系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞FcγⅡb和血清sCD30水平变化与Th1/Th2细胞漂移关系的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)FcγRⅡb、CD30的表达与辅助T细胞亚型(Th1/Th2)漂移在SLE发病机制中的作用.方法 检测了129例SLE患者和30名健康对照者PBMCFcγRⅡb、Th1、Th2细胞以及血清sCD30;FcγRⅡb的检测采用流式细胞术,血清sCD30的检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),Th1、Th2细胞的检测采用免疫组化染色方法.结果 SLE患者与健康对照者相比,PBMC FcγRⅡb的表达以及Th1细胞明显降低(P＜0.01),而血清sCD30水平以及Th2细胞显著升高(P＜0.01).结论 PBMC FcγRⅡb、CD30表达的变化以及Th1/Th2细胞漂移与SLE发病机制有关.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞FcγRⅡb和血清sCD30水平变化与Th1／Th2细胞漂移关系的研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）FcγRⅡb、CD30的表达与辅助T细胞亚喇（Th1／Th2）漂移在SLE发病机制中的作用。方法检测了129例sI．E患者和30名健康对照者PBMC FcγRⅡb、Th1、Th2细胞以及血清sCD30；FcγRⅡb的检测采用流式细胞术，血清sCD30的检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），Th1、Th2细胞的检测采用免疫组化染色方法。结果sLE患者与健康对照者相比，PBMC FcγRⅡb的表达以及Th1细胞明显降低（P〈0．01），而血清sCD30水平以及Th2细胞显著升高（P〈0．01）。结论PBMC FcγRⅡb、CD30表达的变化以及Th1／Th2细胞漂移与SLE发病机制有关。     

特应性皮炎患者外周血Th17细胞比例及不同细胞因子微环境对其分化的影响

目的探讨Th17细胞在特应性皮炎(AD)发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例AD患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR(real-timeRT-PCR)检测PB-MC中Th17细胞相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23和TGF-βmRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中上述细胞因子的含量;同时以34例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。分离AD患者PBMC体外培养,加入不同细胞因子微环境,观察其对Th17细胞数量及特异性转录因子RORγt表达的影响。结果 AD患者外周血Th17细胞比例(CD4+IL17+T细胞/CD4+T细胞%)显著高于正常对照者(P<0.01)。PBMC中IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量均显著高于正常对照者(P<0.01),PBMC中TGF-βmRNA表达水平及其血清中含量与正常对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AD患者PBMC在不同细胞因子微环境中培养,IL-1β+IL-23+IL-6处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达最高,TGF-β处理组表达最低,与其余处理组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平低于IL-1β+IL-23+IL-6处理组,高于TGF-β处理组和未处理组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 AD患者外周血Th17细胞比例及相应促分化细胞因子表达水平升高,IL-1β+IL-23+IL-6对Th17细胞具有明显的促分化作用,Th17细胞在AD发病机制中发挥作用。     

肾癌患者外周血Th1/Th2和Tc1/Tc2细胞因子的表达

目的检测不同临床分期肾癌患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞中细胞因子的表达水平,分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移对肾癌发生和转移的临床意义。方法用流式细胞仪检测60例不同分期肾癌患者和40例正常对照者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。结果与正常对照组相比,无症状型肾癌患者各细胞因子的表达无明显差异,而局限型患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平降低(P<0.01),局部进展型和转移型肾癌患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平明显下降(P<0.01);而Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6(P<0.05,P<0.01)分泌水平升高。结论 Th1/Th2偏移和Tc1/Tc2偏移促进了晚期肾肿瘤的进展和转移。T淋巴细胞亚群改变导致免疫功能失调,使肿瘤细胞发生免疫逃逸。     

慢性丙型肝炎病毒感染者外周血单个CD4+Th 细胞内IFN-γ及IL-4的表达

目的研究慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)中Th细胞内IL-4和IFN-γ的表达情况,探讨Th1/Th2细胞及其细胞因子在慢性HBV感染中的作用.方法常规分离PBMC,在PMA、ionomycin、monensin的刺激下,应用FCM检测慢性HCV感染者外周血Th细胞内IL-4和IFN-γ表达情况,采用ELISA法检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平.结果在慢性HCV感染者中(包括慢性HCV携带者、慢性丙型肝炎以及肝硬化患者)分泌IFN-γ的细胞百分数远高于对照组(P＜0.01);各实验组分泌IL-4的细胞百分数均很低,并且与疾病的进展无任何关联.在慢性HCV感染者中血清sIL-2R水平明显高于健康对照组,并且与分泌IFN-γ的细胞百分数呈正相关.结论在HCV感染的不同阶段,血清sIL-2R和IFN-γ水平均升高,Th1细胞因子或Th1细胞可能在慢性HCV感染肝脏损伤的发病机制中起重要作用.     

系统性红斑狼疮患者Th1、Th2细胞因子表达异常与T细胞亚群功能失调相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1、Th2细胞因子表达异常与T细胞亚群功能失调的相关性。方法用流式细胞仪测定病例组与对照组T细胞表面标志CD3、CD4、CD8的表达情况。用酶联免疫吸附测定法测定病例组与对照组血清IFN-γ及IL-4水平。结果SLE患者CD3 CD4 细胞较正常对照组明显降低(P<0.01),CD4 CD8 细胞较正常对照组明显增加(P<0.01),CD4 /CD8 T细胞比例倒置;血清IFN-γ水平较正常对照组明显增高(P<0.01),而血清IL-4水平较正常对照组明显降低(P<0.05)。结论SLE患者体内细胞免疫功能紊乱,以Th1细胞亢进为主,产生大量Th1细胞因子,介导免疫调节反应。同时,CD8 T细胞功能亢进,CTL细胞参与机体组织损伤,进一步导致免疫紊乱及免疫病理损伤加重。     

桥本甲状腺炎患者外周血Th17与Th1细胞及其相关因子表达水平研究

目的研究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中Th17与Th1细胞及其因子的表达情况及其意义。方法流式细胞方法检测42例HT患者和20例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Th1细胞的比例,ELISA检测血清中相关细胞因子IL-17及IFN-γ的含量。结果 HT患者PBMC中Th17比例显著高于对照组(P<0.01),Th1细胞也高于对照组(P<0.05);此外,HT患者血清中IL-17和IFN-γ的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Th17和Th1细胞可能在HT发病机制中发挥重要作用。     

系统性红斑狼疮外周血Tc与Th细胞漂移的变化及意义

目的:探讨Tc1/Tc2、Th1/Th2及Tc/Th的失衡与系统性红斑狼疮(SLE)分期的关系及意义。方法:采用全血培养、T淋巴细胞荧光标记的流式细胞术分析SLE稳定期和活动期患者及正常健康人外周血中T淋巴细胞亚群及其细胞内因子γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)表达率的变化,比较Tc1、Tc2;Th1、Th2,Tc/Th细胞比率在系统性红斑狼疮患者稳定期、活动期的变化,与SLEDAI分期的相关性。结果:SLE活动期患者的CD4~+/CD8~+比值明显低于正常对照组,而其Tc1、Th1细胞表达水平、Tc1/Tc2、Th1/Th2比值则均明显高于SLE稳定期及正常对照组(P0.05),但在SLE稳定期与正常对照组无差异(P0.05)。结论:Tc/Th的失衡及Tc与Th细胞向Tc1、Th1漂移的变化在SLE的发病机理中有着重要的作用。     

再生障碍性贫血患者外周血Th 1/Th2水平测定及其临床意义

目的：探讨辅助性T(T helper,Th)细胞亚群数量和功能的变化在再生障碍性贫血(再障)患者发病机制中的作用，及这两种变化之间的关系；为再障的诊断及疗效预测提供实验依据。方法：流式细胞术检测再障患者及正常人外周血T细胞亚群、Th1和Th2细胞；RT-PCR法测定再障患者及正常人外周血中Th1，Th2型细胞因子基因表达；用ELISA法测定再障患者血浆中IFN-γ和IL-4的水平。结果：再障患者Th1/Th2显著失衡，Th1细胞显著增多，Th1型细胞因子IFN-γmRNA的阳性表达率和血浆IFN-γ浓度均较正常对照显著升高；再障患者Th1细胞百分数分别与IFN-γmRNA相对表达强度(RV)和血浆IFN-γ浓度呈正相关；Th1细胞百分比、IFN-γmRNA的RV及血浆IFN-γ的浓度在比值倒置型与比值超高型患者体内相近且均高于比值正常型患者。结论：Th细胞亚群失衡，Th1细胞数量增多及功能亢进可能是再障发病的重要免疫机制之一；Th1细胞数量及功能异常相互作用是再障患者疾病发生和发展的根本原因；CD4+T或CD8+T细胞相对变化可能是Th细胞在发挥免疫抑制作用后的外在表象。     

强直性脊柱炎外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的水平及意义。方法取20例AS患者(分AS病情稳定组及活动组各10例)和健康人外周血单个核细胞(PBMC)、免疫磁珠分选CD4+T细胞,用或不用非特异性刺激剂(anti-CD3、anti-CD28),然后加佛被酯/离子霉素,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术检测CD4+T细胞内白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、及IL-6水平。结果免疫磁珠分选CD4+T细胞纯度达90%以上。AS病情活动组IL-17表达水平较病情稳定组和健康对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。用anti-CD3、anti-CD28刺激后,CD4+T细胞IL-17胞内表达水平较无刺激有一定的增加。AS患者CD4+T细胞IFN-γ胞内表达水平呈现与IL-17表达相似的特点。结论 AS患者外周血CD4+T细胞胞内IL-17和IFN-γ呈高表达,提示分泌IL-17的Th17细胞和分泌IFN-γ的Th1细胞共同参与了AS发病过程。     

甲状腺肿瘤患者Th1/Th2漂移对自然杀伤细胞影响的临床研究

目的 探讨甲状腺肿瘤患者辅助T细胞1向2（Th1／Th2）漂移对自然杀伤细胞的影响。方法 采用流式细胞术测定甲状腺癌、甲状腺良性肿瘤患者和正常对照Th1、Th2类细胞因子及CD4^＋和CD56^＋的表达，探讨其在甲状腺肿瘤治疗和预后中的意义。结果 甲状腺癌和甲状腺良性肿瘤患者Th1类细胞因子γ-干扰素和肿瘤坏死因子-α明显低于正常对照组，差异均有显著性；Th2类细胞因子IL4、IL-5和IL-10高于正常对照组，差异有显著性（均P〈0.05）。CD4^＋和CD56^＋的表达均低于正常对照组，差异有显著性。甲状腺肿瘤的病理类型恶性度越高，细胞越呈Th2极化倾向飘移。结论 与正常对照组相比，甲状腺肿瘤患者Th1／Th2漂移，并且随着病理恶性度不同，Th1／Th2的漂移有所不同。Th1／Th2的漂移和CD56的表达具有相关性，从而影响肿瘤细胞的恶性度和患者的预后。     

恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义

目的:通过检测恶性肿瘤患者外周血中的淋巴细胞亚群、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)以及Th1、Th2细胞的数量,了解恶性肿瘤患者的免疫状态。方法:采用流式细胞仪检测90例恶性肿瘤患者(肿瘤组)及60例健康体检者(对照组)外周血中的淋巴细胞亚群、Treg细胞和以及Th1和Th2细胞数量。结果:肿瘤组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞和NK细胞的数量均显著低于对照组(P<0.05),而Treg细胞显著高于对照组(P<0.05)。肿瘤组分泌IFN-γ的Th1细胞显著低于对照组(P<0.05),而分泌IL-4的Th2细胞显著高于对照组(P<0.05)。结论:恶性肿瘤患者Treg细胞数量增多,Th1细胞数量减少,Th2细胞数量增加,这可能是其免疫功能处于抑制状态的重要原因。     

肿瘤患者外周血Th1/Th2的检测及意义

目的 检测恶性肿瘤患者机体的Th1/Th2细胞产生的相关细胞因子含量,讨论Th1/Th2的平衡与肿瘤发生发展的关系。方法 利用有丝分裂原ConA刺激人体外周血单个核细胞(PBMC)体外无菌培养适当时间,提取上清液后以ELISA测定IFN-γ和IL-4在培养液中的浓度,共研究了40例肿瘤患者和30例正常人。结果 恶性肿瘤患者的IFN-γ和IL-4分别是687.1±794.6 pg/ml和379.4±144.9 pg/ml,而正常对照组的IFN-γ及IL-4为1 665.8±1 041.6 pg/ml和294.9±73.1 pg/ml。肿瘤患者的IFN-γ明显降低(P<0.005),而IL-4却显著升高(P<0.05)。结论 肿瘤患者的Th1/Th2平衡被打破,使之向Th2漂移,检测肿瘤患者的IFN-γ和IL-4有助于恶性肿瘤病情发展的监测。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和Th1／Th2类细胞因子的表达及临床意义

目的 研究乙肝感染患者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2类细胞因子的表迭及临床意义.方法 通过流式细胞检测技术,对乙型肝炎患者和正常人外周血T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+)及细胞因子Th1(IFN-γ),Th2(IL-4)进行检测,并进行比较.结果 与正常对照组比较.慢性乙型肝炎组CD4+细胞数下降,CD8+细胞数增加,但结果之间差异无统计学意义(P>0.05); 肝硬化组CD3+,CD3+CD4+细胞减少,CD3+CD8+细胞增加,CD3+CD4+/CD3+CD8+比值下降,结果之间的差异有统计学意义(P<0.05).慢性乙型肝炎组和肝硬化组IFN-γ表达百分率高于正常对照组(P<0.05),而IL-4表达百分率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 乙型肝炎患者免疫功能紊乱,在疾病的发生发展中Th1类细胞因子可能起了一定作用.     

骨髓增生异常综合征患者Th1/Th2细胞平衡改变的临床意义

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞亚群平衡的改变，以及与活化T细胞之间关系的临床意义。方法：选择14例难治性贫血患者（RA）和1例难治性贫血伴原始细胞增多患者（RAEB）的外周血，在PMA、Ionomycin、Monensin存在的条件下体外培养，进行细胞膜表面抗原和细胞内因子染色，并用流式细胞仪计数外周血表达CD3^＋ CD8^-IFN-γ^＋细胞（Th1）、CD3^＋CD8^-IL-4^＋细胞（Th2）、CD3^＋CD8^＋IF-γ^＋细胞（Tcl）、CD3^＋CD8^＋IL-4^＋细胞（Tc2）的百分率。结果与活化T细胞之间关系做相关性分析。结果：MDS组患者Th1细胞高于正常对照组（P〈0．05），体内的Th细胞向Th1细胞漂移，产生过多的造血抑制因子如IFN-γ，TNF-β等。Th2，Tc1，Tc2细胞与正常对照组相比无显著差异（P〉0．05）；CD4^＋CD45RO^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈正相关，相关系数为r=0．573（P〈0．05），CD4^＋CIN5RA^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈负相关，相关系数为r=-0．509（P=0．05），而和Th2，Tc1，Tc2的百分率无明显的相关性（P〉0．05）。结论：MDS患者存在有Th1／Th2细胞因子网络的失衡以及过多的造血抑制因子，且这些因子主要来源于T淋巴细胞。     

内毒素肺损伤大鼠Th1/Th2细胞漂移的变化及其作用

目的：观察外周血与支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th1／Th2细胞的漂移变化，探讨内毒素肺损伤时机体抗炎、致炎反应的分子机制。方法：静脉注射脂多糖制作大鼠内毒素肺损伤模型。分离、提纯外周血与BALF中T淋巴细胞，抗大鼠CD4：FITC单克隆抗体标记，通过流式细胞仪分选后，应用免疫组织化学技术动态观察，Th1、Th2细胞的变化。结果：LPS致伤后，外周血与BALF中IFN-γ阳性细胞(T111细胞)与IL-4阳性细胞(Th2细胞)数目均减少，Th1细胞在相应时相点CD4 T淋巴细胞总数的百分比在一过性增高后进行1性减少，CD4 T细胞中，Th1细胞构成比呈先增加后减少趋势，而Th2细胞构成比则持续增高，提示LPS使CD4 T细胞构成比由，Th1向，Th2漂移。结论：Th1／Th2漂移的方向及程度在一定程度上左右着急性炎症反应发展的速度与转归。     

cITP患者糖皮质激素治疗前后Th1/Th2改变

目的　探讨慢性特发性血小板减少性紫癜(cITP)患者Th1/Th2功能极化改变和糖皮质激素治疗效果之间关系。方法　采用流式细胞仪对18例cITP患者治疗前后和18 例健康者外周血CD3 、CD8- 细胞内IFN-γ和IL-4进行分析。结果　cITP患者治疗前Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较对照组显著降低(P<0 01),Th2细胞升高(P<0 05),糖皮质激素治疗有效者治疗后Th0、Th1 细胞和Th1/Th2 比值较治疗前显著增高(P<0 01),Th2细胞无明显差别(P>0 05),治疗无效者Th0、Th1、Th2 细胞和Th1/Th2 比值无明显差别(P>0 05)。结论　cITP表现为Th2优势表达,糖皮质激素治疗cITP主要通过上调Th1 细胞水平,纠正Th1/Th2 比值异常达到治疗目的。     

再生障碍性贫血外周血Th17和CD4~+ CD25~+ Treg细胞表达情况研究

本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,ELISA检测血清及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白介素(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并与正常对照组比较。结果表明:重型AA(SAA)组外周血Th17细胞比例,血清中IL-17及IFN-γ表达高于轻型AA(MAA)和正常人组,而重型AA组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低。与轻型AA和正常对照相比,重型AA患者单个核细胞培养后上清液中IL-17及IFN-γ表达水平显著增加。AA患者血红蛋白计数与Th17细胞及血清IL-17表达呈负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。结论:重型AA患者外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,贫血的严重程度与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者T细胞亚群和Th亚型的变化

目的探讨T细胞免疫功能在妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)患者中的变化与发病的关系。方法用佛波醇酯(PMA)、离子霉素体外激活淋巴细胞,通过流式细胞仪检测26例ICP孕妇(ICP组)和24名正常妊娠妇女(对照组)外周血单个核细胞在PMA等刺激下产生辅助性T淋巴细胞(Th1)型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)及Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL4)的水平,并与ICP患者淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8进行相关分析。结果ICP组CD3、CD4、CD4/CD8和Th1均高于对照组,而CD8和Th2低于对照组。结论ICP患者体内Th1/Th2型细胞因子平衡由Th2向Th1偏移,细胞免疫功能增强,ICP患者体内Th1型细胞因子免疫反应的增强可能与肝细胞损伤、肝内胆汁淤积症的发生有关。     

流式微珠阵列法检测IFN-γ诱导的Jurkat细胞Th1/Th2细胞因子表达

本研究旨在探讨流式微珠阵列法检测Th1／Th2细胞因子表达及IFN-1应用于T淋巴细胞白血病治疗的临床价值。以不同浓度IFN-γ诱导培养Jurkat细胞48小时，用流式微珠阵列法检测培养上清液中IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ表达，并采用流式细胞术检测膜上IL-2受体（CD25）的表达。结果表明：IFN-γ诱导Jurkat细胞IL-2和TNF-α的表达呈浓度依赖性升高，未检测到IL-6表达，CD25表达明显升高。结论：Jurkat细胞能被IFN-γ诱导高表达Th1细胞因子和CD25，流式微珠阵列法能准确客观地反映Th1／Th2细胞因子表达的动态变化。