替普瑞酮对大鼠胃黏膜COX-1、COX-2及PGE2水平表达的影响

目的 探讨替普瑞酮对胃黏膜的保护作用及其机制.方法 将大鼠随机分为对照组和替普瑞酮组.对照组给予0.9%NaCl溶液1.5ml灌胃,替普瑞酮组给予替普瑞酮200mg/kg灌胃,3次/d,连续3d.放射免疫法测定两组胃黏膜前列腺素E2(PGE2)的水平;免疫组织化学方法检测胃黏膜细胞中环氧合酶(COX)-1和COX-2蛋白表达水平并以平均吸光度值表示其表达强度;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃黏膜COX-1和COX-2基因表达变化.结果 替普瑞酮组和对照组胃黏膜PGE2含量分别为(654.15±75.88)pg/ul、(78.93±25.58)pg/ul,两组比较差异具有统计学意义(t=82.83,P<0.01);替普瑞酮组和对照组胃黏膜COX-1蛋白表达水平(吸光度值)分别为0.355±0.042、0.211±0.034,两组比较差异具有统计学意义(t=11.56,P<0.01);替普瑞酮组和对照组胃黏膜COX-1 mRNA表达水平分别为2.14±0.081、0.55±0.056,两组比较差异具有统计学意义(t=9.25,P<005).替普瑞酮组和对照组大鼠的胃黏膜细胞内均无COX-2蛋白及其COX-2mRNA表达.结论 替普瑞酮对胃黏膜具有保护作用,可能与其促进胃黏膜PGE2合成,增加胃黏膜COX-1基因和蛋白表达有关.     

氟西汀对慢性应激大鼠血清皮质醇、肿瘤坏死因子-α、胃黏膜细胞间黏附分子-1表达的影响

目的 研究氟西汀对慢性应激大鼠血清皮质醇、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、胃黏膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.方法 将青年雄性Wistar大鼠24只随机分为对照组、应激组、氟西汀组各8只.应激组和氟西汀组大鼠每笼1只喂养,实验第1-21天,接受各种不同的应激.氟西汀组大鼠每天给予氟西汀水溶液灌胃.对照组大鼠群养不给任何刺激.实验第22天杀死所有大鼠,检测血清皮质醇、TNF-α浓度;用免疫组化法检测胃黏膜蛋白ICAM-1表达,进行图像分析,测定光密度平均值.结果 应激组大鼠与对照组比较,血清皮质醇含量[(77.12±9.76)μg/ml,(44.96±6.25)μg/ml,t=7.85,P<0.01]、TNF-α含量[(69.66±6.68)pg/ml,(39.21±3.57)pg/ml,t=11.37,P<0.01]、胃黏膜ICAM-1表达的光密度平均值[(53.87±6.84),(30.26±3.68),t=8.59,P<0.01]有明显增高;与应激组比较,氟西汀组大鼠血清皮质醇含量[(58.82±6.56)μg/ml,t=4.40,P<0.01]、TNF-α含量[(50.18±3.23)pg/ml,t=7.43.P<0.01]、胃黏膜ICAM-1表达的光密度平均值(36.61±4.39,t=6.00,P<0.01)明显下降.结论 慢性应激可引起大鼠血清皮质醇、TNF-α含量增高,胃黏膜ICAM-1过表达,而氟西汀可以部分的逆转这些改变.     

三叶青黄酮对荷Lewis肺癌小鼠脾脏单个核细胞PGE2、COX-2表达的影响

目的研究三叶青黄酮对荷Lewis肺癌小鼠脾脏单个核细胞前列腺素E2(PGE2)、环氧化酶-2(COX-2)表达的影响。方法皮下接种法建立Lewis肺癌小鼠动物模型,接种14天后取脾脏,分离单个核细胞培养,以转化生长因子β1(TGF-β1)刺激为模型组,塞来昔布(SC58635)为阳性对照,设三叶青黄酮低、中、高浓度组,无TGF-β1及药物为空白对照组。ELISA法测定单个核细胞分泌PGE2、COX-2浓度。结果 TGF-β1刺激24h后,与空白对照组PGE2(99.31±3.82)pg/m L、COX-2(290.49±5.37)pg/m L比较,其余五组PGE2、COX-2均明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。模型组脾脏单个核细胞体外分泌PGE2[(138.18±4.00)pg/m L]、COX-2[(331.58±5.78)pg/m L]含量最高。与模型组比较,给药组PGE2、COX-2含量均明显下降,差异有统计学意义(P0.01)。PGE2含量依次为塞来昔布组(110.13±2.38)pg/m L三叶青黄酮高剂量组(118.18±1.96)pg/m L中剂量组(121.62±4.44)pg/m L低剂量组(128.90±4.24)pg/m L。COX-2含量依次为塞来昔布组(309.51±2.85)pg/m L三叶青黄酮高剂量组(319.64±2.29)pg/m L中剂量组(323.92±2.61)pg/m L低剂量组(327.07±4.53)pg/m L。给药组组间差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论三叶青黄酮在体外可能通过影响PGE2、COX-2表达水平,改善肿瘤微环境,起到抗肿瘤作用,其作用与剂量呈正比。     

白及对阿司匹林致大鼠胃溃疡的治疗作用研究

[目的]研究白及对阿司匹林诱导的胃溃疡的治疗作用。[方法]将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、白及高、中、低剂量组和阳性对照组。除正常组外,余各组大鼠均以阿司匹林溶液灌胃建立胃溃疡模型。8周后,阳性对照组以奥美拉唑灌胃,白及高、中、低剂量组以白及混悬液灌胃治疗。4周后评价各组大鼠胃溃疡指数,HE染色观察胃组织病理变化,ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及胃黏膜前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、内皮素(endothelin,ET)的表达水平;荧光定量PCR、Western blot分别检测胃黏膜环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因和蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠溃疡指数增加(P0.01),血清TNF-α、IL-6表达增加(P0.01),胃黏膜PGE2表达减少(P0.01)、ET表达增加(P0.01),COX-1基因和蛋白表达减少(P0.01)、COX-2基因和蛋白表达增加(P0.01,P0.05),胃组织病理损伤明显。与模型组比较,白及各剂量组溃疡指数降低(P0.01,P0.05),血清TNF-α、IL-6表达减少(P0.01,P0.05),胃黏膜PGE2增加(P0.01,P0.05)、ET减少(P0.01,P0.05),COX-1基因和蛋白表达均增加(P0.01,P0.05)、COX-2基因和蛋白表达均减少(P0.01,P0.05),胃黏膜组织病理损伤减轻,其中,白及高剂量组的治疗效果最明显。[结论]白及能够有效减轻阿司匹林对大鼠胃黏膜的损伤,该作用与降低血清TNF-α与IL-6,调节胃黏膜COX-1、COX-2的表达水平,从而升高PGE2、减少ET有关。     

环加氧酶-2及其催化的前列腺素分子在复发性流产中的研究

目的 探讨环加氧酶(COX)-2及其催化的前列腺素(PG)在人类不明原因的复发性流产中的作用.方法 采用实时聚合酶链反应(PCR)、Western印迹法、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原因不明的复发性流产患者(流产组)及行人工流产或药物流产的正常妊娠妇女(对照组)绒毛中COX-2表达及其催化产生的各类PG分子的表达.结果 流产组中COX-2蛋白表达水平为0.368±0.089,显著低于对照组的1.046±0.108(P<0.05).流产组的PGF2a、PGI2、PGD2和PGE2分别为(2326±296)、(2337±263)、(2164±240)、(238.7±26.4)μg/L,显著低于对照组的(3450±422)、(3623±460)、(3174±416)、(323.5±43.8)μg/L(P值均<0.01).COX-2 mRNA与PGI2呈正相关(R=0.395,P<0.01).结论 在人类不明原因的复发性流产患者的绒毛组织中,COX-2及其催化产生的PGF2a、PGI2、PGD2、PGE2表达水平下降,其低表达水平可能参与复发性流产的发病机制.     

替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤的保护作用

目的研究替普瑞酮对类固醇激素所致胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为空白组、实验对照组、低剂量替普瑞酮组、中剂量替普瑞酮组和高剂量替普瑞酮组,每组10只。采用泼尼松龙皮下注射制备大鼠胃黏膜损伤模型,低、中、高剂量组替普瑞酮的剂量分别为50、100、200mg/kg,给药7d,每天1次。观察胃黏膜的病理变化,计算溃疡指数、胃黏膜组织学损伤指数,放射免疫法检测血浆内皮素1和胃黏膜前列腺素E2(PGE2)水平,Griess法检测血清NO含量。结果类固醇激素能引起胃黏膜显著出血性损伤,实验对照组大鼠溃疡指数中位数为44.5,组织学损伤指数中位数为5.5,明显高于空白组(均为0,均P<0.01);实验组大鼠血浆内皮素1水平为399pg/ml±74pg/ml,高于空白组(279pg/ml±56pg/ml,P<0.01);血浆NO水平(27μmol/L±5μmol/L)低于空白组(36μmol/L±5μmol/L,P<0.01);胃黏膜PGE2水平(154pg/mg±83pg/mg)低于空白组(337pg/mg±112pg/mg,P<0.01)。低、中、高剂量替普瑞酮组的溃疡指数中位数分别为32.5,23.0,23.0,均明显低于实验组(均P<0.01);组织学损伤指数中位数分别为3.0,3.0,1.5,均明显低于实验组(均P<0.01),内皮素1水平分别为299pg/ml±99pg/ml,284pg/ml±85pg/ml,189pg/ml±32pg/ml,均明显低于实验对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);NO水平分别为56μmol/L±16μmol/L,62μmol/L±12μmol/L,83μmol/L±9μmol/L,均明显高于实验对照组(均P<0.01),高剂量替普瑞酮组胃黏膜PGE2水平为241pg/mg±65pg/mg,明显高于实验组154pg/mg±83pg/mg(P<0.05)。溃疡指数、组织学损伤指数和内皮素1水平随替普瑞酮剂量的增大而降低,血清NO、胃黏膜PGE2水平随替普瑞酮剂量的增大而升高。结论替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与降低内皮素1水平和增加NO和PGE2生成有关。     

胃癌组织中MTA1蛋白及微血管密度检测

目的:研究正常胃黏膜及胃癌组织中MTA1蛋白和微血管密度(MVD)的表达情况及相互关系.方法:采用免疫组织化学法分别检测12例正常胃黏膜及63例胃癌组织中MTA1蛋白及MVD的表达情况.结果:正常胃黏膜及胃癌组织中MTA1蛋白阳性表达率分别为33.3%(4/12)和80.9%(51/63,差异有统计学意义(χ2=9.380,P=0.002);MVD值分别为(18.25±8.35)和(45.38±8.69),差异有统计学意义(t=9.974,P<0.001);胃癌组织中MTA1蛋白的表达与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关(χ2分别为8.129、12.770和6.254,P均<0.05);MTA1蛋白表达者MVD值(47.49±7.69)高于MTA1蛋白未表达者(36.77±5.71)(t=5.265,P<0.001).结论:MTA1蛋白过表达可能是胃癌浸润、转移和微血管生成的一个促进因素.     

选择性COX-2抑制剂尼美舒利对人卵巢癌细胞株移植瘤生长的不同影响

目的:探讨选择性COX-2抑制剂尼美舒利(Nimesulide)对COX-2表达不同的人卵巢癌细胞株移植瘤生长的影响。方法:培养人卵巢癌细胞株SKOV-3(COX-2表达阴性)和OVCAR-3(COX-2表达阳性),制作裸鼠皮下移植瘤模型。应用尼美舒利干预,观察各组肿瘤的生长情况,绘制生长曲线,计算抑瘤率。测定移植瘤组织内血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。结果:SKOV-3组治疗组的肿瘤体积与对照组比较没有统计学差异(1.026 4±0.34)cm3vs(1.668 2±0.94)cm3(P=0.19>0.05);两组肿瘤的VEGF含量比较为没有统计学差异(1 481.1±235.61)pg/mL vs(1 648±179.02)pg/mL(P=0.09>0.05);两组的肿瘤生长曲线没有显著分离。OVCAR-3组治疗组的肿瘤体积(0.139 6±0.061)cm3小于对照组的肿瘤体积(0.263 4±0.056)cm3(P=0.01),抑瘤率为56.3%;治疗组的肿瘤生长曲线较对照组低平。治疗组肿瘤的VEGF含量为(1 070.4±578.29)pg/mL,低于对照组肿瘤的VEGF含量(1 641.3±541.84)pg/mL(P=0.04)。结论:选择性COX-2抑制剂对COX-2表达阳性的人卵巢癌组织有抑制生长的作用,对COX-2表达阴性的人卵巢癌组织的生长没有表现出抑制作用,这可能与COX-2抑制剂对COX-2表达不同的肿瘤组织内VEGF含量有不同的影响相关。     

塞来昔布对实验性Barrett食管的作用研究

目的:探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对大鼠实验性Barrett食管发生发展的影响.方法:60只8周龄雄性SD大鼠,50只行食管空肠吻合术2周后随机分为2组.术后4周,塞来昔布组大鼠塞来昔布10 mg/(kg·d-1)经食管灌入;对照组经食管灌入生理盐水1 ml;另外,10只大鼠为假手术组.术后20周处死动物,观察比较3组动物大体组织变化、食管炎、Barrett食管及食管腺癌的发生情况,免疫组织化学检测COX-2的表达,酶联免疫竞争法检测PGE2的水平.结果:术后20周,塞来昔布组轻、中、重度食管炎发生率分别为14/19(73.68%)、4/19(21.05%)、1/19(5.26%);对照组为4/17(23.53%)、5/17(29.41%)、8/17(47.06%),两组比较有显著差异(P<0.05).Barrett食管发生率塞来昔布组为7/19(36.84%),对照组为13/17(76.47%),两组比较有显著差异(P<0.05).Barrett食管不典型增生发生率塞来昔布组为2/19(10.53%),对照组为8/17(47.06%),两组比较有显著差异(P<0.05).COX-2蛋白表达塞来昔布组为1/7(14.29%),对照组为10/13(76.92%),两组比较有显著差异(P<0.05).塞来昔布组PGE2水平(1480.1±489.8 )pg/mg.protein,显著低于对照组(2933.8±862.9)pg/mg.protein(P<0.001).假手术组组织学未见异常.结论:塞来昔布对大鼠反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌的发生发展有化学预防作用.     

BQ-123在动脉粥样硬化中的抗炎效应

目的 观察内皮素A(ETA)受体拮抗剂BQ-123在家兔动脉粥样硬化(AS)中的抗炎效应.方法 32只雄性新西兰大白兔随机分成4组(n=8),对照组饲喂普通饲料10周;模型组、辛伐他汀组和BQ-123组均饲喂高脂饲料10周.采用ELISA法检测耳中动脉血清中前列腺素E2(PGE2)和ET-1水平;免疫组化SP法检测主动脉组织ET-1、巨噬细胞和COX-2蛋白表达.结果 ①分组饲喂10周后,模型组、辛伐他汀组和BQ-123组血清ET-1和PGE2水平均较对照组明显升高(P<0.01);但辛伐他汀组和BQ-123组均较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01);AS兔血清中ET-1与PGE2水平成正相关(r=0.57,P<0.01).②辛伐他汀组和BQ-123组AS斑块ET-1、巨噬细胞源泡沫细胞、COX-2蛋白阳性表达均较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),而BQ-123组义较辛伐他汀组进一步降低(P>0.05).结论 ET-1通过激活ETA受体可以导致家免AS斑块COX-2表达上调和PGE2生成增多,选择性ETA受体拮抗剂BQ-123在家兔AS中具有抗炎效应.