通心络对大鼠脑缺血再灌注模型微血管细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的影响

背景:现代医学发现通心络制剂除了具有抗凝和抑制血小板聚集作用外,对血管内皮细胞有一定的保护作用。目的:观察中药复方制剂通心络是否影响脑缺血再灌注动物模型黏附分子的表达。设计:随机对照实验。单位:解放军第二军医大学长征医院神经内科。材料:实验于2002-10/2003-01在解放军第二军医大学长征医院神经内科实验室完成。选择雄性SD大鼠25只,随机分为假手术组5只、模型组10只和通心络组10只。方法:线栓法制备大鼠大脑中动脉脑局灶性脑缺血再灌注模型,假手术组除将尼龙线插在颈外动脉接近颈内动脉分叉处外,其余同模型组。通心络组大鼠在缺血再灌注前给予通心络粉剂1.0g/(kg·d),溶在生理盐水中灌胃1周。模型组和假手术组灌胃等剂量生理盐水。各组大鼠麻醉后取脑制备切片,行常规苏木精-伊红染色、免疫组化及原位杂交染色。主要观察指标:①缺血再灌注后细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1阳性微血管表达数目。②缺血再灌注后细胞间黏附分子1mRNA阳性微血管表达数目。结果:①假手术组手术侧大脑半球皮质和基底节区未见细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1蛋白和细胞间黏附分子1mRNA阳性微血管表达。②模型组大鼠缺血2h再灌注6h后,缺血侧大脑细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子-1蛋白表达水平和细胞间黏附分子1mRNA表达水平显著升高。③通心络组缺血侧大脑半球皮质和基底节区蛋白和mRNA阳性微血管数较模型组显著降低犤(10.42±1.98),(12.42±2.14)/高倍视野;(8.54±2.00),(11.12±1.56)/高倍视野犦(P<0.05),血管细胞黏附分子1蛋白阳性微血管表达数目无显著变化(P>0.05)。结论:通心络可以降低大鼠脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1的转录和翻译过程,有助于减轻脑缺血后的炎症性损伤过程。     

神经节苷脂对鼠脑缺血后细胞间黏附分子1及其mRNA表达的影响

目的：探讨神经节苷脂对缺血脑组织中介导炎症病理过程的细胞间黏附分子1及其mRNA表达的影响。方法：实验于2003-08／2004—10在南京脑科医院神经病学研究所进行。取Wistar大鼠60只将大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注组、缺血＋神经节苷脂组、再灌注＋神经节苷脂组5组，每组12只。①造模：除假手术组外，4组大鼠应用线栓法建立大脑中动脉栓塞／再灌注模型，假手术者栓塞大脑中动脉。缺血时间为缺血90min，再灌注时间为缺血90min再灌24h。②给药：各组于缺血前30min和缺血后即刻经腹腔注射给药，神经节苷脂组给予神经节苷脂组水溶液（30mg／kg），其他各组给予生理盐水1mL。③观察指标：应用反转录-聚合酶链反应及免疫组织化学的方法，观察各组大鼠脑细胞间黏附分子1（面密度表示）及其mRNA[用相对吸光度值（细胞间黏附分子1mRNA平均吸光度值／内参平均吸光度值）来表示]的表达。结果：经补充后60只大鼠进入结果分析。①脑组织细胞间黏附分子1的面密度：在假手术组鼠脑组织呈低表达；再灌注组高于假手术组和再灌注＋神经节苷脂组（0．142&;#177;0．031，0．020&;#177;0．011，0．078&;#177;017,t=44373．154，P〈0．01）。②脑组织细胞间黏附分子1mRNA的相对吸光度值：在假手术组呈低表达；再灌注组高于假手术组和再灌注＋神经节苷脂组（1．364&;#177;0．028，0．266&;#177;0．041．0．791&;#177;0．038．t=2．804．3．542,P〈0．01）。结论：神经节苷脂能显著下调细胞间黏附分子1及其mRNA的表达，减轻脑缺血后炎性病理损害，具有明显的缺血后脑保护作用。     

抗细胞间黏附分子1单克隆抗体对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察应用抗细胞间黏附分子1单克隆抗体阻断大鼠缺血再灌注后由细胞问黏附分子1介导的的炎症反应，对缺血脑组织的保护作用。方法：实验于2003—04／2004—04在徐州医学院附属医院神经病学实验室进行。将造模成功的健康雄性SD大鼠24只随机分为3组，每组8只：①脑缺血组：线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型。②再灌注组：同前造模，于缺血6h回抽尼龙线开始再灌注。⑨抗细胞间黏附分子1单克隆抗体组：处理同再灌注组，再灌注同时经颈内动脉注入抗细胞间黏附分子1单克隆抗体1mg／kg。每组随机取5只大鼠于再灌注48h在麻醉状态下处死，用免疫组织化学方法观察各组大鼠脑内细胞间黏附分子1阳性血管数，苏木精-伊红染色观察大鼠脑内白细胞浸润数，炎症反应；各组剩余3只大鼠同时间麻醉状态下处死，四氮唑红测定大鼠脑梗死体积占脑半球的百分率。结果：24只大鼠进入结果分析。①脑内细胞间黏附分子1阳性血管数：抗细胞间黏附分子1单克隆抗体组低于再灌注组，与脑缺血组无差异[（298&;#177;35），（450&;#177;73），（417&;#177;46）个／mm^2]。②脑白细胞浸润数：抗细胞间黏附分子1单克隆抗体组低于再灌注组和脑缺血组[（8．5&;#177;1．7），（28．7&;#177;5．9），（16．3&;#177;4．6）个,P〈0．05]。⑨脑梗死体积占脑半球的百分率：抗细胞间黏附分子1单克隆抗体组低于再灌注组，与脑缺血组无差异[（26．4&;#177;2．5）％，（42．5&;#177;3．5）％，（36．6&;#177;4．1）％]。结论：抗细胞间黏附分子1单克隆抗体对脑缺血后所伴发的炎症反应有抑制作用；可减轻缺血后脑组织的损伤，缩小脑梗死体积，在炎症损伤环节上可延长大鼠脑梗死的溶栓治疗时间窗。     

还原型谷胱甘肽对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达的影响

目的：观察还原型谷胱甘肽对大鼠短暂性局灶性脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达的影响。方法：实验于2005—06在兰州大学基础医学院人体解剖学教研室实验中心完成。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注24h模型，随机分为假手术组、缺血再灌注模型组和还原型谷胱甘肽处理组。每组15只。制模成功后观测各组大鼠的神经行为变化，脑梗死体积，行苏木精-伊红染色计数缺血区中性粒细胞浸润数目，应用免疫组化方法检测细胞间黏附分子1的表达情况。结果：实验中假手术组未见动物死亡，缺血再灌注组2只动物死亡，还原型谷胱甘肽处理组1只动物死亡。死因均为蛛网膜下腔出血所致。①还原型谷胱甘肽处理组及缺血再灌注模型组动物均有不同程度的神经功能缺损，且还原型谷胱甘肽处理组动物神经行为学评分有改善[（2．04&;#177;0．47），（2．71&;#177;0．29），分（P〈0．05）]；还原型谷胱甘肽处理组梗死体积小于缺血再灌注模型组[（20．21&;#177;1．55），（29．57&;#177;4．40）％，P〈0．05]，假手术组未见梗死灶。②脑缺血2h再灌注24h后大鼠脑血管细胞间黏附分子1表达增加。阳性反应的细胞间黏附分子1主要见于脑缺血侧梗塞区及其周围的毛细血管壁，于神经元和胶质细胞也可见。还原型谷胱甘肽处理组的表达较缺血再灌注模型组减少[（11．29&;#177;1．11），（17．14&;#177;1．77），P〈0．05]。③假手术组细胞形态正常；缺血再灌注模型模型组右侧大脑缺血范围内皮质水肿明显，神经细胞外周隙扩大，毛细血管周隙增宽，血管内血栓形成，在皮质和纹状体可见大量死亡神经元，可见筛状坏死灶，间质水肿呈松网状，有大量中性粒细胞的浸润；还原型谷胱甘肽处理组大脑皮质神经细胞层次尚清晰，未见明显坏死灶，神经细胞及毛细血管周围间隙稍大，但明显小于缺血再灌注模型组。间质水肿、中性粒细胞的浸润也轻于缺血再灌注模型组。结论：外源性谷胱甘肽可以改善大鼠局灶性脑缺血引起的神经行为障碍，减少脑梗死体积，通过减少脑缺血引起细胞间黏附分子1表达，抑制中性粒细胞的浸润，从而减轻脑缺血再灌注后的炎症反应，而发挥对脑缺血后的保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达与白细胞浸润的关系及吲哚美辛的干预效应

目的：观察脑缺血2h再灌注不同时间点脑组织细胞间黏附分子1的表达与白细胞浸润的关系，并观察吲哚美辛对细胞间黏附分子1表达及白细胞浸润的影响。 方法：实验于2004-09／2005-03在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。取35只雄性SD大鼠随机分为假手术组5只、对照组25只，吲哚美辛组5只，对照组又分为缺血2h再灌注2，12，24，48．72h 5个亚组，每个亚组5只。①造模：采用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻断模型，阻断大鼠大脑中动脉血流2h之后进行再灌注。②给药：吲哚美辛组在再灌注24h时灌胃给予吲哚美辛（按10mg／kg，溶于2mL生理盐水中），对照组中的再灌注24h亚组给予等容生理盐水。③观察指标：经免疫组化和苏木精-伊红染色，测定细胞间黏附分子1表达阳性微血管数和白细胞计数。 结果：35只大鼠均进入结果分析。①在脑缺血再灌注早期坏死区周围微血管内皮细胞表达细胞间黏附分子1即开始增多[再灌注2h：（15．94&;#177;1．90）个／视野，再灌注12h：（30．73&;#177;3．01）个／视野]，并于24h达高峰[（37．86&;#177;2．21）个／视野]，各对照亚组与假手术组[（0．68&;#177;0.69）个／视野]比较差异有显著性意义（P〈0．01），且各亚组间比较差异有显著性意义（P〈0．01）。②在脑缺血再灌注早期坏死区周围白细胞浸润即开始增多[再灌注2h：（2．30&;#177;0．91）个／视野，再灌注12h：（9．99&;#177;1．40）个／视野]，并于24h达高峰[（22．11&;#177;1．71）个／视野]，各对照组亚组与假手术组比较有显著性差异（P〈0．01），且各亚组两两比较组间差异有显著性意义（P〈0．01）。③细胞间黏附分子1表达与白细胞浸润的相关性分析表明两者之间呈正相关（r=-0．731，P〈0．01）。④吲哚美辛组细胞同黏附分子1表达及白细胞浸润计数[（16．01&;#177;11．43）个／视野，（10．55&;#177;2．64）个／视野1均低于再灌注24h亚组（P〈0．01）。 结论：脑缺血再灌注后细胞问黏附分子1可介导白细胞与内皮细胞的黏附；吲哚美辛可降低脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1的表达和白细胞的浸润，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

沙鼠脑缺血再灌注损伤后细胞间黏附分子1及降钙素基因相关肽变化与阿司匹林的干预效应

背景：近年来由于溶栓治疗的开展，对脑缺血再灌注损伤保护作用及其机制的探讨成为国内外研究的热点。阿司匹林具有较强的抗血小板聚集作用而用于血栓性疾病的防治。 目的：探讨阿司匹林对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用及其对细胞间黏附分子及降钙素基因相关肽表达的影响。 设计：随机分组设计、动物实验。 单位：山东大学临床医学院济南市中心医院神经内科。 材料：实验于2001—12／2002—06在泰山医科大学生理实验室完成。选择健康雄性蒙古种沙土鼠63只，随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组及阿司匹林干预组，每组21只。根据脑缺血再灌注时间将每组动物再分为24h，3，7d3个时相点，每个时相点7只。 方法：采用夹闭双侧颈总动脉的方法，制备沙土鼠短暂性全脑缺血再灌注模型。假手术组：显露双侧颈总动脉，不夹闭动脉。缺血再灌注组：显露双侧颈总动脉，动脉夹夹闭，7min后去除动脉夹恢复血流。阿司匹林干预组：术前经胃管灌人肠溶阿司匹林（50mg／kg）。显露双侧颈总动脉，动脉夹夹闭，7min后去除动脉夹恢复血流，动物在处死前，每日仍经胃管给予阿司匹林。分别于术后24h，3，7d断头处死沙土鼠取脑组织，采用免疫组织化学SABC法，检测脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1及降钙素基因相关肽表达水平的变化，以及阿司匹林干预对二者表达的影响。主要观察指标：脑组织中细胞间黏附分子1及降钙素基因相关肽表达。结果：纳入动物63只，均进入结果分析。①细胞间黏附分子1表达的变化：缺血再灌注24h，缺血再灌组动物脑组织细胞间黏附分子1的表达水平开始增加，3d后明显增强，至7d后仍维持在较高水平，与假手术组相比差异有显著性意义f缺血再灌组分别为（3．36&;#177;&;#177;2．26）％，（5．68&;#177;3．13）％，（4．98&;#177;2．10）％，假手术组分别为（1．53&;#177;1．07）％，（1．56&;#177;1。23）％，（1．62&;#177;1．33）％，P〈0．051；而阿司匹林干预组细胞间黏附分子表达水平，在所有时限均明显低于缺血再灌注组，差异有显著性意义[分别为（0．96&;#177;0．83）％，（2．76&;#177;2．10）％，（1．96&;#177;1．09）％，P〈0．05]。②降钙素基因相关肽表达的变化：在脑缺血再灌注后24h，3，7d缺血再灌注组动物降钙素基因相关肽都呈弱阳性表达[分别为（3．12&;#177;2．26）％，（2．68&;#177;2．04）％，（2．57&;#177;1．97）％]；而阿司匹林干预组则呈强阳性表达[分别为（4．98&;#177;2．47）％，（5．97&;#177;2．35）％，（6．04&;#177;2．40）％]。 结论：脑缺血再灌注可诱导细胞间黏附分子1表达上调，并抑制降钙素基因相关肽的表达；阿司匹林通过抑制细胞间黏附分子1表达水平和增强降钙素基因相关肽表达，从而达到较好的脑保护作用：     

脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景：目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达，但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究，对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。 目的：探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。 设计：随机分组设计、动物实验。 单位：吉林大学体育学院运动医学系。 材料：实验于2003—03／2004—01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只，随机数字表法分为正常对照组7只，单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组：阻断血流30min7只，阻断血流60min7只；缺血再灌注组：根据脊髓缺血30min后再灌注30，60min，2，4，6，9，12，24h又分为8个时相点，每个时相点7只。 方法：采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1 mRNA和白细胞介素1 BmRNA表达量。 主要观察指标：白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。 结果：纳入动物77只，均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA（A值）表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著（分别为1．07&;#177;0．33，0．60&;#177;0．22，0．57&;#177;0．12，t=3．7517，11．8526，P〈0．01）。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（33．7&;#177;3．2），（23．8&;#177;4．5），（23．1&;#177;2．1），t=2．7988，9．9627，P〈0．01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为0．94&;#177;0．12，0．52&;#177;0．11，0．51&;#177;0．10，t=0．3270，6．1274，P〈0．01]。④缺血再灌注4，6，12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（316．90&;#177;26．00），（361．40&;#177;18．00），（406．00&;#177;23．00），（164．21&;#177;2．00），（180．00&;#177;32．00）μg／L，t=1．4103，9．1193，P〈0．01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（15．00&;#177;2．00），（750&;#177;1．67），（6．67&;#177;1．00）nkat／g,t=3，0122,P〈0．01]。 结论：再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础，在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。     

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠单个核细胞中细胞间黏附分子1及血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响

目的：黏附分子的表达与动脉粥样硬化的发生发展有关。观察芪丹通脉片对实验性动脉粥样硬化大鼠外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响。方法：模型构建、样品采集与分析分别于2003—03／06，2003—06／09在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成。将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组：模型组、空白对照组、阳性对照辛伐他汀组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组，每组12只。采用高脂饮食配合口服维生素耽建立大鼠动脉粥样硬化模型，各组动物灌胃给药。采用半定量反转录聚合酶链反应的方法检测各组动物外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA的表达，分析造模及各药物组细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的变化。结果：72只大鼠均纳入实验结果分析。细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1基因的表达：模型组比空白对照组明显增加（1．37&;#177;0．08，1．40&;#177;0．06,P=0．000）；辛伐他汀组及各中药组均明显低于模型组（P=0．000），且芪丹通脉片高剂量组的作用明显优于芪丹通脉片低剂量组（0．40&;#177;0．06，0．40&;#177;0．05；0．61&;#177;0．07，0．67&;#177;0．05。P=0．003．0．007）。结论：高脂饮食能使细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达明显增加，而芪丹通脉片各剂量组可以不同程度地下调血管壁内细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达。而且芪丹通脉片高剂量组的作用效果明显优于低剂量组。     

抗细胞问黏附分子-1抗体对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景：研究发现脑缺血后多形核白细胞(polymovphonuclear leukocyte，PMNL)与微血管内皮细胞(capillary endothelial cell，CEC)间的黏附增多，应用抗细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，1-CAM-1)抗体可减轻神经元的缺血性损伤。但是目前还没有直接的证据表明抗-ICAM-1抗体可以抑制PMNL与CEC间的黏附过程。目的：观察脑缺血再灌注后PMNL与CEC间的黏附性变化，探讨应用抗-ICAM-1抗体对脑缺血再灌注后PMNL与CEC间黏附性的影响。设计：完全随机设计。地点和对象：实验地点设在第三军医大学大坪医院神经内科实验室。以成年雄性Wistar大鼠作为实验动物，分为对照组(n=4)、假手术组(n=6)、脑缺血再灌注组(n=10)和治疗组(n=10)。干预：假手术组、脑缺血再灌注组和治疗组大鼠分别于假手术和再灌注4，12，24h后抽取静脉血2～4mL。治疗组大鼠于缺血再灌注后1h静脉注射抗ICAM-1抗体(1mg／kg)。用右旋糖酐沉淀法和Percoll密度梯度离心法分离出PMNL，加入培养的CEC，1h后进行微管吸吮检测。主要观察指标：PMNL与CEC间的黏附力和黏附应力。结果：脑缺血再灌注4h后PMNL和CEC间的黏附力和黏附应力明显升高，并于12h达到高峰。治疗组大鼠在各时间点的黏附力【4h：(14．3&;#177;0．6)N，12h：(16．2&;#177;0．8)N，24h：(13．7&;#177;0．5)N】和黏附应力【4h：(37．2&;#177;16．6)Pa，12h：(38．9&;#177;14．3)Pa,24h：(33．2&;#177;10．1)Pa】都高于假手术组【黏附力：4h：(3．8&;#177;0．3)N，12h：(4．67&;#177;0．2)N，24h：(3．49&;#177;0．2)N；黏附应力：4h：(9．7&;#177;1．21)Pa，12h：(10．9&;#177;1．48)Pa,24h：(8．6&;#177;1．39)Pa】(t=2．92～38．52，P&;lt;0．01)。但明显低于脑缺血再灌注组【黏附力：4h：(17．8&;#177;0．9)N，12h：(24．9&;#177;2．1)N，24h：(15．3&;#177;1．2)N；黏附应力：4h：(46．3&;#177;19．8)Pa,12h：(59．7&;#177;20．6)Pa,24h：(38．2&;#177;11．7)Pa】(t=-2．82～-13．51，P&;lt;0．01)。结论：ICAM-1可能通过介导脑缺血再灌注后的细胞间黏附过程而参与了神经元的再灌注损伤；抗-ICAM-1抗体可抑制脑缺血再灌注后PMNL和CEC间的黏附，为治疗缺血性脑血管病的提拱新的思路。     

糖尿病大鼠脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1表达和髓过氧化物酶活性的变化

目的：观察糖尿病大鼠脑缺血再灌注后缺血损伤区炎症因子细胞间黏附分子1表达．以及代表局部中性粒细胞数目的髓过氧化物酶活性变化，并与急性高血糖组相比较。方法：实验于2001—03／2002—03在河南医科大学耳鼻喉研究所进行。选用成年健康Wistar大鼠144只，随机分为4组，每组36只：①糖尿病组：经尾静脉注射60mg／kg链尿佐菌素溶液（200g／L）制备糖尿病大鼠模型．1个月后制作左侧大脑中动脉栓塞，缺血2h再灌注模型。②急性高血糖组：术前5min腹腔注射500g／L葡萄糖注射液20mL／kg，然后同前制备脑缺血再灌注模型。③正常血糖组：术前不干预，同前制备脑缺血再灌注模型。④假手术组：不栓塞大脑中动脉，其余处理同正常血糖组。各组均又分为再灌注0，3，6h组，再相应时间点麻醉状态下处死大鼠取脑．用免疫组织化学方法检测缺血脑组织细胞间黏附分子1表达．用比色法测定缺血脑组织髓过氧化物酶活性。结果：经补充后144只大鼠进入结果分析。①细胞间黏附分子1表达：假手术组有微量表达，急性高血糖组和糖尿病组在再灌注3h即显著高于正常血糖组（1607．00&;#177;106．48，1812．00&;#177;112．58，1115．67&;#177;83．86，P〈0．01）．再灌注6h仍高于正常血糖组（2005．33&;#177;173．86，2181．67&;#177;122．85．1269．17&;#177;106．53，P〈0．01）．且糖尿病组明显高于急性高血糖组（P〈0．05）。②髓过氧化物酶活性：假手术组在0．068-0．072。再灌注3h急性高血糖组和糖尿病组增加至0．41，高于正常血糖组的0．17（P〈0．01）。再灌注6h急性高血糖组高于糖尿病组（0．74，0．44，P〈0．05），但两组均高于正常血糖组（0．35，P〈0．01）。结论：急性高血糖可加重大鼠脑缺血再灌注后的炎症损伤，糖尿病不仅通过高血糖机制，还通过其他机制加重再灌注炎症损伤。     

西洛他唑对人脐静脉内皮细胞血管细胞黏附分子1和细胞间黏附分子1mRNA表达的影响

目的观察西洛他唑对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）血管细胞黏附分子1（VCAM-1）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）mRNA表达的影响,探讨西洛他唑可能的抗动脉粥样硬化作用机制。方法将HUVECs用不同浓度的西洛他唑（0μg/L、0.05μg/L、0.1μg/L、1.0μg/L、10μg/L）溶液处理1小时后,用肿瘤坏死因子α（TNF-α）10μg/L诱导24小时。半定量复合逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定黏附分子VCAM-1和ICAM-1mRNA的表达。结果 TNF-α能上调VCAM-1和ICAM-1的表达,西洛他唑在一定程度上可抑制上述作用,随着西洛他唑浓度的增加,ICAM-1mRNA表达水平逐步下降,分别为0.239±0.012、0.205±0.012、0.166±0.010、0.136±0.008,VCAM-1mRNA表达水平也逐步下降,分别为0.114±0.048、0.093±0.051、0.083±0.045、0.068±0.039。结论西洛他唑可抑制TNF-α诱导的HUVECs的黏附分子VCAM-1和ICAM-1mRNA表达,提示西洛他唑的抗动脉粥样硬化作用可能是通过阻止血单核细胞向血管内皮细胞聚集和黏附实现的。     

Intercellular adhesion molecule-1 and vascular cell adhesion molecule-1 are increased in the plasma of children with sepsis-induced multiple organ failure

OBJECTIVES: To determine concentrations of circulating adhesion molecules endothelial (E)-selectin, intercellular adhesion molecule (ICAM)-1, and vascular cell adhesion molecule (VCAM)-1 in children with sepsis-induced multiple organ failure (MOF), and to determine associations among increased concentrations of these circulating adhesion molecules and important outcome measures. DESIGN: Prospective study. SETTING: University pediatric intensive care unit. PATIENTS: A total of 77 consecutive children with sepsis and 14 acutely ill children without sepsis. INTERVENTIONS: Plasma E-selectin, ICAM-1, and VCAM-1 concentrations and organ failure index (indicating number of failed organ systems) were determined in 77 children on days 1 and 3 of sepsis, and in 14 control children on pediatric intensive care unit day 1. Multivariate logistic regression analysis was used to determine associations between adhesion molecule concentrations and clinically relevant outcome measures. MEASUREMENTS AND RESULTS: Plasma concentrations of E-selectin, ICAM-1, and VCAM-1 were increased in children with sepsis vs. control on day 1 (p < .05). Plasma VCAM-1 (but not ICAM-1 or E-selectin) was increased in children with more than three organ failures vs. children with less than three organ failures (p < .05). Plasma ICAM-1 and VCAM-1 (but not E-selectin) concentrations independently predicted number of organs failed and development of more than three organ failures. Plasma ICAM-1 and VCAM-1 also predicted mortality and development of sequential (pulmonary/hepatic/renal) MOF (p < .05). CONCLUSIONS: The pronounced and persistent increase in plasma VCAM-1 and ICAM-1 that occurs in children with sepsis and persistent MOF may indicate a phenotypic change in endothelium toward a more proinflammatory state. Alternatively, the source for these adhesion molecules may be activated leukocytes and other cell types. Future studies are required to determine the role of ICAM-1 and VCAM-1 in the pathogenesis of sepsis-induced MOF.     

血清可溶性血管细胞黏附分子-1和可溶性细胞间黏附分子-1与2型糖尿病血管病变的相关性

目的 探讨血清可溶性血管细胞黏附分子-1（sVCAM-1）和可溶性细胞间黏附分子-1（siCAM-1）在2型糖尿病大、小血管病变中的作用。方法 应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测了62例2型糖尿病患者血浆sVCAM-1和siCAM-1水平,并与20例健康人作对照。结果 糖尿病各组血清sVCAM-1和siCAM-1水平明显高于健康对照组（P〈0．01）,无血管病变组、微血管病变组和大血管病变组的含量逐步升高（P〈0．01）;逐步多元回归分析表明sICAM-1水平与血浆假性血友病因子（vWF）、甘油三酯（TG）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）呈正相关（r=0．43、0．45、0．52、0．62,均P〈0．01）;sVCAM-1水平与TG、胆固醇（TC）及尿白蛋白／肌酐（Alb／Cr）呈正相关（r=0．59、0．46、0．73,均P〈0．01）;多因素logistic回归分析表明sVCAM-1与是否惠有微血管病变显著相关（β=2．48,P〈0．05）,sICAM-1与是否惠有大血管病变显著相关（β=2．46,P〈0．05）。结论 sICAM-1和sVCAM-1参与了2型糖尿病血管病变的发生和发展,可作为早期2型糖尿病患者慢性血管并发症发生的预测及监测指标。     

Influence of single low-density lipoprotein apheresis on the adhesion molecules soluble vascular cellular adhesion molecule-1, soluble intercellular adhesion molecule-1, and P-selectin.

The aim of our study was to investigate the influence of single low-density lipoprotein apheresis (heparin extracorporeal low-density lipoprotein precipitation [HELP]procedure) on plasma concentrations of soluble adhesion molecules (sAMs) such as soluble vascular cellular adhesion molecule-1 (sVCAM-1), soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1), and P-selectin in patients with familial heterozygous hypercholesterolemia and documented coronary artery disease enrolled in a chronic weekly HELP apheresis. Before HELP apheresis, the mean plasma concentration of sVCAM-1 was 515 +/- 119 ng/ml, 204 +/- 58 ng/ml for sICAM-1, and 112 +/- 45 ng/ml for P-selectin. After single HELP apheresis, plasma concentrations of sAM declined significantly by 32 +/- 7%, 18 +/- 15%, and 33 +/- 25% for sVCAM- 1,sICAM-1 and P-selectin, respectively. After a 1 week interval, sAM concentrations rose to approximately the initial values. The concentrations of all sAMs studied were significantly lower in the plasma leaving than entering the filter. Due to filtration, the decline in plasma level of sVCAM-1, sICAM-1, and P-selectin was 62 +/- 19%, 51 +/- 39%, and 67 +/- 22%, respectively. In addition to lipid reduction, single HELP apheresis significantly lowers plasma concentrations of sVCAM-1, sICAM-1, and P-selectin.     

冠心病可溶性细胞间粘附分子-1的检测及其意义

目的 检测冠心病患者可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）的变化,探讨其在冠心病发病机理、病情监测中的意义。方法 用酶联免疫吸附法检测５０例急性心肌梗死（ＡＭＩ）、５０例不稳定性心绞痛（ＵＡ）、３０例稳定性心绞痛（ＳＡ）、３０例健康者血浆ｓＩＣＡＭ－１水平。结果 （１）ＡＭＩ、ＵＡ、ＳＡ患者ｓＩＣＡＭ－１水平均较正常对照组高,且三组间亦有显著差异。（２）ＡＭＩ患者按心功能分组,各组间亦有显著差     

Early up-regulation of intercellular adhesion molecule-1 and vascular cell adhesion molecule-1 expression in rats with hemorrhagic shock and resuscitation.

This study evaluated the effect of resuscitation fluids on intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1). Sprague-Dawley rats (n = 36) were subjected to a 27 mL/kg hemorrhage over 5 min followed by a 1 h shock and 1 h resuscitation. Animals groups included: 1) cannulation only (Sham); 2) hemorrhage only (NR); 3) resuscitation with 1:1 shed blood (Blood); 4) resuscitation with 3:1 lactated Ringer's (81 mL/kg, 3LR+); 5) no hemorrhage but infusion with 3:1 lactated Ringer's (3LR); and 6) resuscitation with .36:1 hypertonic saline (7.5%, 9.7 mL/kg, HTS). At the end of resuscitation, the spleen and lung were harvested for detection of adhesion molecule mRNA and protein by RT-PCR and immunostaining. ICAM-1 and VCAM-1 expression exhibited the following pattern: 3LR+ > HTS approximate to 3LR > Blood approximate to NR approximate to Sham. VCAM-1 mRNA in the lung of the 3LR+ group was 2 or more times more than the groups of Sham, NR, Blood, and 3LR (p < .05). ICAM-1 and VCAM-1 mRNA in the spleen was significantly increased in the 3LR+ group compared with the groups of Sham, NR, and Blood (p < .05). Animals in the 3LR+ group showed enhanced staining for ICAM-1 in the pulmonary microvessels and in the marginal and trabecular areas of the spleen. Pulmonary edema and inflammatory cell infiltration were observed only in the 3LR+ group. In summary, resuscitation with LR following hemorrhagic shock induced immediate up-regulation of ICAM-1 and VCAM-1, which was associated with tissue injury. Thus, the type of resuscitation fluid used affected resuscitation injury.     

Increased binding of synovial T lymphocytes from rheumatoid arthritis to endothelial-leukocyte adhesion molecule-1 (ELAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1).

The infiltration of the synovial membrane (SM) by mononuclear cells, mostly T cells, is a typical histopathological feature associated with rheumatoid arthritis (RA). The entry of T lymphocytes into the SM is believed to be mediated by a number of molecules in the endothelium that are induced in response to a series of inflammatory mediators. In this study, we have investigated the adhesion of synovial T cells from RA patients to two endothelial ligands: endothelial-leukocyte adhesion molecule-1 (ELAM-1), the only selectin known to function as a vascular addressin for T cells, and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), the cellular ligand of VLA-4. Our results clearly demonstrate that synovial T cells isolated from both SM and synovial fluid (SF), bearing an activated and memory phenotype, displayed an enhanced capacity to interact with these two endothelial molecules as compared with T cells from peripheral blood (PB) either of the same RA patients or healthy donors. A further enhancement of VLA-4-mediated T cell binding to VCAM-1 and fibronectin could be observed when already in vivo-activated synovial T cells were stimulated in vitro with phorbol esters, suggesting the existence of several cellular affinity levels for both very late activation-4 (VLA-4) ligands. Moreover, both PB and synovial T cells from RA patients exhibited strong proliferative responses when they were cultured with either fibronectin or VCAM-1 in combination with submitogenic doses of anti-CD3 mAb. This increased endothelial binding ability of synovial T lymphocytes together with their proliferation in response to the interaction with VCAM-1 and fibronectin may represent important mechanisms in the regulation of T cell penetration and persistence in the chronically inflamed SM of RA.     

Intercellular adhesion molecule-1 dimerization and its consequences for adhesion mediated by lymphocyte function associated-1

Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1, CD54) is a ligand for the integrins lymphocyte function associated-1 (LFA-1, CD11a/CD18) and complement receptor-3 (Mac-1, CD11b/CD18) making it an important participant in many immune and inflammatory processes. Modified recombinant soluble ICAM-1 formed dimers. This result indicated that the ectodomain of ICAM-1 contains homophilic interaction sites. Soluble ICAM-1 dimers bind to solid-phase purified LFA-1 with high avidity (dissociation constant [Kd] = 8 nM) in contrast to soluble ICAM-1 monomers whose binding was not measurable. Cell surface ICAM-1 was found to be dimeric based on two distinct criteria. First, a monoclonal antibody specific for monomeric soluble ICAM-1, CA7, binds normal ICAM- 1 poorly at the cell surface; this antibody, however, binds strongly to two mutant forms of ICAM-1 when expressed at the cell surface, thus identifying elements required for dimer formation. Second, chemical cross-linking of cell surface ICAM-1 on transfected cells and tumor necrosis factor-activated endothelial cells results in conversion of a portion of ICAM-1 to a covalent dimer. Cell surface ICAM-1 dimers are more potent ligands for LFA-1-dependent adhesion than ICAM-1 monomers. While many extracellular matrix-associated ligands of integrins are multimeric, this is the first evidence of specific, functionally important homodimerization of a cell surface integrin ligand.     

可溶性细胞间黏附分子-1与类风湿关节炎的相关性研究

目的进一步探讨可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）在类风湿关节炎（RA）中的作用。方法采用放射免疫测定法对34例RA患者及30例健康体检者血清、关节液中sICAM-1进行检测。结果所测静脉血清sICAM-1浓度,RA组显著高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．001）;RA未治疗组显著高于治疗后未复发组,差异有统计学意义（P〈0．001）,但与治疗后复发组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;RA患者关节液中sICAM-1明显高于血清中的水平,二者差异有统计学意义（P〈0．05）,而未治疗组与治疗后复发组关节液中sICAM-1水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论sICAM-1在RA发病中起着重要作用,可作为判断病情严重性的指标用于监测RA的活动及疗效。