牛磺酸抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos、c-myc的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的测定，观察了牛磺酸对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：牛磺酸（３×１０－６～５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ基因表达。     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和癌基因c-fos的表达

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０－７－１０－４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体外培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０－５ｍｏｌ／Ｌ抑制血清诱导ＶＳＭＣ中的ｃ－ｆｏｓ基因表达。     

抗肿瘤特异性转移因子诱导LAK细胞毒活性及在小鼠体内抗瘤作用的研究

用肿瘤细胞免疫山羊，取脾经匀浆透析法制备抗肿瘤特异性转移因子（Ｓ～ＴＦ），并观察了Ｓ～ＴＦ在体内外对淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）细胞活性及ＬＡＫ细胞特异细胞毒作用及对荷瘤小鼠生存期的影响。结果显示，Ｓ－ＴＦ在体内外均能显著增加荷瘤宿主的ＬＡＫ活性及ＬＡＫ特异细胞毒作用，早期单独应用可明显延长荷瘤小鼠生存期，与ＬＡＫ／ＩＬ－２联合应用可明显地延长荷瘤小鼠生存期，并可治愈部分荷瘤小鼠（３／１０），其治疗效果明显优于ＬＡＫ／ＩＬ－２，原因可能是Ｓ－ＴＦ能诱导ＬＡＫ细胞为ＴＩＬ样细胞，明显增加ＬＡＫ细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。提示Ｓ－ＴＦ能有效地提高ＬＡＫ／ＩＬ－２过继治疗效果。     

抗肿瘤特异性转移因子诱导LAK细胞毒活性及在小鼠体内抗瘤…

用肿瘤细胞免疫山羊，取脾经匀浆透析法制备抗肿瘤特异性转移因子（Ｓ－ＴＦ），并观察了Ｓ－ＴＦ在体内外对淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）细胞活性及ＬＡＫ细胞特异细胞毒作用及对荷瘤小鼠生存期的影响，结果显示，Ｓ－ＴＦ在体内外均能显著增加荷瘤宿主的ＬＡＫ活性及ＬＡＫ特异细胞毒作用，早期单独应用于可明显延长荷瘤小鼠生存期，与ＬＡＫ／ＩＬ－２联合应用可明显地延长荷瘤小鼠生存期，并可治愈部分荷瘤小鼠（３／１０）     

吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物碱对血小板聚集及血栓素B_2和6-酮-前列腺素_(Iα)的影响

观测ＳＨ１对ＡＤＰ，ＡＡ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集及ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα生成的影响。用比浊法测定了透骨草提取的单体生物碱结晶ＳＨ１体外对兔血小板聚集的影响，用放免法测定ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量。结果：ＳＨ１０．８～３．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内明显抑制ＡＡ，ＡＤＰ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集。ＳＨ１对三种诱导剂的最大抑制率分别为６２．１６％，４５．２５％，５３．６７％。大剂量组明显加快ＡＤＰ诱导的血小板聚集后的解聚速度，ＳＨ１显著延长Ｃｏｌａｇｅｎ的诱导起聚时间。其抑制作用有明显的量效关系，对ＡＡ诱导的ＴＸＢ２产生明显抑制作用，可使６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量略有增加，但６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα／ＴＸＢ２比值显著增大     

白细胞介素12真核表达载体对DNA疫苗诱导免疫应答的影响

目的 观察白细胞介素１２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法 肌肉注射ＤＮＡ疫苗主白细胞介素１２真核表达载体,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果：对     

015 细胞周期调控在小鼠精原干细胞辐射增敏中的作用

目的 :研究细胞周期阻滞在小剂量Ｘ射线照射诱导小鼠精原干细胞辐射增敏中的可能作用及与ｐ５３基因的关系。方法 :①动物 :选用Ｓｗｉｓｓ小鼠 (８～１０周龄 )和三种 ｐ５３不同基因型 ( ｐ５３-／ - ,ｐ５３+/ - ，ｐ５３+/ +)Ｃ５７ＢＬ/６小鼠 (８～１４周龄 )。②照射 :单次１～１０Ｇｙ或分次１ＧｙＸ射线预照射后２４ｈ给予８～１０Ｇｙ攻击剂量照射。③分组 :分别应用细胞周期阻滞逃逸因子３＿氨基苯甲酰胺 (３＿ＡＢ)和咖啡因检测细胞周期调控在精原干细胞辐射增敏中的作用 ,用 ｐ５３不同基因型Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分析辐射增敏中…     

心痛定抑制激光血管成形术后体外培养的平滑肌细胞增殖和…

本文在兔腹主动脉粥样硬化模型上，行激光血管成形术（ｌａｓｅｒ ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＬＡ），用体外培养的血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）３Ｈ－ＴｄＲ掺入和癌基因ｃ－ｆｏｓ表达的测定观察了心痛定对血管损伤后腹主动脉ＶＳＭＣ增殖的影响。结果显示：心痛定（１０＾－８－１０＾０４ｍｏｌ／Ｌ）能抑制体培养ＶＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ掺入，呈剂量依赖关系，１０＾－５     

Angiostatin K(1-3)基因的原核表达和活性鉴定

将入ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）基因在原核细胞表达并鉴定其活性。构建和鉴定ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）原核表达载体并在大脾性杆菌ＤＨ５α内表达,诱导表达蛋白用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定,采用人脐带静脉内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜试验验证其活性。ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）功能区基因在原核细胞获得成功表达,目的蛋白牛菌全总蛋白１５．７％。该表达蛋白捅抑     

瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对人肝癌细胞增殖的影响

目的 从整体水平探讨瑞香狼毒水提物（ＳＣＬＡ）的抗癌机理。方法 以不同剂量ＳＣＬＡ灌胃给药后,在不同时间采集小鼠血清,处理体外培养的人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞,用ＭＴＴ比色法和集落形成试验观察细胞增殖能力。结果 ＳＣＬＡ５、１０、２０ｇ．ｋｇ＾－１给药１、２、３ｈ后的药物血清处理肿瘤细胞后,其ＭＴＴ转化率和克隆形成率均显著降低;给药２ｈ后的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。结论 直接抑制癌     

益欣康泰胶囊对小鼠自由基代谢的影响

目的：观察益欣康泰胶囊对老龄小鼠体内自由基代谢的影响;方法：在给老龄小鼠灌服益欣康泰胶囊溶液及灌服１０天后,测定小鼠红细胞中超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶和丙二醛;结果：测定结果显示：该药中,高,低剂量组均能降低老龄小鼠体内ＭＤＡ含量和升高体内ＳＯＤ,ＧＳＨ－ＰＸ活性作用。     

LACA小鼠骨髓辐射损伤后干细胞因子受体表达的免疫组化研究

目的至今，尚未见到采用免疫组化技术研究骨髓辐射损伤后干细胞因子受体（Ｃ－ｋｉｔ）表达及其在造血重建中的意义。方法经６０Ｃｏγ射线全身照射ＬＡＣＡ小鼠，于照射后４周内分批活杀动物，采用光镜、电镜及ＬＳＡＢ免疫组化方法，研究了辐射诱导的造血细胞凋亡及Ｃ－ｋｉｔ的表达及意义。结果全身照射ＬＡＣＡ小鼠时，５．５Ｇｙ为其亚致死剂量，此剂量照射小鼠可导致外周血白细胞及骨髓有核细胞数减少；骨髓明显损伤及损伤后重建现象；在照后１天内可使骨髓造血细胞发生凋亡；５．５Ｇｙ照射后６小时，Ｃ－ｋｉｔ蛋白于造血细胞浆内明显增多，呈强阳性；照后１０天，骨髓造血细胞增生、恢复，Ｃ－ｋｉｔ蛋白于造血细胞膜表达明显增多，呈强阳性。结论Ｃ－ｋｉｔ表达与造血功能重建有关，在早期造血功能重建中起重要调节作用。     

重组融合蛋白Fab／INF—αA的表达及其抗乙型肝炎病毒的作用

ＩＦＮ－αＡ是治疗乙型病毒性肝炎有效药物,但由于其临床应用的副作用及持久应答率不超过５０％,限制了其疗效的发挥［１］。作者通过ＤＮＡ重组技术和ＰＣＲ技术将抗乙型肝炎表面抗原抗体片段Ｆａｂ与ＩＦＮ－αＡ在分子水平上进行重组,构建了人抗乙肝表面抗原抗体Ｆａｂ片段／αＡ－干扰素融合蛋白原核表达载体［２］。本实验将筛选出阳性克隆的菌种进行诱导表达,测定表达的重组融合蛋白（Ｆａｂ／ＩＦＮ－αＡ）的ＩＦＮ－αＡ活性及抗体Ｆａｂ活性,并应用ＨＢＶＤＮＡ转染细胞系（ＨｅｐＧ２２１５细胞系）作模型［３］,通过检测…     

生物素—亲和素预定位技术在炎症显像中的实验研究

为评价生物素亲和素预定位技术在炎症显像中的应用价值，采用链霉亲和素（ＳＡ）和生物素、生物素－人免疫球蛋白（Ｂ－ｈＩｇＧ）和＾１３１Ｉ－链霉样和素（＾１３１Ｉ－ＳＡ）行二步法预定位炎症炎症显像，并以＾９９ｍＴｃ直接标记ｈＩｇＧ、ＳＡ一步法显像为对照，于２、６或２４小时显像，测定生物分布。实验动物用葡萄球菌所致小鼠炎症模型。结果：ＳＡ和二步法预测定伴汪地２小时即可显像，其靶／非靶（Ｔ／ＮＴ）比值为１．     

有氧运动和膳食脂肪对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中SR-B1基因及蛋白表达的影响

为研究有氧运动和低脂膳食抑制动脉粥样硬化斑块形成的可能机制，本研究探讨了１０周有氧运动和低脂膳食对ＡｐｏＥ基因缺陷小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块面积及肝脏ＳＲ－Ｂ１ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响。结果表明有氧运动和／或低脂膳食增加ＡｐｏＥ基因缺陷小鼠肝脏ＳＲ－ＢＩ基因及蛋白的表达水平。肝脏ＳＲ－Ｂ１ｍＲＮＡ水平与动脉粥样硬化斑块间存在负相关关系的趋势（相关系数ｒ值为－０．８１４，显著性检验Ｐ值为０．０６２），而且ＳＲ－Ｂ１蛋白水平与动脉粥样硬化斑块间也存在负相关关系（相关系数ｒ值为－０．８７１，显著性检验的Ｐ值为０．０１４）。结果提示在动脉粥样硬化斑块形成过程中，有氧运动和低脂膳食引起的ＳＲ－Ｂ１基因及蛋白表达水平的增加可能是二者具有抗动脉粥样硬化斑块发生作用的潜在机制。     

Bcl—2基因在鼠T—细胞淋巴瘤细胞中抗凋亡作用的实验研究

目的应用转染了Ｂｃｌ－２基因的鼠Ｔ－细胞淋巴瘤ＷＨｂ１２细胞系进一步研究Ｂｃｌ－２基因的抗凋亡作用及意义。方法分别采用紫外线照射２０ｓ、１０μｍ地塞米松作用２４ｈ和２００ｎｇ／ｍｌ鬼臼乙叉甙作用２４ｈ等方法,诱导ＷＨｂ１２细胞和其亲本细胞Ｗ７２ＵＳＡ细胞凋亡,与亲本细胞相比较,观察转染了Ｂｃｌ－２基因的ＷＨｂ１２细胞是否具有抗凋亡作用。结果未转染Ｂｃｌ－２基因的亲本细胞Ｗ７２ＵＳＡ细胞发生了凋亡,而转染了Ｂｃｌ－２基因的ＷＨｂ１２细胞存活完好,无明显凋亡发生。结论进一步证实了Ｂｃｌ－２基因具有显著的抗凋亡作用,其抗凋亡作用谱广,具有重要意义。     

固定在Fe3O4粒子上的抗体及在放射免疫分析中的应用

以直径１０．８ｎｍ±３４％的Ｆｅ３Ｏ４粒子作磁性载体，物理吸附驴抗兔抗血清制备了磁性粒子第二抗体（ＭＳＡ－Ｉ）。研究了包被介质的ｐＨ，抗血清用量，包被时间和封闭液等制备条件对ＭＳＡ－Ｉ免疫反应结合能力和非特异结合的影响，成功地应用ＭＳＡ－Ｉ于Ｔ３，Ｔ４和ＴＳＨ的ＲＩＡ中。这种磁性第二抗体的优点是制备方法简便，省时和成本低。     

白细胞介素－11基因治疗促进放射损伤小鼠造血恢复的实验研究

白细胞介素－１１（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１１，ＩＬ－１１）是一种新的造血生长因子，体内、外实验结果显示ＩＬ－１１具有显著的造血促进作用，它能作用于早期的造血干细胞及祖细胞，促进其增殖和分化。为了探讨ＩＬ－１１基因治疗放射损伤后造血恢复的促进作用，我们构建了含人ＩＬ－１１ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体，并转染小鼠成纤维细胞系ＮＩＨ－３Ｔ３，经筛选获得３株高表达ＩＬ－１１的转染细胞亚克隆，用高表达ＩＬ－１１的转染细胞作为载体细胞，进行了ＩＬ－１１基因治疗对放射损伤小鼠造血系统影响的实验研究。结果表明ＩＬ－１１基因治疗能明显缩短亚致死量放射损伤小鼠白细胞降低的时间，促进外周血白细胞、血小板和红细胞压积的恢复。提示ＩＬ－１１基因治疗对放射损伤造成的造血功能低下具有潜在的应用价值。     

小鼠内皮抑素基因克隆、表达及其抑瘤活性鉴定

利用ＲＴ－ＰＣＲ法从小鼠肝细胞扩增出Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ基因,重组人ｐＵＣ１９质粒。经测序后,将片段重且人大肠杆菌表达载体ｐＤＨ并用温度诱导表达。将表达的蛋白经纯化及复性后直接注入大鼠Ｃ６胶质瘤模型内,检测其对胶质瘤生长的抑制作用。结果,在小鼠肝组织中成功扩增到Ｅｎｄｏｗｓｔａｔｉｎ基因,测序与报道列一致重组进一致。重组进ＰＤＨ后经温度诱导表达,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳上得到一条新的蛋白表达带,分子     

人CD40分子基因的克隆及其在COS—7细胞中的表达

目的：克隆编码人ＣＤ４０分子基因的全长ｃＤＮＡ,在ＣＯＳ－７细胞中获得高表达。方法：提取人Ｂ淋巴细胞看Ｄａｕｄｉ总ＲＮＡ,以ＲＴ－ＰＣＲ技术克隆了编码人ＣＤ４０基因全长ｃＤＮＡ,序列测定证实其正确性。将测序正确的ＣＤ４０基因克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１构建重组表达载体。采用脂质体转染试剂脂染胺（Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ）杂ＣＯＳ－７细胞,用流式细胞仪,免疫细胞化学和免疫荧光法检测ＣＤ４０基