五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡过程中Caspase-3的表达

目的探讨五味子多糖对裸鼠胶质瘤细胞的诱导凋亡作用及其诱导凋亡的机制。方法体外提取和原代培养裸鼠胶质瘤细胞,将质量浓度为0、200、400、800μg/ml的五味子多糖作用于裸鼠胶质瘤细胞中培养48 h后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)和细胞免疫组织化学方法观察五味子多糖作用后裸鼠胶质瘤细胞Caspase-3蛋白表达情况。结果不同浓度(200、400、800μg/ml)五味子多糖作用裸鼠胶质瘤细胞48 h后,与对照组相比较,五味子多糖组培养上清中Caspase-3蛋白表达水显著升高(P<0.01);细胞免疫组化结果显示,200、400、800μg/ml多糖组Caspase-3蛋白表达阳性率均明显升高(P<0.01)。结论五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过激活Caspase-3而使胶质瘤细胞发生凋亡。     

五味子木脂素对裸鼠胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度五味子木脂素对体外原代培养裸鼠神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法体外原代提取和培养裸鼠神经胶质瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法观察0、50、100和200μg/ml五味子木脂素作用裸鼠神经胶质瘤细胞24、48、72 h时对其生长的影响。结果五味子木脂素对体外培养裸鼠神经胶质瘤细胞生长随浓度增高呈现抑制作用,药物浓度在200μg/ml时抑制作用显著(P<0.01)。结论五味子木脂素对体外培养神经胶质瘤细胞的增殖起抑制作用,提示五味子木脂素可能在治疗神经胶质瘤方面发挥重要作用。     

五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的作用及机制

目的探讨五味子多糖对裸鼠胶质瘤细胞的诱导凋亡作用的机制。方法体外提取和原代培养裸鼠胶质瘤细胞,将浓度为0、200、400和800μg/ml的五味子多糖作用于裸鼠胶质瘤细胞中培养48 h后,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测其上清液中Bax和Bcl-2的蛋白表达;细胞免疫组织化学法观察五味子多糖作用后裸鼠胶质瘤细胞Bax和Bcl-2阳性表达率。结果不同浓度五味子多糖作用细胞后,细胞培养上清中Bcl-2蛋白表达水平均下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),Bax/Bcl-2值均升高(P<0.01)。细胞免疫组化结果显示,400和800μg/ml多糖组Bax阳性表达率明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。400和800μg/ml多糖组Bcl-2阳性表达率下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论五味子多糖诱导裸鼠胶质瘤细胞凋亡的机制可能是通过上调Bax/Bcl-2比值,使促凋亡因素占优势,从而使胶质瘤细胞发生凋亡。     

五味子粗多糖对脑胶质瘤细胞生长的作用

目的 观察不同浓度五味子粗多糖对体外培养大鼠脑胶质瘤细胞生长的作用.方法 用0、1.25、2.5、5 mmol/L五味子粗多糖作用于体外培养的大鼠脑胶质瘤C6细胞,采用MTT法检测五味子粗多糖对细胞增殖的抑制作用.结果 不同浓度(1.25、2.5、5 mmol/L)五味子粗多糖作用3、12、24、48 h,均能明显降低大鼠脑胶质瘤C6细胞的存活率;药物作用48 h时(0.53±0.07、0.45±0.04、0.40±0.02),细胞生长抑制最为明显,与对照组(0.54±0.03)相比有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 五味子粗多糖对大鼠脑胶质瘤C6细胞的生长具有抑制作用,提示五味子粗多糖可能在治疗脑胶质瘤方面发挥重要作用.     

五味子粗多糖与顺铂抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用

目的研究五味子粗多糖(FSP)单独或与顺铂联合抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用。方法培养脑胶质瘤(SHG-44)细胞,应用四甲基偶氮唑(MTT)法检测FSP单独及联合顺铂抑制细胞增殖的情况。结果脑胶质瘤SHG-44细胞在FSP浓度200、400、800μg/ml时,均可以抑制细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),且有浓度依赖性。FSP与顺铂联合作用时可以明显地抑制细胞的生长(P<0.01)。结论 FSP可以抑制胶质瘤SHG-44细胞的增殖,联合顺铂时可发挥协同作用。     

五味子木脂素对神经细胞的毒性作用及对胶质瘤细胞的抑瘤效应

目的 研究不同浓度五味子木脂素对体外培养的原代神经细胞的毒性作用和胶质瘤细胞的抑瘤效应.方法 体外培养原代小鼠神经细胞及大鼠C6脑胶质瘤细胞,采用MTT法观察0,50,100和200 μg/ml五味子木脂素作用细胞48 h,对神经细胞的毒性作用及肿瘤细胞生长的影响.结果 各浓度五味子木脂素对体外培养原代小鼠神经细胞无明显毒性作用,而对大鼠C6脑胶质瘤细胞则有明显的抑制增殖作用(P＜0.01).结论 五味子木脂素对神经细胞无毒副作用,对胶质瘤细胞有明显抑瘤效应.     

五味子多糖对人胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的探讨五味子多糖对人胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法人胶质母细胞瘤株U251置于胎牛血清中培养,分为观察组和对照组。观察组应用五味子多糖作用于人胶质瘤U251细胞,对照组未应用任何药物作用于人胶质瘤U251细胞。四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察800μg/ml五味子多糖对人胶质瘤U251细胞增殖的影响。RT-PCR观察800μg/ml五味子多糖对人胶质瘤U251细胞周期素(cyclin)B1 mRNA、原癌基因(c-Myc)mRNA的影响。Western印迹观察800μg/ml五味子多糖对人胶质瘤U251细胞cyclin B1、c-Myc蛋白的影响。结果培养48 h后,观察组不同浓度用药组OD570值均低于对照组,且随着用药浓度的上升,五味子多糖对人胶质瘤U251细胞的增殖抑制作用逐渐加强趋势。观察组cyclin B1 mRNA、c-Myc mRNA相对表达量均低于对照组(P0.05)。观察组cyclin B1、c-Myc蛋白表达量均低于对照组(P0.05)。结论五味子多糖能够有效抑制人胶质瘤U251细胞增殖,这可能与五味子多糖抑制cyclin B1与c-Myc的表达作用有关。     

十全大补汤总多糖的体外抗肿瘤作用

目的探讨十全大补汤总多糖（以下简称总多糖）的体外抗肿瘤作用,为其临床应用及抗肿瘤药物的研发提供依据。方法以200、100、50μg/ml浓度总多糖干预体外培养的人肺癌A549细胞株、人肝癌Bel-7402细胞株、人结肠癌HCT-8细胞株和人宫颈癌Hela细胞株。作用24、48、72 h时采用MTT法测定细胞增殖抑制率（IR）。结果 200μg/ml总多糖作用48 h时A549细胞的IR最高;总多糖对另3种细胞的作用均为随浓度及作用时间延长IR逐渐升高,以200μg/ml、作用72 h时IR最高,呈剂量及时间依赖性。结论总多糖可在体外抑制肿瘤细胞生长;其有望作为抗肿瘤药物用于临床。     

越桔原花青素对SHG-44脑胶质瘤细胞生长的作用

目的探讨越桔原花青素对体外培养的人胶质瘤细胞株SHG-44生长的影响。方法培养人脑胶质瘤SHG-44细胞,加入5%基础培养液和越桔原花青素(浓度分别为5、10、20、40μg/L)含药血清培养24、48、72 h,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测药物作用后SHG-44细胞的生长情况。结果不同浓度的越桔原花青素均可以抑制SHG-44胶质瘤细胞的生长。10、20、40μg/L越桔原花青素浓度组在作用24、48、72 h时,细胞的生长均受到了明显的抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而5μg/L浓度越桔原花青素浓度组在作用细胞72 h时,细胞的生长亦明显受到抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论越桔原花青素可以抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞生长,为其开发为抗脑肿瘤新药提供初步理论依据。     

脂多糖对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞生长的影响——对建立支架内再狭窄炎症细胞模型的探索

目的探讨不同浓度脂多糖(LPS)作用不同时间对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)生长的影响,分析其应用于HCASMC的无毒性反应浓度范围,为开展介入术后再狭窄相关研究建立HCASMC炎症活化模型提供实验数据支持。方法体外培养的HCASMC 3~5代,加入96孔细胞培养板,用噻唑蓝比色实验(MTT法)检测不同浓度(0μg/ml,0.01μg/ml,0.1μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,100μg/ml)LPS在不同作用时间(24 h,46 h,72 h)下对HCASMC活力影响,酶标仪492 nm处测定各组A值,细胞活力=(实验组A值-调零孔A值)/对照组A值。结果 LPS在低于100μg/ml浓度范围内,干预HCASMC时间短于48 h未出现细胞毒性,多表现为促细胞增殖效应,而干预时间大于48 h则显现出较为明显的细胞毒性,且细胞活力随LPS浓度的增大而减低;干预72 h后LPS浓度在0~0.01μg/ml范围内有促增殖作用,0.1~0.5μg/ml浓度则产生轻微的细胞抑制作用,但细胞毒性不明显,在1~100μg/ml浓度下HCASMC毒性反应逐渐出现,且HCASMC活力随LPS浓度的升高而减低。同一浓度水平的LPS随着作用时间延长,HCASMC的细胞活力逐步下降,且作用时间越长下降越明显。结论LPS在浓度0.1μg/ml以下未出现明显的细胞毒性,其中LPS浓度0.01μg/ml干预24 h,人冠状动脉平滑肌细胞增殖最显著,可作为建立炎症诱导人冠状动脉平滑肌细胞活化模型的最佳条件。     

五味子总木脂素与顺铂抑制大鼠胶质瘤细胞增殖的作用

目的 探讨大鼠脑胶质瘤细胞对五味子总木脂素作用的敏感性及五味子总木脂素与顺铂作用后对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 培养大鼠C6脑胶质瘤细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特性,应用MTT法检测五味子总木脂素单独及联合顺铂作用后细胞的增殖程度.结果 大鼠C6脑胶质瘤细胞在五味子总木脂素低浓度作用时抑制生长作用不明显,甚至出现轻微的增殖现象,药物浓度达到200 μg/ml时,明显抑制细胞增殖.总木脂素与顺铂联合作用检测结果为0.43 ±0.01,与对照组(0.75 ±0.04)相比,具有显著性差异(P＜0.01).结论 五味子总木脂素与顺铂联合可发挥协同作用,从而抑制细胞增殖.     

辛伐他汀体外对人U251脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的观察辛伐他汀体外对人U251胶质瘤细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法对照组和实验组分别行辛伐他汀干预,培养24、48、72、96 h,采用MTT比色法和流式细胞仪检测不同浓度及不同时间干预后人U251胶质瘤细胞增殖活性和细胞周期的变化;采用TUNEL法检测干预后细胞凋亡的情况及RT-PCR检测对照组和实验组在干预48 h后检测Caspase-3的表达。结果辛伐他汀体外可明显降低人U251胶质瘤细胞增殖活性及诱导其凋亡,浓度到达1.0μmol/L时抑制作用明显,与对照组相比具有显著性差异(P0.05)。此外,辛伐他汀对人U251胶质瘤细胞的生长抑制呈明显的量-效关系。人U251胶质瘤细胞凋亡随药物浓度增加而显著,Caspase-3的表达亦呈剂量依赖关系。结论辛伐他汀在体外可一定程度上抑制人U251胶质瘤细胞的增殖及诱导其凋亡,Caspase-3参与细胞的凋亡过程。     

替硝唑体外抗毛滴虫效果观察

本文观察了替硝唑(Tinidazole)对体外培养的两株阴道毛滴虫和一株人毛滴虫的作用.该药与阴道毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在2μm/ml浓度时,有一定程度的抑制作用;与甲硝唑对比,替硝唑的作用低一个稀释度。该药与人毛滴虫共同培养,48h的100％致死浓度为20μg/ml,在4μg/ml浓度时,有一定程度的抑制作用,与甲硝唑对比,作用相同。     

商陆抗病毒蛋白对感染细胞模型中HCV复制的影响

目的探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)对丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型中 HCV 的抑制作用。方法用 HCV 阳性血清感染人肝癌细胞株 HepG2细胞.制成 HCV感染细胞模型,用不同浓度的 PAP 干预该模型;利用荧光定量 PCR 法分别于药物干预后48h、96h、144h 检测培养细胞及上清液中 HCV RNA 含量,同时以不同浓度干扰素(IFN)处理该模型作为对照。结果 PAP 处理 HepG2感染 HCV细胞模型后,细胞内 HCV RNA 含量在48h、96h、144h 各组间与对照组相比有显著差异(P<0.01)。在第48h,HCVRNA 含量100μg/ml 组和10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组<0.01μg/ml 组及对照组;在第96h,HCV RNA含量100μg/ml 组和10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组和0.01μg/ml 组<对照组;在第144h,HCVRNA含量100μg/ml 组及10μg/ml 组<1μml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml组及对照组。培养上清液中 HCV RNA 含量各组间在48h时与对照组相比差异无显著性(P>0.05),第96h,培养上清液中 HCV RNA 含量各组间差异显著(P<0.05)。100μg/ml组及10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml 组及对照组;第144h 时,培养上清液中 HCV RNA 含量各组间差异显著(P<0.01),100μg/ml 组、10μg/ml 组及1μg/ml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml 组及对照组。PAP 对 HCV 的抑制作用随 PAP 浓度的增加而增强,以100μg/ml 组对 HCV的抑制作用最强。IFN 干预该模型亦得出相似结果,以3.0×10~4IU/ml 组对 HCV 抑制作用最强。PAP 与 IFN 均以第48h 的抑制效果最好,在48h、96h 及144h时,PAP 对 HCV的抑制作用显著高于 IFN(P<0.01)。实验浓度的 PAP 未引起细胞死亡或脱壁,对细胞的形态、生长也无明显影响。结论 PAP 对 HCV 复制有明显的抑制作用,且作用强于IFN。实验浓度的 PAP 对细胞形态及生长无明显影响。     

黄芪多糖对肝癌Hep G2.215 细胞的抑制作用及其机制研究

[摘要]?目的?探讨黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞体外增殖的抑制作用及其作用机制。方法?CCK-8法测定不同浓度黄芪多糖作用于Hep G2.215细胞48 h、72 h后对其增殖影响;平板细胞克隆实验测定不同浓度黄芪多糖对Hep G2.2.15细胞克隆生长的影响;流式细胞术检测黄芪多糖对Hep G2.215细胞周期和凋亡的影响。结果?CCK-8检测结果显示,当黄芪多糖给药浓度达1000 μg/ml时,对Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,且与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。平板细胞克隆实验表明,低浓度（100 μg/ml）的黄芪多糖对Hep G2.215细胞克隆形成具有抑制作用,与对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。流式细胞术检测结果显示,G2/M期细胞比例与对照组相比呈下降趋势（P＜0.05）,经过黄芪多糖处理的Hep G2.215细胞,细胞凋亡率高于对照组（P＜0.05）。结论?黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,其机制可能是通过阻滞Hep G2.215细胞进入G2/M期,激活了细胞凋亡系统,从而诱导细胞凋亡。     

地喹氯铵对脑胶质瘤细胞凋亡的影响

目的探讨地喹氯铵对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法用50、100、200μmol/L的地喹氯铵作用于脑胶质瘤细胞U251、U87、C6,作用时间分别为12、24、48、72、96 h,MTT检测细胞增殖情况。流式细胞仪检测76μmol/L的地喹氯铵作用48 h后的脑胶质瘤细胞U251的细胞凋亡情况。Transwell小室检测地喹氯铵对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。Western印迹检测细胞中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达水平。结果 50、100、200μmol/L的地喹氯铵对U251、U87、C6脑胶质瘤细胞增殖均具有抑制作用。地喹氯铵对脑胶质瘤细胞的增殖抑制作用随着作用时间的增加而增加,随着药物作用浓度的增加而增加。地喹氯铵作用胶质瘤U251、U87、C6细胞48 h的半数抑制浓度由大到小依次为:C6>U87>U251。76μmol/L的地喹氯铵作用后的脑胶质瘤细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。脑胶质瘤细胞经地喹氯铵作用后的侵袭细胞数明显低于对照组(P<0.01)。地喹氯铵作用后的脑胶质瘤细胞中PI3K、Akt的表达水平与对照组相比无明显差异,而p-PI3K、p-Akt的表达水平明显下降。结论地喹氯铵对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭能力具有抑制作用,对脑胶质瘤细胞凋亡具有促进作用,作用机制与PI3K/Akt信号通路有关。     

键合紫杉醇聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚纳米胶束体外抑制C6胶质瘤细胞的实验研究

目的探讨键合紫杉醇聚合纳米胶束抑制C6胶质瘤的机理。方法体外培养C6胶质瘤细胞,应用不同浓度的键合紫杉醇聚合胶束处理C6细胞系24~72h,应用MTT法、流式细胞仪观察键合紫杉醇聚合胶束对细胞的抑制情况,用电镜检查细胞超微结构的改变。结果1.25~20μg/ml的键合紫杉醇聚合胶束可明显抑制C6胶质瘤细胞的增殖,且呈明显剂量和时间依赖关系;流式细胞仪检测20.0μg/ml和10.0μg/ml组细胞出现G2-M期阻滞,且随紫杉醇聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚胶束浓度的增大,细胞凋亡率增高。电镜下细胞呈现典型的凋亡形态学改变。结论键合紫杉醇聚合胶束对C6胶质瘤细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡作用,且这种作用有周期特异性,诱导凋亡可能为其抗肿瘤作用机制。     

千金子二萜醇对人肾癌7860细胞和小鼠肾癌renca细胞体外生长的抑制作用

目的观察中药千金子体外对人肾癌7860细胞和小鼠肾癌renca细胞的抑制作用。方法将人肾癌7860细胞和小鼠肾癌renca细胞在不同浓度含千金子二萜醇(111、333、1 000、3 000、9 000μg/ml)的培养基中培养,MTT法观察千金子二萜醇对细胞体外增殖情况的影响。结果24 h后两实验组细胞增殖速度减慢,并随浓度增加增殖速度减慢明显;3 000、9 000μg/ml浓度组有统计学差异(7860细胞:P=0.005,P=0.002;renca细胞:P=0.005,P=0.003),以9 000μg/ml浓度组作用最强,人肾癌7860细胞生长抑制率达76.03%,小鼠肾癌renca细胞生长抑制率为64.65%;与空白对照比较差异显著(P=0.002,P=0.003);两实验组细胞增殖比较没有明显差异(P0.05)。结论中药千金子体外对人肾癌7860细胞和小鼠肾癌renca细胞有明显抑制作用,使两细胞体外生长被显著抑制,证实千金子二萜醇是一种有临床应用前景的抗肿瘤中药提取物。     

五味子多糖对人结肠癌HT29细胞增殖的抑制作用及其机制

目的探讨五味子多糖含药血清对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响及作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度的五味子多糖含药血清对细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态和细胞核的改变;流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果五味子多糖含药血清对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性。五味子多糖含药血清作用72 h后,荧光显微镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测凋亡。结论五味子多糖含药血清对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关。     

人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rh3对人结肠癌细胞SW480增殖与凋亡的影响。方法体外培养的人结肠癌细胞SW480分别用无血清培养液稀释的终浓度为15、30、60、120和240μg/ml的人参皂苷Rh3作用24、48及72h,应用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞增殖;采用终浓度为15μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h,应用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,采用终浓度为15、20μg/ml的人参皂甙Rh3作用于SW480细胞24及72h;应用丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法计算细胞凋亡率和坏死率。结果 15μg/ml人参皂苷Rh3作用48h即可明显抑制SW480细胞增殖,其作用随剂量增加和作用时间延长而增强,30μg/ml人参皂苷Rh3作用72h抑制率超过80%;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h部分细胞凋亡,胞浆呈棕色,作用72h凋亡细胞增多;15μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为25.5%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用24h细胞凋亡率为31%,未见细胞坏死,15μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为55%、坏死率为7%,20μg/ml人参皂苷Rh3作用72h细胞凋亡率为67.5%、坏死率为7%。结论人参皂苷Rh3能抑制人结肠癌细胞SW480增殖,诱导其凋亡,作用呈剂量依赖性和时间依赖性。