VEGF-C反义寡核苷酸抑制人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的实验研究

目的:探讨VEGF-C反义寡核苷酸(VEGF-C-ASODN)对人胃癌裸鼠移植瘤淋巴管生成的影响。方法:构建人胃癌裸鼠移植瘤模型,反义组在接种部位皮下注射VEGF-C-ASODN,正义组和对照组分别注射VEGF-C正义寡核苷酸和生理盐水,观察移植瘤生长变化。半定量RT-PCR检测移植瘤VEGF-CmRNA表达,酶组织化学方法(5'-Nase-ALPase)染色行淋巴管计数。结果:反义组移植瘤生长缓慢,体积和重量分别为(387.57±166.29)mm³、(1.4±0.7)g,较正义组和对照组显著下降(P<0.01)。反义组VEGF-CmRNA表达的相对系数为(0.35±0.12),淋巴管计数为(14.37±4.21),较正义组和对照组均显著降低(P<0.01)。结论:VEGF-C-ASODN可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长及淋巴管的生成。     

Suramin联合DDP对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的探讨suramin对人鼻咽低分化鳞癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法建立人鼻咽低分化鳞癌细胞株（CNE-2）裸鼠移植瘸模型。将24只荷瘤裸鼠随即机分为4组；生理盐水对照组、suramin组、DDP组和suramin＋DDP组。每组6只。各组裸鼠分别经腹腔注射生理盐水、suramin（0．1mg／g·d^-1）、DDP（0．01mg／g·d^-1）、suramin和DDP（suramin0．1mg／g·d^-1，DDP0．01nag／g·d^-1），每天1次，连续10d后改为每周给药2次。共4w。将移植瘤完整切除。并称其重量。在光学显微镜和电子显微镜下观察移植瘤细胞形态变化，采用免疫组化法检测瘤组织中血管内皮生长因子（vascular endotheliai growth factor,VEGF）表达情况，TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡。结果腹腔分别注射suramin、DDP和suramin＋DDP后，人鼻咽癌BALB／C裸鼠移植瘤生长被抑制，各组抑瘤率分别为28．42％、57．52％和71．35％，与对照组相比有明显差异，suramin联合DDP其抑瘤率明显增加。对照组VEGF表达为（75．17±9．0）％。suramin组、DDP组和suramin＋DDP组的VEGF表达明显减少，分别为（43．83±7．5）％、（67．33±8．3）％和（35．50±6．8）％，与对照组相比。suramin组和suramin＋DDP组的VEGF表达有明显差异（P〈0．01）；suramin组和suramin＋DDP组的细胞凋亡率分别为（23．83±7．5）％和（35．50±6．8）％。与对照组（6．17±4．0）％相比有明显差异（P〈0．01）。结论suramin可抑制人鼻咽低分化鳞癌BALB／C裸鼠移植瘤的生长，suramin对人鼻咽低分化鳞癌BALB／C裸鼠移植瘤的生长抑制作用可能与其诱导癌细胞凋亡增加、抑制VEGF表达有关。suramin与传统化疗药物联用可起协同作用。     

反义寡核苷酸抑制肿瘤细胞表达VEGF的研究

研究用反义寡核苷酸（ＯＤＮ）抑制肿瘤细胞ＶＥＧＦ的表达，探讨发展新的抗肿瘤药物的可能性。方法Ｓ１８０细胞培养上清液有促进牛脐血管内皮细胞生长的作用。用ＶＥＧＦ的反义ＯＤＮｓ分别加入Ｓ１８０细胞培养液，检查各上清液刺激内皮细胞生长的受抑情况，即可了解ＯＤＮｓ抑制肿瘤细胞表达ＶＥＧＦ的情况。结果证明ＶＥＧＦ反义ＯＤＮｓ确有抑制ＶＥＧＦ表达的作用。结论反义ＶＥＧＦ的ＯＤＮｓ有望成为新一代的抗肿瘤药物。     

抗VEGF发卡状核酶抑制肝癌VEGF表达和移植瘤生长

目的:采用抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发卡状核酶基因转染肝癌细胞,观察核酶对VEGF表达及肿瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导的方法,将人工合成的抗VEGF发卡状核酶基因转染肝癌细胞SMMC-7721,同时制备空载体和细胞对照,经G418筛选获得阳性克隆,基因组水平鉴定核酶在细胞中的表达,半定量RT-PCR法和免疫组化法观察核酶对SMMC-7721细胞VEGF表达的影响。接种各组细胞于裸鼠皮下,观察瘤体体积大小和质量,免疫组化法观测各组肿瘤微血管变化和VEGF的表达。结果:核酶基因成功导入到肿瘤细胞中,转基因细胞的增殖速率明显下降(P<0.01),转染核酶组细胞VEGF水平明显下降(P<0.01)。移植瘤成瘤率和生长速度减慢(P<0.01),肿瘤组织VEGF表达和血管形成减少(P<0.01)。结论:抗人VEGF发卡状核酶基因在体内、体外均可抑制肝癌VEGF表达,通过减少血管形成抑制肿瘤生长,为进一步开展肝癌血管靶向基因治疗提供实验依据。     

Bcl-xl反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤抑制作用的研究

目的　探讨bcl xl反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤生长和基因表达的抑制作用。方法　建立裸鼠人鼻咽癌模型 ,接种肿瘤细胞后 2 4h之内将bcl xlASODN、序列对照寡核苷酸 (ODN)皮下注射进行治疗 ,观察肿瘤大小变化和组织形态学改变 ,并检测药物治疗后肿瘤细胞中bcl xlmRNA和蛋白表达情况。结果　Bcl xlASODN治疗组裸鼠鼻咽癌的生长受到明显抑制 ,抑瘤率为 41.7% ,其对应的bcl xlmRNA和蛋白水平明显降低 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,而序列对照ODN治疗组抑瘤率仅为 19.0 % ,差异无显著性 ,对基因的表达亦无明显影响。结论　Bcl xlASODN对裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用 ,为鼻咽癌的治疗提供新的方法。     

阳离子脂质体VEGF反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的观察阳离子脂质体VEGF反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的作用。方法应用阳离子脂质体VEGF ASODN转染H160细胞48h后，观察细胞形态，电泳法检测DNA梯状带和流式细胞仪Annexin V—FTC／PI检测细胞凋亡。结果VEGF ASODN组VEGF mRNA的表达完全抑制，VEGF MSODN组和空白对照组的VEGF、mRNA的表达没有明显变化，细胞生长受抑制可见细胞固缩，DNA电泳出现典型的梯状条形带，流式细胞仪分析细胞凋亡率可达23．28％，明显高于VEGF MSODN组的8．21％和空白对照组。结论VEGF ASODN可抑制白血病细胞VEGF mRNA的表达，导致白血病细胞的凋亡，VEGF基因与白血病细胞的凋亡有关。     

Bcl-2反义寡核苷酸对裸鼠人肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的探讨Bcl-2反义寡核核苷酸(ASODN)对裸鼠人肺癌移植瘤的成瘤能力和生长的抑制作用。方法将经硫代修饰的Bcl-2ASODN导入非小细胞肺癌。NCI-H460细胞内,然后将这种细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤出现的时间和肿瘤体积的变化,并计算抑瘤率。同时采用未经处理的NCI-H460细胞接种于裸鼠背部皮下建立裸鼠人肺癌移植瘤模型,待长出瘤结节直径为≥5mm后,分为Bcl-2ASODN实验组、生理盐水对照组和无义寡核苷酸对照组3组。实验组用15mg/kgASODN两天一次直接瘤内注射,连用3周,测肿瘤大小变化和组织形态学改变。结果Bcl-2ASODN作用后的NCI-H460细胞在裸鼠皮下成瘤能力降低,最大抑瘤率达87.5%(P相似文献   

奥曲肽致裸鼠肝癌原位移植瘤坏死的实验研究

背景与目的：生长抑素类似物奥曲肽可抑制肝癌的生长,但能否使其坏死、获得更好的抗肿瘤效果呢？本研究旨在观察奥曲肽在体内、外对肝癌细胞株HepG2的作用,探讨其致肿瘤坏死的机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝法检测体外HepG2细胞的增殖,建立裸鼠肝癌HepG2细胞原位移植瘤模型．奥曲肽组裸鼠皮下注射奥曲肽100μg／（kg·d）;对照组皮下注射相同体积的生理盐水,连续用药8周。组织学评估肿瘤坏死程度,免疫组化检测移植瘤中血管内皮生长因子（VEGF）的表达,Western blot和免疫组化检测生长抑素受体2（SSTR2）的表达。结果：奥曲肽（0．1—1000nmol/L）作用24h,不影响HepG2细胞增殖。奥曲肽组裸鼠肝癌移植瘤重[（7．15±2．96）g]高于对照组[（4．21±3．11）g],移植瘤坏死体积[（81．86％±0．05）％]大于对照组[（43．75±0．06）％],两组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。与对照组明显不同的是．奥曲肽组移植瘤中未见VEGF表达。两组移植瘤组织血窦中SSTR2表达无显著性差异（P〉0．05）。结论：在肝癌细胞活跃增殖条件下,奥曲肽通过移植瘤血窦中SSTR2介导,仅仅抑制肿瘤血管生成,可致裸鼠肝癌显著坏死的良好效应。     

VEGF反义核酸抑制肿瘤血管形成的研究

目的探讨ＶＥＧＦ反义核酸作为抗新生血管形成药物和抗肿瘤药物的可能性。方法在小鼠角膜肿瘤模型上,测定两种ＶＥＧＦ反义核酸序列的５种不同修饰之反义核酸,对肿瘤血管形成和肿瘤生长的抑制作用。结果线性片段疗效较差,部分硫代和发夹结构两种修饰的反义核酸疗效满意。两种序列反义核酸混合使用最好。结论ＶＥＧＦ反义核酸有望成为抗肿瘤和抗新生血管形成的药物。     

人肝癌组织裸鼠原位种植模型体内筛选化疗药物可行性研究

目的利用人肝癌组织裸鼠原位种植模型筛选针对供瘤患者敏感的化疗药物。方法荷瘤鼠随机分为对照组和表阿霉素(E-ADM)、5氟脲嘧啶(5-Fu)、丝裂霉素(MMC)3个治疗组,每周腹腔化疗1次,共4周次。化疗期间B超观测其移植瘤大小,选择敏感的化疗药物试用于供瘤患者。结果对照组移植瘤随时间的推移,肿瘤体积逐渐变大,而3个化疗组肿瘤体积均在化疗过程中逐渐减小,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0·05)。应用MMC和5-Fu对供瘤患者化疗1个疗程,患者疼痛缓解,SPECT示个别转移灶消失,多个转移灶缩小。结论荷瘤鼠敏感的化疗药物同样也对供瘤患者敏感,提示该模型能较好筛选具有针对性的化疗敏感药物。     

CIK细胞对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用

目的：观察外周血单个核细胞(PBMC)体外经IFNγ， rIL2和antiCD3McAb诱导后细胞表型的变化及CIK细胞对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法：采用成份血采血机采集6例健康自愿者PBMC，经多因子诱导后，计数活细胞数，流式细胞仪检测细胞表型；裸鼠肩胛下接种肝癌细胞，次日起连续6 d给予不同数量的CIK细胞，观察对肝癌生长的抑制作用。结果：诱导培养后13 d，效应细胞增殖7.1倍，CD3+CD56+双阳性细胞增殖约6倍。动物实验结果表明，CIK细胞可明显抑制肝癌移植瘤的生长，且肿瘤抑制率与CIK细胞的数量呈剂量效应关系。结论：PBMC细胞体外经多因子诱导成CIK细胞，其数量及抗肿瘤活性显著增加，对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用。     

脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

目的　探讨c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法　将 15只裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,然后随机分成 3组予以不同条件处理 :对照组 (腹腔注射转染液和脂质体 ) ,正义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -SODN ) ,反义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -ASODN )。治疗期间定期观测裸鼠体重和肿瘤体积 ,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。利用RT -PCR技术比较治疗后各组肿瘤组织中c erbB 2基因水平。结果　反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为 71.2 %和 7.6% ,反义治疗组肿瘤缩小率为 2 2 .7% ,与正义治疗组相比较有显著性差异。各组裸鼠体重变化无明显差异。RT -PCR结果显示反义治疗组c erbB 2表达水平降低约 61.0 %。结论　脂质体 c erbB 2 -ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗作用 ,可能成为日后卵巢癌基因治疗的重要途径。     

抗癌中药制剂局部注射对裸鼠人肝癌细胞核DNA含量的影响

应用自动化图像分析技术对裸鼠人肝癌经局部注射抗癌中药制剂治疗的肝癌细胞核DNA含量进行定量测定,结果表明:经局部治疗后的DNA相时含量均下降(由22.57降到16.13,15.86),与对照组间盖异有显著意义(P<0.01),病理组织学改变为癌组织坏死,纤维组织增生及炎细胞浸润。因此作者认为,洲定DNA含量和组织病理学观察,对抗癌药物疗效的评价,具有重要意义。     

肝细胞癌患者血清血管内皮生长因子测定的临床意义

目的　探讨肝细胞癌患者血清血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)表达情况的临床意义。方法　选择 5 0例肝细胞癌和 2 5例正常对照血清标本 ,采用定量ELISA法检测血清VEGF含量。记录肝细胞癌组临床特征 ,与血清VEGF水平做相关性分析。结果　肝细胞癌组血清VEGF显著高于正常对照组 (P <0 0 5 )。肿瘤的生长方式对VEGF的表达有重要意义 (P <0 0 5 ) ;伴有远处转移患者血清VEGF水平明显增高 (P <0 0 5 ) ,TNMⅢ、Ⅳ期患者血清VEGF浓度也明显高于TNMⅠ、Ⅱ期患者 (P <0 0 5 )。结论　血清VEGF水平可作为肝细胞癌诊断和预后评价的重要指标     

Comparison of Seven Iodine-Labelled Monoclonal Antibodies in Nude Mice with Human Colon Carcinoma Xenografts

The biokinetics of seven ¹³¹I-labelled monoclonal antibodies (MAbs), directed against human colon carcinoma and one ¹²⁵I-labelled unspecific MAb have been examined. the study in nude mice, carrying human colon carcinoma, was intended to be a step in the selection of the most suitable antibody for clinical scintigraphy. the biological half-life in blood was found to be between 1.3 and 7.4 days for the different MAbs. Chromatography of plasma samples showed that the radioiodine was mainly bound to IgG-sized molecules. the (normal tissue)/blood ratios were similar for all the MAbs. the tumour/blood ratio was 0.41 for the unspecific MAb and 0.49-1.1 for the specific MAbs, and the tumour/muscle ratio was between 3.2 and 6.8 for the specific MAbs 6 days after injection. for one MAb tumour/blood and tumour/muscle ratios were 3.9 and 9.8 respectively 9 days after injection. Localization indices were at their highest 2.6 6 days after injection. for at least two of the monoclonal antibodies the tumour/blood and tumour/ muscle ratios found are high enough to justify clinical trials regarding their usefulness for scintigraphy of colon cancer in man.     

p27mt对裸鼠肝癌移植瘤侵袭性生长的影响

目的 研究外源性突变型p27基因(p27mt)对裸鼠皮下肝癌移植瘤侵袭性生长的影响。方法 应用细胞移植法把人原发性肝癌细胞株SMMC-7721种于BALB／c裸鼠皮下,构建人肝癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,将PBS液(100μl)、腺病毒介导的突变型p27(Ad-p27mt, 5.0×109 pfu, 100μl)及Lac Z(Ad Lac Z, 5.0×109 pfu, 100μl)分别注射到瘤体后,每隔3天测量肿瘤体积,计算肿瘤生长抑制率。于处理后21天取材行冰冻切片,免疫组织荧光化学法观察各组移植瘤的P27蛋白、CD44v6及Ⅷ因子的表达,数码成像后,用Image-Pro Plus软件计算荧光亮度和细胞总数,测量积分吸光度（integrated optical density,IOD）,计算平均吸光度（Average optical density,AOD）,以平均吸光度来反映细胞因子表达水平。结果 与Ad-Lac-Z、空白对照组比较,Ad-p27组移植瘤P27mt蛋白表达明显增高（P<0.01),并且过表达的P27mt蛋白明显减小了移植瘤体积,抑制了肿瘤的生长速度;血管大体观发现Ad-p27组血管不仅细而且分支少,Ⅷ因子免疫组织荧光化学观察发现瘤体内血管密度明显降低;同时Ad-p27组也明显降低了肿瘤细胞CD44v6 （P<0.05)。结论 Ad-p27mt能在裸鼠SMMC-7721肝癌皮下移植瘤过表达P27mt蛋白,不仅通过抑制血管的生成而抑制肿瘤的生长,而且通过降低肿瘤细胞CD44v6的表达而显著抑制移植瘤的侵袭性。     

介入热灌注化疗栓塞对肝癌患者血管内皮生长因子的影响

[目的]探讨介入热灌注化疗栓塞对肝癌患者血管内皮生长因子(VEGF)的影响.[方法]采用ELISA方法检测60例原发性肝癌患者(介入热疗组30例和常规介入组30例)治疗前后VEGF的变化,并对两组数据进行对比分析.[结果]治疗前介入热疗组血清VEGF中位值为256.42pg/ml,常规介入组为255.16pg/ml;治疗后1周介入热疗组为179.37pg/ml,较前下降;常规介入组343.58pg/ml,较治疗前升高,两组比较均有显著性差异(P＜0.05).介入热疗组2年生存率(70％)明显高于常规介入组(50％).[结论]介入热灌注化疗栓塞可抑制VEGF的产生,对减少肿瘤新生血管的形成、防止或降低肿瘤的复发起到积极的作用,其疗效优于常规介入疗法,是治疗中晚期肝癌的一种安全有效的方法.     

人ACHN肾癌裸鼠荷瘤模型建立及相关特性研究

[目的]探讨建立肾癌ACHN细胞系裸鼠皮下移植瘤及转移瘤模型的适宜条件。[方法]MTT法观察细胞生长情况。将裸鼠分组，分别用2、0×10^6／100μl（A组）、3．0×10^6／100μl（B组）和4．0×10^6／100μl（C组）的细胞接种浓度．注入裸鼠后项中间皮下：用4．0×10^6／100μl的细胞接种浓度，分别接种于裸鼠后项中间（C组）、背部（D组）和前肢腋窝皮下（E组）；分别用第20代（F组），第30代（G组）和第10代（C组）的肿瘤细胞4．0×10^6／100μl，注入裸鼠后项中间，观察各组成瘤情况。尾静脉注射瘤细胞1.0×10^6／ml建立转移模型。[结果]第4天细胞进入对数生长期。A组成瘤率为33.3％、B组和C组的成瘤率均为100％，但C组的成瘤速度明显高于B组：C组、D组和E组的成瘤率均为100％，注射肿瘤细胞后第10天，C组、D组和E组的肿瘤生长平均相对体积，各组间尚无明显差异；注射后第30天，C组的肿瘤生长平均相对体积显著高于D组和E组（P〈0．05）；G组的成瘤率为83.3％，F组的成瘤率为100％，与C组相比，无显著性差异（P〉0．05）。尾静脉注射组全部出现转移灶。[结论]使用ACHN细胞株，控制好浓度、接种部位以及传代次数后能获得较理想的裸鼠肾癌皮下移植瘤模型：使用传统尾静脉注射法可以建立裸鼠转移模型。     

人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型的研究

将1例人食管癌手术切除组织移植于NIH裸小鼠皮下，建立了人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型（Eca910709），已传25代，历时2年余传代移植成功率100％。该移植瘤病理组织学的结构与原人体肿瘤的形态相似．电镜形态属鳞状细胞癌。用地高辛标记的Alu探针及DNA－DNA原位杂交方法，证实移植癌中有Alu序列存在，表明移植瘤来源于人类组织。该移植瘤的建立将有助于食管癌病因、发病机理及治疗的研究．