肿瘤微环境与肝癌干细胞相互作用对肝细胞癌发生发展的影响

近几年，肝癌干细胞(LCSC)被认为是肝细胞癌(HCC)治疗失败和复发的主要原因之一。许多研究已经表明LCSC是肝癌肿瘤中具有自我更新、分化和致瘤能力的一小部分细胞，它能启动HCC的发生，并影响其增殖、侵袭、转移、复发和耐药。最近以肿瘤微环境(TME)为基础的治疗已经开展，许多研究发现靶向TME的相关元素比靶向肿瘤细胞本身更具治疗价值。TME是LCSC和肝癌细胞生长的微环境，它与LCSC相互作用，发挥协同效应，对HCC的发生发展起着积极作用。本文介绍了TME中的各种细胞成分和非细胞成分如何与LCSC相互作用，调节肝癌的发生、发展。此外，还描述了TME中主要成分与LCSC相关联的一些分子靶点及治疗方法或药物，以期能在它们的基础上寻求更安全、更有效的HCC靶向治疗方法。     

HOXC9在肝细胞癌组织中的表达以及对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

[目的]探讨HOXC9在肝细胞癌(HCC)组织中的表达以及对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.[方法]收集2015～2019年于我院接受手术治疗的65例HCC患者的癌组织及相应癌旁组织,通过免疫组化检测HOXC9在癌组织及癌旁组织中的表达情况,通过RT-qPCR检测HOXC9在肝上皮细胞THLE-3、HCC细胞系HepG2...     

骨形态发生蛋白2在骨髓间充质干细胞向肝细胞分化中的作用

目的：观察骨形态发生蛋白2（BMP2）在骨髓间充质干细胞（BMSCs）向肝细胞分化中的作用。方法采用贴壁法分离培养大鼠股骨BMSCs ,将体外扩增的第3代BMSCs制作细胞爬片,并行肝细胞定向诱导。根据诱导因子不同分为：肝细胞生长因子（ HGF）组、HGF＋BMP2组、BMP2组及空白对照组。培养10 d左右收集细胞,观察各组细胞形态的变化,并采用ELISA法检测培养液上清中肝细胞特异性标志物甲胎蛋白（ AFP）、白蛋白（ ALB）,免疫细胞化学法检测诱导分化后细胞CK-18的表达。结果 HGF组和HGF＋BMP2组可检测到ALB、AFP及CK-18,且HGF＋BMP2组ALB、AFP及CK-18明显高于HGF组（P均＜0．05）。结论 BMP2不能单独诱导BMSCs向肝细胞分化,但能增强HGF诱导BMSCs向肝细胞分化的作用。     

骨形态发生蛋白9在门静脉性肺动脉高压中的作用机制

门静脉性肺动脉高压(POPH)是在门静脉高压基础上出现的肺动脉压力升高。骨形态发生蛋白9(BMP9)作为BMP家族成员之一，除了具有成骨活性外，还具有保护内皮完整性及维持血管稳态的作用。本文通过回顾POPH发病机制、BMP9生理表达及作用，以及BMP9信号通路及其参与肺动脉高压肺血管重塑的相关研究进展，探讨其成为POPH新型生物标志物的可能，进而协助POPH诊断。     

骨形态发生蛋白2、6在肝癌中的表达及意义

目的:研究骨形态发生蛋白2、6(BMP-2、6)在肝癌组织中的表达,并探讨其与肝癌生物学行为的关系.方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)和Western blot检测30例正常肝脏组织和30例肝癌组织的BMP-2、6的表达水平.结果:正常肝脏组织BMP-2、6 mRNA相对表达量显著低于肝癌组织(0.3245±0.1127vs 0.8298±0.1187,0.2947±0.1853 vs 0.7145±0.1373,均P<0.05),Ⅲ、Ⅳ期肝癌组织BMP-2、6 mRNA相对表达量显著高于Ⅰ、Ⅱ期(0.92431±0.1234 vs 0.69355±0.1925,0.8354±0.1423 vs 0.6043±0.1234,均P<0.05).We s t e r n b l o t检测有远处转移的肝癌组织BMP-2、6表达高于无远处转移的肝癌组织(0.9854±0.2888 vs 0.6244±0.3087,0.9076±0.1276 vs 0.5678±0.2493,均P<0.01).结论:BMP-2、6在肝癌中表达上调,可能在肝癌的发生发展中起着重要的作用,其表达上调可能促进肝癌的浸润和转移.     

骨形态发生蛋白的细胞内信息传导机制

骨形态发生蛋白(bone morpho-genetic protein,BMP),是一种可以在皮下及肌肉等非骨骼系统诱导软骨及骨生成的生长因子,目前已有20余种BMP被分离和克隆,除了BMP1(一种前胶原C 蛋白酶,基因定位于8p 22cen) 外,其余均属于转化生长因子(TGF-β)超家族[1].     

CXCR2在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制

目的探讨趋化因子受体2(CXCR2)在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制。方法取膀胱癌肿瘤组织,培养成悬浮肿瘤细胞球,用流式细胞仪筛选出CD44+膀胱癌干细胞。采用Western blotting法检测干细胞标志基因Oct4、Sox2蛋白表达,并检测CXCR2蛋白表达。培养膀胱癌干细胞,将其分为sh-CXCR2组和转染对照组,sh-CXCR2组加入慢病毒转染试剂polybrene与CXCR2敲减慢病毒,转染对照组加入慢病毒转染试剂polybrene与对照scramble。转染72 h后,采用MTS法检测两组细胞增殖率,软琼脂克隆实验观察细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室转移实验和Boyden侵袭实验观察细胞转移和侵袭能力,Western blotting法检测两组细胞中凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2以及侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的相对表达量。结果流式细胞仪分选出CD44⁺细胞占全部细胞的2.37%,CD44⁺细胞中Oct4、Sox2、CXCR2蛋白表达水平高于CD44-细胞(P均&...     

骨形态发生蛋白微球对犬骨髓基质细胞增殖和分化的影响

目的观察骨形态发生蛋白微球对犬骨髓基质细胞（MSC）增殖及分化的影响。方法聚乳酸聚乙醇酸共聚物制备微球,采用细胞培养及组织化学等方法观察骨形态发生蛋白载药微球对犬MSC增殖、分化及Ⅰ型胶原表达的影响。结果骨形态发生蛋白微球对MSC的增殖无明显影响,但对细胞的分化功能及Ⅰ型胶原表达有明显的促进作用。结论骨形态发生蛋白能够提高MSC的体外成骨能力,且微球可作为骨形态发生蛋白的良好载体。     

重组骨形态发生蛋白7基因转染骨髓间充质干细胞及其在该细胞中的表达

目的将重组骨形态发生蛋白7质粒（pcDNA3．1-BMP7）转染至体外培养的兔骨髓间充质干细胞中．测定骨形态发生蛋白7基因在该细胞中的表达。方法骨形态发生蛋白7基因序列测定、拼接后与报道的骨形态发生蛋白7基因序列对照：脂质体介导pcDNA3．1-BMP7转染骨髓间充质干细胞，G418筛选14d，Western blot、PCR、原位杂交检测骨形态发生蛋白7基因的表达。结果序列测定证实与GenBank报道的骨形态发生蛋白7全长基因序列一致：转染pcDNA3．1-BMP7质粒的骨髓间充质干细胞有大量骨形态发生蛋白7蛋白及骨态发生蛋白7 mRNA表达。结论脂质体介导下，重组真核表达载体pcDNA3．1-BMP7能被转入骨髓间充质干细胞．且表达了骨形态发生蛋白7及骨形态发生蛋白7 mRNA。     

骨形态发生蛋白2在肺癌组织中的表达和意义

目的探讨骨形态发生蛋白2（BMP-2）在肺癌组织中的表达。方法采用免疫组化SP法检测60例肺癌组织和10例正常肺组织中BMP-2的蛋白表达,并进行相关分析。结果 BMP-2在肺癌组织中的阳性表达为67%,正常肺组织无阳性表达,P〈0.01。BMP-2蛋白表达与淋巴结的转移、临床分期有关。结论 BMP-2在肺癌的发生发展及转移中可能有重要作用。     

骨形态发生蛋白-2调控MAPK信号通路在肝癌干细胞特征维持中的机制研究

目的:探究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在肝癌干细胞特征维持中的作用及其相关机制。方法:采用qRT-PCR检测肝癌患者癌组织及其癌旁组织BMP-2和CD133的表达水平。通过慢病毒将PLK-NC和PLK-BMP-2转染至HepG2细胞,设空白对照组(未转染)、PLK-NC组(转染PLK-NC)、PLK-BMP-2组(转染PLK-BMP-2)与PLK-BMP-2+PNU-120596组(转染PLK-BMP-2后给予5μmol/L PNU-120596孵育24 h)。采用qRT-PCR检测各组细胞BMP-2、EpCAM、CD133、CD24基因表达水平,Western blot检测BMP-2、p-MAPK蛋白表达水平。通过有限稀释法测定各组干细胞的成球频率差异。结果:与癌旁组织比较,癌组织BMP-2和CD133表达水平升高。与PLK-NC组比较,PLK-BMP-2组BMP-2、EpCAM、CD133、CD24基因表达水平升高,BMP-2、p-MAPK蛋白表达水平升高,细胞成球频率增加(均P<0.05)。与PLK-BMP-2组比较,PLK-BMP-2+PNU-120596组BMP-2...     

原发性肝细胞癌细胞凋亡、增殖与肿瘤分化程度的关系

为探讨原发性肝细胞癌（HCC）中细胞增殖和凋亡与肿瘤分化程度的关系，采用免疫组化法对50例HCC患者（HBsAg均阳性）癌细胞增殖细胞核抗原Ki-67的表达进行了定位和半定量分析，并用Tunel法对细胞凋亡进行检测。结果显示，Ki-67以棕黄色颗粒状位于细胞核膜中，胞膜和胞质中阴性。认为HCC细胞中Ki-67和凋亡表达与HCC的分化程度有关；HCC细胞中增殖／凋亡失调是导致HCC发展的重要原因，诱导HCC中细胞亡或抑制其增殖，可望提高临床治疗效果。     

骨形态发生蛋白与骨代谢

骨形态发生蛋白(BMPs)是多功能细胞因子,其家庭成员参与骨骼形成、分化、吸收等过程,对成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞均有不同程度的影响。本文就BMPs对成骨细胞、破骨细胞及软骨细胞作用的研究进展进行综述。     

肝细胞生长因子对肝细胞癌侵袭和转移的影响

目的:研究HGF对肝细胞癌SMMC-7721的上皮-间叶转化的作用,并对其机制进行探讨.方法:HGF处理SMMC-7721后,应用细胞培养、Transwell、划痕实验、WB技术研究HGF对肝癌细胞SMMC-7721上皮-间叶转化的作用.并应用P13 kinase抑制物LY294002 10umol/L顸处理细胞,观察SMMC-7721的变化,研究P13 kinase对于HGF作用机制的影响.结果:Transwell和划痕实验显示HGF处理的细胞侵袭和转移能力增强,蛋白印迹结果显示HGF处理的细胞的N-cad、MMP-2、MMP-9和Vimentin的表达增加,E-cad的表达减少.LY294002预处理后,细胞不再受HGF的影响,细胞的形态没有明显变化.Transwell和划痕实验结果与未经处理的SMMC-7721相同.蛋白印迹结果显示:细胞的N-cad、MMP.2、MMP-9、Vimacntin和E-cad的表达变化不明显.结论:HGF能够促进SMMC-7721的上皮间叶转化,这种作用通过PD Kinase实现.     

酸对食管鳞状细胞骨形态发生蛋白表达的影响

目的探讨酸对食管鳞状细胞骨形态发生蛋白4(BMP4)表达的影响。方法原代培养食管鳞状上皮细胞,采用不同pH值酸处理细胞,RT-PCR、实时荧光定量PCR与蛋白印迹分析方法测定BMP4、细胞内第二信使Smad1表达的变化,然后对其进行相关性分析。结果强酸刺激可明显增强食管鳞状上皮细胞表达BMP4、Smad1。结论酸可能通过促进BMP4及BMP信号通路相关蛋白表达而参与Barrett食管的发生。     

细胞外泛素对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的通过体外细胞实验,探讨细胞外泛素对肝细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法利用不同浓度的细胞外泛素(200、400、800 ng/ml),分别干预肝癌细胞(HepG2),采用CCK8法检测细胞的增殖情况;利用Transwell法检测不同浓度泛素对肝癌细胞侵袭能力的影响;利用划痕实验和蛋白免疫印迹检测细胞外泛素对肝癌细胞迁移能力的作用。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 CCK8法检测结果显示,细胞外泛素干预后能明显促进肝癌细胞的增殖能力,并具有明显的浓度依赖性,且泛素干预浓度在400 ng/ml时作用最显著,在48、72、96 h相对吸光度值均明显高于对照组(P值均0. 05)。Transwell实验结果显示,与对照组相比,不同浓度的细胞外泛素均可明显促进肝癌细胞的侵袭,且在400 ng/ml泛素干预组最显著[(134. 00±8. 18)个vs (347. 33±18. 90)个,t=17. 94,P 0. 001]。划痕实验和蛋白免疫印迹结果显示,400 ng/ml泛素能显著增加HepG2肝癌细胞的迁移能力。结论细胞外泛素在体外能明显促进HepG2肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移,且具有浓度依赖性。     

骨形态发生蛋白和糖尿病及其并发症之间的关系

骨形态发生蛋白（BMPs）是转化生长因子?β（TGF-β）超家族的成员,具有多种生理功能,如胚胎形成、骨代谢、造血作用以及神经形成等。近年来研究发现,BMPs还与糖、脂类及能量代谢密切相关,并参与糖尿病及其并发症如糖尿病性肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病血管病变等过程的调节。同时BMPs可以从代谢角度调节糖尿病型肥胖的发生,为未来糖尿病的治疗提供了新的思路。     

CA19-9对肝细胞癌和胆管细胞癌的诊断价值

甲胎蛋白是诊断原发性肝癌的传统肝癌标志物,但约有30%～40%的原发性肝癌甲胎蛋白阴性.因而其他的肝癌标志物,如CA19-9等也应用于原发性肝癌的诊断.本研究旨在探讨CA19-9在原发性肝癌诊断中的临床意义.