罗格列酮对2型糖尿病大鼠模型心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠模型心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法高脂饮食联合小剂量链脲菌素（STZ）复制大鼠2型糖尿病模型；结扎大鼠左冠状动脉前降支30min，再灌注120min，建立大鼠心肌缺血再灌注（I／R）损伤模型。将糖尿病大鼠随机分为3组，分别为罗格列酮组、I／R损伤模型组、假手术组，灌胃给药1W后行I／R损伤手术，观察I／R损伤后心肌梗死面积，心律失常发生次数和类型以及血压的变化。结果罗格列酮组减少了心肌梗死面积与左心室面积比值（IS／LV，30．3±3．6VS38．7±3．0）以及心肌梗死面积与危险区面积比值（AAR／LV，76．0±2．6v893．2±3．0），降低了心律失常评分（2．6±0．4VS4．4±0．8），改善了再灌注平均动脉压恢复，与I／R组比较均有显著性差异。结论罗格列酮对糖尿病大鼠心肌I／R损伤具有保护作用。     

菜菔硫烷对低硒病毒性心肌损伤小鼠Ⅱ相酶和一氧化氮的影响

目的 研究Ⅱ相酶和一氧化氮（NO）在低硒病毒性心肌损伤中的变化以及十字花科蔬菜成分菜菔硫烷（SF）的影响。方法 采用低硒和常硒病毒性心肌损伤小鼠模型，观察心肌组织Ⅱ相酶和NO的变化及SF对其的影响。结果 病毒感染使低硒条件下谷胱甘肽硫转移酶（GST）水平增高[（22．46±2．08）×10^3、（19．36±2．03）×10^3U／g，P〈0．05]，而常硒条件下使醌还原酶（QR）水平增高[（24．40±1．18）×10^3、（22．04±1．25）×10^3U／g，P〈0．01]，各SF保护组Ⅱ相酶活性均明显高于相应未保护组（P〈0．05）；病毒感染使小鼠血清NO水平升高（P〈0．01）。常硒SF保护组NO水平显著低于未保护组[（45．98±3．16）、（61．33±8．54）μmol／L，P〈0．01]。结论 SF可通过诱导心肌组织Ⅱ相酶活性．提高抗氧化能力以及降低血清NO水平减轻炎症反应来保护损伤的心肌。     

Y-27632对家兔心肌缺血／再灌注损伤的有益作用

目的研究Rho激酶抑制剂Y-27632对家兔心肌缺血／再灌注损伤（IRI）是否有心脏保护作用。方法健康家兔18只，体重2．0～2．5kg，随机分为3组：IRI组、Y-27632（Y）组和假手术（C）组。用结扎左冠状动脉前降支60min后剪断结扎线恢复血流30min的方法建立在体心肌IRI模型，Y组于再灌注前5min，经耳缘静脉注射Y-276320．35mg/kg。检测左心室收缩功能，血浆肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）及心肌缺血、梗死范围。结果IRI组缺血／再灌注导致左心室舒缩功能受损，左心室收缩峰压（LVSP）、左心室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）下降，左心室舒张末期压力（LVEDP）升高，CK、LDH的释放增加，心肌梗死范围为（5．3±0．7）％；Y组在再灌注早期LVSP、±dp／dtmax下降的幅度和LVEDP升高的幅度、CK和LDH的释放，均明显低于IRI组，组间比较P均〈0．05。心肌缺血、梗死范围也明显较IRI组小（缺血：40．5％ vs 51．3％，P〈0．05；梗死：1．7％ vs 5．3％，P〈0．01）。结论Y-27632对家兔心肌IRI有部分心脏保护作用。     

冠状动脉内移植自体骨髓单个核细胞和内皮祖细胞对小型猪心肌缺血再灌注损伤的疗效比较

目的比较自体骨髓单个核细胞（BM—MNC）和内皮祖细胞（EPC）移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后修复梗死心肌和改善心功能的疗效。方法23头小型猪心肌缺血再灌注损伤模型分为BM—MNC组[（3．54±0．90）×10^8个细膨头,n=9]、EPC组[（1．16±1．07）×10^7个细胞／头,n=7]以及对照组（n=7）,比较细胞移植前以及移植4周时超声心动图、血液动力学和心肌梗死范围的变化。结果与移植前比较,移植4周时BM-MNC组、EPC组左室射血分数（LVEF）分别降低2％[（68±10）％比（66±7）％,P〉0．05]和0[（69±7）％比（69±8）％,P〉0．05],对照组则降低10％[（70±9）％比（59±7）％,P〈0．05],三组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。LVEF、左室收缩末压（LVESP）、心输出量（CO）和左室等容收缩压力最大上升速率（＋dp／dtmax）的变化值在BM—MNC组和EPC组间的差异无统计学意义（P〉0．05）,而显著小于对照组的变化值（P〈0．05）。舒张末压（LVEDP）和等容舒张压力最大下降速率（-dp／dtmax）在细胞移植前后各组变化不明显（P〉0．05）。EPC和BM—MNC移植的心肌梗死面积均小于对照组[心肌梗死面积百分比分别为[（4．1±0．6）％、（8．4±3．8）％和（11．4±3．2）％,均P〈0．05],EPC组较BM-MNC组有减小的趋势,但差异无统计学意义（P=0．067）。结论心肌缺血再灌注损伤后,自体BM—MNC和EPC移植均可明显改善左室收缩功能,这种作用可能通过减小心肌梗死面积实现。移植EPC与BM-MNC改善心功能的疗效相当,但还需进一步评价。     

大鼠胰腺离体灌注技术的建立

目的建立大鼠离体胰腺灌注技术。方法采用大鼠离体胰腺灌注技术对10只高脂肥胖大鼠胰岛13细胞功能进行研究。结果6只大鼠符合胰腺整体灌注胰腺完整性的评定标准：（1）在整个灌注期间灌注压保持在（70±5）mmHg（1mmHg=0．133kPa）。（2）灌注结束后检测分离的胰腺十二指肠组织块，均存在十二指肠蠕动活性。（3）持续精氨酸刺激较持续高糖刺激胰岛素分泌幅度明显增高[最大胰岛素分泌率：（987±100）μU／min vs （545±50）μU／min，P〈0．05；平均胰岛素分泌率：（544±73）μU／min vs （260±28）μU／min，P〈0．05]。结论成功建立了大鼠胰腺整体灌注技术，此技术可用于大鼠离体胰岛β细胞功能研究。     

“冠心颗粒”抗缺血／再灌注损伤作用及JNK蛋白信号通路在其中的调节作用

目的：观察具有抗心肌缺血／再灌注（I／R）损伤作用的中药“冠心颗粒”（GXKL）对心肌I／R损伤的拮抗作用及其可能的机制。方法：将36只SD大鼠随机分为3组：对照组,I／R组及GXKL组,每组12只大鼠。制备大鼠离体心脏心肌I／R模型再灌注30rain时,分别检测①离体心脏功能指标：左室收缩压（LVDP）、心率（HR）、左室舒张末压（LVEDP）及心室内压最大变化率（±dp／dtmax）;②心律失常评分;③应用生化法检测肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的活性;④应用蛋白印迹法检测再灌注0min时,心肌组织中JNK的磷酸化水平。结果：与I／R组比较,GXKL组：①可明显提高I／R大鼠心肌中的±dp／dtmax[（2327．1±334．5）US．（1823．1±499．8）mmHg／s,P〈0．05],并明显改善LVDP、LVEDP等指标[LVDP：（39．6±9．1）vs．（24．2±10．1）mmHg,P〈0．05;LVEDP：（19．9±9．9）摊．（31．0±9．4）mmHg,P〈0．05];②可明显降低心律失常的评分（11．58±4．81郴．6．33±1．88,P〈0．05）;③可明显降低LDH和CK的水平[（282．2±29．6）YS．（222．9±30．2）U／L和（299．8±45．4）US．（251．9±41．8）U／L,P〈0．05];④可明显降低缺血心肌组织中磷酸化JNK的水平（0．75±0．07椰．1．54±0．10,P〈0．05）。结论：GXKL可明显改善缺血心肌抗缺血、缺氧的能力,增加心肌收缩力,减轻心律失常;其对离体心肌I／R的拮抗作用可能与JNK途径密切相关。     

原发性甲状旁腺功能亢进症患者钙敏感受体基因多态性的分布及其与血钙水平的相关性

目的 研究原发性甲状旁腺功能亢进症患者中钙敏感受体（CASR）基因多态性的分布，及其与临床特征的相关性。方法 分别采用突变分离PCR（MS—PCR）和错配PCR—RFLP方法检测北京地区202名无亲缘关系的汉族健康妇女及45例原发性甲状旁腺功能亢进症（PHPT）患者CASR基因A986S、G990R基因型，测定血钙、游离钙、磷、甲状旁腺素（PTH）水平。结果 （1）北京地区年轻正常汉族妇女中存在CASR基因A986S、G990R多态性，A986S等位基因A和S的频率分别为0．975和0．025，G990R等位基因R和G的频率分别为0．468和0．532，符合Hardy—Weinberg平衡。（2）PHPr患者：①A986S等位基因A和S的频率分别为0．944和0．056，G990R等位基因R和G的频率分别为0．667和0．333[与健康妇女组比较G990R基因型分布和等位基因频率差异有统计学意义（P〈0．01）]。②AA、AS基因型组的血钙分别为（3．03±0．50）、（2．84±0．12）mmoL／L（P〈0．05），血游离钙分别为（1．56±0．32）、（1．42±0．07）mmol/L（P〈0．05），血磷分别为（0．71±0．18）、（0．69±0．07）mmo/L（P〉0．05），血PTH升高倍数分别为（13．13±11．26）、（9．25±7．78）倍（P〈0．05）。（3）PHPT患者GG＋GR与RR基因型组的血钙分别为（3．00±0．46）、（3．04±0．52）mmoL／L（P〈0．05），血游离钙分别为（1．50±0．21）、（1．58±0．39）mmoL／L（P〈0．05），血磷分别为（0．71±0．16）、（0．71±0．18）mmol/L（P〉0．05），血PTH升高倍数分别为（11．84±10．63）、（13．89±11．51）倍（P〉0．05）。结论 PHPT患者中CASR基因G990R多态性的分布频率与健康人群不同，R等位基因频率较高；A986S、G990R多态性与血钙、游离钙水平相关，含S或G等位基因的个体血钙及游离钙水平较低；A986S多态性与血PTH水平相关，含S等位基因的基因型的PTH水平较低。     

参附注射液对犬心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨参附注射液（SFI）预处理对犬心肌缺血／再灌注损伤的保护作用及机制。方法21只犬随机分为3组。假手术组（Sham组）、缺血/再灌注组（I／R组）和参附注射液（SFI）预处理组（SFI纽）。观察血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）和心肌钙蛋白（cTn-I）含量,测定心肌梗死范围、心肌组织丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性等指标。结果与Sham组比较,I／R组和SFI组LDH、CK-MB和cTn-I值均明显升高,心肌组织SOD活性显著下降,MDA含量显著升高,心肌梗死范围明显增大（P〈0．01）。与I／R组比较,SFI纽能显著降低血清LDH、CK-MB、cTn-I值和心肌组织MDA含量（P〈0．01）,显著缩小心肌梗死范围（P〈0．05）,升高心肌SOD活性（P〈0．05）。结论SFI预处理对心肌缺血／4g灌注损伤心肌有保护作用,机制可能与减轻脂质过氧化反应有关。     

痛风伴微量白蛋白尿患者胰岛素抵抗与红细胞膜胰岛素受体的关系

目的 探讨痛风伴微量白蛋白尿患者胰岛素抵抗与红细胞膜胰岛素受体的关系。方法 观察106例痛风患者，按是否合并微量白蛋白尿（MAU），将其分为MAU组和正常MAU组（NMAU），测定空腹、餐后2h血糖、胰岛素及空腹血脂、血尿酸（UA），并检测高、低亲和力红细胞膜胰岛素受体数目（R1、R2）和高、低亲和力常数（K1、K2），分析痛风伴MAU患者胰岛素抵抗与红细胞膜胰岛素受体的关系。结果 MAU组空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-c）及胰岛素抵抗指数（HOMA—IR），分别为：（16±4）mU／L、（2．5±0．6）mmol／L、（3．2±0．5）mmol／L和3．6±1．2，正常MAU组分别为（13±3）mU／L、（2．3±0．8）mmol／L、（3．0±0．5）mmol／L及3．0±0．4，上述指标两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。痛风患者合并MAU红细胞膜胰岛素受体数目（R1）较正常MAU组明显减少，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。痛风患者合并MAU的Pearson相关分析结果示：HOMA—IR与年龄、体重指数（BMI）、TG、LDL—c、UA、UAER呈正相关（P〈0．05或P〈0．01），与R1、R2、K1、K2呈负相关（P〈0．05或P〈0．01）。多元线性逐步回归分析提示BMI、年龄、R1是影响痛风合并MAU患者胰岛素抵抗的独立危险因素。结论 痛风合并MAU时存在胰岛素抵抗，且与红细胞膜胰岛素受体数目减少密切相关。     

高碳酸血症对急性肺损伤保护作用及机制探讨的实验研究

目的探讨高碳酸血症对急性肺损伤模型的保护作用及可能的机制。方法24只新西兰兔按随机数字表法分为对照组、治疗组、预防组，每组8只。采用脂多糖静脉注射复制肺损伤模型，观察3组兔血流动力学、血气指标的变化；检测肺组织湿／干重（W／D）比、光镜、肺损伤组织学定量评价指标（IQA）来评估肺脏的损伤程度。通过对肺组织中髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）及血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）浓度及中性粒细胞凋亡率的测定，阐明高碳酸血症对肺损伤保护的可能机制。结果（1）治疗组、预防组在模型形成后平均动脉压、心率、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、动脉血氧分压／吸入气氧浓度（PaO2／FiO2）分别为（79±6）mm Hg（1mmHg=0．133kPa）、（180±10）次／min、（99±13）mmHg、250±26，（80±9）mmHg、（181±12）次／min、（95±11）mmHg、241±56，与对照组[（66±10）mmHg、（139±13）次／min、（31±4）mmHg、182±35]比较差异有统计学意义（t值分别为4．05、26．32、5．36、28．15、12．54、11．07、16．13、12．36。P均分别〈0．05、0．01）；（2）治疗组、预防组W／D、NPO、MDA分别为1．98±0．28、1．87±0．30、（6．1±1．6）U／g、（5．8±1．5）U／g、（20±5）mg／L、（19±4）mg／L，与对照组[2．43±0．26、（9．0±1．3）U／g、（36±8）mg／L]比较差异有统计学意义（t值分别为11．07、24．46、2．35、9．63，12．34、25．32，P分别〈0．05、0．01）；（3）治疗组、预防组血清和BALF中IL-8、TNF—α、中性粒细胞凋亡率分别为（50±8）ng／ml、（103±49）ng／ml、（94±16）ng／ml、（44±9）ng／ml、（38±9）％、（56±5）％、（49±7）ng／ml、（96±50）ng／ml、（91±14）ng／ml、（39±6）ng／ml、（39±10）％、（55±10）％，与对照组[（91±43）ng／ml、（177±60）ng／ml、（162±15）ng／ml、（67±7）ng／ml、（19±7）％、（43±7）％]比较差异有统计学意义（t值分别为7．12、5．55、7．30、3．93、13．08、8．00，P分别〈0．05、0．01）；（4）各组血清及BALF中IL-8、TNF—α与中性粒细胞凋亡率呈负相关（r值分别为-0．73、-0．72、-0．52、-0．64、-0．73、-0．56、-0．57、-0．78、-0．69、-0．75、-0．82、-0．84，P均〈0．05）。结论高碳酸血症对急性肺损伤具有保护作用，对血流动力学无明显影响。     

后适应渐进模式通过线粒体途径减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨后适应不同模式对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响,并进一步研究线粒体途径在其中的作用.方法 60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(R/I)组、后适应逆向模式(R-Post,后适应处理方案短暂再灌注/缺血时间为30/10 s,25/15 s,15/25 s,10/30 s)组、后适应标准模式(S-Post,后适应处理方案为20/20 s x 4)组和后适应渐进模式(G-Post,后适应处理方案短暂再灌注/缺血时间为10/30 s,15/25 s,25/15 s,30/10 B)组,共5组,建立急性心肌梗死再灌注和缺血后适应模型.再灌注6 h后每组取4只处死,取心肌组织用Western blot方法测定B细胞淋巴瘤/自血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关抗原(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)在心肌组织中的表达及细胞色素C(Cyt-c)在胞浆中的表达.各组其余大鼠再灌注24 h后测定血液动力学,抽血测心肌酶,取心脏进行TUNEL凋亡检测和梗死面积测定.结果 三种后适应处理方案Bax、Cyt-c、Caspase-9、凋亡指数、心肌酶释放均显著低于R/I组(P均<0.05),同时三种后处理方案Bcl-2水平均显著高于R/I组(P均<0.05),其中G-Post组最为明显,其次是S-Post组,R-Post组最不明显.G-Post组同S-Post组比较,Bax(0.35±0.10比0.50±0.02,P<0.05)、Cyt-c(O.66±0.16比1.68±0.22,P<0.05)、Caspase-9(0.61±0.17比1.66±0.55,P<0.05)的表达水平均较低,心肌酶释放水平低[CK:(251.00±45.16)U/L比(388.56±75.01)U/L,P<0.05;CK-MB:(146.00±60.12)U/L比(291.16±52.41)U/L,P<0.05],凋亡指数小[(4.32 ±1.16)%比(8.58 ±1.12)%,P<0.05].同时Bcl-2表达水平高于S-Post组(2.00 ±0.34比1.40±0.18,P<0.05).在以上指标中渐进模式均显著优于逆向模式.结论 后适应渐进模式减轻心肌再灌注损伤程度较标准模式显著,线粒体途径在其中发挥了重要作用.     

短期应用辛伐他汀对大鼠缺血再灌注后心肌无复流的影响及其潜在机制

目的 探讨辛伐他汀对缺血再灌注后心肌无复流的影响及其潜在机制.方法 雄性Wistar大鼠48只,随机分为假手术组、对照组及辛伐他汀组.对照组及辛伐他汀组结扎左冠状动脉建立大鼠心肌无复流模型,假手术组仅开胸不结扎冠状动脉.术后进行缺血范围(RA/LVA)、无复流范围(NA/RA)及梗死范围(MIA/RA)评估,测定心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,一氧化氮(NO)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)含量,并用免疫组织化学法测定心肌组织及微血管核因子(NF)-кB p65阳性指数.结果 在缺血范围差异无统计学意义的条件下,辛伐他汀组无复流范围显著小于对照组(34.10±7.05比52.09±6.89,P<0.01),梗死范围也小于对照组(78.80±7.60比90.13±5.72,P<0.05).对照组及辛伐他汀组心肌组织iNOS活性、NO含量、MPO活性及MDA含量均高于假手术组,对照组eNOS活性显著低于假手术组(P均<0.05),辛伐他汀组eNOS活性与假手术组比较差异无统计学意义.辛伐他汀组心肌组织iNOS活性、NO含量、MPO活性及MDA含量均低于对照组(5.02±1.64比9.19±2.89,586.21±126.97比744.49±137.53,257.72±93.43比384.10±40.68,72.10±18.56比111.84±38.58,P均<0.05),eNOS活性显著高于对照组(7.08±1.74比3.72±0.98,P<0.01).对照组及辛伐他汀组左心室游离壁梗死周边心肌细胞及微动脉NF-кB p65阳性指数均显著高于假手术组,辛伐他汀组低于对照组(21.59±10.5比34.32±9.55,27.27±13.19比44.91±15.06,P均<0.05).结论 辛伐他汀可以改善缺血再灌注后心肌无复流,其可能机制是通过改善内皮功能,抑制炎症反应,进而抑制中性粒细胞的激活浸润,减少活性氧簇的生成,最终减轻无复流.     

丹参注射液降低血管内皮细胞氧化应激损伤，对心肌梗死患者心肌功能的保护效果

目的:探讨丹参注射液降低血管内皮细胞氧化应激损伤,对急性心肌梗死(AMI)患者心肌功能的保护效果。方法:120例行经皮冠脉介入治疗(PCI)的AMI患者被随机均分为常规治疗组和丹参组(在常规治疗组基础上加用丹参注射液),两组均治疗14d。治疗前后检测比较两组外周血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、高敏心肌肌钙蛋白T (hscTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及LVEF、心肌梗死面积,并随访观察两组术后3个月内主要不良心血管事件(MACE)和用药不良反应发生情况。结果:与常规治疗组治疗后比较,丹参组外周血SOD水平[(20.76±1.58)U/ml比(25.81±1.45)U/ml]、LVEF [(52.44±6.74)%比(57.57±4.39)%]显著升高,外周血MDA [(8.84±0.47)pg/ml比(6.74±0.56)pg/ml]、NO [(19.11±1.58)μmol/L比(15.34±1.74)μmol/L]、iNOS [(80.37±1.65)U/ml比(73.28±2.76)U/ml]、hscTnT [(38.25±4.24)ng/ml比(26.85±3.23)ng/ml]、CK-MB [(63.26±5.64)U/L比(32.68±4.49)U/L]水平以及心肌梗死面积[(19.42±4.33)mm2比(13.58±3.25)mm2]均显著降低,P均=0.001。术后随访3个月,丹参组MACE发生率显著低于常规治疗组(20.00%比41.67%),P=0.010。两组治疗过程中,均无严重药物不良反应发生。结论:丹参注射液能够显著减轻AMI患者PCI术后血管内皮细胞氧化应激损伤,保护缺血再灌注心肌功能,改善预后,值得推广。     

缝隙连接在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用

目的探讨心肌缝隙连接在缺血预适应中的调控机制以及在预适应信号传导通路中的地位和作用。方法Sprague—Dawley大鼠进行30min的冠状动脉缺血和4h再灌注,根据是否使用缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸和5-羟基奎酸分为7组,即对照组（单纯缺血再灌注）、缺血预适应组、缺血预适应和5-羟基奎酸合用组、二氮嗪组、二氮嗪和5-羟基奎酸合用组、甘草次酸组、甘草次酸和5-羟基奎酸合用组。测量各组的血流动力学指标、心肌梗死面积以及缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化。结果与对照组相比,缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸能降低心肌梗死面积（P〈0．001）,5-羟基奎酸可以阻断缺血预适应和二氮嗪的心肌保护作用（P〉0．05）,但是对缝隙连接失耦联剂甘草次酸没有影响（P〈0．001）。缺血预适应和线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪能促进缝隙连接蛋白43磷酸化,抑制去磷酸化和内化（P〈0．001,P〈0．001）,线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道阻断剂5-羟基奎酸能阻断该作用（P〉0．05,P〉0．0051）。结论缺血预适应通过开放线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道来调节缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化,进而调控缝隙连接的化学转运,减少心肌梗死面积。     

Protection of Veratrum nigrum L. var. ussuriense Nakai alkaloids against ischemia-reperfusion injury of the rat liver

AIM： TO investigate the protective effects and possible mechanisms of Veratrum nigrum L. var. ussuriense Nakai alkaloids （VnA） on hepatic ischemia/reperfusion （I/R） injury in rats.
METHODS： Forty male Wistar rats were randomly divided into four experimental groups （n = 10 in each）： （A） Control group （the sham operation group）; （8） I/R group （pretreated with normal saline）; （C） Small-dose （10 μg/kg） VnA pretreatment group; （D） Large-dose （20 μg/kg） VnA pretreatment group. Hepatic ischemia/ reperfusion （Hepatic I/R） was induced by occlusion of the portal vein and the hepatic artery for 90 min, followed by reperfusion for 240 min. The pretreatment groups were administered with VnA intraperitoneally, 30 min before surgery, while the control group and I/R group were given equal volumes of normal saline. Superoxide dismutase （SOD） activity, myeloperoxidase （MPO） activity and nitric oxide （NO） content in the liver tissue at the end of reperfusion were determined and liver function was measured. The expression of intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） and E-selectin （ES） were detected by immunohistochemical examinations and Western blot analyses.
RESULTS： The results showed that hepatic I/R elicited a significant increase in the plasma levels of alanine aminotransferase （ALT： 74.53 ± 2.58 IU/L vs 1512.54 ± 200.76 IU/L, P 〈 0.01） and lactic dehydrogenase （LDH： 473.48 ± 52.17 IU/L vs 5821.53 ± 163.69 IU/L, P 〈 0.01）, as well as the levels of MPO （1.97 ± 0.11 U/g vs 2.57 ± 0.13 U/g, P 〈 0.01） and NO （69.37 ± 1.52 μmol/g protein vs 78.39 ± 2.28 μmol/g protein, P 〈 0.01） in the liver tissue, all of which were reduced by pretreatment with VnA, respectively （ALT： 1512.54 ± 200.76 IU/L vs 977.93 ± 89.62 IU/L, 909.81 ± 132.76 IU/L, P 〈 0.01, P 〈 0.01; LDH： 5821.53 ± 163.69 IU/L vs 3015.44 ± 253.01 IU/L, 2448.75 ± 169.4 IU/L, P 〈 0.01, P 〈 0.01; MPO： 2.57 ± 0.13 U/g vs 2.13 ± 0.13 U/g,     

Nitric oxide inhalation improves microvascular flow and decreases infarction size after myocardial ischemia and reperfusion.

OBJECTIVES: The purpose of this study was to test if nitric oxide (NO) could improve microvascular perfusion and decrease tissue injury in a porcine model of myocardial ischemia and reperfusion (I/R). BACKGROUND: Inhaled NO is a selective pulmonary vasodilator with biologic effects in remote vascular beds. METHODS: In 37 pigs, the midportion of the left anterior descending coronary artery was occluded for 50 min followed by 4 h of reperfusion. Pigs were treated with a saline infusion (control; n = 14), intravenous nitroglycerin (IV-NTG) at 2 microg/kg/min (n = 11), or inhaled nitric oxide (iNO) at 80 parts per million (n = 12) beginning 10 min before balloon deflation and continuing throughout reperfusion. RESULTS: Total myocardial oxidized NO species in the infarct core was greater in the iNO pigs than in the control or IV-NTG pigs (0.60 +/- 0.05 nmol/mg tissue vs. 0.40 +/- 0.03 nmol/mg tissue and 0.40 +/- 0.02 nmol/mg tissue, respectively; p < 0.01 for both). Infarct size, expressed as percentage of left ventricle area at risk (AAR), was smaller in the iNO pigs than in the control or IV-NTG pigs (31 +/- 6% AAR vs. 58 +/- 7% AAR and 46 +/- 7% AAR, respectively; p < 0.05 for both) and was associated with less creatine phosphokinase-MB release. Inhaled NO improved endocardial and epicardial blood flow in the infarct zone, as measured using colored microspheres (p < 0.001 vs. control and IV-NTG). Moreover, NO inhalation reduced leukocyte infiltration, as reflected by decreased cardiac myeloperoxidase activity (0.8 +/- 0.2 U/mg tissue vs. 2.3 +/- 0.8 U/mg tissue in control and 1.4 +/- 0.4 U/mg tissue in IV-NTG; p < 0.05 for both) and decreased cardiomyocyte apoptosis in the infarct border zone. CONCLUSIONS: Inhalation of NO just before and during coronary reperfusion significantly improves microvascular perfusion, reduces infarct size, and may offer an attractive and novel treatment of myocardial infarction.     

氟伐他汀预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌的影响

目的：探讨氟伐他汀预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用及其机制。方法：48只SD大鼠被均分为假手术组、缺血再灌注组和氟伐他汀预处理组。采用免疫组化法检测心肌组织中基质金属蛋白酶（MMP）-1,MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1的表达,多导生理信号采集系统记录心功能[包括左室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压（LVEDP）、左室压最大上升和下降速率（±dp／dtmax）]的改变．以SABC比色法测定血浆中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量和心肌组织中髓过氧化物酶（MPO）活性,称重法测定心肌梗塞百分比变化。结果：缺血再灌注组心功能[LVSP：（12．87±2．25）kPa,＋dp／dtmax：（379．75±51．40）kPa／s,LVEDP：（1．31±0．14）kPa,-dp／dtmax：（292．21±52．62）kPa／s]明显差于氟伐他汀组[LVSP：（15．71±1．68）kPa,＋dp／dtmax：（534．71±73．99）kPa／s,LVEDP：（1．14±0．12）kPa,-dp／dtmax：（338．45±59．74）kPa／s,P均〈0．01];缺血再灌注组血浆CK、LDH水平和心肌组织MPO活性分别为（319．16±39．07）U／ml、（5249．63±379．53）U／L和（4．21±0．62）U／g,氟伐他汀预处理后上述指标明显降低,分别为（215．55±32．56）U／ml、（3236．48±281．24）U／L,（2．53±0．45）U／g,两组相比差异显著（P均〈0．01）。且氟伐他汀预处理组心肌梗塞面积明显小于缺血再灌注组[（56．20±3．87）％：（68．55±6．46）％,P〈0．05]。此外,与缺血再灌注组相比,氟伐他汀预处理还明显减少心肌组织中MMP-1,-9表达和上调TIMP—1表达（P均〈0．01）。结论：氟伐他汀预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

Corrected TIMI frame counts correlate with stenosis severity and infarct zone wall motion after thrombolytic therapy

BACKGROUND: The majority of patients with patent infarct-related arteries after thrombolytic therapy have slower than normal flow, which relates to myocardial perfusion. METHODS: To evaluate the relationships between blood levels of creatine kinase (CK) and the corrected Thrombolysis in Myocardial Infarction (TIMI) frame count (CTFC), infarct artery stenosis, and left ventricular function, we studied 397 patients with a first myocardial infarction who underwent angiography at 3 weeks. TIMI flow grades, the CTFC, infarct artery stenosis, and infarct zone wall motion (by contrast ventriculography using the centerline method) were assessed, and CK levels (in units per liter) were measured hourly for the first 4 hours after streptokinase (1.5 x 10(6) U over 30-60 minutes) and then every 4 hours over the next 20 hours, all blinded to treatment and outcome. RESULTS: Infarct artery stenosis and the CTFC, assessed as continuous variables, correlated in patients with patent infarct arteries (r = 0.33, P <.001). Also, there was a significant correlation between the CTFC and the sum of hypokinetic chords in the infarct zone (r = 0.15, P =.01). Patients with total occlusion or markedly slowed infarct artery flow (CTFC >100) had a higher fraction of chords with wall motion >2 SDs below normal (0.65 [0.41, 0.80] vs 0.37 [0.0, 0.67]) compared with patients with normal flow (CTFC < or =27) (P <.001). The rates of increase of median CK levels with respect to TIMI flow grades were 342 U/L/h for TIMI 3 versus 212 U/L/h for TIMI 2 versus 140 U/L/h for TIMI 0-1 (P <.0001). CONCLUSIONS: Prolonged corrected TIMI frame counts correlate with stenosis severity in the infarct artery after infarction, infarct zone regional wall motion, and CK levels.     

极化液对缺血/再灌大鼠心肌细胞死亡及心脏功能的影响:胰岛素的关键作用

目的　探讨葡萄糖 胰岛素 钾极化液 (GIK)对心肌缺血 /再灌 (MI/R)后心肌细胞死亡(坏死和凋亡 )及心脏功能的影响 ,并比较和分析GIK各组分在其中的作用。方法　制备大鼠MI/R模型 ,分别用生理盐水、GIK、葡萄糖 钾液 (GK)或胰岛素干预分组。观察动脉血压、血糖、左室压等的变化 ,再灌注结束后检测心肌梗死或提取DNA检测心肌细胞凋亡。结果　MI/R造成明显的心脏功能障碍、心肌梗死和缺血区细胞凋亡。GIK与胰岛素 (而非GK)具有相似的减轻再灌注心肌损伤作用 ,包括减少心肌梗死范围 [(41 3± 8 3) %和 (39 6± 8 6) %比对照组 (54 4± 1 0 4) % ,q =4 34和q=4 90 ,P值均 <0 0 5]、减弱DNA梯带形成及促进再灌后心脏收缩 /舒张功能恢复。结论　GIK可减少心肌梗死、促进缺血心脏功能恢复 ,胰岛素可能通过抑制缺血心肌细胞凋亡在GIK心肌保护中发挥关键作用。     

热休克蛋白70抑制剂PFTμ对小鼠炎症反应的影响

目的 观察热休克蛋白70抑制剂PFTμ对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮(NO)的生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用以及与缺血再灌注损伤小鼠炎症反应的关系,并探讨其作用机制.方法 采用LPS诱导的RAW 264.7细胞株建立细胞炎症反应模型,分为PFTμ组(PFTμ 20 μmol/L预处理15 min后加入LPS 2 g/L)和对照组(等量DMSO预处理15 min后加入等量LPS).Griess试剂法测定 NO释放量.Western blot法测定蛋白的表达.逆转录聚合酶链反应分析iNOS mRNA表达改变.建立小鼠心脏缺血再灌注模型,分为PFTμ组(40 mg/kg,溶于DMSO腹腔注射)和对照组(等量DMSO腹腔注射),测定小鼠心肌梗死面积的变化.结果 PFTμ可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放(PFTμ组NO的释放显著低于对照组,P<0.05).PFTμ可下调LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA和蛋白表达(PFTμ组iNOS mRNA和蛋白表达均显著低于对照组,P均<0.05).PFTμ可减少缺血再灌注小鼠心脏梗死面积(PFTμ组小鼠心肌梗死面积显著低于对照组,P<0.05).结论 PFTμ有抑制炎症反应的作用,该作用机制可能与抑制NO的生成有关.

Abstract：

Objective To observe the effects of hot shock protein 70 (HSP70) inhibitor (PFTμ) on inflammation response in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cells and mice underwent myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury.Methods RAW264.7 macrophage line of mice was stimulated by LPS as an inflammatory model. These were divided into control (15 min DMSO pretreatment and LPS 2 g/L)and PFTμ treated groups(15 min PFTμ 20 μmol/L pretreatment and LPS 2 g/L). NO concentration was measured by Griess Kit. The expression of iNOS protein and mRNA were detected by Western blot and RT-PCR.Infarct size was determined on mice underwent myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury in the absence or presence (PFTμ 40 mg/kg,intraperitoneal injection).Results PFTμ significantly blocked the production of NO and protein and mRNA expression of iNOS (P<0.05 vs. control). PFTμ also significantly reduced the infarct size on mice underwent I/R injury (P<0.05 vs. control).Conclusion These results suggest that PFTμ could be a potential therapeutic agent for the treatment of inflammatory diseases through inhibiting the production of NO and reducing informatory responses.