干化学与赖氏两种检测ALT方法直线回归方程的建立

为了探讨干化学法和赖氏法检测 AL T两者之间的关系 ,作者通过检测不同 AL T标本 ,利用 Excel进行快速回归分析 ,建立了直线回归方程 ,赖氏法 AL T2 5卡门单位的临界值相当于干化学法的 4 3U/ L,这为街头用干化学法初筛 AL T的判断标准 ,提供可靠依据 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　无偿献血者 AL T不同值的血液标本 16份。1.2　试剂和仪器　 Reflotron快速全血生化分析仪及试纸条(德国 BM公司 ) ;AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan集团 ) ;BEP 全自动酶标分析系统 (德国 Beh…     

用圆形分布法分析献血者ALT阳性率的季节规律

对无偿献血 AL T阳性血液进行统计分析 ,探讨 AL T的阳性率季节分布规律 ,以便使医务人员和无偿献血者都能及时采取措施进行预防 ,以降低 AL T的阳性率 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 1999- 0 1～ 2 0 0 2 - 12无偿献血者每个月 AL T阳性数及其阳性率。1.2　方法　 1AL T赖氏法试剂 (上海生物制品研究所 ) ;AL T速率法试剂 (北京澳斯邦公司 ) ;TECAN 2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan公司 ) ;BEP (德国 Behring公司 ) ;96孔微孔平底板(丹麦 Nucun) ;AT样本处理机 (瑞士 Hamilton公司 ) ;HT 恒温酶标仪 (奥地利 Anthos…     

自动化酶免分析系统对ALT含量的检测分析

对献血者丙氨酸氨基转移酶 (AL T)的检测 ,对于可处于肝炎病毒感染的窗口期患者具有一定意义 [1 ]。传统的赖氏法检测(AL T)多在试管中进行反应 ,虽然结果可靠 [2 ] ,但完全由手工操作 ,繁琐费时。笔者将赖氏法检测 AL T引入到自动化酶免分析系统中 ,把手工操作变为自动化 ,结果可靠 ,工作效率高。1　对象和方法1.1　对象　郑州市无偿献血者。AL T试剂 ,上海生物研究所提供 ;RSP2 0 0全自动加样器 ,瑞士 TECAN公司产 ;BEP 自动化检测系统 ,德国 Berhing公司产 ;HT3酶标仪 ,奥地利 Anthos公司产 ;96微孔平底板 ,丹麦 Nunc公司产 …     

干化学试纸条法快速初筛献血者ALT漏检原因分析

干化学试纸条法检测丙氨酸氨基转移酶 (简称 AL T)具有简便、快速、可单份操作的优点 ,适合就诊者急诊检验的需求 ,尤其适合流动采血点为献血者现场采血前检测 AL T,这样可减少血液报废 ,但在使用干化学试纸条检测 AL T的过程中 ,也出现 AL T阳性漏检的现象 ,作者对漏检的原因进行分析 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　郑州地区无偿献血者。1.2　试剂和仪器　试纸条和小型 Reflotron生化分析仪 (均有德国罗氏公司提供 ) ,PSP全自动加样仪 (瑞士蒂肯公司 )。AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;BEP 全自动酶免分析仪 (…     

改良赖氏法测定谷丙转氨酯的标准曲线拟合

改良赖氏法测定谷丙转氨酶 (以下简称 AL T)活力时 ,标准曲线不呈直线 ,随着酶活力的增大 ,曲线斜度逐渐趋于平坦 ,测定结果准确性相应减少 ,在 1～ 2 0 0 u只能大致反映酶活力的大小 ,超过 2 0 0 u时 ,曲线已很平坦 ,需将标本稀释后再行测定。用丙酮酸钠标准液按改良赖氏法做标准系列测 OD值 ,作y=a+bx、y=a+bex、y=10 a+ bx三种曲线拟合 ,从中优选相关性最显著 ,剩余平方和最小的方程为最佳标准曲线 ,以之确定标本的 AL T单位 ,可提高检测结果准确性。1　材料和方法1.1　材料　试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产。 1丙酮酸钠标准液 …     

丙酮酸在微板赖氏法测定ALT酶活力中的应用

丙酮酸在丙氨酸氨基转氨酶 ( ALT)的测定中 ,主要用于绘制标准曲线 (赖氏法 )。测定 ALT的方法有速率法和赖氏法等。赖氏法又分为试管法和微板法两种 ,试管法费工、费时 ,不利于计算机对原始数据的网络化管理 ,而速率法受温度影响较大 ,为此 ,笔者在微板赖氏法中 ,利用丙酮酸为标准液 ,进行 ALT检测 ,并与试管法与速率法比较 ,现介绍如下。材料与方法1　仪器　 TECAN GENESIS RSP1 5 0全自动加样系统 (奥地利产 ) ,TECAN SPECTRA温控酶标仪 (奥地利产 ) ,Heidolph温控震荡器 (德国产 ) ,96孔微孔平底板 (天津开元公司提供 )…     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式     

2000～2002年周口市无偿献血者输血传染病标志物检测结果分析

从计划献血到自愿无偿献血是保证血液质量和输血安全的关键 ,为了解本地无偿献血的基本情况 ,笔者对 2 0 0 0～ 2 0 0 2年无偿献血者血液标本的检测结果进行分析 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年度 ,周口市参加无偿献血者 35 195人次 ,年龄 18～ 5 5岁。1.2　仪器　 L absystems MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪(芬兰产 )。1.3　方法　 HBs Ag抗 - HCV、抗 - HIV检测均采用 EL ISA法 ,梅毒采用 TRUST和 EL ISA法 ,AL T采用赖氏法 (试剂分别由洛阳华美 ,河南理利 ,上海生物制品研究所提供 )批批检合…     

周口地区无偿献血者肝炎血清学调查

为了解周口地区无偿献血者的肝炎血清学的分布情况 ,提高血液质量 ,保证临床输血安全 ,更好地贯彻执行《中华人民共和国献血法》,笔者对 2 0 0 0～ 2 0 0 2年的无偿献血者进行了肝炎血清学的调查统计 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年本地区无偿献血者共 35 70 7人份。1.2　仪器　 L absytems MK2洗板机 ,Well Scan MK3酶标仪(芬兰 )。1.3　方法　 HBs Ag、抗 - HCV检测均采用 EL ISA法 ,AL T采用赖氏法 (试剂分别由洛阳华美 ,河南理利 ,上海生物制品研究所提供 )批批检合格 ,均在有效期内使用 ,实验严…     

肝缺血-再灌注损伤中脂质过氧化反应及左旋精氨酸的干预作用

目的 :探讨脂质过氧化反应在肝缺血再灌注损伤中的作用及左旋精氨酸对其的影响。方法 :实验兔和肝癌手术患者均随机分为肝缺血再灌注组 (n=10 )和肝缺血再灌注 +左旋精氨酸治疗组 (n=10 ) ;分别取缺血前、缺血 4 5 min(兔 )或 2 5 min(患者 )和再灌注 4 5 m in(兔 )或 2 5 m in(患者 )共 3个时间点 ,用硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛 (MDA) ,赖氏法检测丙氨酸转氨酶 (AL T)。结果 :肝缺血再灌注期间 ,实验兔和肿瘤手术患者血浆 MDA和 AL T均明显升高 ,尤以再灌注 4 5 m in(兔 )或 2 5 min(患者 )为著 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。左旋精氨酸可逆转上述指标 ,缺血时兔 MDA虽降低 ,但 P>0 .0 5 ;AL T,P<0 .0 5 ;患者 MDA和 AL T均 P<0 .0 1。再灌注时兔 MDA和 AL T均 P<0 .0 1;患者 MDA和 AL T也均 P<0 .0 1。结论 :脂质过氧化反应在肝缺血再灌注损伤发生、发展中起重要的作用 ,左旋精氨酸通过拮抗脂质过氧化反应而减轻肝缺血再灌注损伤。     

某校新生健康乙肝病毒HBVM检出结果分析

为了解新生健康携带乙肝病毒者的有关病毒免疫指标 ,我们对某校 2 0 0 2年秋季入学的 1374名地方新生进行体格复查时检测了乙型肝炎病毒表面抗原 (HBs Ag) ,对 HBs Ag阳性者检测了乙型肝炎病毒五项指标 (HBVM) ,现将检出结果分析报告如下。1　对象和方法1.1　对象　为 2 0 0 2年秋季入学的 1374名地方新生 ,其中男5 84名 ,女 790名 ,检查项目包括肝功能、AL T、HBs Ag,对 HB-s Ag阳性者做 HBVM检测。1.2　方法　采用改良赖氏法检测肝功能、AL T;血清 HBV血清标志物检测采用 EL ISA方法 ,试剂盒系上海实业科华生物技术有限公司…     

修正计算系数速率法微量快速测定ALT

血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的测定是保证输血安全的重要手段之一。酮体粉快速测定法由于只能作为半定量方式而少为应用[1];而赖氏法操作繁琐,耗时较长;微量速率法测定ALT已有报道[2],但需每次制作标准曲线,不适合常规批量操作。本文参考生化分析仪原理,应用定值血清即刻修正计算系数,微量快速测定,经在血液检测中应用,效果甚佳。1材料与方法1．1实验仪器瑞士TECANMegflex－ID智能加样仪;SLT温控酶标仪（经质控板校正）;OLYMPUSAUS800全自动生化分析仪;美国96孔平底微孔板。1．2实验试剂ALT基质液（参考IFCC…     

HBV感染与ALT异常结果的相关性分析

为了解乙型肝炎病毒 ( HBV)感染和谷丙转氨酶 ( AL T)异常结果的关系 ,本文对 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 1年 6月期间 ,在我院门诊及住院患者中同时检测乙肝病毒表面抗原 ( HBs Ag)和 AL T者 5 5 86例的结果进行分析。并对 HBs Ag阳性者进一步做 HBV血清学标志物 ( HBV- M)即乙肝“两对半”的检测及结果分析。1　试剂及方法HBs Ag和 HBV- M的检测均采用酶联免疫法 ( EL ISA) ,试剂来源于上海实业科华生物技术有限公司。AL T检测采用赖氏法 ,试剂按《全国临床检验操作规程》[1 ]配制。2　结　果 (见表 1、2 )表 1　 5 5 86例受检…     

全自动加样器作微板赖氏法ALT检测加样参数的选择

血站自动化检测仪器,可以自动化加样、孵育、读板,极大降低了检验者劳动强度.本站对ALT采用微板赖氏法检测,用TECAN加样,后续由 BEPⅢ孵育、加2,4-二硝基苯肼、加NaOH、读板.TECAN加血样准确,但在加ALT丙酮酸标准品(简称标准品)时,标准品OD值仪器比手工偏低.为此,笔者在TECAN加样编程上进行了一系列实验,找到了仪器最佳加样参数,手工和仪器加标准品无显著差异,现报告如下.     

用MK3酶标仪绘制ALT标准曲线

笔者将MK3酶标仪曲线定量功能,运用到改良赖氏法检测献血者ALT绘制标准曲线工作中,现介绍如下。1材料与方法1.1材料雷勃MK3酶标仪,96孔平底微孔板,赖氏法试剂盒(下面以北化康泰试剂盒为例)。1.2标准管的配制按试剂盒说明书在试管中作出标准曲线管(表1)。将各管置于37℃水浴箱内温育5min,加入2.4-二硝基苯肼100μl,置于37℃水浴箱内温育20min,加NaOH0.4mmol/L2ml室温放置10min后,在酶标仪520nm处比色,以蒸馏水调零,测各管吸光度。将蒸馏水、标准管的液体用微量加样器加200μl到平底微孔板孔中,A1孔中加蒸馏水,“1”管加入A2中,“2”号…     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的　用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活性 ,并对其可行性及适用性进行研究。方法　用赖氏法和丙酮酸氧化酶法 (酶标板法和试管法 )分别测定不同ALT值的血浆标本 ,并对结果进行统计分析。结果　 96孔酶标板法具有较好的精密度 ;线性范围达 135卡门氏单位 ;与赖氏法结果比较 ,可将 5 8份阳性标本全部检出 ,无阳性漏检。但酶标板法结果存在假阳性 (假阳性率为 0 .2 5 %) ,使用试管法进行复检后 ,结果与赖氏法完全一致。结论　使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查 ,该方法具有快速、简便的优点 ,特别适用于标本量大手工操作的实验室。检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示 ,可以代替赖氏法。     

献血者筛查ALT活性标准研究分析

目的　探讨分析ALT活性作为献血者检测标准及其参考区间。方法　选择从未受血和HBV、HCV标志物均为阴性的 2 84 9名健康人和献血者作为研究对象 ,采用连续监测技术测定其血清ALT活性 ,又在其中随机选取 6 85名以赖氏法测定ALT活性。结果　血清ALT的测定值在各年龄组无显著性差异 ;男性ALT活性明显高于女性 ,具有明显的统计学差异 (连续监测法 :Ρ<0 .0 0 1 ;赖氏法 :Ρ<0 .0 5 )。ALT活性连续监测法测定 x± 2s上限为 5 3 4 9U/L , x± 3s限为 6 6 .5 9U/L ;ALT活性赖氏法测定 x± 2s上限为 2 4 96U , x± 3s上限为 38 89U。结论　参照赖氏法参考区间 ,ALT连续监测法参考区间上限应该为 5 3.4 9U/L。     

厦门市无偿献血者ALT检测结果分析

丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)是临床诊断肝功能指标之一,同时也是血站基本标准中献血者健康检查的必检项目之一.目前各地血站ALT检测大多采用赖氏法,在部分引进全自动加样分析仪及恒温酶标仪的实验室,也有采用微板法检测[1],对献血者ALT检测的可行性及意义时有报道[2].本站引进自动生化分析仪用连续监测法作ALT检测,同时用赖氏法复检,笔者对2种方法检测的结果进行了分析比较.     

急性白血病细胞端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA的表达及意义

为研究原代急性白血病 (AL)骨髓单个核细胞 (MNCs)端粒酶逆转录酶 (hTERT)mRNA表达及其意义 ,采用半定量RT PCR方法检测骨髓MNCshTERTmRNA表达 ,用TRAP PCR ELISA法检测骨髓MNCs端粒酶活性。结果发现 :30例初发AL患者骨髓MNCshTERTmRNA表达量 (0 .71± 0 .34)明显高于 12例AL获CR的患者 (0 .4 3± 0 .2 5 )及 6例正常志愿者 (0 .2 2± 0 .2 1)。 30例初发AL患者骨髓MNCs端粒酶活性 (0 .2 35± 0 .395 )明显高于 12例AL获CR的患者 (0 .0 12± 0 .0 15 )。初发AL患者骨髓MNCshTERTmRNA表达量与端粒酶活性呈正相关 (r=0 .4 2 1,P <0 .0 1)。初发AL患者骨髓液常规涂片中原始细胞百分率与骨髓MNCs的hTERTmRNA表达量和端粒酶活性均呈正相关 (r =0 .4 5 7,P<0 .0 5和r =0 .4 11,P <0 .0 5 )。结论 :初发AL患者骨髓MNCs的hTERTmRNA表达与端粒酶活性相关。推测hTERTmRNA表达可能代表白血病细胞的一种高增殖状态。     

iQTM 200全自动尿沉渣定量分析仪的临床应用与评价

目的 评价iQ^TM200全自动尿沉渣定量分析仪的性能及临床应用价值。方法 我们对仪器的精密度、携带污染率、线性等指标进行了评价,并随机选择370例患者尿标本,分别用iQ^TM200全自动尿沉渣定量分析仪及手工定量尿沉渣镜检法对红细胞、白细胞进行比对分析。结果仪器的批间精密度分高值、中值、低值3个水平进行测定,分别为7．1％、2．8％、7．3％;批内精密度红细胞变异系数(CV)为5．5％、白细胞CV为4．0％;红细胞、白细胞携带污染率分别为0％～1．23％、0．13%～1．08％;线性评价：红细胞、白细胞在0～2000μl内相关系数分别为0．997、0．999。iQ^TM200全自动尿沉渣定量分析仪与手工定量尿沉渣镜检法相对灵敏度分别为89．5％、84．6％。结论 iQ^TM200全自动尿沉渣定量分析仪可用于临床进行尿沉渣的定量分析,以替代繁琐的手工定量尿沉渣镜检。