脂肪细胞因子内脂素的研究进展

长期以来，脂肪组织一直被认为是仅供能量储备的终末分化器官。然而自1994年瘦素的发现以及脂肪因子研究的深入，脂肪组织旺盛的内分泌功能亦逐渐为人们所认识。脂肪组织不仅是机体能量储存器官，而且也是一个内分泌器官，分泌的细胞因子和激素在肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病（DM）发病机制中的作用越来越受到重视。     

单纯性肥胖青少年血清内脂素水平及其与年龄和高密度脂蛋白胆固醇的关系

目的 检测单纯性肥胖及正常青少年血清内脂素水平,探讨其与年龄、体重指数(BMI)、脂联素、瘦素、血脂、血糖及胰岛素水平的关系.方法 研究对象共148名,其中单纯性肥胖症青少年72例,正常对照76名.采用放射免疫分析法、酶法测定两组青少年的空腹血清内脂素、脂联素、瘦素、睾酮、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等.肥胖组青少年均做口服葡萄糖耐量试验(OGTF),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)和早期胰岛素分泌指数(EISI).结果 肥胖组血清内脂素水平显著高于正常对照组[(37.65±18.28 vs 29.35±12.10) μg/L,P<0.01].正常对照组血清内脂素水平与人体测量指数及脂质参数之间无任何相关性,而肥胖组血清内脂素与年龄、EISI和Tanner分期呈负相关,与血清HDL-C水平呈正相关.并且在校正年龄、性别、体重指数后,内脂素水平与年龄及HDL-C水平仍然呈显著相关(g<0.05).结论 在中国青少年人群中,血清内脂素随年龄增长而下降,且可能参与体内HDL-C代谢的调控.     

高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因XspI位点多态性与内脂素的相关性

目的探索高胆固醇血症低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因Xsp I位点多态性与内脂素的相关性。方法应用聚合酶链技术-限制性片段长度多态性技术检测LDL-R基因第2外显子Xsp I位点基因多态性,将224例高胆固醇血症患者按照基因型分为三组:X+X+组;X+X-组;X-X-组。同时应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清内脂素的水平。结果 1高胆固醇血症组与正常对照组相比,腰围、体重指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),氧化低密度脂蛋白(ox LDL)、内脂素明显升高(P0.05)。2X+X+组体重、腰围、BMI、LDL、ox LDL较X-X-组和X+X-组明显升高(P0.05)。3血清内脂素水平在X-X-组、X+X-组、X+X+组中依次升高(P0.05)。4血清内脂素与体重、腰围、BMI、总胆固醇(TC)、LDL-C、oxLDL呈正相关(r分别为0.226、0.277、0.272、0.332、0.348、0.372,P0.05)。结论 1高胆固醇血症组较正常对照组体重、腰围、BMI、ox LDL、内脂素升高。2LDL-R基因Xsp I X+X+基因型组体重、腰围、BMI均高于X-X-组和X-X+组。3血清内脂素水平与LDL-R基因多态性有关,X+X+组内脂素水平最高。4内脂素与血清TC、LDL-C、ox LDL水平呈正相关。     

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素表达的影响

目的观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素（visfatin）表达的影响和探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的机制。方法采用RT—PCR法检测不同浓度小檗碱和不同作用时间后，3T3-L1脂肪细胞内脂素mRNA的表达，并以Western印迹方法检测其蛋白水平的表达。结果0～10μmol／L小檗碱剂量依赖性地增加内脂素mRNA的表达，其中10μmol／L时最明显，是空白对照组的4．96倍，其后随着小檗碱浓度的进一步增加，内脂素mRNA的表达反而降低；10μmol／L的小檗碱作用3h后内脂素mRNA的表达开始明显增强，至作用12h时表达增强最明显，是基础组的4．57倍，随着作用时间的延长内脂素mRNA的表达虽然有所下降，但到48h时内脂素mRNA的表达仍比空白对照组明显增高；5、10、20μmol／L的小檗碱均可使内脂素蛋白的表达增加1．13、2．46、2．34倍，与空白对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论在一定浓度范围内小檗碱可剂量和时间依赖性地促进离体脂肪细胞内脂素mRNA及蛋白表达。小檗碱对内脂素表达的调节作用可能是其改善机体胰岛素抵抗、降低血糖的机制之一。     

维吾尔族肥胖患者脂肪和血清内脂素、脂联素的改变及相关因素

目的 探讨维吾尔族肥胖患者内脂素、脂联素(APN)在腹部网膜、皮下脂肪组织的表达和血清水平改变及其与体重指数(BMI)、腰臀围比(WHR)和血脂的关系.方法 用半定量RT-PCR方法检测41例肥胖患者和20例非肥胖对照脂肪组织内脂素和APN mRNA表达水平,ELISA法检测血清内脂素和APN浓度,并测量腰围(WC)、臀围(HC)、血压(BP)、空腹血糖(FPG)和血脂等.结果 ① 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平在肥胖组与非肥胖对照组之间差异无显著性,肥胖组APN mRNA表达水平显著低于非肥胖对照组(P<0.05);内脂素、APN在两组网膜和皮下脂肪组织mRNA的表达水平均无显著性部位差异;血清内脂素肥胖组显著高于非肥胖对照组(P<0.05),APN在两组之间比较差异无显著性.② 肥胖组舒张压(DBP)和收缩压(SBP)均显著高于非肥胖对照组(P<0.01和P<0.01),高密度脂蛋白(HDL-C)明显低于非肥胖对照组(P<0.05).③ 网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与血清内脂素、BMI和TG显著正相关,APN mRNA表达量与血清APN显著正相关,与BMI、LDL-C显著负相关.结论 维吾尔族肥胖患者血清内脂素水平升高,网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平无显著性部位差异;APN mRNA在网膜脂肪组织的表达显著降低,内脂素和脂联素可能在维吾尔人中心性肥胖相关的代谢紊乱性疾病中起一定作用.     

阿托伐他汀对高胆固醇血症兔脂肪细胞分泌C反应蛋白的影响及其机制

目的 探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症兔脂肪细胞分泌C反应蛋白的影响及其机制.方法 采用高胆固醇饮食法建立高胆固醇血症兔模型后,随机给予阿托伐他汀或淀粉1.5 mg/(kg·d).2周后取皮下脂肪组织进行脂肪细胞培养.采用乳胶颗粒增强免疫透射比浊法检测血清和脂肪细胞培养上清液中C反应蛋白的水平.并采用半定量逆转录聚合酶链反应检测脂肪细胞过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达.结果 阿托伐他汀显著降低高胆固醇血症兔血清C反应蛋白水平. 血清C反应蛋白水平与血低密度脂蛋白胆固醇水平 (r=0.890, P<0.001)和脂肪细胞上清液中C反应蛋白水平相关(r=0.688, P＝0.007).脂肪细胞培养上清液中C反应蛋白水平与其过氧化体酶增殖物激活型受体γ mRNA的表达负相关(r=-0.857,P<0.001),与血低密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关(r=0.869, P<0.001).结论 高胆固醇血症可诱发脂肪细胞炎症反应、分泌C反应蛋白.阿托伐他汀可降低血清C反应蛋白和脂肪细胞分泌C反应蛋白水平,该效应与其降低胆固醇和上调脂肪细胞过氧化体增殖物激活型受体γ表达有关.     

内脂素与冠心病

内脂素是一种新的脂肪因子,主要来源于内脏脂肪,具有类胰岛素样作用。近年来的许多研究发现,内脂素与缺氧、易损斑块、内皮功能紊乱、炎症、血管增生等冠心病,尤其动脉粥样硬化的发生和发展过程相关。此外,内脂素还能通过延长氧化应激状态下线粒体渗透转运孔（mPTP）的开放时间,发挥一定的心血管保护作用。     

姜黄素在内脂素诱导内皮细胞炎症损伤中的作用机制

目的观察姜黄素(Cur)对内脂素(visfatin)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症损伤过程的影响,探讨Cur改善内皮功能的信号传导机制。方法将HUVECs随机分组,根据前期实验结果,给予1×10~(-5)mol/L的visfatin进行诱导,加入Cur后MTT法检测内皮细胞活力变化。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、E选择素(E-selectin)的含量变化,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞黏附分子-1(ICAM-1)、需肌醇激酶/核酸内切酶1(IRE1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达。结果 MTT检测结果表明,正常HUVECs加入Cur后,不影响内皮细胞活力;而与正常对照组相比,给予1×10~(-5)mol/L visfatin处理后,MCP-1和E-selectin含量明显增加,ICAM-1、IRE1及GRP78的表达增加,差异有统计学意义(P0.05)。与visfatin组相比,给予不同浓度Cur处理后,可显著降低MCP-1和E-selectin的含量,同时ICAM-1、IRE1及GRP78的表达也显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论Cur可能通过抑制内质网应激(ESR)来拮抗visfatin诱导HUVECs炎症损伤。     

内脂素与冠心病

内脂素是一种新的脂肪因子,主要来源于内脏脂肪,具有类胰岛素样作用。近年来的许多研究发现,内脂素与缺氧、易损斑块、内皮功能紊乱、炎症、血管增生等冠心病,尤其动脉粥样硬化的发生和发展过程相关。此外,内脂素还能通过延长氧化应激状态下线粒体渗透转运孔（mPTP）的开放时间,发挥一定的心血管保护作用。     

内脂素与心血管病关系的研究进展

内脂素是近年来新发现的一种脂肪细胞因子。广泛存在于人、动物和细菌体内。国内外研究发现,内脂素与动脉粥样硬化斑块形成、炎症状态、血管内皮功能损伤等密切相关。其在心血管病、糖尿病、肥胖、高血压等其他疾病中有重大影响。内脂素与心血管病的关系现已成为研究热点,且可能在心血管病的预测、诊断和判断预后等方面起重要作用。     

Trimethylamine N-oxide attenuates high-fat high-cholesterol dietinduced steatohepatitis by reducing hepatic cholesterol overload in rats

BACKGROUND Trimethylamine N-oxide (TMAO) has been shown to be involved in cardiovascular disease (CVD). However, its role in nonalcoholic steatohepatitis (NASH) is unknown. AIM To determine the effect of TMAO on the progression of NASH. METHODS A rat model was induced by 16-wk high-fat high-cholesterol (HFHC) diet feeding and TMAO was administrated by daily oral gavage for 8 wk. RESULTS Oral TMAO intervention attenuated HFHC diet-induced steatohepatitis in rats. Histological evaluation showed that TMAO treatment significantly alleviated lobular inflammation and hepatocyte ballooning in the livers of rats fed a HFHC diet. Serum levels of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase were also decreased by TMAO treatment. Moreover, hepatic endoplasmic reticulum (ER) stress and cell death were mitigated in HFHC diet-fed TMAOtreated rats. Hepatic and serum levels of cholesterol were both decreased by TMAO treatment in rats fed a HFHC diet. Furthermore, the expression levels of intestinal cholesterol transporters were detected. Interestingly, cholesterol influxrelated Niemann-Pick C1-like 1 was downregulated and cholesterol efflux-related ABCG5/8 were upregulated by TMAO treatment in the small intestine. Gut microbiota analysis showed that TMAO could alter the gut microbial profile and restore the diversity of gut flora. CONCLUSION These data suggest that TMAO may modulate the gut microbiota, inhibit intestinal cholesterol absorption, and ameliorate hepatic ER stress and cell death under cholesterol overload, thereby attenuating HFHC diet-induced steatohepatitis in rats. Further studies are needed to evaluate the influence on CVD and define the safe does of TMAO treatment.     

脂肪细胞胆固醇代谢及其病理生理意义

脂肪组织是体内最大的游离胆固醇储存池,而且对血循环胆固醇代谢起缓冲作用。脂肪细胞胆固醇代谢与其对甘油三酯的储存密切相关,胆固醇可能作为感应脂肪细胞能量储存状态的细胞内信号分子,参与介导肥大脂肪细胞所出现的一些代谢功能异常。     

氧化型低密度脂蛋白诱导分子伴侣GRP78在3T3-L1脂肪细胞中的表达

目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导3T3-L1脂肪细胞内质网应激相关分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达,探讨ox-LDL对脂肪细胞内质网应激的诱导作用。方法体外培养3T3-L1脂肪细胞,分别给予不同浓度ox-LDL(50,100,200μg/ml)及内质网应激阳性对照诱导剂衣霉素(Tun)处理。用RT-PCR检测GRP78 mRNA的表达,筛选出最佳干预浓度,用最佳浓度的ox-LDL分别干预脂肪细胞6、12、24 h,分别用RT-PCR、Western印迹法检测GRP78 mRNA、蛋白表达情况。结果 ox-LDL呈浓度依赖方式诱导脂肪细胞GRP78表达,其表达强度随时间延长而增强,24 h达高峰(P<0.05)。结论 ox-LDL可诱导3T3-L1脂肪细胞发生内质网应激,促使未折叠蛋白反应信号通路的分子伴侣表达增加。     

烟酸对高脂血症兔脂肪细胞胆固醇流出和肝X受体表达的影响

目的探讨烟酸对高脂血症兔脂肪细胞胆固醇流出和肝X受体（LXR）α、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γmRNA表达的影响。方法选取12只健康雄性新西兰兔给予高胆固醇饲料培养8周,建立高胆固醇兔模型后,随机分为高胆固醇组（继续饲以高胆固醇饲料6周,n=6）,烟酸治疗组（在饲以高胆固醇饲料的基础上给予烟酸缓释剂0．2g·kg^-1·d^-1,共6周,n=6）,另选普通饮食14周雄性新西兰兔（n=6）作为对照组。实验结束后,取皮下脂肪行脂肪细胞培养,用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,运用逆转录聚合酶链反应检测LXRα mRNA的表达。此外,在体外观察不同浓度的烟酸缓释剂（0．25、0．5、1、2mmol／L）对健康雄性新西兰兔脂肪细胞LXRα、PPARγ mRNA的影响。结果高胆固醇组脂肪细胞胆固醇流出率（5．94±1．26）％明显低于正常对照组（12．68±1．31）％,烟酸治疗组脂肪细胞胆固醇流出升高明显（16．39±3．32）％,3组间比较差异有统计学意义。逆转录聚合酶链反应显示烟酸治疗组较高胆固醇组LXRα mRNA表达高,与胆固醇流出率呈正相关。体外实验亦显示,烟酸缓释剂呈浓度依赖性升高脂肪细胞LXRα、PPARγ mRNA的表达。结论烟酸增加高脂血症兔脂肪细胞LXRα mRNA的表达及细胞内胆固醇流出。     

氧化应激对脂肪细胞脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达的影响

目的 探讨氧化应激对于脂肪细胞因子脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达和分泌的影响.方法 体外培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,并诱导其分化成熟.通过在高糖培养基中加入葡萄糖激酶制作氧化应激模型.分为4个试验组,分为四个试验组,A组:观察不同浓度的葡萄糖激酶对七述脂肪细胞因子的影响;B组:不同浓度的抗氧化应激物N乙酰半胱氨酸(NAC)拮抗氧化应激后,对脂肪细胞因子的作用;C组:NAC作用不同时间对抗氧化应激作用的影响;D组:观察氧化应激伴或不伴拮抗效应对脂肪细胞因子的影响.结果 (1)脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素的表达随着葡萄糖激酶浓度的增加呈现浓度依赖性抑制,其中脂联素和瘦素的这种效应更为明显[葡萄糖激酶浓度25 U/L时,脂联素水平达(6.94±0.07)ng/L,瘦素水平达(0.64±0.11)ng/L,与空白对照组相比,均P<0.01];(2)随着NAC作用持续时间的延长,脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达增加[NAC作用16 h,脂联素水平达(19.22±0.27)ng/L,瘦素水平达(2.95±0.22)ng/L,与空白对照组相比,均P<0.01];(3)在同一葡萄糖激酶浓度下(25 U/L),随着NAC浓度的增加,脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达旱现浓度依赖性增加(与空白对照组相比,NAC 25 mmol/L组脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素t值分别为6.88、6.96、4.52、3.15,均P<0.05);(4)与空白对照组相比,NAC作用组的脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达明显增加,葡萄糖激酶作用组脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达明显减少.结论 氧化应激对于脂肪细胞因子的表达有明显影响,对抗氧化应激可改善这种作用.此作用可能是氧化应激参与胰岛索抵抗和代谢功能紊乱的机制之一.     

The release of the adipocytokine visfatin is regulated by glucose and insulin

Aims/hypothesis The novel insulin-mimetic adipocytokine visfatin has been linked to the metabolic syndrome, but its regulation has not been characterised to date. Since insulin-mimetic actions of visfatin may be part of the feedback regulation of glucose homeostasis, we hypothesised that visfatin concentrations are influenced by glucose or insulin blood levels in humans.Subjects, materials and methods In this randomised, double-blind, placebo-controlled crossover study, nine healthy male subjects (age 26±6 years) attended three different study days. On each day, systemic glucose concentrations of 5.0, 8.3 and 11.1 mmol/l were attained by stepwise increases in i.v. infusions of glucose, representing fasting and postprandial conditions. Visfatin plasma concentrations were studied during concomitant exogenous hyperinsulinaemia, inhibition of endogenous insulin production by somatostatin infusion, and placebo time control. Additionally, human adipocytes were cultured to study visfatin release and mRNA expression in vitro.Results Glucose concentrations of 8.3 and 11.1 mmol/l increased circulating visfatin from baseline concentrations of 0.5±0.0 ng/ml to 0.9±0.1 and 2.1±0.3 ng/ml, respectively (p<0.01). Glucose-induced elevation of visfatin was prevented by co-infusion of insulin or somatostatin (p<0.05). Cultured subcutaneous and visceral adipocytes released an equivalent amount of visfatin upon glucose-concentration- and time-dependent stimulation. Visfatin secretion involved the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase) and protein kinase B (AKT) pathways. The mRNA expression pattern of visfatin was consistent with this altered protein release.Conclusions/interpretation Circulating visfatin concentrations are increased by hyperglycaemia. This effect is suppressed by exogenous hyperinsulinaemia or somatostatin infusion. Glucose signalling for visfatin release in adipocytes involves the PI3-kinase/AKT pathway.     

葡萄糖和胰岛素对3T3-L1脂肪细胞内脏脂肪素mRNA表达的影响

目的研究不同浓度葡萄糖和胰岛素对3T3-L1脂肪细胞中内脏脂肪素（Visfatin）mRNA表达的影响。方法通过real—time RT-PCR方法检测不同浓度葡萄糖和胰岛素培养下3T3-L1脂肪细胞Visfatin mRNA的表达。结果葡萄糖增加了3T3-L1脂肪细胞Visfatin mRNA的表达;胰岛素降低其表达。结论葡萄糖和胰岛素对3T3-L1脂肪细胞中Visfatin mRNA的表达有凋控作用。     

甘精胰岛素对体外培养的人脂肪细胞脂肪因子分泌及脂质合成与分解的影响

目的 探讨甘精胰岛素对体外培养的人脂肪细胞脂肪因子分泌及脂质合成与分解的影响.方法 原代培养人皮下前脂肪细胞,采用不同浓度的甘精胰岛素（20、200、500、1 000、1 500nmol/L）干预其分化过程,酶联免疫吸附法检测分化过程中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、瘦素、脂联素、视黄醇结合蛋白4（RBP4）的分泌情况,比色法检测细胞内甘油三酯（TG）合成及培养基中甘油的释放量,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测脂肪分化标志基因：过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPAR-γ）、CCAAT促进结合蛋白α（C/EBPα）以及脂联素、RBP4、脂质代谢基因脂肪细胞脂肪酸结合蛋白（aP2）、激素敏感性酯酶（LPL）转录情况.组内比较采用配对t检验,组间比较采用.结果（1）人脂肪组织可分离出前脂肪细胞,并诱导分化为成熟的脂肪细胞,随着细胞的分化成熟,TNF-α、瘦素、脂联素、RBP4的分泌逐渐增加.（2）随着细胞的分化,细胞内TG含量逐渐增加,分化第15天时达峰值[（12.16±0.19）比（0.02 ±0.00） mmol·L-1·g-1,t=11.20,P＜0.001];培养基中甘油含量与甘精胰岛素浓度呈正相关,1 500比500nmol/L组增高[21 d：（961±15）比（611±10） μmol/L,t =3.70,P＜0.01],与分化时间无关.（3）RT-PCR结果：PPAR-γ、C/EBPα、脂联素、RBP4、aP2、LPL基因转录水平随着分化时间的延长逐渐增加,在第15 ～21天达峰值,与分化前比较,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 甘精胰岛素可诱导体外培养的人前脂肪细胞的分化,促进多种脂肪细胞因子的分泌,中低浓度促进脂质合成,高浓度可诱导脂质分解.     

脂联素对脂肪变肝细胞内C反应蛋白表达的影响及作用机制

目的：探讨脂联素对肝细胞内C反应蛋白（CRP）的影响及可能的作用机制。方法给予 HL-7702细胞不同浓度和比例的油酸软脂酸混合液干预不同时间后,CCK-8法测定细胞活力,Nile red染色荧光显微镜拍照,测定荧光强度。实时定量 PCR检测细胞内CRP、CREBH、BIP和CHOP mRNA表达水平变化。Western印迹检测细胞核内活化的CREBH蛋白含量。根据是否加入脂联素分组,每组加入不同比例的脂肪酸干预24 h后,实时定量 PCR检测 CRP、CREBH、BIP和CHOP的表达水平变化。结果相比于正常组,混合脂肪酸干预12 h后,仅OP03（1．0 mmol）组CRP表达升高（P＜0．05）,24 h后,OP12（1．0 mmol）、OP03（1．0 mmol）、OP03（0．5 mmol）组CRP表达均升高（P＜0．05）。混合脂肪酸干预24 h后,CREBH、BIP和CHOP mRNA均有不同程度的增高,OP12（1．0 mmol）、OP03（1．0 mmol）组核内活化CREBH蛋白增加。加入脂联素后,各组CRP、CREBH、BIP和CHOP表达水平下降（P＜0．05）。结论软脂酸可上调肝细胞CRP表达水平,其机制可能与活化的CREBH蛋白有关。脂联素可能通过抑制CREBH蛋白相关的炎症通路而下调CRP表达。