电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响

目的 观察电针对兔膝骨关节炎家兔模型软骨细胞凋亡的影响.方法 40只新西兰大白兔随机分成空白对照组、模型组、电针组和西药组.除空白对照组外,各组动物采用左后肢膝关节伸直位石膏固定7周建立膝骨关节炎动物模型.造模成功后,电针组取左后肢梁丘、血海、阳陵泉、足三里和内外膝眼6个穴位,用毫针斜刺或直剌得气后,进行电针操作,连续治疗3周;西药组灌服氨基葡萄糖胶囊,治疗3周.处理前后,对各组家兔膝关节滑膜和软骨标本,进行HE染色、免疫组化法染色观察膝关节滑膜和软骨的病理变化;采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡并计算凋亡指数（AI）.结果 经治疗后,电针组和西药组关节软骨细胞凋亡、凋亡指数与模型组比较明显降低（P＜0.05）.结论 电针能改善膝骨关节炎家兔模型软骨细胞的过度凋亡,降低膝骨关节炎软骨细胞的凋亡率.     

电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响,探讨电针治疗膝骨关节炎的作用机制.方法:将30只健康新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组和电针治疗组,每组10只.采用Hulth法对模型对照组及电针治疗组实验兔左膝关节进行造模,造模后第5周开始对电针治疗组实验兔进行电针治疗,正常对照组、模型对照组同期正常饲养,不作任何治疗.治疗4周后同时处死3组实验兔,取左膝关节股骨端制成切片,观察各组实验兔软骨组织形态及软骨细胞凋亡情况.结果:①软骨组织形态.正常对照组软骨表层光滑、平整,4层结构清晰,软骨细胞分布均匀、无簇聚,潮线完整;模型对照组关节软骨厚度减小,表面毛糙,可见明显纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂;电针治疗组关节软骨厚度减小,表面不光滑,少见纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂.②软骨细胞凋亡情况.3组实验兔软骨细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(F=126.753,P=0.000);进一步两两比较,模型对照组软骨细胞凋亡率大于正常对照组和电针治疗组(LSD -t=3.769,P=0.000;LSD-t=7.000,P =0.000),电针治疗组软骨细胞凋亡率大于正常对照组(LSD -t=10.769,P =0.000).结论:电针治疗可以通过抑制软骨细胞凋亡,减轻膝骨关节炎软骨的损伤,这可能是电针治疗膝骨关节炎的机制之一.     

蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响

目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态及软骨细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1g·kg-1· d-1,蚁龙通痹汤生药0.6 g·kg-1.d-1,溶于10 mL生理盐水中灌胃,每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量,并用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,分析软骨中凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax表达情况.结果:与正常组比较,模型组动物关节液IL-1β和TNF-α含量、软骨细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax、关节外在表现和软骨病理组织学均出现明显变化;与模型组比较,蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组各项指标均有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05).蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,显著降低软骨细胞凋亡率,提高Bcl-2/Bax而达到对软骨组织保护的作用.     

基于TRPV4通路探讨针刀对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔软骨香草素受体亚家族4(TRPV4)通路调控作用及软骨细胞凋亡的影响。方法选取6月龄健康雄性新西兰兔24只,采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组,每组各8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定6周制备KOA兔模型。针刀组选取经筋病灶点"鹤顶次""髌外上""髌内上""髌外下""髌内下""阴陵上"行针刀松解治疗,每周1次,共治疗4次;空白组和模型组不予处理。采用苏木素-伊红(HE)染色及Mankin’s评分评价软骨形态学改变;采用原位缺口标记法(Tunel)检测软骨细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)检测软骨TRPV4、半胱氨酸天冬酰胺酶-3(Caspase-3)分子表达情况。结果与空白组比较,模型组软骨表面不光滑,部分缺损,细胞分布不均匀,潮线紊乱,Mankin’s评分明显增高(P<0.05);细胞凋亡率及TRPV4、Caspase-3 m RNA和蛋白表达均明显提高(P<0.05)。与模型组比较,针刀组软骨表面较光滑,细胞排列较整齐,软骨细胞数量增多,潮线较完整,Mank...     

川芎嗪对骨关节炎兔软骨细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究

目的探讨川芎嗪对骨关节炎兔软骨细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法选取12只兔建立骨关节炎动物模型,体外分离培养软骨细胞,并分为模型组、川芎嗪低剂量组、川芎嗪中剂量组、川芎嗪高剂量组,另选取3只正常兔体外分离培养软骨细胞作为正常对照组。模型组和正常对照组给予10%DMEM培养液进行培养,而川芎嗪低、中、高剂量组分别给予含10μg/m L、20μg/m L、30μg/m L川芎嗪注射液的培养液进行培养。采用流式细胞仪测定兔软骨细胞周期及增殖指数,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况,采用MTT法检测软骨细胞活性,采用Western-blot法检测软骨细胞中bax、bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况。结果模型组G0/G1期细胞所占比例及PI均明显低于正常对照组(P均<0.05),S期及G2/M期细胞所占比例均明显高于正常对照组(P均<0.05);川芎嗪中、高剂量组G0/G1期细胞所占比例、PI均显著高于模型组和川芎嗪低剂量组(P均<0.05),而S期及G2/M期细胞所占比例均显著低于模型组和川芎嗪低剂量组(P均<0.05)。川芎嗪中、高剂量组软骨细胞凋亡率均明显低于模型组(P均<0.05),川芎嗪高剂量组显著低于低剂量组(P<0.05),而川芎嗪高剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义;川芎嗪中、高剂量组软骨细胞活性均显著高于模型组(P均<0.05),川芎嗪高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05),而川芎嗪高剂量组仍然低于正常对照组(P<0.05)。模型组软骨细胞中bax及Caspase-3表达量均明显高于正常对照组(P均<0.05),bcl-2表达量显著低于正常对照组(P<0.05);而川芎嗪各剂量组软骨细胞中bax及Caspase-3表达量均明显低于模型组(P均<0.05),bcl-2表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且川芎嗪高剂量组各指标改善情况均显著优于低剂量组(P均<0.05)。结论川芎嗪能够促进软骨细胞的增殖,同时还能通过上调抗凋亡因子bcl-2表达,下调软骨细胞促凋亡因子bax以及Caspase-3表达而抑制软骨细胞的凋亡。     

益肾为主对兔膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡的影响

目的:观察益肾为主治法对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取新西兰白兔20只,随机分为三组,模型组、中药组用石膏外固定兔右后肢膝关节造模,造模后同空白组分别灌服生理盐水、益肾方和生理盐水,6周后取兔膝关节软骨,肉眼、光镜观察形态学变化,用原位末端标记法观察软骨细胞凋亡。结果:中药组软骨细胞凋亡指数明显低于模型组(P<0.01)。结论:益肾为主能减少兔膝实验性膝骨关节炎软骨细胞的凋亡,具有关节软骨保护作用。     

针刀对膝骨关节炎兔软骨细胞氧化应激的影响

目的 通过观察针刀干预对膝骨关节炎（KOA）兔软骨细胞氧化应激的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法 将28只健康清洁级雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,每组7只。除空白组外,余组以改良后Videman左后肢伸直位固定法造模并制动6周。治疗组干预4周后离体取材,用试剂盒分别测定各组膝软骨细胞一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px)活力,用免疫组化法测定各组膝软骨细胞内γ-H2AX表达。结果 模型组较空白组软骨细胞NOS及MDA活力升高（P <0.01）,SOD及GSH-Px活力下降（P <0.01）;针刀组NOS及MDA活力较模型组下降（P <0.05）,针刀组及电针组SOD活力较模型组均升高（P <0.05）;模型组、电针组、针刀组之间GSH-Px活力无明显差异（P> 0.05）。模型组软骨细胞内γ-H2AX表达较空白组强（P <0.01）,针刀组、电针组表达较模型组弱（P <0.05）。结论 针刀干预可通过降低软骨细胞NOS及MDA活力、升高SOD活力、减缓软...     

兔膝OA腔内注射牛膝多糖对软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨关节腔内注射牛膝多糖液对骨性关节炎软骨细胞凋亡率的影响。方法:造模成功后,实验兔左侧膝关节腔内注射牛膝多糖液0.4ml,右侧膝关节内注入玻璃酸钠0.4ml,每周1次,共4次。于0、15、30d各处死12只实验兔,观察软骨细胞凋亡及凋亡率。结果:治疗前各组细胞凋亡率比较无明显差异(P>0.05);治疗第15天各组与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05),两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗第30天各组与治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05),两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:牛膝多糖能够更好的促进骨性关节炎修复,具有很好的临床价值。     

针刀疗法对膝骨关节炎兔关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察针刀疗法治疗膝骨关节炎兔对其细胞凋亡的影响,探讨可能的作用机制。方法:正常新西兰兔随机分为:正常组、模型组、针刀组、中药组。左后膝伸直位石膏管型固定6周建立膝骨关节炎兔模型,原位末端标记(TUNEL)检测关节软骨细胞凋亡。结果:细胞凋亡指数正常组为(4.9±1.7),模型组为(25·2±4.3),针刀组为(11.6±3.1),中药组为(19.1±3.4)。模型组细胞凋亡指数显著升高,与正常组比较,经统计学处理,差异具有显著性意义(P<0.01)。针刀治疗和中药治疗均能降低细胞凋亡指数,两组比较,差异具有显著性意义(P<0.01)。结论:针刀疗法能抑制膝骨关节炎兔关节软骨细胞的凋亡,促进关节软骨形态恢复,这可能是针刀治疗膝骨关节炎的作用机制之一。     

活血通络药物对膝骨关节炎小鼠凋亡软骨细胞体外干预的影响

目的 体外培养膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)小鼠凋亡软骨细胞模型,对凋亡软骨细胞模型进行形态学观察和鉴定,传代培养第一代凋亡软骨细胞模型.培养成功后,分别以不同浓度的骨痹合剂以及氨糖美辛、生理盐水干预后,进行形态学观察和绘制细胞生长曲线,确定凋亡软骨细胞变化最明显的时间点以及促进凋亡软骨细...     

动态温热疏密波对软骨细胞凋亡调控基因表达的影响

目的：探讨动态温热疏密波对骨性关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响。方法：大白兔60只,随机分为2组．即：正常组（10只）和手术组（50只）。手术组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,术后随机分为5组,模型组造模后常规饲养,对照组微波治疗仪,实验1组电（疏密波）治疗,实验2组热（热软膜）治疗,实验3组电热（治疗型护膝动态温热疏密波）治疗,分别对应治疗16周后,观察关节软骨的组织形态学,检测软骨细胞的凋亡率及p21、p53、Bcl-2 mRNA的表达。结果：16周时,骨性关节炎模型成功建立,经治疗后各组关节软骨组织形态学病理变化程度明显轻于模型组（P〈0．01,P〈0．05）;各组软骨细胞的凋亡率、p53 mRNA表达,模型组、对照组、实验1组、实验2组、实验3组明显高于正常组（P〈0．01）,对照组、实验2组、实验3组明显低于模型组、实验1组（P〈0．01,P〈0．05）,实验3组明显低于对照组、实验2组（P〈0．01,P〈0．05）;软骨细胞p21、Bcl-2 mRNA表达,模型组、对照组、实验1组、实验2组、实验3组明显低于正常组（P〈0．01）,对照组、实验2组、实验3组明显高于模型组、实验1组（P〈0．01,P〈0．05）,实验3组明显高于对照组、实验2组（P〈0．01,P〈0．05）。结论：动态温热疏密波能有效下调软骨细胞p53 mRNA表达,上调p21、Bcl-2 mRNA表达,从而抑制软骨细胞的凋亡,延缓关节软骨退变。     

膝关节骨性关节炎病变与细胞凋亡及相关基因表达关系

软骨细胞凋亡在骨性关节炎的发病中具有重要作用,其凋亡的途径有NO途径和Fas途径;主要受Bcl-2基因家族、Bax、P53、和ICE基因家族调控;软骨细胞外基质的降解,可诱导软骨细胞凋亡。     

化痰除湿祛瘀剂膝痹康对膝骨关节炎患者软骨细胞凋亡调控基因表达的影响

目的研究化痰除湿祛瘀剂膝痹康对人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞调控基因表达的影响。方法取全膝关节置换手术膝骨关节炎患者的软骨组织,采用酶消化培养法培养人软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色鉴定细胞来源。将软骨细胞分为对照组、膝痹康0.016、0.08、0.4、2.0、10.0 mg/m L组,培养24 h后,应用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测各组细胞的增殖情况。根据增殖结果将软骨细胞分为对照组、膝痹康低、中、高剂量组(0.05、0.1、2.0 mg/m L),用TUNEL法检测各组细胞凋亡情况,以实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组细胞Bcl-2、Bcl-2同源水溶性相关蛋白X(Bax)及p53 mRNA表达。结果本研究成功建立了人骨关节炎软骨细胞有限细胞系,细胞生长状态良好;甲苯胺蓝染色证明所培养的细胞为来自中胚层的软骨细胞。膝痹康在0.016~10.0 mg/m L范围内对OA软骨细胞波长=450 nm处24 h的光密度(OD)有影响。与对照组相比,膝痹康低剂量组细胞凋亡率无明显变化(P0.05),膝痹康中、高剂量组下降(P0.05,P0.01)。膝痹康低、中、高剂量组间比较显示,两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,膝痹康低剂量组Bcl-2、Bax及p53 mRNA相对表达量无明显变化(P0.05),膝痹康中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达量明显上调(P0.05),Bax及p53 mRNA表达量明显下调(P0.05,P0.01);与膝痹康低剂量组相比,膝痹康中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达量明显上调(P0.05),Bax及p53 mRNA表达量明显下调(P0.05,P0.01);与膝痹康中剂量组相比,膝痹康高剂量组Bax mRNA表达量明显下调(P0.05)。结论化痰除湿祛瘀剂膝痹康调控细胞凋亡基因的表达,抑制软骨细胞过度凋亡,这可能是抑制软骨破坏的重要机制之一。     

虾青素对兔骨性关节炎软骨细胞增殖与凋亡影响的研究

目的通过观察虾青素对新西兰兔骨性关节炎模型的软骨细胞增殖与凋亡基因表达的影响,初步探索其干预软骨细胞代谢的作用机制。方法取5月龄新西兰兔骨性关节炎模型的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MTT法、TUNEL法、免疫组化法对细胞增殖、凋亡及细胞周期调控基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53 mRNA的表达进行检测。结果不同剂量组虾青素可显著促进软骨细胞体外增殖,并可通过减弱软骨细胞Bax、Caspase-3、p53 mRNA的表达,增强Bcl-2 mRNA的表达来减缓软骨细胞凋亡进程。结论虾青素可有效调控兔骨性关节炎软骨细胞代谢,增强细胞活性,延缓凋亡,具有研发成为骨性关节炎治疗药物的潜能。     

“双固一通”温针灸对实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:研究"双固一通"温针灸在预防兔膝关节骨性关节炎过程中对兔膝关节软骨细胞凋亡的影响。方法:24只日本大耳白兔随机分为"双固一通"温针灸组、模型组和正常组,每组8只。采用结扎股静脉法建立兔膝骨性关节炎模型,"双固一通"温针灸组在造模开始时采用"双固一通"温针灸法,对关元(CV 4)、足三里(ST 36)、内膝眼(EX-LE4)、犊鼻(ST 35)和阳陵泉(GB 34)等穴进行预防性治疗;正常组不做任何处理,正常喂养。在造模8周后,各组分别通过透射电镜观察兔膝关节软骨细胞的超微结构,TUNEL染色光镜下观察软骨细胞凋亡情况。结果:"双固一通"温针灸组兔膝关节软骨细胞超微结构接近正常组,模型组软骨细胞轮廓不清楚,胞膜坏死崩解,胞浆内细胞器消失,细胞裂解为致密颗粒样物质,细胞固缩、变形,甚至出现核分裂,染色质浓聚;"双固一通"温针灸组和模型组软骨细胞凋亡指数高于正常组(P<0.01),"双固一通"温针灸组软骨细胞凋亡指数低于模型组(P<0.01)。结论:"双固一通"温针灸可抑制实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞过度凋亡,从而对兔膝骨性关节炎起防治作用。     

快针针刺疗法治疗膝骨关节炎

目的：观察快针刺法治疗膝骨关节炎的临床疗效.方法：膝骨关节炎患者50例,随机分为2组,每组25例.观察组采用快针刺法治疗,对照组采用电针加特定电磁波谱灯照射治疗;每日治疗1次,5 d为1个疗程,共治疗2个疗程.分别在治疗前、治疗1个疗程后、治疗2个疗程后采用疼痛视觉模拟法评价2组患者患膝的疼痛程度,并进行比较.结果：治疗前后不同时间点间疼痛视觉模拟评分比较,差异有统计学意义（F=100.946,P=0.000）,存在时间效应;2组患者间疼痛视觉模拟评分比较,观察组VAS评分低于对照组,差异有统计学意义（F=-3.850,P=0.000）,存在分组效应;治疗前2组患者间疼痛视觉模拟评分比较,差异无统计学意义[（6.207±0.711）分,（6.306±1.041）分;t=-0.392,P=0.697];治疗1个疗程后和治疗2个疗程后,观察组患者疼痛视觉模拟评分均低于对照组,差异有统计学意义[（3.126±0.809）分,（5.612±0.850）分;t=-10.590,P=0.000）;（2.804±0.919）分,（3.492±0.963）分;t=-2.584,P=0.013];时间因素与分组因素存在交互效应（F=20.426,P=0.000）.结论：快针刺法治疗膝骨关节炎可有效缓解患膝疼痛,疗效优于电针加特定电磁波谱灯照射治疗.     

灸法治疗膝骨关节炎的研究进展

膝骨关节炎(KOA)是以退行性病理改变为基础,以关节软骨变性和丢失及关节边缘和软骨下骨骨质再生为特征的慢性病、常见病、多发病,男女均可发病。近年来,中医药治疗KOA的研究进入白热化,并取得较大进展,主要的治疗方法有中药内服、中药外用和针灸推拿3大类为主。其中灸法具有温通经络的作用,更成为现如今的研究热点之一。灸法有很多种,对于KOA的治疗研究较多的方法有化脓灸、悬灸、热敏灸、隔物灸、温针灸、灸法结合其他疗法等。对近年来灸法治疗KOA的现状进行简要的综述,并提出存在的问题及未来发展的方向。     

中西医结合治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效观察

目的:探讨中西医结合治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:选取收治的82例膝关节骨性关节炎患者,随机将其分为观察组和对照组,各41例,给予观察组患者中西医结合治疗,给予对照组患者单纯西医治疗,对两组患者的治疗总有效率进行对比。结果:观察组患者的治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论:给予膝关节骨性关节炎患者中西医结合治疗可有效的提高治疗效果,临床效果显著,值得推广和应用。