细胞凋亡及凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡和凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义。方法：采用凋亡细胞原位检测、原位杂交、免疫组化研究８３例曲张静脉和１０例对照组内皮细胞和平滑肌细胞凋亡及相关基因表达。结果：①曲张静脉囊性扩张型Ｅｃｓ及ＳＭＣ凋亡指数显著增高（Ｐ＜０．０１）；②曲张静脉囊性扩张型Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ阳性细胞表达率均显著低于非囊性扩张型（Ｐ＜０．０５）；③非囊性扩张型其Ｂｃｌ－２基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；④囊性扩张型其Ｂａｘ　和Ｆａｓ基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于非囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；⑤Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ表达阳性细胞数和表达率（０．２５±０．２３）与Ｂｃｌ－２基因蛋白（０．３０±０．２７）呈显著正相关，相关系数ｒ分别为０．７９５３８１（Ｐ＝０．００１９８１）和０．６８８２１６（Ｐ　＝０．０００８４４）。结论：①细胞过度凋亡导致静脉血管重塑，可能是静脉曲张发病机制之一；②曲张静脉囊性扩张型其ＥＣｓ和ＳＭＣ过度凋亡可能与Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ、Ｂｃｌ－２蛋白低水平表达及Ｂａｘ、Ｆａｓ高水平表达相关。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

胎鼠宫内缺血缺氧后脑组织Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的：观察胎鼠宫内缺血缺氧后脑组织Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ 表达的动态变化。方法：钳夹一侧供应子宫的血管１０ｍ ｉｎ 造成宫内缺血缺氧模型,分别再灌注０,１,４,８,１５,２４ ｈ,进行半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测Ｂｃｌ－２与Ｂａｘｍ ＲＮＡ 的表达。结果：Ｂａｘ 的表达在缺血缺氧当时即开始增强, ４ ｈ 已有显著性（Ｐ＜ ０．０１）, ８ ｈ 达高峰, １５ ｈ 有所降低, ２４ ｈ 又出现升高（ Ｐ＜ ０．０１）;而Ｂｃｌ－２的变化无显著性（Ｐ＞ ０．０５）;Ｂｃｌ－２与Ｂａｘ 的比值在８ ｈ 达最低。结论：在轻度宫内缺血缺氧后４ ｈ,Ｂａｘ 发生显著变化     

柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用

目的：了解柔红霉素（ＤＮＲ）体外作用于ＨＬ－６０　细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法：应用光镜、ＤＮＡ电泳及ＦＣＭ检测ＨＬ－６０细胞发生的凋亡模式；用ＩＣ、ＦＣＭ观察相关蛋白的变化。结果：当ＤＮＲ浓度为０．２μＭ～２μＭ时，ＨＬ－６０细胞发生的凋亡率随浓度的增加与作用时间的延长而升高，可见典型的凋亡细胞及明显的ＤＮＡ梯度条带。１μＭ　ＤＮＲ作用２ｈ时，ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的荧光强度指数（ＦＩ）降低，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３　的　ＦＩ　升高；而作用５ｈ时，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３的ＦＩ值反而降低。结论：一定浓度的ＤＮＲ在体外可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，它可抑制ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达，而激活ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白的表达。     

Bcl—2和Bax蛋白表达与非小细胞肺癌临床病理特性的关系

探讨Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白表达与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）临床病理特征的关系。方法应用免疫组化ＳＰ法检测了３０例正常肺组织和６１例ＮＳＣＬＣ中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的表达。结果ＮＳＣＬＣ组织中Ｂｃｌ－２蛋白表达率（５７．３８％）显著高于正常肺组织（１３．３３％）（Ｐ〈０．０１）,而ＮＳＣＬＣ组织中Ｂａｘ蛋白表达率（４５．９０％）显著低于正常肺组织（８０．００％）（Ｐ〈０．０１）,鳞癌和腺癌中Ｂｃｌ     

MRSA PBP2a表达的影响因素及MecA基因的检测价值

目的 探讨温度,ｐＨ,盐浓度对甲氧西林耐药金葡萄（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ,ＰＢＰ）表达的影响,以及ＰＢＰ２ａ编码基因ＭｅｃＡ的检测价值。方法 采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）检测ＭＲＳＡ特异性ＭｅｃＡ基因和美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ０推荐的琼脂板稀释法（３２℃,ｐＨ７．２,４０ｇ／Ｌ,ＮａＣｌ苯唑西林ＭＩＣ≥ｍｇ／Ｌ）筛选ＭＲＳ     

结扎冠状动脉对大鼠心肌凋亡相关基因表达的影响

目的：研究大鼠冠状动脉结扎时心肌组织中凋亡相关基因的表达状况与急性心肌缺血的关系。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。描记Ⅱ导心电图;检测血清肌酸激酶（ｃｒｅａｔｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ,ＣＫ） 活性、心肌组织丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ, ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ） 活性;ＲＴＰＣＲ 法检测凋亡相关基因Ｆａｓ、ＣＰＰ３２ 、Ｂｃｌ２ 和Ｂａｘ 在心肌组织的相对表达量。观察伪结扎组、结扎组、苦豆碱（ａｌｏｐｅｒｉｎｅ,Ａｌｏ）给药组（２０ ｍｇ·ｋｇ－ １）、普萘洛尔（ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ,Ｐｒｏｐ）给药组（２ ｍｇ·ｋｇ－１） 对上述各指标的影响。采用单因素方差分析（Ｏｎｅ Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ） 对结果进行统计处理。结果：结扎大鼠左冠状动脉前降支可导致心电图明显的缺血性改变及血清ＣＫ 活性显著升高;心肌组织的ＭＤＡ 含量和ＳＯＤ 活性显著增加;缺血心肌组织中Ｆａｓ、ＣＰＰ３２ 和Ｂｃｌ２基因的表达显著增加（ Ｐ＜０ ．００１）,Ｂａｘ 变化不明显（ Ｐ＜ ０．０５） 。Ａｌｏ 和Ｐｒｏｐ 能明显缓解心电图的缺血性改变并降低血清ＣＫ 活性;减少心肌组织的     

血浆同型半胱氨酸和叶酸及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产

【目的】 探讨孕妇血浆同型半胱氨酸水平（Ｈｃｙ）、叶酸水平及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产的相关性。【方法】 采用病例对照研究,选取４４０例分娩孕妇为研究对象,其中早产临产孕妇（ｃａｓｅ ｇｒｏｕｐ）、同孕周健康孕妇（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）各２２０例。用高效液相色谱荧光检测法（ＨＰＬＣ－ＦＤ）检测两组孕妇血浆同型半胱氨酸水平和叶酸水平差异;１４Ｃ 放射法测定两组孕妇ＭＴＨＦＲ的活性;Ｔａｑｍａｎ－ＭＧＢ技术检测两组孕妇ＭＴＨＦＲ基因的５个ＳＮＰ分型差异。【结果】 早产临产孕妇的血浆Ｈｃｙ 水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显高于同孕周健康孕妇的血浆Ｈｃｙ水平 （７．５６ ± ２．９７ ｖｓ． ５．９６ ± ２．５４, Ｐ ＝ ０．０１５）,而早产临产孕妇的血浆叶酸水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显低于同孕周健康孕妇血浆叶酸水平（１６．２１ ± ２．９１ ｖｓ． １８．５３ ± ３．４４, Ｐ ＝ ０．００２）。早产临产孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（ｎｍｏｌ·ｍｇ－１·ｈ－１）明显低于同孕周健康孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（１３．３３ ± ３．１６ ｖｓ． ２６．８６ ± ５．６３, Ｐ ＝ ０．０００）。在ＭＴＨＦＲ基因中ｒｓ１８０１１３１和ｒｓ１８０１１３３在早产临产孕妇组与同孕周健康孕妇组的基因型分布差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 早产儿孕妇血浆同型半胱氨酸水平受叶酸水平影响,并与ＭＴＨＦＲ基因ＳＮＰ分型密切相关。     

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞亲环素Ａ的表达及意义

【目的】 探讨强直性脊柱炎（ＡＳ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）亲环素Ａ（ＣｙＰＡ）表达水平及其与病情活动性指标的联系。【方法】 纳入年龄与性别相匹配的新诊断ＡＳ患者及健康志愿者（ＨＶ）各３０例,于空腹状态采集血样,并记录患者的毕氏ＡＳ疾病活动指数（ＢＡＳＤＡＩ）、毕氏ＡＳ功能指数（ＢＡＳＦＩ）、红细胞沉降率（ＥＳＲ）及Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及半定量逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ表达,Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析了解ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白水平与病情活动性指标的相关性。【结果】ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白及ｍＲＮＡ半定量值分别为０．９８ ± ０．２８及０．７７ ± ０．１０,均显著高于ＨＶ的０．３０ ± ０．２１及０．１７ ± ０．１１（Ｐ＜ ０．０５）。Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析则提示ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ蛋白与ＥＳＲ （ｒ ＝ ０．５２１,Ｐ ＜ ０．０５）及ＣＲＰ （ｒ ＝ ０．３９４, Ｐ＜ ０．０５）均呈正相关。【结论】 ＡＳ患者ＰＢＭＣ中ＣｙＰＡ表达较ＨＶ上调,且与ＥＳＲ及ＣＲＰ密切关联,提示ＣｙＰＡ可能在ＡＳ发病及炎症活动过程中起调节作用。     

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活性改变的影响因素。方法测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。ｔ检验、直线相关分析和多元逐步回归分析。结果ＮＩＤＤＭ组血糖、ＨｂＡｌｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＬＰＯ显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＳＯＤ、ＧＳＨＰＸ、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组（除ＧＳＨ的Ｐ＜０．０５外，其他Ｐ＜０．０１）；不同ＨｂＡｌｃ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＬＰＯ、ＴＣ组的红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性有显著性差别。红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１２．８０＋０．２７（ＧＳＨ）－０．１２（ＬＰＯ）－０．０９（ＴＣ／ＨＤＬＣ），红细胞胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１０８．２０＋１．     

ｍｉＲ－１０３通过抑制ＦＢＷ７的表达促进肝癌细胞增殖

摘 要： 【目的】研究ｍｉＲ－１０３对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ方法检测ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和细胞中的表达。将ｍｉＲ－１０３ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ转染到肝癌细胞中,分为实验组（转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）和对照组（转染Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）,通过ＭＴＴ实验检测肝癌细胞的增殖变化。Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ后肝癌细胞中ＦＢＷ７ ｍＲＮＡ和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ 或ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ后ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性的变化。【结果】 Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ结果显示ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和ＨｅｐＧ２ 细胞系中均高于癌旁组织和ＬＯ２肝细胞系（Ｐ＜ ０．０５）。ＭＴＴ实验结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。 Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ实验组肝癌细胞中ＦＢＷ７的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平都低于对照组．重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ报告基因活性显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）;与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性显著升高（Ｐ＜ ０．０５）。进一步实验发现,转染ＦＢＷ７后能显著下调由ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ所引起的细胞增殖作用。【结论】ｍｉＲ－１０３可以通过抑制ＦＢＷ７的表达来促进肝癌细胞增殖。     

反义bcr／abl寡核苷酸诱导K562细胞凋亡时Caspase3表达及？…

用反义ｂｃｒ／ａｂｌ寡核苷酸片段诱导Ｋ５６２细胞凋亡,观察Ｃａｓｐａｓｅ３表达及活性变化,以阐明Ｃａｓｐａｓｅ在慢性髓性白血病（ＣＭＬ）发病机制中的作用。方法：用反义ｂｃｒ／ａｂｌ寡核苷酸片段ＡＳ和对照无义片段ＮＳ自理５６２,ＳＷＩＭＸＬＥＱＵＭＦ ＹＮＶ ＥＹ display status     

皮肤鳞状细胞癌Bcl—2蛋白的表达

目的：研究Ｂｃｌ－２蛋白产物在皮肤鳞状细胞癌（ＳＣＣ）中的表达及其意义。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组化方法检测。结果：１０例ＳＣＣ均表达Ｂｃｌ－２蛋白，而且肿瘤细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达强度与表皮Ｂｃｌ－２蛋白表达强度及肿瘤Ｂｒｏｄｅｒ病理分级呈显著正相关（ｒ′ｓ分别为１和０．９１９，Ｐ分别＜０．００１）。结论：支持皮肤ＳＣＣ起源于表皮，表明Ｂｃｌ－２蛋白与皮肤ＳＣＣ的发生与发展密切相关。     

Effects of salvia miltiorrhiza bung （SMB） onosteoblast－like cell lin （clonal MC3T3－E1 cells）

Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａｂｕｎｇ（ＳＭＢ）ｏｎｏｓｔｅｏｂｌａｓｔ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｌｉｎ（ｃｌｏｎａｌＭＣ３Ｔ３－Ｅ１ｃｅｌｌｓ）￥（丁寅）ＤｉｎｇＹｉｎ；ＳｕｉｃｈＳｏｍａ；Ｔ．ＴａｋａｎｏＹａｍａｍｏｔｏ；Ｓ．Ｍａ...     

脑胶质瘤中P53、Bcl—2、Bax蛋白的表达

目的：探讨Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白在脑胶质瘤表达水平以及和细胞凋亡的相关性。方法：采用免疫组化Ｓ－Ｐ染色法检测４７例脑胶质瘤组织中Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白的表达民情况。结果：在４７例脑胶质瘤中,Ｐ５３、Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白的阳性率分别为４８．９％（２３／４７）,５７．４％（２７／４７）,１７．０２％（８／４７）（ｐ〈０．０５）;发现ＧＢＭ的Ｐ５３蛋白阳性水平要高于ＡＳ;Ｂｃｌ－２蛋白     

ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体,研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞,ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＥＲ下游靶基因ｃ－ｆｏｓ,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的蛋白表达水平。【结果】 成功构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,转染后 ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ的表达和蛋白的表达分别下降８６％和６５％（Ｐ ＜ ０．０５）。转染后Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞与对照组相比增殖抑制（Ｐ ＜ ０．０５）, 细胞周期Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少 （Ｐ ＜ ０．０５）。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞Ｓ期的比例增加,转染组增殖抑制明显（Ｐ ＜ ０．０５）,Ｓ期比例降低（Ｐ ＜ ０．０５）。转染组ＥＲ下游基因ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎ－Ｄ１蛋白水平均显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 在子宫内膜癌细胞中沉默ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在Ｇ１期,下调ＥＲ靶基因蛋白表达,ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。     

CLINICAL EXPERIENCES Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Principle in Treating Simple Hematuria of Primary Latent Glomerulone phritis

ＳｉｎｃｅＳｅｐｔｅｍｂｅｒ 1 993，ｗｅｔｒｅａｔｅｄ 85 ｐａ ｔｉｅｎｔｓｏｆ ｐｒｉｍａｒｙｌａｔｅｎｔ ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓｍａｎｉｆｅｓｔｅｄａｓｓｉｍｐｌｅｈｅｍａｔｕｒｉａｗｉｔｈｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＴＣＭ）ａｎｄｗｅｓｔ ｅｒｎｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＷＭ）ａｎｄＷＭｏｎｌｙ，ａｎｄｃｏｍ ｐａｒｅｄｔｈｅｉｒｅｆｆｉｃａｃｉｅｓａｓｆｏｌｌｏｗｓ．ＭＥＴＨＯＤＳＳｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆＰａｔｉｅｎｔｓ　　Ａｌｌｔｈｅｐａｔ…     

Treatment of 38 Cases of Oral Ulceration of Chemotherapeutic Patients with Notoginseng－Bletillae Decoction

Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ３８ＣａｓｅｓｏｆＯｒａｌＵｌｃｅｒａｔｉｏｎｏｆＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＰａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＮｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ－ＢｌｅｔｉｌｌａｅＤｅｃｏｃｔｉｏｎＺＨＡＯＱｉｎｇ－ｂｉｎｇ（赵庆兵）；ＳＵＮＹｏｎｇ－ｈｏｎｇ...     

缺血再灌注对心肌细胞Ca~(2+)-ATP酶蛋白及其基因表达的影响

目的 研究鼠缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）心肌细胞肌浆网钙ＡＴＰ酶（ＳＲ·Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ,ＳＥＲＣＡ２ａ）的蛋白及其基因表达的变化,探讨基固调控在。肌保护中的作用。方法 将ＳＤ大鼠分为正常对照组与Ｉ／Ｒ组,利用离体心工作模型进行灌注,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ方法检测心肌细胞ＳＥＲＣＡ２ａ蛋白的含量,利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ方法测定ＳＥＲＣＡ２ａ ｍＲＮＡ相对含量。结果Ｉ／Ｒ心肌细胞的ＳＥＲＣＡ２ａ蛋白含量（０．５３８±０．００６ｖｓ１．０２０±０．０１５）及其ｍＲＮＡ相对量（０６２±０．００８ｖｓ０．９５±０．００９）均明显下降,分别下降３４．７％与４７．３％,其变化状态与其心肌功能变化一致。结抡 缺血再灌注过程严重影响了心肌细胞 ＳＲ·Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ蛋白及其基因的表达,ＳＥＲＣＡ２ａ基因表达显著下降可能是心肌Ｉ／Ｒ损伤的重要机制;若采取有效措施进行基固调控,增强ＳＥＲＣＡ２ａ基因的表达,可能起到保护Ｉ／Ｒ心肌细胞、增强心肌功能的作用。     

sPLA2cDNA表达载体的选择和亚克隆

目的：选择适当的载体，启动Ｃａ＾２＋依赖分泌型磷脂酶Ａ２（ｓＰＬＡ２）ｃＤＮＡ的表达，为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法：首先从ｓＰＬＡ２－ｐＧＥＭ７重组体（这一重组体不能在转染的真核细胞中表达）获得人ｓＰＬＡ２ｃＤＮＡ，克隆该片断进入中间载体ＢＳＳＫ（使ｓＰＬＡ２ｃＤＮＡ两端出现ＸｂａＩ、Ｈｉｎｄ３酶切位点），选择ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体进行扩增，双酶消化上