粪菌移植对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用及可能机制

目的探讨粪菌移植对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用及可能机制。方法将45只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、干预组各15只。模型组及干预组制备UC小鼠模型。造模后第2天开始对干预组进行粪菌移植,其他两组给予等体积生理盐水灌肠,共7 d。采用疾病活动指数(DAI)对小鼠的一般情况进行评价。干预第8天处死小鼠,取结肠组织进行结肠黏膜大体形态损伤指数(CMDI)、组织学评分,并应用流式细胞术检测脾脏组织滤泡辅助性T细胞(Tfh)及滤泡调节性T细胞(Tfr)水平。结果对照组、干预组、模型组的DAI、CMDI、组织学评分依次升高(均P<0.05)。与对照组比较,模型组Tfh及Tfr水平、Tfh/Tfr比值均升高,干预组Tfh及Tfr水平升高,而Tfh/Tfr比值降低(均P<0.05);与模型组比较,干预组Tfr水平升高,而Tfh水平及Tfh/Tfr比值降低(均P<0.05)。结论粪菌移植可减轻UC小鼠肠道黏膜炎症,这可能与其降低促炎症因子Tfh的表达并促进保护因子Tfr的表达有关。     

粪菌移植治疗DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的免疫学机制研究

目的 分析粪菌移植(Fecal microbiota transplantation, FMT)对葡聚糖硫酸钠(DSS)所致溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及免疫学机制。方法 60只C57BL/6J小鼠,其中选取10只小鼠收集粪便(不参与后续实验),其余50只小鼠采用随机数字表法随机分为空白组(n=10)、模型组(n=20)、研究组(n=20)。空白组自分组首日起自由饮用灭菌蒸馏水,模型组和研究组自分组首日起自由饮用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,诱导形成溃疡性结肠炎小鼠模型。小鼠模型建立成功后,模型组予以生理盐水灌肠,研究组予以正常小鼠粪便混悬液生理盐水混合物灌肠,每3天灌肠1次,共2次。待第2次灌肠完成后的第2天处死所有小鼠,采集血清样本。ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-35(IL-35)、白介素-22(IL-22)、白介素-17(IL-17)与可溶性Fas等细胞因子水平;HE染色观察结肠组织病理形态表现;光冈氏肠内细菌群分析法定量检测肠道菌群值及双歧杆菌与肠杆菌的数量比值(B/E值)。结果 ELISA检测结果显示,与空白组比较...     

粪菌移植对不同溃疡性结肠炎小鼠的疗效及其中药性味研究

背景 溃疡性结肠炎被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。目前治疗技术均有相应的不足之处,粪菌移植（FMT）治疗溃疡性结肠炎的有效性已被证实,但疗效参差不齐。 目的 比较FMT治疗小鼠普通型溃疡性结肠炎模型（CUCM）与湿热型溃疡性结肠炎模型（DUCM）的效果及FMT（新金汁）的中药性味。 方法 于2019年12月9—28日,将35只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为7组,分别为正常对照组（Control组）、CUCM组、CUCM+FMT组、CUCM+5-氨基水杨酸（5-ASA）组、DUCM组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组,每组各5只小鼠。Control组不做任何干预处理;CUCM组和DUCM组根据造模需求分别制备模型;CUCM+FMT组和DUCM+FMT组于造模成功后,给予制备的粪菌液0.2 ml对小鼠进行灌肠;CUCM+5-ASA组和DUCM+5-ASA组于造模成功后,给予0.019 5 g/ml 5-ASA对小鼠进行灌肠。通过HE染色观察各组肠组织的变化,透射电镜观察组织的超微结构变化,流式细胞检测辅助性T细胞1（Th1）、Th2细胞含量,血常规检测血液中白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）和血红蛋白（HGB）,尼莫地平法评估干预前后疗效指数,16S rRNA高通量测序技术检测肠内容物中的菌群分布。 结果 各组小鼠均造模成功。肠组织HE染色显示：CUCM组与DUCM组肠黏膜表面出现不同程度的缺损或脱落坏死;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组肠黏膜基本完整;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者腺体较后者排列整齐并紧密。肠组织透射电镜超微结构显示：CUCM组与DUCM组上皮细胞表面微绒毛稀疏,杯状细胞减少;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组微绒毛较为致密,杯状细胞数目较多;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者微绒毛较后者紧密,杯状细胞也较后者多。各组小鼠Th1、Th2细胞含量、WBC、RBC、PLT、HGB比较,差异均有统计学意义（P<0.001）。CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组疗效指数高于CUCM+FMT组（P<0.05）。菌群分析显示CUCM组与DUCM组中丰度显著降低的属是Ruminococcus,显著升高的属是Akkermansia,经过FMT治疗后,CUCM+FMT组、DUCM+FMT组有逐步向Control组靠拢的趋势,表明肠道菌群正在改善。 结论 FMT可治疗溃疡性结肠炎模型小鼠,且针对DUCM疗效更佳,FMT（新金汁）的中药性味苦寒,推测其发挥功效的途径可能是通过调节肠道菌群进而改善Th1/Th2细胞平衡,达到治疗的目的。     

橙皮苷对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及其机制

目的 探讨胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）在溃疡性结肠炎（UC）大鼠血清中的水平及橙皮苷的干预作用.方法 应用三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇灌肠制备大鼠溃疡性结肠炎模型.将大鼠模型随机分为模型组、模型＋橙皮苷组,模型＋柳氮磺胺嘧啶组,另设正常对照组,共4组.观察大鼠一般状况及粪便性状;采用ELISA法检测溃疡性结肠炎大鼠血清中TSLP水平;放射免疫分析法测定肠黏膜中TNF-α的水平.结果 模型组大鼠血浆中TSLP、肠黏膜TNF-α的表达及DAI评分明显高于正常对照组和模型＋橙皮苷组;模型＋橙皮苷组与对照组比较,差异无显著性.结论 橙皮苷对溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制可能是通过降低TSLP的表达、抑制炎症型Th2类细胞的产生而发挥其干预作用.     

粪菌移植治疗轻中度溃疡性结肠炎的初步临床研究

目的:探讨粪菌移植(FMT)治疗轻中度溃疡性结肠炎的临床疗效.方法:回顾性分析2019年8月～2020年8月在弋矶山医院采用单次FMT治疗轻中度溃疡性结肠炎的患者8例,对比治疗前与治疗8周后的相关临床指标.结果:患者FMT治疗后CRP、ESR、排便次数、改良Mayo评分均较治疗前改善,差异有统计学意义(P<0.05)....     

溃疡性结肠炎外周血T淋巴细胞亚群的研究

目的：研究溃疡性结肠炎的可能发病机制。方法：对11例病例的外周血T淋巴细胞亚群作了前瞻性对照研究,使用的是敏感性高,准确性好的单克隆抗体-ABC法。结果：溃疡性结肠炎病例组的外周血CD3、CD4、CD8细胞亚群的百分数和CD4／CD8的比值均显著降低。结论：溃疡性结肠炎患者有免疫调节细胞的失衡,可能与其发病机制有关。     

彝药益元化腐汤浸膏对溃疡性结肠炎模型T细胞亚群干预机制研究*

目的研究彝药益元化腐汤调控T细胞亚群介导治疗溃疡性结肠炎的效应机制，为益元化腐汤临床应用治疗溃疡性结肠炎提供科学基础。方法 32只C57BL/6健康雌性小鼠随机分为正常组、模型组、益元化腐汤中剂量（4.05 g·kg-1）和高剂量组（8.1 g·kg-1），每组8只。除正常组，其余以自由饮水的方式给予3%葡聚糖硫酸钠（sodium dextran sulfate，DSS）诱导建立溃疡性结肠炎小鼠模型，每2 d更换1次饮用水，自饮用DSS第1天起，各组按相应剂量灌胃给药，每日1次，连续8 d；采用疾病活动指数（diseases activity index，DAI）和苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）分别评价溃疡性结肠炎症状及结肠组织形态学变化；荧光定量PCR（qPCR）检测淋巴细胞T细胞亚群相关因子转录的相对表达水平；流式细胞术（flow cytometry）检测T细胞亚群中辅助性T细胞1（T-helper 1 cell, Th1）、辅助性T细胞17（T-helper 17 cell，Th17）和调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）的表达水平。结果 与正常组比较，病理模型组小鼠体质量和结肠质量显著下降、结肠长度显著缩短（P<0.05或P<0.01）；与病理模型组比较，益元化腐汤组显著增加小鼠体质量、结肠质量及其长度（P<0.05或P<0.01），改善结肠病理损伤程度；流式细胞术检测结果显示，益元化腐汤药物干预显著下调γδTCR表达（P<0.05），且抑制Th1细胞（CD4+ IFN-γ+ T细胞）、Th17细胞（CD4+ IL-17+ T细胞）绝对数量和比例（P<0.01），然而对Treg细胞（CD4+ Foxp3+ 调节性T细胞）表达无明显影响。qPCR检测结果显示，益元化腐汤显著下调UC小鼠Th17细胞因子IL-17A和转录因子RORγτ mRNA表达（P<0.01）。结论 彝药益元化腐汤可能通过抑制Th17细胞诱导的炎症反应介导治疗溃疡性结肠炎。     

自体干细胞移植治疗溃疡性结肠炎

溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）是一种慢性的、非特异性的肠道炎症性疾病。至今其病因及发病机制尚不明确，治疗缺乏特异性，病程迁延。干细胞移植作为一种新型的治疗方法引起大家的关注，基础研究证实移植的干细胞可定居于肠道上皮，其定植机制及带来的生物安全伦理问题有待于进一步深入研究。本文就干细胞移植治疗溃疡性结肠炎的研究现状和存在问题进行概述。     

肠菌移植对溃疡性结肠炎的治疗效果研究

【目的】 研究肠菌移植对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果及相关指标的变化情况。 【方法】 以3%的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液喂养BALB/c小鼠7 d进行UC造模,肛门出现明显的血迹后,以正常小鼠肠菌清液进行灌肠,7 d后停止;造模期间,每天定时对小鼠进行称重,做出体重变化曲线;常规PCR与实时定量PCR技术检测肠道菌群变化,做出柱状图;隐血实验:每天定时取小鼠粪便,以四甲基联苯胺法测隐血,做出折线图;病理组织诊断:取小鼠结肠组织做病理组织切片,H-E染色,观察病理组织变化并分析。 【结果】 造模期间观察体重发现,UC可致体重急剧下降,而行肠菌移植7 d,体重明显回升至正常水平;实时荧光定量PCR表明,造模期间益生菌(如:乳酸杆菌、双歧杆菌)减少,大肠杆菌增多,而行肠菌移植7 d,益生菌数量回升,大肠杆菌下落,说明肠菌移植能够调整肠道菌群分布平衡;造模期间可看到肛周明显血迹,即出现肉眼可见血便,而行肠菌移植7 d,肉眼血便消失,隐血试验结果也表明结肠不再出血;从病理组织切片来看,在造模期间,结肠的黏膜与黏膜下层受损,出现淋巴细胞、单核-巨噬细胞大量浸润,形成隐窝脓肿,隐窝脓肿融合破溃形成浅小溃疡,经过治疗后,再观察结肠组织切片,可发现黏膜已恢复,已达治愈标准。 【结论】 肠菌移植对于溃疡性结肠炎的治疗是有效的。     

美沙拉嗪口服联合灌肠治疗溃疡性结肠炎剂量选择

目的在控制美沙拉嗪总给药量不变的情况下通过改变口服和灌肠联合用药的剂量来选择治疗溃疡性结肠炎的最佳给药剂量。方法120例活动期溃疡性结肠炎患者随机分为A、B、C3组,各40例。每组分别给予不同剂量的口服美沙拉嗪缓释片(艾迪莎)和美沙拉嗪灌肠剂(莎尔福灌肠剂)。比较治疗8周后3组患者的疗效和不良反应发生率。结果治疗8周后,3组患者的疗效间差别有统计学意义(P<0.01);且3组患者疗效间两两比较,差别均有统计学意义(P<0.01)。3组患者不良反应发生率间差别无统计学意义(P>0.05)。结论小剂量多次联合给药可以增加药物的治疗效果。在总用药量不变的情况下,最佳的治疗剂量为口服美沙拉嗪缓释片1g,4次/d,灌肠1g/100ml,2次/d,联合治疗不少于8周。     

梅毒血清固定患者外周血调节性T细胞／T h17细胞平衡的变化

目的观察外周血调节性T(Treg)细胞/Th17细胞平衡在梅毒血清固定患者体内的变化。方法将2010年1月至2012年9月东南大学附属中大医院皮肤性病科诊治的梅毒血清固定患者28例纳入观察组,同期选取健康人30例纳入对照组,利用流式细胞仪分别检测外周血Treg细胞、Th17细胞、相关特异性转录因子Foxp3及ROR-γ表达情况并进行比较分析。结果观察组外周血Treg细胞比例[(34.02±12.31)%]高于对照组[(21.86±8.24)%,P<0.05],观察组外周血Th17细胞比例[(3.08±2.17)%]低于对照组[(9.13±1.96)%,P<0.01];观察组CD4+T细胞转录因子Foxp3的表达量[(2 946.35±995.63)]高于对照组(2 468.74±869.63,P<0.05),ROR-γ表达量(1 438.29±659.31)低于对照组(1 831.25±426.37,P<0.05)。结论梅毒血清固定患者外周血存在Treg细胞/Th17细胞失衡,这种机体细胞免疫抑制可能是导致梅毒患者产生血清固定的原因。     

双歧杆菌三联活菌胶囊联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎疗效评价

【目的】从临床表现、肠镜及肠道菌群变化多方面对双歧杆菌三联活菌胶囊联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎疗效进行评价。【方法】选择本院92例溃疡性结肠炎采用数字表随机法分为两组,每组46例。对照组给予美沙拉嗪治疗,观察组在对照组基础上加用双歧杆菌三联活菌胶囊治疗,比较两组治疗前后临床症状总积分、肠道菌群、肠镜分级变化。【结果】观察组总有效率89．13％;对照组总有效率58．7％,观察组疗效明显优于对照组（P ＜0．05）。观察组治疗后症状评分、肠镜评分降低幅度大于对照组（P ＜0．05）。治疗后观察组乳酸杆菌、双歧杆菌数量明显增加,大肠杆菌、肠球菌数量明显下降（ P ＜0．05）。【结论】双歧杆菌三联活菌胶囊联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎有助于患者肠道菌群的平衡,从而达到抑制炎症的目的,显著提高疗效。     

Correlation of Thl7 cells and CD4＋CD25＋ regulatory T cells with clinical parameters in patients with systemic sclerosis

Background Systemic sclerosis （SSc） is an autoimmune disease that has three major components： inflammation, fibrosis, and vasculopathy. T-helper 17 cell （Th17） and regulatory T cell （Treg） are considered to be critical for autoimmune disease pathogenesis. The role of Th17 and Treg in SSc is still unclear. The aim of this study was to detect the presence of Th17s and CD4＊CD25~ Tregs in peripheral blood samples from SSc patients and to investigate the possible roles of these two T cell subsets in SSc pathogenesis. Methods Th17s （CD4 and IL-17 positive） and CD4＊CD25~ Tregs （CD4, CD25 and Foxp3 positive） in the peripheral blood mononuclear cells of 53 SSc patients and 27 healthy controls were counted by flow cytometry. The differences between SSc and control patients were analyzed. Clinical parameters, including disease duration, duration of the second symptoms, Modified Rodnan Skin Score （MRSS）, anti-topoisomerase I antibody, anti-U1 ribonucleoprotein （RNP） antibody, systemic involvements, pulmonary function test （PFT） and high resolution computed tomography （HRCT） score were prospectively collected following EUSTAR （EULAR scleroderma trial and research group） protocols. The correlations between the experimental and clinical data were investigated. Results The ratio of Th17 in SSc patients was significantly elevated compared to healthy controls （8.74% vs. 4.41%, P 〈0.001）. The amount of Th17 was positively correlated with disease duration （R=-0.531, P=-0.013） and duration of the second symptoms （R=-0.505, P=0.023）. The ratio of CD4＊CD25＊ Treg in SSc patients also significantly differed from the healthy controls （3.04% vs. 2.24%, P=0.018）. Elevated Tregs were more frequently observed in patients with a high interstitial lung disease （ILD） score on computed tomography （24/36） compared with patients with normal ILD scores （4/12, ,P=-0.043）. Elevated Tregs were also more often observed in patients with low carbon monoxide diffusing capacity     

焦虑与抑郁心理对溃疡性结肠炎患者神经内分泌免疫的影响研究

背景　溃疡性结肠炎（UC）是消化内科常见病,目前,该病病因和发病机制尚不十分明确,近年来,多项研究显示,精神心理因素可能也参与了UC的发病,但精神心理因素到底通过何种机制参与UC的发病,是值得探讨的问题。目的　探讨焦虑、抑郁心理对UC患者神经内分泌免疫的影响。方法　选取2013年1月-2018年11月在蚌埠医学院附属连云港市第二人民医院和蚌埠医学院第一附属医院消化内科就诊的门诊及住院UC患者198例为病例组,根据病情分期将其分为缓解期（A组）57例和活动期（B组）141例。B组根据病情严重程度分为轻度活动期（B1亚组）83例和中-重度活动期（B2亚组）58例。121例轻-中度活动期患者中合并焦虑和/或抑郁者62例,采用随机数字表法将其分为对照组31例和干预组31例,对照组予“美沙拉嗪肠溶片”治疗,干预组予“心理干预+氟哌噻吨美利曲辛片+美沙拉嗪肠溶片”治疗。另选取同期在两院体检健康者32例作为健康体检组。于纳入研究和治疗4周后采用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）和汉密尔顿抑郁量表（HAMD）测定研究对象焦虑、抑郁情况,并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定5羟色胺（5-HT）、白介素（IL）-6、IL-8、IL-2水平。结果　健康体检组、A组、B1亚组HAMA、HAMD评分及5-HT、IL-6、IL-8水平均分别低于病例组、B组、B2亚组,IL-2水平均分别高于病例组、B组、B2亚组（P<0.01）。Pearson相关分析结果显示,病例组HAMA评分、HAMD评分均与5-HT、IL-6、IL-8呈正相关,与IL-2呈负相关（P<0.001）。治疗4周后,干预组HAMA、HAMD评分及5-HT、IL-6、IL-8水平均低于对照组,IL-2水平高于对照组（P<0.05）;对照组和干预组治疗后HAMA、HAMD评分及5-HT、IL-6、IL-8水平均低于治疗前,IL-2水平均高于治疗前（P<0.05）。结论　焦虑、抑郁心理与UC发病密切相关,其可能通过影响神经内分泌免疫相关指标而参与UC的发病。     

溃疡性结肠炎疾病活动病理组织学评价指标的应用现状

目前,显微镜下肠黏膜病理组织学缓解作为评估溃疡性结肠炎（UC）治疗疗效及患者预后的指标已被广泛认可。现有多种评分系统可用于评估UC患者肠黏膜病理组织学状况,但哪一种评分系统能更准确地反映UC患者的疾病状态,能更准确地判断UC患者的预后,评估结论的一致性更好,尚存在争议。针对这一问题,本文就目前常用的评估UC疾病活动的病理组织学评价指标进行综述,旨在为临床医生准确判断UC患者的疾病状态及疾病转归提供帮助。     

中药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的相关注意事项

大量临床实践表明,中药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎效果显著。目前关于中药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的临床研究主要集中在中药配伍及机制、联合用药等方面。要想获得良好的临床疗效,除了良好的配伍处方外,还需要合适的治疗措施,才能让药物更好地在患者体内发挥作用。本文结合相关文献,重点讨论中药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的方式及相关注意事项。