醛固酮、诱导型一氧化氮合酶与动脉粥样硬化

醛固酮可引起自主神经功能失调、参与高血压的发生发展、参与心血管重构、致心律失常、参与血管再狭窄以及促进血栓形成等.     

内皮细胞中血管紧张素Ⅱ对诱导型一氧化氮合酶表达影响及干预的实验研究

目的 探讨在内皮细胞中血管紧张素Ⅱ对诱导型一氧化氮合酶表达的影响以及血管紧张素Ⅱ一型受体（AT1）、血管紧张素Ⅱ二型受体（AT2）和核因子-kappaB在其中的作用。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,用血管紧张素Ⅱ单独和与AT1、AT2、核因子-kappaB的抑制剂联合干预细胞后,用RT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶mRNA表达,Western blot检测诱导型一氧化氮合酶蛋白表达,电泳迁移率变动分析（EMSA）检测核因子-kappaB的活性。结果 在血管紧张素Ⅱ干预2h后核因子-kappaB活性增强（P〈0．05）,5h后诱导型一氧化氮合酶的mRNA和蛋白表达增加（P〈0．05）,核因子-kappaB和AT1的抑制剂能抑制这种增加（P〈0．05）,AT2则无此作用。结论 在内皮细胞中血管紧张素Ⅱ与AT1结合后激活核因子-kappaB,后者的激活引起诱导型一氧化氮合酶表达的增强,从而增加了心血管系统的炎性反应。     

诱导型一氧化氮合酶与寄生虫感染

一氧化氮(NO)在体内由L-精氨酸在一氧化氮合成酶(NOS)的催化下生成.它是一种重要的信使分子,参与血管、气道平滑肌的调节,神经递质的传递、细胞杀伤、肿瘤细胞的溶解及内分泌激素的释放过程,与许多疾病的发生、发展密切相关;既在机体多个系统多种细胞中具有广泛的生理功能,又可能参与多种疾病的发生过程.     

诱导型一氧化氮合酶与脑缺血

研究显示 ,诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)及其所产生的NO参与了脑缺血后的病理生理学过程 ,在脑缺血不同阶段的级联反应中发挥着正负双重效应。文章对iNOS/NO促进细胞凋亡和神经发生的作用及其机制 ,iNOS选择性抑制剂对缺血性脑损伤的影响作了综述。     

诱导型一氧化氮合酶在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展

采用溶栓疗法、动脉搭桥术、冠状动脉血管成形术等技术,使缺血组织和器官重新恢复血流,挽救了众多危急重病人的生命,然而,缺血器官及组织在恢复血流的同时,均伴随着缺血/再灌注损伤,是目前临床上亟待解决的问题。在对心血管疾病的研究过程中,随着心肌保护研究的不断深入,如何减轻心肌缺血/再灌注损伤成为心肌保护问题的关键。越来越多的研究表明,心肌缺血/再灌注损伤与诱导型一氧化氮合酶表达过量一氧化氮紧密相关。研究表明,诱导型一氧化氮合酶既有心肌保护作用,也有促心肌损伤作用,而通过对诱导型一氧化氮合酶抑制剂的应用,有望减轻心肌损伤的进展,保护损伤心肌。     

血管外膜源一氧化氮对内皮素—1诱导的血管平滑肌增殖的影响

目的 观察血管外膜生成的一氧化氮（NO）对内皮素－1（ET－1）诱导的血管平滑肌（VSM）增殖的影响，以探讨血管外膜源NO对血管结构重塑调节的意义。方法 取大鼠胸主动脉，去除内皮，分以下几组进行组织孵育10h：（1）完整外膜血管组；（2）单纯中膜组；（3）中膜与剥离的外膜共育组；（4）中膜与服L－N－硝基精氨酸（L-NNA)预处理的外膜共育组。每例胸主动脉剪为二段，分两个亚组：ET（10^-7mol/L)组和对照组。^3H-胸腺嘧啶（^3H-TdR)掺入法检测各组VSM的细胞增殖。另取大鼠腹主动脉外膜，用10^-8和10^-7mol/L ET-1刺激4h。Griess法测血管外膜生成的亚硝酸（NO2-)含量，^3H-L－精氨酸（^3H-L-Arg)标记的同位素法测定外膜一氧化氮合酶（NOS）活性。结果 （1）各ET亚组^3H-TdR掺入比相应对照组分别增加48．8％－71．9％。（2）在10^-7mol/L ET-1刺激下，完整外膜组及中膜＋外膜组的^3H-TdR掺入分别比单纯中膜组低21．3％和24．5％。中膜＋L－NNA预处理的外膜组^3H-TdR掺入分别比中膜＋外膜组及完整外膜组高30．8％和25．4％，而与单纯中膜组差异无显著性。（3）与对照组相比，10^-8和10^-7mol/L 的ET－1使外膜NOS活性分别增加124％和177％；使外膜生成的NO2－含量分别增加88％和225％。结论 实验结果表明：血管外膜生成的NO可抑制ET－1刺激的VSM的增殖，其抑制作用为ET－1激活的血管外膜NOS／NO途径所分导。提示血管外膜源NO可能参与心血管疾病过程中血管重塑的调节。     

一氧化氮、诱导型一氧化氮合酶与腹主动脉瘤

腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)是在动脉粥样硬化的基础上发生的最常见的主动脉扩张性病变,65岁以上人群发生率约9%.20世纪50年代以来出现的主动脉重建手术和90年代出现的腔内隔绝术使AAA的治疗有了很大的进展.但本病的诱发因素以及持续扩张直至破裂的控制因素仍未清楚.广泛的基础和临床研究显示:腹主动脉瘤壁的细胞外基质合成与降解以及中膜平滑肌细胞的增殖与凋亡失衡是其形成和发展的关键之一[1].而近年来的研究显示一氧化氮(Nitric oxide,NO)和诱导型一氧化氮合酶(Inducible NO synthase,iNOS)在多个层面上影响了这二者的平衡,在腹主动脉瘤的发生发展中起了一定的作用.本文就NO,iNOS的分类与功能,NO与细胞因子的相互作用及NO,i-NOS与腹主动脉瘤的临床病理联系作一综述.     

辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨辛伐他汀对脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:90只健康SD大鼠随机分为对照组(生理盐水2 mL静脉滴注)、内毒素(LPS)组(LPS 5 mg/kg,用生理盐水稀释至2 mL静脉滴注)、LPS+辛伐他汀(Sta)组(LPS 5mg/kg,Sta 20mg/kg,生理盐水稀释至2 mL静脉滴注),每组30只.分别在用药后2、4、6、12、24 h处死大鼠,取右肺下叶用RT-PCR法检测肺组织iNOS mRNA表达.结果:光镜下对照组各时点肺泡结构正常;LPS组2h出现炎症损伤,以6h最为显著;LPS+ Sta组中性粒细胞浸润较LPS组减轻.LPS组iNOSmRNA表达较对照组和LPS+ Sta组明显增高(均P＜0.05),6h达高峰,12 h开始下降;LPS+ Sta组各时点iNOSmRNA表达趋势同LPS组,但接近对照组水平(P＞0.05).结论:辛伐他汀能改善脓毒症时肺组织的病理性炎症损伤,辛伐他汀能减低脓毒症时肺组织iNOS mRNA的表达.     

雌二醇对兔血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 通过测定兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）一氧化氮（ＮＯ）产物及诱导型一氧化氮 麦（ｉＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达。验证雌二醇影响恰在民的机制。方法 测定细胞培养液中硝酸盐和亚硝酸盐含量作为培养兔血管平滑肌细胞ＮＯ产物的指标,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法检测培养兔血管平滑肌细胞ｉＮＯＳ表达。结果 （１）雌二醇呈时间依赖关系（０～２４ｈ,Ｐ〈０．０５）和剂量依赖关系（１０＾０－７～１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ,Ｐ〉     

阿霉素对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的研究阿霉素(ADM)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。方法将雄性wistar大鼠24只,随机分为ADM组和对照组,每组12只,ADM组按每次给ADM 2 mg/kg腹腔注射,隔日一次共6次;对照组给等体积的生理盐水腹腔注射。于实验第30 天,应用生化方法测定心肌组织中的一氧化氮(NO)水平及iNOS的活性;用TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数;用RT—PCR方法检测心肌组织iNOS mRNA的表达。结果与对照组比较ADM组大鼠心肌组织NO、iNOS活性增加(P< 0.01),心肌细胞凋亡指数及iNOS mRNA的表达均显著增高(P< 0.01)。结论ADM能诱导大鼠心肌细胞iNOS mRNA表达增加,使NO合成增多,引起细胞凋亡而参与对心肌的损害。     

BXSB小鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶的异常表达及甲泼尼龙干预效应

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与介导BXSB小鼠狼疮肾炎(LN)及甲泼尼龙(MPS)是否可通过影响iNOS表达而缓解LN。方法用MPS对BXSB自发狼疮小鼠进行体内实验,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术研究了MPS对狼疮小鼠肾脏iNOS表达的影响,并观察了狼疮小鼠MPS治疗前后24h尿蛋白和NO3-/NO2-排泄量。结果BXSB狼疮小鼠肾组织检测到了iNOSmRNA的表达,而BALB/C小鼠未见表达;免疫组织化学示iNOS表达于BXSB小鼠肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、肾间质及肾小球浸润的炎症细胞胞质内。MPS治疗组BXSB狼疮小鼠肾组织iNOSmRNA表达量显著低于未治疗组(P<0.01);治疗组24h尿蛋白及NO3-/NO2-排泄量显著低于未治疗组(P<0.01,P<0.05)。结论iNOS及其合成的一氧化氮(NO)可能参与介导了LN。MPS可能通过抑制肾组织iNOS的表达缓解LN。     

硫化氢供体对实验性门静脉高压及内源性一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢供体一硫氢化钠（sodium hydrosulfide，NaHS）对大鼠门静脉高压及内源性一氧化氮（nitric monoxide，NO）／一氧化氮合酶（nitricoxide synthase，NOS）体系的影响。方法将30只健康成年雄性sD大鼠随机分为4组：部分门静脉结扎（partly portal vein ligation，PPVL）组（10只）、PPVL＋NariS组（10只）、假手术组（5只）和正常组（5只）。PPVL组和PPVL＋NaHS组行部分门静脉结扎术建立门静脉高压的动物模型。模型制作14天后，分别测定各组大鼠的门静脉压力（PVP）和平均动脉压力（MAP）；采用免疫组织化学检测大鼠肝细胞中一氧化氮合酶（NOS2、NOSS）的蛋白水平表达情况，RT-PCR方法检测大鼠肝组织中NOS2和NOS3的mRNA水平的表达情况。结果术后14d，假手术组和正常组比较，各项检测指标无显著差异，NOS2蛋白及mR-NA水平未见明显表达；NOS3蛋白及mRNA表达水平无显著差异。PPVL组与假手术组比较，PVP明显升高（P〈0．05），MAP则下降（P〈0．05），PPVL＋NaHS组与PPVL组相比较，PVP进一步升高（P〈0．05），MAP则进一步降低（P〈0．05）。PPVL组和PPVL＋NaHS组NOS2在蛋白及mRNA水平均有表达，且后者NOS2蛋白及mRNA表达水平减少（P〈0．05）。4组之间NOS3的蛋白及mRNA表达水平则无显著差异。结论H2S参与了门静脉高压的形成与发展，NaHS可以加重门静脉高压，其作用可能与NO／NOS2体系有关。．     

阿托伐他汀对冠心病患者血清一氧化氮及一氧化氮合酶含量的影响

目的　观察阿托伐他汀对冠心病患者血清一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)含量水平的影响。方法　对用阿托伐他汀治疗的 79例冠心病患者依据是否合并高胆固醇血症分为两组 ,对其治疗前后血清 NO及 NOS含量水平进行对比分析。结果　不论是否合并高胆固醇血症的冠心病 ,阿托伐他汀均可升高其血清 NO及 NOS水平。结论　阿托伐他汀可通过调脂治疗抑制脂质的过氧化反应 ,保护血管内皮功能 ,但其保护内皮功能的作用不受患者是否存在高脂血症的影响 ,改善内皮功能 ,对冠心病的防治具有重要意义。     

一氧化氮及其合酶在哮喘发病机制中的作用

探讨一氧化氮及其合酶在哮喘发病机制中的作用。方法 采用哮喘豚鼠模型，将豚鼠分为４组；１．哮喘组，用１０％卵白蛋白腹腔注射１ｍｌ致敏，２周后用１％卵白蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作．２；肾上腺皮质激素预防组；诱喘同哮喘组，在每次诱喘前腹腔滴注地塞米松０．５ｍｇ／ｋｇ。３．硝基精氨酸甲酯预防组；诱喘同哮喘组，每次诱喘产腹腔注射ＬＮＮＡ０．４ｍｇ／ｋｇ。４．正常对照组；用生理盐水代替诱喘剂。每组分别测定其     

Early effects of diabetes on inducible nitric oxide synthase in the kidney

NO may be responsible for the glomerular hyperfiltration observed in diabetic kidney by inducing vasodilation of the afferent arteriole. The aim of this study was to evaluate which isoform of nitric oxide synthase (NOS) is responsible for increased renal production of NO in diabetic kidney. Thirty male WKY rats were divided into 6 groups. Five rats were sacrificed immediately, five after 20 days. In the other rats, diabetes was induced by streptozotocin. The four diabetic groups were sacrificed respectively after 5, 10, 15 and 20 days. Urine excretion of NO metabolites was assayed; immunochemistry showed the presence of inducible (iNOS) and endothelial constitutive (ecNOS) synthases in the kidney. Urinary excretion of NO metabolites increased significantly in diabetic rats five days after the induction of diabetes and at the end of the study whereas it was unchanged in the control group. Renal ecNOS remained unchanged throughout the study in all rats whereas iNOS increased significantly in diabetic rats from the fifth day until the end of the study. The results demonstrate that iNOS is activated in the kidney of rats, soon after the induction of diabetes, thus suggesting its involvement in the increased production of NO observed immediately after the onset of diabetes. Received: 19 September 2001 / Accepted in revised form: 31 January 2002     

诱生型一氧化氮合酶在老年豚鼠耳蜗的表达

目的检测诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在老年豚鼠耳蜗的表达. 方法将20只豚鼠分2组实验组豚鼠年龄为33～35个月之间,对照组豚鼠年龄为2～3个月.测定两组豚鼠听觉脑干诱发电位(ABR)听阈,用免疫组织化学方法检测iNOS在两组豚鼠耳蜗的表达. 结果对照组和实验组豚鼠ABR平均听阈分别为(22.0±5.3)dBspL 、(50.0±10.5)dBspL ,且两组间差异有显著性(P<0.05).iNOS在实验组耳蜗的表达呈阳性,阳性区域主要在血管纹和螺旋神经节细胞.iNOS在对照组耳蜗的表达呈阴性. 结论 iNOS在老年豚鼠耳蜗中呈阳性表达,提示一氧化氮(NO)在豚鼠耳蜗老化过程中起重要作用.     

流体切应力对内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶基因表达和一氧化氮分泌的影响

目的本研究旨在观察不同切应力对内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因表达和一氧化氮（NO）分泌的影响,以探讨流体切应力对内皮祖细胞功能的调节作用。方法诱导健康成人外周血的单个核细胞分化为内皮祖细胞,分为静态组、低切应力组（5dyn／cm^2,1dyn／cm^2=0．1Pa）、中切应力组（15dyn／cm^2）和高切应力组（25dyn／cm^2）4个不同处理组,观察不同切应力对内皮祖细胞eNOS基因表达和NO分泌的影响。结果外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的“纺锤样”梭形细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和vWF免疫荧光抗体染色均为阳性。切应力处理4h,低、中和高切应力组内皮祖细胞eNOS／β-肌动蛋白基因表达比值分别为0．364、0．505和0．548,较静态组（0．183）明显高（P〈0．05）。在切应力处理的各时间点,低、中和高切应力组内皮祖细胞NO分泌也较静态组明显升高（P〈0．05）。结论流体切应力提高明显上调内皮祖细胞eNOS基因表达和促进其NO分泌,提示流体切应力可改善内皮祖细胞的功能活性,是提高内皮祖细胞修复血管内皮损伤能力的有效方法之一。     

氟对大鼠脑组织中一氧化氮合成酶活性的影响

目的为研究氟对神经系统的作用机理。方法利用化学发光分析技术测定大鼠脑组织中的一氧化氮合成酶的活性。结果氟暴露大鼠脑组织中ＮＯＳ活性明显高于对照组，直接在ＮＯＳ反应液中加入氟化钠，ＮＯＳ活性亦增加，而且这种增强作用能被一氧化氮合成酶的抑制剂Ｌ－硝基精氨酸所阻断。结论无论在体内还是体外，氟能使一氧化氮合成酶的活性增高。     

赛格列酮对HUVECs表达eNOS和NO生成的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)激动剂赛格列酮,对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达一氧化氮合酶(eNOS)及其一氧化氮(NO)生成的影响。方法体外培养HUVECs,用1×10-6～10-4mol/L赛格列酮预处理HUVECs24h,再与10-7mol/LAngⅡ共同孵育12h;通过RT-PCR和WesternBlot分别检测eNOSmRNA和蛋白表达水平;通过Griees反应测定上清NO释放量。结果与无刺激组比较,10-7mol/LAngⅡ刺激HUVECs12h后明显抑制eNOSmRNA及蛋白表达,P<0.001;基础状态下,HUVECseNOSmRNA及其蛋白表达较强,10-7mol/LAngⅡ刺激12h后明显下调eNOSmRNA和蛋白表达(与对照组相比,P<0.001)。各浓度赛格列酮预处理24h明显减弱AngⅡ对HUVECseNOSmRNA的下调作用(与AngⅡ组相比,P<0.001)。同样赛格列酮也明显减弱AngⅡ对HUVECseNOS蛋白表达的下调作用(与AngⅡ组相比,0.1、1μmol/L时P<0.01,10、100μmol/L时P<0.001,但0.1、1、10μmol/L赛格列酮组间比较P>0.05)。与无刺激组比较10-7mol/LAngⅡ明显减少NO的释放,P<0.05;与AngⅡ组比较,赛格列酮干预24h后呈浓度趋势增加NO的释放,P<0.001。结论赛格列酮呈浓度效应上调HUVECs表达eNOS,并呈浓度趋势增加内皮NO的释放。     

Reversal of inducible nitric oxide synthase uncoupling unmasks tolerance to ischemia/reperfusion injury in the diabetic rat heart

The diabetic heart is known to be susceptible to ischemia/reperfusion (I/R) injury by increased oxidative stress. Although oxidative stress upregulates inducible nitric oxide (iNOS), the role of iNOS in I/R injury in the diabetic heart has been poorly understood. Because iNOS-derived nitric oxide (NO) plays a crucial role in cardioprotection against I/R injury, we hypothesized that inhibition of iNOS uncoupling would restore tolerance to I/R injury in the diabetic heart. The present study demonstrated that iNOS-derived superoxide generation was reduced, and that the NO bioavailability was increased, by treatment with the NOS-cofactor, tetrahydrobiopterin (BH4), before I/R in the hearts isolated from diabetic rats. This was associated with a reduction of infarct size and improvement of left ventricular (LV) function after I/R. The cardioprotective effect of BH4 was abrogated by treatment with a thiol reducing agent dithiothreitol (DTT), but not a NO-sensitive guanylyl cyclase inhibitor ODQ, suggesting that iNOS-derived NO-mediated cardioprotection occurs through protein S-nitrosylation but not cGMP-dependent signaling in the diabetic heart. Indeed, protein S-nitrosylation was increased by treatment with BH4 in the diabetic heart and was inhibited by DTT. These results suggest that the inhibition of iNOS uncoupling unmasks tolerance to I/R injury through enhanced protein S-nitrosylation in the diabetic rat heart.