一种新的荧光扫描法定量检测CK同工酶

介绍一种用不连续缓冲液电泳分离ＣＫ同工酶的方法，并以光密度计荧光扫描确定每种同工酶的相对含量。结果显示其测定敏感度和特异性与ＭＯＰＳ电泳系统结果一致，且二法有良好的相关性，而成本明显低于单用ＭＯＰＳ电泳法。     

Studies on the creatine kinase MM isoforms of normal and Duchenne muscular dystrophic patients.

OBJECTIVE: To study the changes of creatine kinase MM (CK-MM) isoforms in Duchenne muscular dystrophy (DMD) patients. METHODS: Serum samples from 49 DMD patients and 40 control subjects were collected for CK-MM isoforms measurement. CK-MM isoforms were separated within 30 minutes by electrophoresis on agarose gel with a discontinuous buffer system at constant current of 30 mA and low voltage of 200-300 V, then measured by fluorescence scanning. RESULTS: Significant differences of MM2/MM1 ratio were found between DMD patients and control subjects (P < 0.05) as well as among the three different age groups of DMD patients (P < 0.05). CONCLUSIONS: CK-MM isoforms may present useful information for the early diagnosis and evaluation of DMD and the ratio of MM2/MM1 can be considered as a specific indicator of the degree of seriousness for DMD patients.     

血清肌酸激酶MM同工酶亚型和丙酮酸激酸对急性心肌梗塞早期诊断的意义

用普通琼脂糖快速电泳法和２，４—二硝基苯肼法分别测定２１例ＡＭＩ患者血清ＣＫ－ＭＭ亚型和ＰＫ的活力，动态观察ＡＭＩ发病后不同时间ＣＫ－ＭＭ亚型和ＰＫ的变化，对比ＣＫ和ＣＫ－ＭＢ，以评价各指标在ＡＭＩ后不同时间的诊断价值。结果：ＡＭＩ发病５ｈ内首次血清ＣＫ－ＭＭ３％高于心绞痛组和对照组，ＭＭ３／ＭＭ１比值高于心绞痛组和对照组（Ｐ＜０．０１）。而同时限测定的ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ和ＰＫ与心绞痛组和对照组比较无差异（Ｐ＞０．０５）；梗塞后６ｈ内ＭＭ３／ＭＭ１诊断阳性半天高１９～２４ｈ内ＰＫ和ＣＫ－ＭＢ诊断阳性率最高；３６～７２ｈＣＫ诊断阳性率最高。血清ＣＫ－ＭＭ亚型，尤其是ＭＭ３／ＭＭ１是ＡＭＩ最早、最敏感的生化指标。     

A rapid electrophoretic method for separating creatine kinase MB isoforms and its application in diagnosis of acute myocardial infarction

ＡｒａｐｉｄｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｅｐａｒａｔｉｎｇｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅＭＢｉｓｏｆｏｒｍｓａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎＷａｎｇＢｏ...     

急性心肌梗塞病人血清CK-MM亚型的检测

①目的观察急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人血清肌酸磷酸激酶（ＣＫ）及其亚型的变化，以探讨对ＡＭＩ早期诊断及病情变化的意义。②方法应用琼脂糖凝胶电泳法检测２０例ＡＭＩ病人血清ＣＫ总活力及其亚型ＭＭ变化，并与对照组和心绞痛组进行了比较。③结果ＡＭＩ发病３ｈ内，ＣＫ总活力和ＣＫ－ＭＢ与对照组和心绞痛组均无明显改变，而ＭＭ３及ＭＭ３／ＭＭ１比值则明显高于上述两组（ｔ＝７．８１，１０．０８，Ｐ均＜０．０１）。ＡＭＩ发病后，ＣＫ总活力和ＣＫ－ＭＢ达到峰值时间分别为２３．２和２１．６ｈ，而ＭＭ３／ＭＭ１则在１２．３ｈ达到峰值，ＭＭ３／ＭＭ１比值达峰值时间明显缩短（ｔ＝７．４５，Ｐ＜０．０１）。④结论检测ＣＫ及其亚型的变化有助于对ＡＭＩ的早期诊断和病情判断。     

Determination of serum creatinine kinase MM isoforms in assessing reperfusion after acute myocardial infarction]

Creatine kinase(CK), aspartate aminotransferase (AST), alpha-hydroxybutyrate dehydrogenase (HBDH), lactate dehydrogenase (LD) and LD isoenzymes, CK-MB isoenzymes and CK-MM isoforms were measured in 17 acute myocardial infarction (AMI) patients treated with thrombolysis resulting in reperfusion and 2 not resulting in reperfusion as well as 71 treated conventionally to assess reperfusion. The results showed that the peak of the ratio of MM3 to MM1 was attained significantly earlier in patients with reperfusion than in those conventionally treated and those without reperfusion, and this ratio is considered to be a good indicator to assess reperfusion. The results were similar to those of previous reports. The peak in all the 17 patients with confirmed reperfusion was attained within 9 hours after onset of AMI, while only 9 of the 73 patients in the group without reperfusion had their peaks within 9 hours. The diagnostic efficiency was 94%. The authors suggested a new indicator for assess reperfusion. An increase of CK-MM3 over 10% from the first to the second hour after treatment with urokinase was found in 15 of the 17 urokinase-treated patients with reperfusion. The diagnostic efficiency was also 94%. We consider that it is an indicator as good as the peak of ratio of MM3/MM1. Furthermore, with this indicator, it is possible to assess reperfusion in two hours after treatment with urokinase.     

非心源性疾病患者MB型肌酸激酶活性假性升高原因分析

目的:探讨非心源性疾病患者血清中MB型肌酸激酶(CK-MB)活性假性升高的原因及其与疾病的关系。方法:对日常采用免疫抑制法检测的CK-MB活性高于正常参考值(0~25U/L)、与肌酸激酶(CK)比值>0.38的55例标本进行CK同工酶琼脂糖凝胶电泳分析;1周后重取标本检测CK-MB,并与开始的CK-MB值进行比较,结合临床诊断进行分析。结果:55例患者根据临床诊断,其中恶性肿瘤41例(肝癌16例、肺癌11例、前列腺癌7例,其他肿瘤7例),肝硬化12例,其他2例;CK-MB含量百分比均<5%,其中34例恶性肿瘤检出线粒体型肌酸激酶(m acro-CK2),23例恶性肿瘤检出BB型CK(CK-BB),16例恶性肿瘤同时检出巨CK2和CK-BB。12例肝硬化患者均检出巨CK2。前后2次CK-MB活性浓度进行比较,变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血清CK-MB活性的假性升高,主要是由于血液中出现了异常升高的CK-BB或巨CK(巨CK1、巨CK2);它们的出现与肝硬化及某些恶性肿瘤密切相关。     

琼脂糖电泳法分离血清碱性肝型和骨型同工酶方法的改进

目的：介绍一种琼脂糖电泳法分离血清碱性磷酸酶肝型和骨型同工酶的改进方法。方法：将血清用神经氨酸苷酶处理,在此基础上选用四种缓冲液配制成０．７％的凝胶,加入１％的ＴｒｉｔｏｎＸ－１００电泳,并进行荧光扫描。     

心肌炎和进行性肌营养不良患儿肌酶变化规律的对比分析

目的：通过对心肌炎及进行性肌营养不良(Duchene/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)患儿不同时间肌酶转归的对比分析,探索其变化规律。方法：回顾性分析2008年1月至2015年5月就诊于中国医科大学盛京医院儿科的心肌炎患者83例(心肌炎组)及DMD/BMD患者69例(DMD/BMD组),对照组24例为同期发育儿科门诊体检儿童。检测内容包括肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同功酶(creatine kinase isoenzyme MB,CK-MB)、肌酸激酶同功酶质量(CK-MB mass)、肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)I及超敏肌钙蛋白T(high-sensitive-cTnT,hs-cTnT)。 结果：1)心肌炎组CK升高数百到数千U/L,5 d内达高峰,持续约1周后降至正常;CK-MB 在5~7 d达高峰,1个月左右降至正常;CK-MB mass在发病第1天即达高峰,约3周降至正常;cTnI 明显升高,5 d内达高峰, 17 d左右降至正常;hs-cTnT明显升高,第1天即可以达到峰值,19 d左右降至正常。2)DMD/BMD组CK升高明显,27例超过1×104 U/L,经过1~2周治疗后各项酶指标轻度降低,之后可再次升高;6例cTnI轻度升高,其中6例中又有5例超过3周不能降至正常;45例hs-cTnT升高,其中31例升高超过3周且有逐渐升高趋势。 结论：心肌炎组cTn升高明显,且峰值持续时间较长,较其他心肌标志物观察窗宽,具有高度的敏感性及特异性。DMD/BMD组CK升高幅度最大,治疗后轻度下降多复升。DMD/BMD组心肌损伤可以在肌无力发生前出现,且多数持续存在。心肌炎组cTnI和hs-cTnT改变规律相似,而DMD/BMD组hs-cTnT远比cTnI敏感。     

慢性阻塞性肺疾病不同病情患者肌酸激酶水平与动脉血氧分压关系

目的：了解慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者肌酸激酶水平（creatine ki-nase,CK）与动脉血氧分压（partial pressure of oxygen in artery,PaO2）之间的关系。方法：对已经确诊的COPD患者30例进行分析。患者分别于急性发作期和治疗稳定期抽取空腹静脉血和动脉血,检测CK、PaO2。结果：急性期COPD患者的血清CK和PaO2分别为（248.0±19.0）U/L和（41.0±3.3）mm Hg,明显高于稳定期组（229.0±17.5）U/L和（62.0±3.2）mm Hg,两者差异有统计学意义（t=4.094,P〈0.01和t=25.161,P〈0.01）,CK与PaO2之间存在负相关（r=-0.606,P〈0.01）。结论：CK是COPD患者病情变化的一个敏感指标,且与PaO2水平呈负相关。在临床上可用来评估COPD患者的病情程度和治疗效果。     

磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎实效性分析

目的：探讨磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎的临床效果,为临床治疗提供参考。方法选择2011年1月至2015年1月160例病毒性心肌炎患儿,按照数字表法随机分为对照组与观察组,各80例。对照组使用果糖二磷酸钠、维生素C、辅酶Q10、利巴韦林等对症治疗,观察组在对照组基础上,联合使用磷酸肌酸钠及心肌康颗粒治疗,比较两组患者临床效果、心电图改善、心肌酶水平及肌钙蛋白 I （cT nI ）水平变化。结果观察组治疗有效率为87．50％,明显高于对照组的70．00％,差异有统计学意义（χ2＝7．320,P＝0．004）;观察组心电图改善有效率为90．00％,明显高于对照组的75．00％,差异有统计学意义（χ2＝6．234,P＝0．005）;两组患者治疗后比治疗前天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）、磷酸肌酸酶（CPK ）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK‐MB）、羟丁酸脱氢酶（HBDH）、cTnI均有明显改善,差异有统计意义（P＜0．05）,观察组治疗后AST、CPK、LDH、CK‐MB、HBDH、cTnI分别为（29．98±4．66）U／L、（184．41±5．97）U／L、（314．25±9．84）U／L、（22．29±2．98） U／L、（268．37±8．64）U／L、（0．13±0．04）μg／L ,与对照组[（33．49±4．98）U／L、（196．49±6．71）U／L、（328．64±11．14）U／L、（26．53±3．44）U／L、（298．68±10．64）U／L、（0．25±0．05）μg／L ]比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论磷酸肌酸钠联合心肌康颗粒治疗小儿病毒性心肌炎临床效果显著,值得临床推广应用。     

一种新的荧光扫描法定量检测CK同工酶

介绍一种用不连续缓冲液电泳分离ＣＫ同工酶的方法，并以光密度计荧光扫描确定每种同工酶的相对含量，结果显示其测定敏感度和特异性与ＭＯＰＳ电泳系统结果一致，且二法有良好的相关性，而成本明显低于单用ＭＯＰＳ电泳法。     

内毒素、磷脂酶A2与颅脑损伤后心肌功能损害的相关性与机制探讨

目的探讨内毒素（LPS）、磷脂酶A2（PLA2）与重型颅脑损伤后心肌功能损害发生的相关性及机制。方法收集2009年1月-2011年12月在中国人民解放军第二五三医院急诊科就诊的创伤指数TI≥17分、格拉斯哥昏迷评分GCS≤12分,并除外合并其他部位损伤及在急诊科内死亡的急性重型颅脑损伤患者53例,在急诊予以相应抢救、治疗的同时抽血检查肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）、LPS、PLA,,对检验结果进行相关性分析检验。以同期到笔者医院门诊体检的健康志愿者为对照组,共计53例,在门诊体检中心抽血行相同检查,试验组与对照组检测数据比较用t检验。结果心肌功能检验结果：试验组：CK-MB：73．52±26．41U／L,eTnT：184．83±68．98pg／ml;对照组：CK-MB：8．13±3．64U／L,cTnT：21．67±11．58pg/ml。损伤因子检验结果：试验组：LPS：309．38±49．41IU／L,PLA,：45．23±19．97ng／ml;对照组：LPS：87．38±46．51IU／L,PLA,：7．47±5．21ng／ml。试验组与对照组有显著差异。反映心肌功能的指标CK-MB和eTnT与可能导致心肌细胞损害的因素LPS、PLA2之间存在着显著的相关性。结论LPS、PLA2可能通过颅脑损伤后的应激反应、微循环障碍、炎症反应的“瀑布样”效应、肠源性内毒素血症等途径参与了颅脑损伤后心肌细胞功能损害的发生、发展。因此在颅脑损伤后的早期加强对心肌细胞的功能保护,加强对LPS、PLA：的针对性干预,抑制LPS、PLA2的高表达,有可能减少颅脑损伤后心肌细胞功能损害的发生。     

左卡尼汀在严重烧伤休克心应用的研究

目的：观察左卡尼汀注射液对严重烧伤患者“休克心”的疗效。方法：严格按照临床科研方法设计前瞻性试验方案，将笔者单位符合入选标准的20例严重烧伤患者按完全随机化方法分为给药组和对照组，每组10例。患者入院后均在常规复苏补液的基础上另建1条静脉通道，治疗组予左卡尼汀3g加入5％葡萄糖溶液250ml中静脉滴注，每日1次。对照组予常规治疗，具体包括：维生素C150mg／kg加入5％葡萄糖250ml中静脉滴注，每日1次，口服维生素E50mg／d，每日1次，口服泛癸利酮（辅酶Q10）10mg，每日3次。两组疗程均为14d。于伤后12h和1，2，3，4，5d抽取两组患者股静脉血，检测血清心肌型肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、心肌肌钙蛋白I（eTnI）的含量。并于滴注前及滴注后1，2，3，5，7d同法抽血检测两组患者的肝、肾功能及凝血功能指标。结果：伤后12h给药组、对照组患者血清中CK—MB，LDH，cTnI含量均达峰值，分别为52±20U／L，5．9±1．3μmol·s^-1·L^-1，（0．274±0．231）g／L和（91±31）L／L，（8．5±1．8）μmol·s^-1·L^-1，（0．584±0．192）μg／L，随治疗时间推移呈逐渐下降趋势。但给药组与对照组比较，各项指标在伤后2d或3d内下降更显著（P〈0．05）。结论：严重烧伤患者早期应用左卡尼汀注射液可有效地防治“休克心”损害，对心肌细胞起到一定的保护作用。     

心脏直视手术后血清CK,AST和LDH及其同工酶的变化

研究心脏直视手术后血清肌酸激酶，丙氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶及其它们同工酶的变化及临床意义。方法：３２例患者分为３组：１．心脏闭式手术组；２．经心室切口心脏直视手术组；３．经心脏切口心脏直视手术组。术前，术后６，１２，２４，４８，７２ｈ测定患者ＣＫ，ＡＳＴ和ＬＤＨ及其同工酶ＣＫ－ＭＢ，ＡＳＴｍ，ＬＤＨ２１和ＬＤＨ２。     

血清肌酸激酶同工酶MM（CK—MM）亚带动态测定诊断急性心肌梗塞

本文观察了12例急性心肌梗塞(AMI)患者血清CK,CK-MB,CK-MM及亚带的动态变化。结果表明:血清CK-MM亚带MM_3/MM_1比值在梗塞发生后2h内即出现异常(P<0.05),平均3.5h开始升高,幅度为基础值的9—33倍,约10h达峰值,早于CK和CK-MB。血清MM_3峰值与CK,CK-MB和CK-MM峰值及相应累积释放(∫_0~Tf(t)·d_t)均呈显著正相关(P<0.01)。另外还比较了各同I酶Ka和Kd值大小,表明MM_3和CK-MB最大,MM_1最小。这提示血清CK-MM亚带MM_3/MM_1比值是AMI早期诊断的最敏感指标,动态测定CK-MM亚带亦有助于估计AMI的预后和了解心肌酶的释放情况。     

白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶检测结合对急性心肌梗死的早期诊断价值

目的　观察白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶 (CK MB)检测相结合对急性心肌梗死的早期诊断价值。方法　前瞻性研究因胸痛而就诊的病例 6 2 5例 ,观测心电图变化及血液肌酸磷酸激酶及其同工酶 ,白细胞总数及分类 ,肌钙蛋白T等的变化 ,最后统计并比较各指标尤其是白细胞分类并肌酸磷酸激酶同工酶对急性心肌梗死的早期诊断价值。结果　急性心肌梗死胸痛发生后 1 2h内相对淋巴细胞减少的敏感性最高 (6 1 3% ) ;肌酸磷酸激酶同工酶并白细胞分类对急性心肌梗死诊断的特异性和诊断有效性 ,与心电图有诊断意义的ST段抬高相近 ,而敏感性明显高于后者 (4 6 8%vs 38 7% ,P <0 0 5 )。结论　肌酸磷酸激酶同工酶与白细胞分类两个指标相结合 ,敏感性和特异性均较高 ,对急性心肌梗死的早期诊断有较大的临床价值     

双重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分

目的　建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法。方法　针对转基因大豆基因组中被导入的 35 S启动子、NOS终止子和 CP4 - EPSPS抗草甘膦基因等外源基因 ,自行设计了两对引物 ,采用双重 PCR同时扩增上述基因 ,用 8g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质 ,在 5 0 cm× 10 0μm i.d.涂壁毛细管中 ,于 - 10 k V电压下用激光诱导荧光 -毛细管电泳检测转基因大豆的 PCR扩增产物。结果　在优化的 PCR反应和毛细管电泳条件下 ,本法可以同时检测出转基因大豆样品中三种外源基因 ,双重 PCR扩增产物经测序证实与原基因序列完全一致 ,表明本研究设计的引物合理 ,扩增结果可靠。毛细管电泳进样量仅需 5 nl,分析时间为 2 4 min,迁移时间的相对标准偏差≤ 3.2 %。结论　本方法较常规琼脂糖凝胶电泳特异性高 ,分析时间短 ,重现性好 ,检测灵敏 ,适合于大豆中转基因成分的快速检测     

布比卡因与国产罗派卡因用于腋路阻滞的cTnI及心肌酶变化

目的：探讨布比卡因与国产罗哌卡因用于腋路臂丛阻滞对心脏的毒性作用。方法选择择期上肢手术患者60例,A-SAI～Ⅱ级.随机分为罗哌卡因组（R组）及布比卡因组（B组）各30例,分别于麻醉前、麻醉后30 min,麻醉后2 h抽取静脉血3 mL,测定血清心肌肌钙蛋白cTnI及心肌酶学的变化。结果 R组在麻醉前的cTnI 、CK-MB 、CK值分别为（0.062±0.018）ug/L、（6.340±1.723）U/L、（44.000±12.000）U/L,B组在麻醉前的cTnI、CK-MB、CK值分别为（0.073±0.034）ug/L、（6.876±2.357）U/L、（48.000±14.000）U/L。比较两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。R组在麻醉后30 min的cTnI 、CK-MB 、CK值分别为（3.482±1.892）ug/L、（32.684±9.842）U/L、（314.00±47.000）U/L,B组在麻醉后30 min的cTnI 、CK-MB 、CK值分别为（6.842±2.147） ug/L、（46.960±8.792）U/L、（429.00±50.000）U/L。比较两组间差异有统计学意义（P＜0.05）。R组在麻醉后2 h的cTnI、CK-MB、CK值分别为（5.546±0.032）ug/L、（38.724±8.686）U/L、（378.00±45.000）U/L,B组在麻醉后2 h的cTnI 、CK-MB 、CK值分别为（9.278±0.065）ug/L、（57.789±9.240）U/L、（466.00±47.000）U/L。比较两组间差异有统计学意义（P＜0.05）。麻醉前比较过两组患者相应指标差异无统计学意义（P＞0.05）,麻醉后两组患者相应指标均较麻醉前有所提高,B组较R组相应指标增高显著,比较两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论罗哌卡因及布比卡因臂丛阻滞后均出现cTnI及心肌酶增高,两药均有抑制心肌影响,但国产罗哌卡因对心脏毒性小于布比卡因,可安全用于臂丛腋路阻滞。     

进行性肌营养不良症及运动神经元疾病的血清CK及其同工酶MB测定的诊断意义

对进行性肌营养不良症(PMD)71例、运动神经元病(MND)35例及假肥大型PMD基因携带者22例共128例进行了血清CK及其同工酶MB活性的测定。以正常人215名作为CK对照组,另20名作为MB活性对照组。CK用肌酸显色法测定,MB活性用定量柱层析法测定。不论何型PMD或MND之CK含量均显著高于对照组。CK含量之增多以假肥大型PMD最甚,肢带型及面肩肱型次之,MND再次之。但各型PMD或MND之CK个体值离散程度大,交叉重叠多,故单凭CK值不能区分PMD或AND的各种类型。各型PMD或MND的MB个体值离散程度小,尤其假肥大型PMD的MB值增多最显著,特异性极强,为诊断假肥大型PMD最具特征性的指标,其他两型PMD及两型MND则否,故无鉴别意义。对22例假肥大型PMD携带者CK与MB测定的结果表明似仍以CK值较为灵敏。对假肥大型PMD患者血清中MB的来源作了讨论。