口腔鳞癌患者外周血及癌组织中IL-17和Foxp3的表达及意义

目的 探讨口腔鳞癌患者外周血及癌组织中IL-17和Foxp3的表达及意义。方法 选取40例原发初诊经病理证实的口腔鳞状细胞癌患者为实验对象,术前流式细胞术测定外周血中IL-17与Foxp3所占比例及CD3、CD4、CD8、CD56的表达。组织标本为术中立即取材,SP法测定IL-17及Foxp3表达。选取20例良性肿瘤患者瘤旁正常口腔黏膜作组织对照。实验分为A（Ⅰ、Ⅱ期鳞癌患者）、B（Ⅲ、Ⅳ期鳞癌患者）、C（健康者）三组进行组间比较。 结果 A、B组外周血CD4+IL-17+ 细胞、CD4+Foxp3+细胞所占比例均显著高于C组, IL-17+、Foxp3+的表达水平呈正相关（r=0.772,P<0.05）,其中B组CD4+IL-17+、CD4+Foxp3+细胞所占比例高于A组（P<0.05）。与C组相比,A、B组外周血中CD3+和CD4+细胞的百分率、CD4+/CD8+的比值降低,CD8+细胞的百分率升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。 IL-17、Foxp3在A、B组中阳性率均明显高于C组,在A组中阳性表达率低于B组,差异均有统计学意义（P<0.05）,且A、B组癌组织中IL-17与Foxp3的表达水平呈正相关（r=0.386,P<0.05）。结论 IL-17及Foxp3在口腔鳞癌的发生发展中起着一定的促进作用,这种作用可能与机体免疫状态有关。     

肿瘤患者CD4+CD25+调节性T细胞流式细胞术分析

目的:分析比较肿瘤患者和健康人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的特点,为肿瘤免疫学研究及治疗探索新方法.方法:收集并分离30例肿瘤患者和32例健康人的外周血单个核细胞(PBMCs),用荧光标记的抗人CD4及抗人CD25单抗标记肿瘤患者和健康人PBMCs细胞,FCM检测CD4+CD25+Treg细胞,分析CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤患者和健康人中的差别.结果:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞百分数明显高于健康人(年龄<55者62.4 vs 40.4;年龄≥55者53.1 vs 31.0,P<0.05).结论:肿瘤患者的CD4+CD25+Treg细胞高于健康对照,为肿瘤免疫治疗提供新策略,通过删除CD4+CD25+Treg细胞,有可能增强抗瘤免疫反应.     

食管癌患者外周血调节性T细胞亚群格局变化及其临床意义

[目的]分析食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比例变化.[方法]采用流式细胞仪检测104例食管癌患者和68例健康及良性疾病对照者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例,分析其与临床分期、淋巴结转移及外膜受侵的关系.[结果]食管癌患者与对照组的外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞比例分别为(5.19％±1.82％)和(4.56％±1.16％),两组比较差异有统计学意义(t=2.544,P=0.012).Ⅱa期CD4+CD25+CD 127-Treg细胞比例分别与Ⅱb期和Ⅲa期比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);不同年龄、淋巴结及外膜受侵状况患者的外周血CD4+CD25+CD127-Treg细胞比例变化比较无统计学差异(P＞0.05).[结论]食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例明显升高,且分期高患者升高更为明显,提示可能与食管癌免疫逃逸和免疫耐受有关.     

胃癌患者外周血中CD4~+CD25~(high)FOXP3~+调节性T细胞的检测及临床意义

目的探讨胃癌患者外周血CD4+CD25highFOXP3+调节性T细胞(Treg)的检测及临床意义。方法选取60例胃癌患者(胃癌组)和60例健康体检者(健康对照组),采用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25highFOXP3+Treg细胞、CD4+CD25highT细胞及CD4+T细胞水平,酶联免疫吸附法检测外周血白介素10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)浓度。结果与健康对照组相比,胃癌组患者外周血中CD4+CD25highFOXP3+Treg细胞和CD4+CD25highT细胞比例增高;IL-10和TGF-β1浓度增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 CD4+CD25highFOXP3+Treg细胞可能与胃癌发生发展密切相关,为胃癌免疫治疗提供新思路。     

肿瘤患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义

目的：研究肿瘤患者外周血调节性T细胞水平的变化并探讨其临床意义,旨在了解肿瘤患者的免疫功能改变,为肿瘤患者临床治疗及判断预后提供依据。方法：采用流式细胞仪对40例肿瘤患者及40例正常人外周血CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25highT细胞及CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞水平进行检测。结果：肿瘤患者外周血中CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25highT细胞高于正常对照组（P〈0.05）;CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞亦明显高于对照组（P〈0.01）。结论：肿瘤患者细胞免疫功能明显异常,CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞增多可能是肿瘤患者免疫功能受抑的重要原因之一;调节性T细胞水平检测在评价肿瘤患者疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。     

肿瘤患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义

目的:研究肿瘤患者外周血调节性T细胞水平的变化并探讨其临床意义,旨在了解肿瘤患者的免疫功能改变,为肿瘤患者临床治疗及判断预后提供依据。方法:采用流式细胞仪对40例肿瘤患者及40例正常人外周血CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平进行检测。结果:肿瘤患者外周血中CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25highT细胞高于正常对照组(P<0.05);CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞亦明显高于对照组(P<0.01)。结论:肿瘤患者细胞免疫功能明显异常,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞增多可能是肿瘤患者免疫功能受抑的重要原因之一;调节性T细胞水平检测在评价肿瘤患者疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。     

调节性T细胞在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

  目的   分析CD4+CD25+Treg细胞在慢性粒细胞白血病（CML）患者不同病程中的表达,探讨其与该疾病的疗效及预后的关系,从免疫学方面揭示CML发生及转归的可能机制。   方法   收集23例不同病程分期CML患者及10例健康对照的外周血,采用流式细胞仪技术对CD4+CD25+Treg细胞进行检测,比较CML患者与对照之间及不同病程CML患者之间CD4+CD25+Treg细胞表达的差异;比较CD4+CD25+Treg细胞表达水平与对应的临床参数间的关系。   结果   与正常对照比较,CML初治患者、加速急变期患者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg细胞百分比呈显著性下降（P < 0.05）;而CML慢性治疗期患者外周血单个核细胞中CD4+ CD25+Treg细胞百分比与正常对照比较无显著性差异（P>0.05）;与正常对照比较,CML初治患者、加速急变期患者外周血单个核细胞中CD4+Treg细胞百分比呈显著性下降（P < 0.05）;而CML慢性治疗期患者外周血单个核细胞中CD4+Treg细胞百分比与正常对照比较无显著性差异（P>0.05）;不同病程CML患者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg细胞百分比相比较,慢性稳定期患者较初治患者有明显上升,差异有统计学意义（P < 0.05）;而其他组之间无显著性差异（P>0.05）;初治CML患者外周血单个核细胞中CD4+ CD25+Treg细胞百分比与外周血血红蛋白量呈正相关（P=0.010）;与骨髓中幼稚细胞（原始粒细胞+早幼粒细胞）百分比呈负相关（P=0.022）。   结论   CML患者外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg细胞占外周血单个核细胞的比例下降,提示患者进入加速急变期CD4+CD25+Treg细胞在CML患者中起到一定的免疫调节作用。      

CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤免疫中的作用

CD4 CD25 调节性T(Tr)细胞是CD4 调节性T细胞的一个重要亚群,具有免疫低反应性和免疫抑制性两大功能特征,其作用机制可能是通过细胞间直接接触和/或分泌抑制性细胞因子.在维持机体免疫内环境稳定、防止自身免疫性疾病发生、诱导移植耐受以及调节肿瘤免疫方面都起着重要作用.文章就该类细胞的研究近况及其在调节肿瘤免疫方面的作用作一综述.     

调节性T细胞诱导肿瘤免疫耐受的机制

调节性T细胞(Treg)是一类免疫抑制性T辅助(Th)细胞.研究表明,Treg可在肿瘤细胞分泌的趋化因子CCL22作用下大量募集于肿瘤周围,分泌或表达免疫抑制性的细胞因子和受体,形成以Th2型免疫为主的微环境,引导宿主免疫耐受.通过抗体等药物降低Treg数量和活性后可打破肿瘤免疫耐受,抑制肿瘤的发生和转移.     

健择联合顺铂化疗对非小细胞肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节T细胞的影响

目的探讨健择联合顺铂对非小细胞肺癌患者免疫耐受的调控作用。方法38例经病理学或细胞学确诊的NSCLC患者,采用健择、顺铂联合化疗方案,应用流式细胞仪检测化疗前后外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的百分率。结果化疗前NSCLC患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比率明显高于健康对照组(P<0.05);化疗后NSCLC患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞(Treg)占CD4+T细胞的百分率较化疗前显著降低(P<0.05);但鳞癌、腺癌及腺鳞癌3组间化疗前、化疗后各项指标之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论健择联合顺铂化疗可调控晚期非小细胞肺癌机体的肿瘤免疫耐受,改善患者的免疫功能。     

非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞检测及临床意义

[目的]探讨非小细胞肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）表达及临床意义。[方法]流式细胞术检测30例非小细胞肺癌组患者及12例健康志愿者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg百分比。[结果]肺癌组外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞百分比（6.24%±2.01%）高于健康对照组（4.83%±0.85%）（P〈0.05）,外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋细胞百分比在肺癌患者不同性别、年龄、病理、KPS及肿瘤标志物正常与否之间比较无差异（P〉0.05）,Ⅳ期患者表达高于Ⅰ～Ⅲ期患者（P〈0.05）,带瘤患者表达高于无瘤患者（P〈0.05）,有气虚证、血瘀证患者高于无气虚证、血瘀证患者（P〈0.05）。[结论]检测肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg表达在了解患者肿瘤进展情况和机体免疫功能状态方面有一定价值,其表达升高与患者出现气虚证和血瘀证有关。     

结直肠癌患者外周血CD4+ CD25high调节性T细胞的作用

目的探讨结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的作用。方法采用流式细胞仪测定36例结直肠癌患者及30例健康对照者外周血中CD4+CD25highFoxP3 Treg、CD4+CD25highTreg、CD4+CTLA-4 Treg及CD4+T细胞水平。结果与健康对照组比较,结直肠癌组患者外周血CD4+CD25highFoxP3 Treg显著增多(P<0.01),CD4+CD25high Treg和CD4+CTLA-4 T细胞也增多(P<0.05)。结论CD4+CD25highFoxP3 Treg可能在结直肠癌发展过程中起着重要作用。     

食管鳞癌患者外周血及癌组织中浸润性NK细胞表面受体的表达

目的 分析食管鳞癌患者外周血及组织中NK细胞的比例及其表面受体的表达。方法 流式细胞仪检测食管鳞癌患者外周血及组织中NK细胞的比例及其表面受体的表达。结果 食管鳞癌组织中NK细胞比例明显高于癌旁5 cm以远的非肿瘤正常组织。CD16在食管鳞癌患者外周血中的表达与健康者外周血并无明显差异，但在鳞癌组织中的表达则明显低于正常组织；癌组织中NKp30、NKG2D的表达均明显低于正常组织；NKp44的表达明显高于正常组织。在同一患者体内，与外周血相比，癌组织中的CD16、NKp30、NKG2D的表达更低；而NKp44、NKG2A的表达更高。外周血与癌组织中浸润的NK细胞数量与肿瘤进展呈负相关。结论 食管鳞癌组织中NK细胞表面受体表达失衡可介导食管鳞癌细胞发生免疫逃逸。     

CD4+CD25+调节性T细胞与CD4+T、CD8+T细胞在结直肠癌组织中的分布

 目的 分析CD4+CD25+ FOXP3+调节性T细胞（Treg）与CD4+T、CD8+T在结直肠癌（colorectal carcinoma, CRC）组织中的分布及其与临床病理特征之间的关系。方法 收集42例CRC新鲜手术标本,应用冰冻切片、免疫组织化学SP法检测肿瘤组织和癌旁组织中FOXP3+、CD4+T和CD8+T阳性细胞数。结果 CRC患者肿瘤组织中FOXP3表达水平显著升高,与癌旁组织相比差异有统计学意义（P<0.01）;中低分化组Treg细胞数明显高于高分化组（P<0.01）;淋巴结转移组Treg细胞数明显高于无淋巴结转移组（P<0.05）;癌巢内CD4+、CD8+T细胞数及CD4+/CD8+值显著低于间质（P<0.01）;Ⅲ+Ⅳ期、淋巴结转移组癌巢内CD4+/CD8+比值显著低于Ⅰ+Ⅱ期及无淋巴结转移组（P<0.05）;CRC中Treg数量与癌巢内CD4+/CD8+比值显著负相关（r=-0.605, P<0.01）。结论 CRC的发生发展可能与其癌组织局部微环境中Treg数量变化相关,肿瘤局部Treg数量的增多与T淋巴细胞亚群比例失调可能成为肿瘤免疫逃逸的机制之一。     

CD4+CD25+调节性T细胞对晚期肺癌患者免疫抑制作用的研究

目的 探讨Treg及Th1/Th2类细胞因子在晚期肺癌肿瘤免疫抑制中的作用.方法 选取100例初治晚期肺癌患者及50例健康自愿者.采用流式细胞术检测其外周血中Treg、Th1类细胞因子(IFN-γ、IL-2、TNF-a)、Th2类细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)水平,同时分析CD4+CD25+Treg与Th1/Th2类细胞因子之间的相关性.结果 ①晚期肺癌患者外周血中Treg为(11.12±5.83)%,高于健康对照组(7.46±3.07)%,差异有统计学意义(P=0.003);②化疗前肺癌患者外周血中Treg为(11.12±5.83)%,明显高于化疗后(6.45±3.74)%,差异有统计学意义(P<0.001);③晚期肺癌患者与正常对照组Th1/Th2类细胞因子水平分别为:IFN-γ(8.56±3.62 vs 10.79±3.27,P=0.049)、IL-2(8.48±2.87 vs 10.22±4.03,P=0.03)、TNF-a(6.18±2.67vs8.14±2.87,P=0.007)、IFN-γ/IL-4(3.33±1.44 vs 4.09±1.00,P=0.028)、IL-4(3.17±1.19 vs 2.45±0.43,P<0.001)、IL-6(3.88±2.08 vs 2.33±0.88,P<0.001)、IL-10(3.64±1.73 vs 2.54±1.08,P=0.008),其中Th2类因子水平明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05);④CD4+CD25+Treg与Th1类细胞因子IFN-γ、TNF-a、IL-2及IL-6无相关性(P均>0.05);与Th1/Th2(γ=-0.273,P=0.003)呈负相关;与Th2类细胞因子IL-4(γ=0.237,P=0.009)、IL-10(0.626,P<0.001)呈正相关(P均<0.05).结论 晚期肺癌患者CD4+CD25+Treg、Th2类细胞因子水平显著升高,Th1类细胞因子水平下降,它们共同导致肿瘤患者免疫抑制及肿瘤进展,监测其水平变化有助于判断肺癌患者疗效、预后,有效调控CD4+CD25+Treg及负性细胞因子水平可能是治疗肺癌的一个新策略.     

监测肾癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞在术后免疫治疗中的作用

目的:探讨肾癌患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞的监测在术后辅助免疫治疗中的作用。方法:将24例肾癌患者随机分为两组:A组,根治性肾切除术后行IFN-α辅助免疫治疗;B组,单纯行根治性肾切除术;C组,10例健康对照。分别在术前、术后1周以及术后3个月免疫治疗结束时采集外周血样本,流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+CD25、CD4+CD25high T淋巴细胞亚群含量,并计算各部分比值。结果:A、B组术前CD4+CD25+、CD4+CD25high T淋巴细胞亚群总体上增加,并且其含量随肿瘤分期的进展而增加(P<0.05),但部分患者并不高于健康对照组。免疫治疗后,肾癌患者CD4+CD25+T淋巴细胞总体略有上升,但术前较高的患者中,约2/3下降。结论:利用流式细胞仪监测肾癌患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞亚群可反映机体抗肿瘤免疫状态,有助于预测免疫治疗的预后,为肾癌尤其是早期肾癌术后辅助免疫治疗的选择提供参考。     

Cytotoxicity of Histocompatibility Leukocyte Antigen–DR8–restricted CD4+ Killer T Cells against Human Autologous Squamous Cell Carcinoma

Although CD8⁺ killer T cells reacting against human autologous tumor cells have recently been studied in detail, little is known about the cytotoxic mechanism of CD4⁺ T cells against such tumor cells. In order to investigate this, we have established CD4⁺ cytotoxic T lymphocyte TcOSC–20 lines. TcOSC–20 showed selective cytotoxic activity against autologous OSC–20 cells, derived from a cancer of the tongue, in an HLA–DR–restricted fashion. HLA–DR8 (DRB1* 08032) is the only DR molecule expressed on OSC–20 cells, and anti–DRS monoclonal antibody could inhibit the Cytotoxicity, suggesting that HLA–DRB1^★ 08032 is the tumor rejection antigen–presenting moleculeto TcOSC–20. The Fas ligand was expressed on TcOSC–20 lines, and its expression was induced upon mixed lymphocyte–tumor cell culture of autologous peripheral blood lymphocytes. Furthermore, the Cytotoxicity of TcOSC–20 was inhibited by anti–Fas ligand antibody.These data imply that TcOSC–20 lines recognize the tumor antigenic peptide presented by HLA–DR8, and exert Cytotoxicity against autologous tumor cells via a Fas–mediated cytotoxic pathway.