCV/HBV混检检测结果的Ct值和Procleix TIGRIS核酸检测系统外部质控品的HIV/HCV/HBV联检S/CO值。对数据进行正态分布检验,判断是否可以使用基于数据正态分布的统计学质量控制方法。符合正态分布的项目绘制Levey-Jennings质控图,不符合正态分布的项目采用指数加权移动平均(exponential weighted moving average, EWMA)质控图对外部质控品检测S/CO值进行分析。结果 浩源PCR混检系统HIV、HCV和HBV外部质控品混合检测Ct值符合正态分布,利用Levey-Jennings质控图可以监测实验稳定性。TGRISTMA检测系统HIV、HCV和HBV外部质控品联检S/CO值均不符合正态分布。利用EWMA质控图对外部质控品核酸联检S/CO值的波动情况进行监控。结论 利用8人份浩源混检外部质控...     

实施同步核酸检测和血清学检测的结果分析

目的通过对核酸检测和血清学检测并行的检测模式的效果进行分析,对核酸检测和血清学检测在降低输血相关感染风险中的作用进行全面评估。方法对2016年3月1日至2017年5月31日共计73559份献血者标本进行血清学检测(HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶及血型),同时进行HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA的3联检核酸定性检测。统计各项检测的检出率;将酶免检测HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体3项检测与核酸检测结果进行对比分析。结果在检测的73559份标本中,酶免检测HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体三项阳性同时核酸阳性的标本共407份(0.55%);单纯核酸阳性489份,检出率为0. 67%,经鉴别,HBV DNA阳性131份,无HCV RNA和HIV RNA的检出。核酸检测阴性而酶免检测双试剂阳性的标本共有61份,其中HBsAg双阳性44份,抗-HCV双阳性17份,无HIV抗体/抗原双阳性标本。结论核酸检测对于HBsAg(-)的HBV感染献血者的检出效果比较明显,但是核酸检测不能完全代替血清学检测,两者结果不一致,具有一定的互补作用。     

PCR-微流芯片在血液HBV DNA HCV/HIV RNA筛查中的初步应用

目的探讨在血液筛查中应用PCR-微流芯片技术检测献血者HBV DNA,HCV/HIV RNA的模式及可行性。方法在常规ELISA初、复检全项测定合格基础上,将献血者的血清按5人份×200μL进行汇集,用大容量磁珠法提取样本核酸,PCR-微流芯片检测技术进行扩增和检测。将国家标准质控血清进行系列稀释考评方法的灵敏度和重复性。结果342份(69个汇集池)无偿献血标本中有3份HBsAg(-)HBV DNA( ),HBV DNA阳性率为0.89%,其中1份标本两对半结果全阴性,2份标本抗-HBs( )及抗-HBc( )。PCR-微流芯片法检测HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA的95%的灵敏度分别为11.5IU/mL、167.7拷贝/mL和57.9IU/mL结论PCR-微流芯片法具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好特点,可应用于血液HBV DNA HCV/HIV RNA的筛查工作,以进一步提高输血的安全性。     

HIV/AIDS患者与HBV、HCV共感染对外周血病毒载量及T淋巴细胞亚群表达影响的相关性分析

目的:分析HIV/AIDS患者与HBV、HCV共感染对外周血病毒载量及T淋巴细胞亚群表达水平影响的相关性。方法:采用流式细胞术及PCR法对115例HIV单独感染者、HIV/HBV、HIV/HCV及HIV/HBV/HCV合并感染者外周血的CD4+T细胞、CD8+T细胞表达水平、CD4+T/CD8+T细胞比值、HIV RNA、HBV DNA及HCV RNA病毒载量进行比较分析。结果:HIV与HBV、HCV共感染者的肝功能异常、肝衰竭及死亡发生率均随着CD4+T细胞表达水平下降而增加,其三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);在HIV组、HIV/HBV组、HIV/HCV组、HIV/HBV/HCV 4组间CD4+T细胞计数与CD8+T细胞计数两组间比较差异有统计学意义(P<0.05),HIV单独感染者的CD8+T细胞数与不同类型的HIV/HBV、HIV/HCV、HIV/HBV/HCV共感染组间比较,除HIV/HBV共感染组与HIV/HCV共感染组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余每二组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);HIV组、HIV/HBV组、HIV/HCV组、HIV/HBV/HCV共感染组的CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA载量比较呈负相关系(P<0.05)。结论:HIV合并HBV、HCV感染会影响外周血T淋巴细胞表达水平及生物学功能,降低对病毒的清除作用,促进HIV-RNA复制,加速HIV/AIDS的免疫损伤,从而加速疾病进程。     

HIV／AIDS合并HBV／HCV感染病毒载量水平及与T淋巴细胞相关性的探讨

目的：探讨人类免疫缺陷病毒（HIV）／艾滋病（AIDS）合并乙型肝炎病毒（HBV）／丙型肝炎病毒（HCV）感染后病毒载量水平变化及对机体T淋巴细胞免疫机制的影响。方法分别测定 HIV／AIDS单纯感染组,HIV／HBV合并感染组,HIV／HCV合并感染组3组的 HIV RNA、HBV DNA、HCV RNA、CD4＋ T淋巴细胞频数、CD8＋ T淋巴细胞频数、CD4／CD8比值,并分析各组T淋巴细胞与HIV RNA的关系,HBV DNA／HCV RNA与HIV RNA、CD4＋ T淋巴细胞、CD8＋ T淋巴细胞、CD4／CD8比值的相关性。结果 HIV／AIDS单纯感染组、HIV／HBV合并感染组及 HIV／HCV合并感染组的CD4＋ T 淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义（P＜0．05）;HIV／AIDS单纯感染组、HIV／HBV合并感染组的CD8＋ T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义（P＜0．05）;HIV／AIDS单纯感染组、HIV／HBV合并感染组及 HIV／HCV合并感染组的CD4／CD8与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论合并感染 HBV后,HIV／AIDS患者T细胞的数量下降更明显,致HIV RNA、HBV DNA高载量,加速了 HIV病情进展;感染 HBV后CD4＋ T细胞的数量下降比感染HCV更明显。     

HIV/HCV/HBV联合感染的血清学模式与病毒核酸的关系

目的：探讨HIV、HCV和HBV联合感染者血清学模式与核酸表达间的关系。方法：选择50例确诊的HIV感染者，采用ELISA和荧光定量PCR方法分别检测各项血清学感染指标和病毒核酸载量。结果：HIV阳性血清中抗体和核酸检出阳性率结果一致，依次为HIV〉HCV〉HBV，HIV＋HCV抗体阳性率为66％，核酸阳性各为45％和42％，HIV＋HCV＋HBV中抗体阳性各占20％，核酸阳性分别是60％、50％，HIV／HBV抗体阳性占4％，而核酸都分别为100％和0，本组血清中ALT／AST正常，低度升高各占48％和48％。结论：HIV、HCV和HBV传播途径相似，传插模式和传播率存在差异。HIV和HCV联合感染率低于国外报道，HIV和HCV病毒间存在协同作用并反映在HIV/HCV/HBV感染模式中，故应密切关注感染时间和免疫损伤程度，HIV和HBV病毒间未观察到明确的相互关系。     

血清学检测联合核酸检测在血液中心的应用价值

目的探讨在血液中心应用血清学检测联合核酸检测的价值,以提高输血的安全性,降低输血感染风险。方法以我血液中心于2015年1月至2015年12月期间大约共计3000份献血者血液标本作为本组研究的观察对象,所有血液标本均经血清学检测包括HbsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体(以下简称酶免),与谷丙转氨酶;并行HBV/HCV/HIV3联检核酸定性检测。对于单纯核酸检测反应性的标本需进行鉴别试验,其中鉴别阴性的献血者进行跟踪检测,并将HbsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体三项酶联免疫检测结果与核酸检测结果进行对比分析。结果本组大约3000份血液标本中,经酶联免疫检测单试剂不合格331份,不合格率为1.35%;其中经酶联免疫检测双试剂反应性且经核酸检测无反应性的不合格标本共31份,其中HbsAg反应性11份,HCV抗体反应性20份;单纯核酸检测反应性标本共43份,经跟踪检测确认其中HBV13例、HIV窗口期感染2例,末检出HCV献血者。结论核酸检测与血清学检测的结果存在一定差别,核酸检测虽然对血清学阴性的HBV感染检出效果明显,但对于感染HBV但病毒载量极低者,其漏检的可能性较高;需要经跟踪检测与实验室检测以进一步确认。     

静脉吸毒人群多病毒共感染的血清流行病学分析

目的　探索静脉吸毒人群血清多病毒共感染 (包括重叠、混合 )的流行趋势。材料和方法　采乌鲁木齐市某戒毒所静脉吸毒者 (IVDUs)血清 2 0 6份 ,抗 -HIV初筛用ELISA法 ,阳性血清经WB法确认 ,抗 -HCV、HBV -M均用ELISA法检测。结果　单病毒感染 62例 ( 3 0 % ) ,二种以上病毒共感染 13 7例 ( 66.5 % )。抗 -HCV阳性 191份( 92 .7% ) ,HBV(HbsAg Ab) 97份 ( 4 7.0 8% ) ,抗 -HIV阳性 86份 ( 4 1.75 % )。HBV HCV感染 5 1份 ( 2 4.75 % )、HIV HCV共感染 48份 ( 2 3 .3 % )、HIV HCV HBV共感染 3 8份 ( 13 .5 9% )。无HIV单感染和HIV HBV阳性血清。HBV阳性中抗 -HBs高于HbsAg4～ 7倍 ,全阴血清 7份 ( 3 .3 9% )。讨论　在静脉吸毒人群中高危病毒感染顺次为HCV >HIV >HBV ,两种以上病毒感染的危险率为HCV HIV >HCV HIV HBV >HCV HBV。抗 -HBs >HBsAg、无单纯HIV感染血清和HIV与HBV共感染血清。提示除已知HIV具有直接或间接促使HCV复制增加的作用 ,HCV具有促使抗 -HBs产生的作用外 ,应重视病毒间的相互生物学作用     

基于PCR-化学发光的HBV/HCV/HIV并行核酸检测试剂盒的评价

目的：评价一种基于PCR与化学发光技术并行检测血液中HBV/HCV/HIV的试剂盒。方法：使用自制的磁珠及试剂提取病毒核酸,利用多重PCR、特异性探针及化学发光法检测目标病毒核酸的信息,评价试剂盒的灵敏度、特异性及稳定性等。结果：本试剂盒灵敏度高,特异性和稳定性好,能够同时检测出HBV、HCV和HIV的极限值分别为2.0、3.7和166.6 U/mL,对于可能产生干扰的10种病毒和2种细菌的病原体无交叉反应,有效期约12个月。在健康献血者10 422例酶免疫分析法合格标本中,筛查出HBV DNA核酸阳性标本12例和HCV RNA核酸阳性标本2例,与国家批准的血液筛查核酸试剂平行检测结果一致。结论：该试剂盒快速、准确、高灵敏、低成本,适用于基因诊断及流行病学调查。     

仪征市4382份献血者血样核酸检测结果报道

目的探讨缩短病毒检测“窗口期”的检测方法,保证临床输血安全。方法将经常规检测方法检测合格的献血者的血样在加样仪上进行样本汇集,用核酸提取仪提取样本核酸,用核酸扩增仪对HBV、HCV、HIV做扩增检测。结果4382份经常规检测方法检测合格的献血者血样中,发现2份HBV DNA阳性（漏检率为4．65‰）,未发现HCV和HIV RNA阳性。结论经二次ELISA法检测都合格的血液,并非绝对安全,还存在HBV漏检。因此,在献血员筛查中应尽快开展NAT技术以缩短病毒检测的“窗口期”,进一步提高血液安全性。     

HIV感染者合并HBV及HCV感染情况分析

目的分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者合并乙型肝炎病毒(hep-atitis B virus,HBV)和(或)丙型肝炎病毒(hepatitis virus,HCV)感染的情况。方法对260例HIV感染者的HBV和(或)HCV合并感染情况进行回顾性分析,对HIV单独感染者、HIV/HBV合并感染者、HIV/HCV合并感染者及HIV/HBV/HCV合并感染者的CD4+T细胞数、CD4+/CD8+细胞比值及HIV-RNA载量水平进行比较分析。结果在260例HIV感染者中,60例(23.1%)为HIV/HCV合并感染,29例(11.2%)为HIV/HBV合并感染,8例(3.1%)为HIV/HBV/HCV合并感染;男性的HIV/HCV合并感染率显著高于女性(P<0.01);HIV/HBV和HIV/HCV合并感染者的CD4+/CD8+细胞比值均显著低于HIV单独感染者(P<0.05);HIV/HCV合并感染者的CD4+细胞数显著低于HIV单独感染者(P<0.05);3组合并感染者的HIV-RNA载量与HIV单独感染者之间差异无显著性。结论HIV/HCV合并感染率...     

核酸检测技术在血液筛查中的应用研究

目的大样本、多方法调查深圳地区无偿献血人群中乙肝、丙肝和艾滋病病毒血清学阴性者的核酸阳性率,探讨在我国血液筛查中引进核酸扩增技术的必要性,了解和分析献血者血清学阴性核酸阳性感染状况。方法采用大样本数调查,应用ROCHE PCR-ELISA、PCR-微流芯片、实时荧光PCR方法和CHIRON TMA(转录依赖的扩增技术)多种方法对血清学检测阴性的献血者进行HBV DNA、HCV RNA和HIV-1RNA检测,对乙肝阳性献血者追踪检测ALT和乙肝两对半标志物,对丙肝核酸阳性献血者追踪检测ALT及抗-HCV及HBV DNA和HCV RNA病毒载量。结果共对141288人份血样进行了检测,检出HBsAg(-)、HBV DNA阳性28例,总阳性率为0.020%,其中21例为anti-HBc阳性,占0.015%。HIV-1RNA未检出阳性,17例HBsAg(-)、HBV DNA阳性样本追踪发现,9例发生了血清转换现象,4例呈窗口期特征,所有追踪的HBV DNA阳性献血者ALT检测结果正常。1例anti-HCV(-)、HCV RNA阳性献血者追踪发现为典型窗口期献血,ALT显著升高。结论应采用高灵敏度的核酸扩增技术筛查血液中的乙肝和丙肝病毒,可提高血液安全。     

分析重庆市HIV/AIDS患者合并HBV、HCV感染状况

目的 分析重庆市艾滋病病毒感染者(HIV)和获得性免疫缺陷综合征(acquired immunedeficiency syndrome,AIDS)患者(简称HIV/AIDS患者)合并感染乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)状况.方法 利用《艾滋病综合防治系统——抗病毒治疗管理》数据库,回顾收集重庆市2004-2015年HIV/AIDS治疗患者基本情况和HBsAg、Anti-HCV实验室检测结果,利用SPSS 19.0统计软件进行统计分析.结果 截至2015年12月31日,重庆市HIV/AIDS患者中HBsAg和(或)Anti-HCV总检测率55.1％ (11 231/20 397),其中HBsAg和Anti-HCV都进行检测的患者有9 307例.HIV/HBV、HIV/HBV/HCV、HIV/HCV合并感染的比例分别为9.8％、0.9％、4.5％.HIV/HCV合并感染在30 ～ 45岁年龄段构成比最高;HIV/HBV合并感染在男性中构成比最高,与HIV单纯感染组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).HIV/HBV合并感染及HIV单纯感染均在性传播中构成比最高,差异无统计学意义(P=0.177);HIV/HCV和HIV/HBV/HCV合并感染在静脉吸毒中构成比最高,与HIV单纯感染比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).主城9区中HIV/AIDS患者及合并感染患者比例最高.合并感染组病死率均高于HIV单纯感染组,HIV/HBV/HCV组病死率最高.结论 重庆市HIV/AIDS患者中HBsAg、Anti-HCV检测率较低,不同感染模式具有不同的流行病学特征,且合并感染的病死率较高,需要进一步加强对重庆市HIV/AIDS患者中HBV、HCV合并感染检测率和治疗情况的管理.     

血源性艾滋病高发村村民HIV/HBV/HCV混合感染状况调查

目的:了解中国中部血源性艾滋病高发村HIV/HBV/HCV混合感染状况.方法:以血源性艾滋病高发村2岁以上村民1506人为调查对象,采静脉血检测HIV、HBV、HCV.结果:1506人中,1180人进行了所有检测,总调查率78.4%.1180人中,HIV、HBV、HCV感染率分别为15.34%、5.34%、36.44%.HIV/HBV、HIV/HCV、HBV/HCV、HIV/HBV/HCV混合感染率分别为0.25%、12.12%、0.34%、0.34%;有有偿献血史者单项HIV、单项HCV、HIV/HCV感染率高于无有偿献血史者;无有偿献血史者HCV感染者的配偶HCV感染率78.13%(75/96)高于无有偿献血的HCV阴性者的配偶HCV感染率2.91%(19/654)(P＜0.000 1).结论:由于有偿献血,血源性艾滋病高发村存在较高水平的HIV、HBV或HCV混合感染,主要感染类型为 HIV/HCV.     

核酸与酶联免疫同步检测模式在献血者归队中的应用

目的：应用核酸与酶联免疫同步检测模式分析献血者归队情况,探讨献血者归队策略。方法：通过对2016～2021年我市献血者筛查结果中酶联免疫吸附试验（ELISA）单反应性和单核酸反应性但重复检测为非反应性的献血者进行常规ELISA和核酸检测（NAT）单人份归队检测,对不同项目开展补充实验。结果：经过两轮归队检测,ELISA单反应性归队献血者83.7%(36/43)允许归队,单核酸反应性献血者44.4%(12/27)允许归队,其中HCV RNA和HIV RNA允许归队率100%,而HBV DNA允许归队率仅为21.0%(4/19)。结论：初步确定的反应性献血者归队策略有利于维护献血队伍,但由于HBV基因变异比较多样和复杂,为减少OBI的输血感染风险,血站应根据实际情况建立更科学更严密的单核酸反应性归队策略,以保障血液安全。     

超速离心浓缩对提高血液NAT筛查不确定标本鉴别率的临床研究

目的探讨超速离心浓缩（简称超浓缩）血液标本中的病毒对提高三联检核酸筛查阳性、病毒含量低不能常规鉴别标本的可鉴别率。方法30份Roche COBAS s201核酸扩增检测系统筛选出的COBAS TaqScreen MPX HIV、HCV、HBV三项联检核酸阳性,但COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV、HCV及HBV定量试剂原倍鉴别结果均阴性的标本,进行4℃、24600g超速离心1h,浓缩富集病毒后,使用Roche公司的COBASAmpliPrep/COBASTaq-ManHIV、HCV及HBV定量试剂盒进行HIV、HCV及HBV鉴别试验,鉴别阳性的标本,超浓缩处理后用Novartis（原Chiron）公司的PROCLEIX ULTRIO试剂进行相应病毒的鉴别试验加以确证。结果30份RocheMPX核酸筛查阳性、鉴别阴性的标本,经4～10倍超浓缩处理后有23份标本被鉴别为HBV阳性,可鉴别率为76.7%。结论超浓缩处理可解决绝大部分核酸检测三联检阳性但鉴别未果的标本的病毒鉴别问题。     

纯化后的HCV RNA、HIV RNA在2-8℃保存条件下的稳定性研究

目的验证纯化后的HCV RNA、HIV RNA在2-8℃保存条件下的稳定性,为其保存期限提供数据支持。方法选取PCR检测HCV及HIV为阳性的血浆样本,采用磁珠法提取核酸,采用实时荧光PCR法分别检测2-8℃下保存0d、1d、2d、3d、5d、7d、9d后的核酸样本,分析纯化后的HCV RNA及HIV RNA在2-8℃保存条件下的稳定性。结果在2-8℃保存条件下,纯化后的HCV RNA及HIV RNA保存d1、d2、d3、d5、d7、d9的检测结果(Ct值)与初始值相比差异无统计学意义。结论纯化后的HCV RNA及HIV RNA在2-8℃条件下至少可以保存7d。     

与输血相关的几个抗原抗体

经输血传播病原体通常有乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒螺旋体(TP)、西尼罗河病毒(WNV)、嗜人T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)等。目前,国内采供血机构针对上述病原体对献血员血液筛检的特异抗体原和抗体标志物共有4种,即乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)和梅毒抗体,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测,方法模式为双抗体夹心法、间接法和双抗原夹心法等。所使用的仪器设备主要有酶标仪、洗板机、全自动酶免疫分析系统和全自动加样系统等。病毒核酸检测标志物是HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA。     

病毒核酸检测在血液筛查中的应用

目的:探讨病毒核酸检测技术在血液筛查中的应用效果。方法:选择血清学检测为阴性的献血者为研究对象,选择PCR-微流芯片、ROC HE PCR-ELISA、实时荧光PCR方法、转录依赖的扩增技术(CHIRON TMA)等多种方法对研究对象进行HCV RNA、HBV DAN、HIV-1 RAN检测,如果献血者的乙肝为阳性,则应进行乙肝两对半标志物和ALT追踪检测,如果献血者为丙肝核酸阳性,则应进行HBV DNA、HCV RNA、抗-HCV和ALT病毒载量的追踪检测。结果:共检测血液样本4521份,其中HBS AG(-)、HBV DNA阳性共2例,总阳性率为0.047%;未检出HIV-1 RNA阳性,追踪检测2例HBS AG(-)、HBV DNA阳性样本显示,1例表现为窗口期特征,1例存在血清转换现象;HBV DNA阳性者进行追踪检查发现,ALT正常。追踪检测1例ANTI-HCV(-)、HCV RNA阳性者,结果显示ALT上升明显,为典型窗口期献血。结论:在血液筛查中应用病毒核酸检测技术,能让血液安全性得以有效提升。