阪崎肠杆菌新疆分离株侵袭乳鼠组织器官的病变特征分析

[目的]阪崎肠杆菌新疆分离株侵袭乳鼠,引起组织器官病变特征分析。[方法]阪崎肠杆菌新疆分离株经产毒培养后,灌胃ICR乳鼠,7d后,无菌解剖取肠、肝、脾、肾等组织器官,制做切片,HE染色后镜下观察。[结果]乳鼠小肠、结肠、直肠、肝、脾、肾发生明显病变。[结论]阪崎肠杆菌新疆分离株对机体具有潜在危害。     

阪崎肠杆菌培养产物对乳鼠肠上皮细胞的损伤研究

目的纯化阪崎肠杆菌(ES)培养产物,通过体内侵袭乳鼠肠上皮细胞、体外侵袭caco-2细胞,分析其对肠上皮细胞的损伤特征。方法阪崎肠杆菌用酪蛋白氨基酸液体培养基(CAYE)培养后离心取上清,硫酸铵法纯化上清并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳分析。将纯化产物分别进行体内、外侵袭实验。纯化产物对3~4日龄ICR乳鼠灌胃4 d,7 d后无菌解剖取小肠,制做切片,HE染色,光镜观察;纯化产物侵袭caco-2细胞,光镜观察细胞变化。结果阪崎肠杆菌(ES)培养液上清纯化后,SDS-PAGE电泳显示纯化产物包括3个分子量相近的蛋白质;乳鼠实验表明纯化产物能够引起肠上皮细胞变性水肿、核消失;体外实验表明,纯化产物能够引起caco-2细胞形态变化并死亡。结论阪崎肠杆菌培养后能够产生具有生物活性的蛋白质,对肠上皮细胞具损伤作用。     

阪崎肠杆菌检测方法的研究进展

阪崎肠杆菌是食品和环境中广泛存在的一种条件致病菌,该菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症.近年来,随着对该菌的日益重视,其检测方法也得到不断的发展和改善.本文对阪崎肠杆菌的非特异性与特异性传统检测方法,PCR检测、探针法和实时PCR等分子生物学检测方法以及其他相关方法进行了综述.     

从酱腌菜中检出一株阪崎肠杆菌

目的 了解我市酱腌菜中阪崎肠杆菌的污染状况.方法 按照GB 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》对30份酱腌菜进行阪崎肠杆菌分离培养.结果 检出1株阪崎肠杆菌,检出率为3.3％.结论 说明阪崎肠杆菌不仅存在于婴幼儿奶粉中,其他食品中也存在,对人体存在较大的安全隐患.     

食品及环境分离的阪崎肠杆菌药敏分析

目的了解分离自配方奶粉和婴幼儿食品及奶粉生产环境的阪崎肠杆菌的药物敏感性和耐药性。方法采用纸片扩散法对19株分离自配方奶粉和婴幼儿食品及奶粉生产环境的阪崎肠杆菌进行11大类29种抗生素的药敏实验。结果 19株阪崎肠杆菌对青霉素G、苯唑西林、万古霉素等3种抗生素耐药,对临床常用针对肠杆菌科的抗生素敏感。结论临床中应加强该菌的监测,同时加强对预防用药和临床用药的重视,以减少阪崎肠杆菌多重耐药性的产生。     

阪崎肠杆菌的特征及分类研究进展

阪崎肠杆菌具有产生黄色素、α-葡萄糖苷酶阳性、吐温80酯酶阳性等特征,说明其具有分类学特异性。随着分子生物技术的应用,阪崎肠杆菌分类地位由早期的黄色阴沟肠杆菌演变为独立的阪崎肠杆菌种,而近期Iversen C等学者又提议建立一个新属阪崎肠杆菌。     

阪崎肠杆菌新疆分离株的药敏分析

[目的]对阪崎肠杆菌新疆分离株进行药敏试验,分析其药物敏感性,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株及耐药性。[方法]采用纸片扩散法对6株阪崎肠杆菌新疆分离株进行了9类共23种抗生素的药敏实验。[结果]所有阪崎肠杆菌对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美洛培南100%耐药,对至少20种抗生素敏感。[结论]阪崎肠杆菌在肠杆菌科属耐药性不显著的细菌。     

奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测

婴儿配方奶粉常因阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazak ii)污染而成为婴儿感染发病的主要原因^(1,2)。为快速、高效对奶粉中阪崎肠杆菌进行检测和监控,本实验针对阪崎肠杆菌外膜蛋白A(ompA)基因⁽³⁾设计引物,建立PCR检测方法,并对人工污染细菌的奶粉进行检测,为奶粉中阪崎肠杆菌检测提供新的手段。现将结果报告如下。     

阪崎肠杆菌生长特性及耐热耐酸碱性分析

目的 研究不同阪崎肠杆菌菌株的生长特性和耐热耐酸碱性.方法 采用光谱扫描仪培养22株阪崎肠杆菌,由扫描仪实时监测不同阪崎肠杆菌菌株生长特性;采用显色平板涂布方法观察高温和酸碱条件下阪崎肠杆菌存活情况.结果 传统平板计数法和微孔板光谱扫描仪建立的阪崎肠杆菌生长曲线具有良好相关性(R2=0.92);22株阪崎肠杆菌经75℃处理2 min后,尚有1株存活;经碱处理后(pH 12.55)立检测,所有菌株均已死亡;用酸处理1min后(pH 1.18)检测,尚有2株存活.结论 采用光谱扫描仪方法测定阪崎肠杆菌生长曲线方便快捷,不需要培养计数;不同的阪崎肠杆菌菌株具有不同的耐热、耐酸特性.     

某市部分食品阪崎肠杆菌污染情况

目的了解某市市售10类食品带染阪崎肠杆菌的数量和程度,从而评估其风险性。方法按照GB 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》和实时荧光PCR法操作规程作定性、定量分析。结果查10类850份食品,有7类54份检出阪崎肠杆菌,检出率为6.4%。39份带菌量在30 MPN/100 g(ml)浓度范围以下,占72.3%;15份带菌量在30MPN/100 g(ml)浓度范围以上,占27.7%。结论小部分糖饼类、冰淇淋、巧克力坚果等食品阪崎肠杆菌带菌量较高,潜在一定的致病风险,要有针对性地加强监督管理。     

寿司制品中阪崎肠杆菌污染情况调查

目的:了解寿司制品中阪崎肠杆菌的污染状况。方法:采用常规培养鉴定方法、实时荧光PCR方法对40份样品进行阪崎肠杆菌分离鉴定。结果:从40份市售寿司制品中检出4株阳性株,阳性率为10%。2种鉴定方法结果相符。结论:阪崎肠杆菌的污染造成寿司制品存在安全隐患。     

从进口原料奶粉中检出坂崎肠杆菌

目的：检测进口原料奶粉中是否污染坂崎肠杆菌。方法：参照GB／T4789．6-2003致泻性大肠埃希氏菌检验和美国FDA《婴幼儿奶粉中坂崎肠杆菌检测方法》部分。结果：5份进口原料奶粉样品中有2份检出坂崎肠杆菌。结论：本文提示对进口原料奶粉检测坂崎肠杆菌的重要性。     

阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型的研究

目的对29株阪崎肠杆菌分离株和2株阪崎肠杆菌模式株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型研究。方法分别利用限制性内切酶XbaⅠ和SpeⅠ酶切阪崎肠杆菌染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics软件进行聚类分析。结果31株阪崎肠杆菌使用XbaⅠ和SpeⅠ酶切分别有30种PFGE带型。除ES004和ES005外,其他29株阪崎肠杆菌经XbaⅠ或SpeⅠ酶切后的PFGE条带之间均存在不同程度的差异。来源于同品牌同批次中不同包装的产品中的ES004和ES005分离株XbaⅠ和SpeⅠ酶切图谱完全一致(相似度为100%)。根据BioNumerics软件分析结果可知,除分离株ES004和ES005外,其他分离株的带型和样品来源之间无显著相关性。结论虽然XbaⅠ酶切的PFGE带型平均条带少于SpeⅠ,但对阪崎肠杆菌具有足够的分辨率。两种PFGE分型方法都可应用于阪崎肠杆菌的分子分型和溯源。     

阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法建立

目的 将特异性抗体免疫富集和聚合酶链反应(PCR)方法有机结合,建立乳制品中阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法。方法 用特异性阪崎肠杆菌单克隆抗体包被的PCR管对样品中病原菌进行特异性免疫富集后,以PCR管中免疫富集的阪崎肠杆菌为模板直接进行PCR扩增,通过特异性、灵敏度、模拟增菌等实验,确认该方法实际检测的可行性并与酶联免疫吸附实验(ELISA)进行比较。结果 免疫富集捕获-PCR(IC-PCR)法检测阪崎肠杆菌纯菌液灵敏度可达10²~10³ CFU/mL,是直接PCR的10³~10⁴倍;特异性验证表明,该方法与常见食源性致病菌无交叉反应;模拟带菌实验显示灵敏度可达到10³ CFU/mL;模拟增菌实验显示该方法检测阪崎肠杆菌只需增菌6 h,而用ELISA试剂盒需要增菌16 h。结论 该方法灵敏度高、特异性强、检测周期短。     

婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌分子检测方法探讨

目的：对婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分子检测方法进行探讨。方法：分别用常规PCR方法和实时荧光PCR方法对32份奶粉样品进行阪崎肠杆菌鉴定。结果：32份样品中检出2株阳性株,阳性率为6.25%,两种检测方法结果相符。结论：市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌污染,应尽快制订婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的检测标准,分子检测方法可快速准确检测阪崎肠杆菌。     

2012 - 2016年陕西省897份婴幼儿食品中阪崎肠杆菌检测

目的 通过连续5年对陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的监测,调查陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染情况。方法 随机采集省内超市、零售店、农贸市场、网购场所的婴幼儿食品,依照食品微生物检验国家标准GB 4789.40—2010 对所采集的婴幼儿食品进行阪崎肠杆菌的检测。结果 2012 - 2016年共采集婴幼儿食品897份,总检出率为3.01%（27/897）。婴幼儿辅助食品的检出率（6.54%）高于婴儿配方食品（1.90%）,第二季度的检出率（3.82%）较高,0～6个月婴幼儿配方食品中也检出了阪崎肠杆菌,检出率为1.67%,羊奶粉的检出率（5.51%）高于牛奶粉的检出率（1.08%）。结论 陕西省婴幼儿食品存在阪崎肠杆菌污染,婴幼儿辅助食品、0～6个月婴幼儿食品以及羊奶粉中阪崎肠杆菌污染更为严重,需引起监管部门重视,加强监督和管理。     

阪崎肠杆菌外膜蛋白基因的克隆与序列分析

目的:扩增并分析阪崎肠杆菌外膜蛋白基因。方法:根据肠杆菌外膜蛋白A基因的序列特点,设计引物,扩增阪崎肠杆菌外膜蛋白A(ompA)序列,并通过T载体克隆后测序。结果:序列分析表明其1044 bp的序列全长编码347个氨基酸,具有肠杆菌科细菌外膜蛋白序列的典型特征。同源性分析表明,该序列与其它肠杆菌属细菌的序列进行比较,其核酸序列同源性为86%到99%。结论:结果表明该序列为阪崎肠杆菌外膜蛋白基因。