蛋白激酶C、Bcl-2及Bax在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义

目的探讨变应性鼻炎（AR）患者鼻黏膜蛋白激酶C（PKC）、抗凋亡基因Bcl-2及促凋亡基因Bax蛋白的表达水平,以进一步了解AR的发病机制。方法应用免疫组织化学的方法检测26例AR患者（AR组）鼻黏膜及10例下鼻甲组织中（对照组）PKC、Bcl-2及Bax的表达。结果PKC、Bcl-2及Bax在2组中均有表达,AR组中PKC主要表达在嗜酸粒细胞、血管内皮细胞及腺体细胞,Bcl-2蛋白主要表达于鼻黏膜腺体细胞和上皮层,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。Bax蛋白与Bcl-2蛋白表达部位一致,2组表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论AR鼻黏膜蛋白激酶C、抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达上调,是AR嗜酸粒细胞增多、鼻分泌物增多及鼻黏膜上皮破坏的机制之一。     

苯环喹溴铵对大鼠变应性鼻炎的治疗作用

目的探讨苯环喹溴铵对大鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制。方法以卵清白蛋白(Ova)和Al (OH)_3建立大鼠变应性鼻炎模型。将60只大鼠随机分为模型组,苯环喹溴铵大、中、小剂量组,倍氯米松组和溶媒对照组,每组10只大鼠。各组动物经鼻给予相应药物2 wk后,观察各动物的症状和鼻黏膜组织形态学的状况,对各动物单侧鼻分泌物进行称重,并检测血清和鼻黏膜中Ova特异性IgE。结果模型组大鼠症状评分、鼻分泌物重量、血清和鼻分泌物中Ova特异性IgE水平及鼻黏膜病理学评分均高于溶媒对照组(P<0.01)。与模型组相比,苯环喹溴铵各剂量组大鼠的鼻炎症状均得到明显改善(P<0.01);大、中剂量组大鼠鼻黏膜的组织形态改变明显减轻(P<0.01);大剂量组大鼠血清和鼻黏膜中的Ova特异性IgE水平以及鼻分泌物量均明显降低(P<0.01)。结论经鼻给予苯环喹溴铵,对于大鼠变应性鼻炎有明显的治疗作用,其作用机制之一可能是通过降低Ova特异性IgE来实现的。     

玉屏风散对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜NF-κBp65、GATA-3表达的影响

目的通过研究变应性鼻炎大鼠鼻黏膜NF-κBp65、GATA-3表达的影响,探讨玉屏风散治疗变应性鼻炎的可能机制。方法 60只SD大鼠按体质量随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、治疗组(玉屏风散低、中、高剂量组)、对照组。除正常组外,其余的大鼠均建立卵清蛋白诱导的变应性鼻炎模型。分组给药干预1周。应用HE染色检测鼻黏膜组织结构变化,应用western-blot及Realtime PCR技术检测NF-κBp65、GATA-3在鼻黏膜组织中的表达。结果模型组鼻组织病理学表现以组织重塑、上皮细胞脱落、杯状细胞化生、组织水肿、大量嗜酸性粒细胞浸润为主;治疗组的表现以鼻黏膜存在组织重塑表现,鼻黏膜上皮细胞脱落、组织间质轻度水肿、固有层可见少量嗜酸性粒细胞浸润,两组比较,有统计学差异(P<0.05)。模型组鼻黏膜中NF-κBp65、GATA-3蛋白及其mRNA呈高表达变化;给予玉屏风散治疗后,NF-κBp65、GATA-3蛋白及其mRNA表达下降,经统计学比较,有显著性差异(P<0.05)。结论变应性鼻炎鼻黏膜存在组织重塑,玉屏风散可能通过下调NF-κBp65、GATA-3表达,发挥防治变应性鼻炎的效应。     

鼻炎通窍喷雾剂对变应性鼻炎豚鼠血清IL-4含量和鼻黏膜Bax蛋白表达的影响

目的:通过研究鼻炎通窍喷雾剂对变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)模型豚鼠血清中白细胞介素4(Interleukin-4,IL-4)含量和鼻黏膜组织中Bax蛋白表达的影响,探讨鼻炎通窍喷雾剂治疗变应性鼻炎的作用机制。方法:用10%甲苯-2,4二异氰酸酯(10%toluene-2,4-diisocyanate,TDI)橄榄油溶液建立豚鼠变应性鼻炎模型;用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定各组豚鼠血清中IL-4的含量,免疫组化法测定鼻黏膜组织中Bax蛋白的表达。结果:实验组豚鼠血清的IL-4表达水平显著低于模型对照组(p0.01);实验组豚鼠鼻黏膜中Bax蛋白的表达水平显著高于模型对照组(P0.01)。结论:鼻炎通窍喷雾剂对变应性鼻炎的作用机制与调节免疫功能、促进炎细胞凋亡有关。     

硝酸铈对豚鼠变应性鼻炎鼻黏膜的影响

目的探讨1%硝酸铈溶液对豚鼠变应性鼻炎鼻黏膜的影响。方法健康豚鼠39只随机分成正常对照组,变应性鼻炎组：用2,4-二异氰酸甲苯酯（2,4-Toluene-Dissocya-nate,TDI）作致敏原,经鼻腔滴入建立变应性鼻炎模型。治疗期间变应性鼻炎组（n=30）动物随机分成3组：阳性对照组（n=10）、药物治疗对照组（n=10）、硝酸铈治疗组（n=10）,正常对照组（n=9）设为阴性对照组,治疗15d。观察症状体征、鼻分泌物涂片、鼻黏膜组胺含量和光镜和电镜下鼻黏膜组织形态学的变化。结果阳性对照组出现鼻痒、喷嚏、流清涕,鼻分泌物嗜酸性粒细胞增多,鼻黏膜组胺含量增多,嗜酸性粒细胞浸润,鼻黏膜细胞超微结构改变。与阳性对照组相比,硝酸铈治疗组上述变化明显减轻。结论 1%硝酸铈溶液能有效控制豚鼠变应性鼻炎的症状体征,使鼻黏膜嗜酸性粒细胞减少、组胺含量减低。     

雷公藤甲素对变应性鼻炎大鼠模型Fas表达的影响及机制研究

目的探讨变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜Fas的表达和雷公藤甲素对他们的干预作用,为雷公藤甲素治疗变应性鼻炎提供初步理论依据。方法选健康SD大鼠40只,雌雄不限,随机分为卵清蛋白(OVA)致敏组,雷公藤(TP)处理组,地塞米松(DM)处理组和生理盐水(SC)对照组,每组10只,用卵清蛋白腹腔注射致敏,继之鼻局部激发建立AR大鼠模型,TP处理组、DM处理组和SC对照组分别用TP、DM和SC在激发前30m in腹腔注射和鼻腔滴入。取各组大鼠鼻黏膜,行Fas蛋白免疫组织化学染色,图像分析软件分析阳性区的灰度值。实验数据采用统计软件包SPSS13.0,统计学分析采用单因素方差分析并继以最小显著差(LSD)t检验比较组间差异。结果变应性鼻炎大鼠鼻黏膜Fas主要表达于上皮、腺体、平滑肌及血管周围的炎性细胞中;TP处理组和DM处理组Fas的表达水平显著高于OVA组(P<0.01),TP处理组和DM处理组间表达水平比较无显著性差异(P>0.05)。结论 TB能够促进大鼠鼻黏膜组织Fas的表达、且与DM比较无显著差异,这可能是其药理作用机制之一。     

氯胺酮对七日龄SD大鼠脑皮层神经元凋亡的影响及其机制探讨

目的:探讨氯胺酮对七日龄SD大鼠脑皮层神经元凋亡的影响及其机制。方法:新生七日龄SD大鼠18只,随机分成3组:对照组腹腔注射等量的生理盐水,低剂量氯胺酮组、高剂量氯胺酮组分别腹腔注射20 mg/kg和80 mg/kg氯胺酮,给药24小时后,用原位末端标记法检测脑皮层神经元的凋亡细胞数,免疫印迹法检测Bcl-2基因和Bax基因蛋白表达的变化。结果:原位末端标记法检测结果显示与对照组比较,低剂量氯胺酮组的凋亡细胞增多但无统计学意义(P>0.05),高剂量氯胺酮组的凋亡细胞数则呈显著性增加(P<0.05)。免疫印迹法检测结果显示与对照组比较,低剂量和高剂量氯胺酮组Bcl-2基因蛋白表达水平明显下降,Bax基因蛋白表达水平增加。结论:氯胺酮可导致新生大鼠皮层神经元凋亡,其机制可能与皮层神经元Bcl-2基因蛋白表达下调、Bax基因蛋白表达上调有关。     

丝裂霉素C抑制PI3K/AKT信号通路抗宫腔黏连SD大鼠子宫内膜纤维化的机制研究

目的探讨丝裂霉素C通过抑制PI3K/AKT信号通路对宫腔黏连SD大鼠内膜纤维化的作用及机制。方法将40只SD雌性大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、实验组1、实验组2,每组10只,建立宫腔黏连模型并进行丝裂霉素C治疗。观察各组大鼠子宫内膜组织形态变化,并行Western blot检测p-AKT、p-PI3K、Bcl-2、Bax蛋白含量。结果与对照组比较,模型组大鼠HE染色可见细胞结构紊乱,大量单层柱状上皮细胞被上皮细胞覆盖,黏膜下层腺体数量减少,细胞成纤维化增生增加;模型组大鼠子宫组织中p-AKT、p-PI3K、Bcl-2蛋白均显著升高,Bax蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各实验组大鼠细胞胞浆及细胞核染色程度较浅,细胞成纤维化增生数量明显减少,其中以实验组2大鼠最为显著;各实验组大鼠p-AKT、p-PI3K、Bcl-2蛋白均显著降低,Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);且实验组2大鼠p-AKT、p-PI3K、Bcl-2蛋白含量明显低于实验组1,Bax蛋白含量明显高于实验组1(P<0.05)。结论丝裂霉素C可抑制宫腔黏连大鼠成纤维细胞活力,诱导细胞凋亡,其作用机制与抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白有关。     

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中趋化因子CC的表达

目的探讨大鼠鼻粘膜中趋化因子CC含量与变应性鼻炎（allergicrhinitis）发生的关系。方法提取22只变应性鼻炎组大鼠及对照组鼻黏膜中的总RNA,设计趋化因子CC和内参GAPDHPCR扩增引物,利用SYBRGreen实时荧光定量PCR法检测趋化因子CC及内参的表达水平。结果变应性鼻炎组大鼠鼻黏膜组织中的趋化因子CC的表达量显著高于对照组。结论趋化因子CC可能在变应性鼻炎的发病过程中发挥重要作用。     

补气固表制剂对变应性鼻炎鼻黏膜细胞凋亡指数的双向调节作用

目的：探讨补气固表制剂对变应性鼻炎鼻黏膜细胞凋亡指数的双向调节作用。方法：制作变应性鼻炎豚鼠模型，观察黏膜上皮细胞，黏膜下腺体细胞凋亡指数的变化和细胞凋亡与嗜酸细胞数量的关系，观察黏膜上皮细胞、黏膜下腺体细胞凋亡指数比值对补气固表制剂的反应，并与对照组比较。结果：变应性鼻炎模型组上述指标均异常，与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。补气固表制剂干预后恢复正常。与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：变应性鼻炎鼻黏膜细胞的凋亡具有双重性，其凋亡特性与细胞种类相关，并与嗜酸细胞的数量有关，补气固表制剂能双向调节凋亡指数，保持鼻黏膜的生理稳态。有效地治疗变应性鼻炎。     

氨基胍对糖尿病大鼠非酶糖化和细胞凋亡的影响

目的观察氨基胍对2型糖尿病大鼠肾脏晚期糖基化终末产物（AGEs）和细胞凋亡的影响。方法利用高糖高脂饮食及注射小剂量的链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、氨基胍组,并设对照组,分别于16周观察大鼠肾脏形态结构、肾脏凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达和肾皮质AGEs含量。结果电镜下见糖尿病组肾脏小管上皮细胞呈典型的凋亡改变,氨基胍组细胞凋亡明显减轻。免疫组化显示,糖尿病组肾小管上皮细胞中Bcl-2、Bax表达较对照组增多,氨基胍组Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,Bax蛋白表达减少。氨基胍组大鼠肾皮质AGEs含量较糖尿病组明显减少。结论氨基胍可通过降低糖尿病肾皮质AGEs含量调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,抑制肾脏细胞凋亡。     

咪达唑仑对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的探讨咪达唑仑对大鼠肝脏缺血再灌注时细胞凋亡的影响及其保护作用。方法成年健康SD大鼠54只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、咪达唑仑组(M组),每组18只。制作70%肝脏缺血再灌注模型,实验结束后即刻取肝左叶做标本。用免疫组织化学法检测Bcl-2与Bax蛋白表达量,TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果与Sham组比较,各组肝组织Bcl-2、Bax蛋白含量、凋亡指数差异有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,M组Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达和AI减少(P<0.05)。IR、M组各组内各时相以再灌注6h最高。结论咪达唑仑可以通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达,使肝细胞凋亡减轻,从而对大鼠缺血再灌注肝脏有一定的保护作用。     

五龙颗粒对变应性鼻炎模型大鼠鼻黏膜IL-3 mRNA表达的影响研究

目的:研究五龙颗粒对变应性鼻炎模型大鼠白细胞介素-3(IL-3)mRNA表达的影响,探讨其治疗变应性鼻炎的机制。方法:以卵清蛋白为变应原复制变应性鼻炎模型大鼠,随机分为模型(AR)组、五龙颗粒组和息斯敏组。取3组和健康大鼠(空白组)血清进行组胺检测;取大鼠鼻黏膜作苏木素-伊红染色,并采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测法对各组大鼠鼻黏膜组织中IL-3mRNA的表达水平进行相对定量比较。结果:IL-3mRNA在4组大鼠鼻黏膜中均有表达,其中AR组的表达水平为11.85±0.82,显著高于空白组(P<0.01);与AR组比较,五龙颗粒及息斯敏组大鼠鼻黏膜IL-3mRNA的表达显著下降(P<0.01)。结论:五龙颗粒能降低模型大鼠鼻黏膜IL-3mRNA的表达水平,可为临床合理用药提供理论基础。     

消风宣窍汤对变应性鼻炎豚鼠模型NGF和IL-5表达的影响及其相关性

目的探讨消风宣窍汤治疗变应性鼻炎（AR）的作用机制。方法将60只Hartley豚鼠随机分为正常组,模型组,消风宣窍汤高、中、低剂量组,氯雷他定组。卵蛋白（OVA）致敏成功建立变应性鼻炎豚鼠模型。药物干预后,ELISA法检测各组豚鼠血清神经生长因子（NGF）和白细胞介素-5（IL-5）的水平。结果OVA致敏后,模型组豚鼠血清NGF,IL-5含量显著高于正常组（P〈0．01）。与模型组比较,用药组豚鼠血清NGF和IL-5含量下降（P〈0．05）,其中消风宣窍汤高、中剂量下调NGF,IL-5作用更显著（P〈0．01）,消风宣窍汤低剂量亦能显著下调IL-5（P〈0．01）,且NGF和IL-5有正相相关关系（r=0．863,P〈0．01）。结论消风宣窍汤治疗AR的作用机制可能是：1）通过降低NGF含量,减少神经肽的产生,直接减少鼻黏膜的神经刺激,进而减轻鼻部症状;2）通过降低NGF含量,调整Th1／Th2免疫失衡,下调Th2细胞因子IL-15的表达,阻断IL-5对EOS的活化作用,减轻鼻黏膜病理改变,进而减轻鼻部症状,达到治疗效果。     

驱铅颗粒对铅中毒大鼠肾小管上皮细胞凋亡的干预作用

探讨益气化滞方驱铅颗粒对铅导致的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用。方法：60只大鼠随机分为2组,其中空白组12只,饮用双蒸水;造模组48只,在饮水中添加0．02％醋酸铅,连续60d制作大鼠慢性铅中毒模型,然后将造模动物随机分为4组：模型组（不予任何治疗）,驱铅颗粒高剂量组（按3．0g·k^-1·d“的剂量灌胃）、驱铅颗粒低剂量组（按0．6g·kg^-1·d^-1的剂量灌胃）、阳性对照组（依地酸钠钙加普鲁卡因肌内注射,50mg·kg^-1·d^-1）,连续4d为1个疗程,休息4d后进行下1个疗程,连续干预7个疗程,连续60d后检测各组血Pb、肾Pb含量,并用TUNEL法检测各组动物肾组织的细胞凋亡;免疫组化方法检测肾组织Bcl．2蛋白表达,Western Blotting方法检测肾组织p53表达。结果：与空白组比较,模型组动物体质量、血色素及Bcl-2蛋白表达均有显著降低（P〈0．01）,而血Pb、肾Pb、肾组织凋亡及p53蛋白表达均显著增高（P〈0．05）。与模型组比较。驱铅颗粒高剂量组体质量、血色素及肾小管Bcl-2表达均有显著增高（P〈0．05）,血Pb、肾组织Pb、肾组织凋亡及p53蛋白表达均显著降低（P〈0．05）。结论：益气化滞方驱铅颗粒能降低动物血Pb和肾组织Pb含量,并通过抑制铅导致的p53高表达、促进Bcl-2表达而减轻肾小管上皮细胞凋亡,降低铅对肾组织的损伤。     

河豚毒素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究河豚毒素（TTX）心脏停搏液对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法取Wistar大鼠24只,建立Langendorff-Neely离体心脏灌注模型,随机分为3组（n=8）：基础组、STH-2组、TTX组。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53的表达,Westernblot检测Bcl-2蛋白表达。结果STH-2组凋亡指数（AI）（11.20±0.79）%高于TTX组（6.92±1.10）%和基础组（1.34±0.23）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的PEI为（22.63±1.10）%高于STH-2组（13.51±0.67）%和基础组（2.52±0.58）%（P〈0.01）;STH-2组Bax的PEI为（8.04±0.57）%高于TTX组（6.05±0.46）%和基础组（2.14±0.57）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2/Bax为3.78±0.41高于STH-2组1.75±0.15（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的相对蛋白含量为（86.1±0.98）%高于STH-2组（53.2±1.76）%和基础组（23.7±2.61）%（P〈0.01）。p53蛋白在各组均未见明显阳性表达。结论与STH-2比较,TTX能减少缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡数,其抗凋亡的机制可能与上调Bcl-2表达,下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

Panax notoginseng saponin Rl attenuates allergic rhinitis through AMPK/DRP1 mediated mitochondrial fission北大核心CSCD

目的探讨三七皂苷(notoginsenoside R1,PNS-R1)是否通过AMP激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/线粒体裂变关键蛋白(dynamin-related protein 1,DRP1)介导的线粒体裂变减轻过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)。方法利用不同剂量PNS-R1治疗卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的AR小鼠,通过观察擦鼻、打喷嚏的过敏症状和鼻组织的HE染色探索PNS-R1在AR中的抑制作用。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgE水平和鼻灌洗液(nasal lavage fluid,NLF)炎性细胞因子水平,Western blot检测凋亡相关蛋白。在体外,利用IL-13刺激人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNEpC),观察细胞凋亡、线粒体膜电位、细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)和线粒体ROS(mtROS)生成、AMPK/DRP1,TXNIP/NLRP3炎症小体的表达水平以及DRP1易位情况。结果PNS-R1减轻了AR小鼠的过敏症状,HE染色炎性细胞减少,降低血清OVA特异性IgE水平以及NLF中IL-4、IL-6和IL-8的水平。在体外,PNS-R1上调IL-13刺激后的线粒体膜电位,降低ROS和mtROS生成、减少cleaved-caspase-3、Bax和上调Bcl-2表达,以AMPK依赖性方式下调DRP1磷酸化(Ser 616)和DRP1在线粒体膜上的易位,减少TXNIP/NLRP3表达。结论PNS-R1通过抑制AMPK/DRP1信号轴及随后的TXNIP/NLRP3信号轴保护线粒体的完整性,缓解AR。     

依达拉奉预处理对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究依达拉奉预处理对大鼠全脑缺血/再灌注损伤(I/R)大脑的保护作用,探讨其脑保护作用的可能机制。方法采用改良Pulsinelli法制作大鼠全脑I/R模型。依达拉奉(3mg·kg-1)腹腔内注射法进行预处理。35只健康雄性SD大鼠随机分为7组,每组5只:对照组(C)、缺血再灌注损伤组(I)、依达拉奉预处理组(E),根据再灌注时间(1d、3d、5d)I、E组依次分3个亚组。TUNEL法检测大鼠脑组织海马CA1区神经细胞凋亡数、免疫组织化学pv6001染色法检测Bcl-2、Bax及CytC(cytochromec)蛋白表达的变化。结果与相应I各亚组比较,E各亚组海马CA1区神经细胞凋亡数目显著减少;Bax、CytC蛋白的表达显著减少;Bcl-2蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论依达拉奉预处理可能通过调节凋亡相关调控基因Bcl-2、Bax、CytC的表达,明显减轻大鼠I/R的神经细胞凋亡,从而产生脑保护作用。     

益脑胶囊对血管性痴呆大鼠皮层Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨中成药制剂益脑胶囊对血管性痴呆大鼠皮层Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备前脑缺血致血管性痴呆模型,以Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;以免疫组化检测大鼠皮层Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 VD模型组与假手术组相比,认知能力明显下降(P<0.05),Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P<0.05);治疗组与模型组相比,认知能力明显改善(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05),Bax蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论血管性痴呆大鼠给予益脑胶囊后,可以通过调节脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达,抑制神经细胞凋亡,保护神经细胞,促进脑功能的恢复,从而改善大鼠学习记忆能力。