流行性出血热病毒地方株细胞抗原片制备及应用的研究

本文用流行性出血热病毒(EHFV)HU、B_2地方毒株接种Vero-E_(?)细胞后,用PBS制备细胞悬液直接点片经CO_2培养法制备EHFV细胞抗原片,与国家标准株(A_(?))细胞抗原片同时检测野鼠型病毒免疫血清,家鼠型病毒免疫血清,EHF病人血清及健康人血清抗体,其结果均一致,现已推广应用于基层临床早期诊断,在健康人群隐性感染调查中也取得满意效果。     

反向间接血凝法检测流行性出血热抗原的实验研究

应用抗EHFV单克隆抗体和兔抗EHFV抗体分别致敏醛化血球,建立了检测EHF抗原的反向间接血凝法。检测18株EHF毒株(人源6株、鼠源10株、螨源2株)的细胞培养上清液,以及10份EHF抗原阳性的小白鼠乳鼠的20％的脑悬液,血凝试验均为阳性,最高效价达1:1024,10份正常细胞培养上清液和10份正常小白鼠乳鼠的脑悬液均为阴性。且EHF抗原阳性的标本可被特异的EHF抗体所阻断。本法具有特异、敏感、快速、简便等优点,将有助于临床EHF病人早期诊断方法的建立。     

流行性出血热疫苗免疫后的抗体反应和防病效果

198 8年 ,我们流行性出血热疫苗协作组研制的沙鼠肾细胞Ⅰ型灭活疫苗 ,通过动物试验 ,经卫生部批准 ,进入人体观察。由于此疫苗在我国首次使用 ,对人体观察要求特别严格 ,一期临床观察 ,经历了 10人的小试 ,再 10 0人的扩大 ,又经 10 0 0人的再次扩大 ,然后进入15 0 0人的二期临床观察。经过长达 5年的一期、二期临床观察后 ,于 1993年底获得此疫苗的新药证书和试生产文号 ,才进入三期临床观察。一、二期临床观察主要检查疫苗的安全性和血清学效果 ,三期临床除继续观察安全性和血清学效果外 ,主要观察疫苗的现场防病效果。1989年后 ,我国另…     

胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的结合临床实践经验,开展胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较研究。方法选取本站美沙酮维持治疗中心接受药物治疗的吸毒患者611例为研究对象,采用试验研究方法,常规采集吸毒人员的静脉血,离心取血清备用。采用英科新创（厦门）科技有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）和北京万泰生物药业股份有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）,对上述研究对象进行检查,探讨两种方法的有效性。采用χ2检验,取P〈0.05为差别有统计学意义。结果本次研究结果显示,两种方法的检验阳性率差别无统计学意义（χ2=1.21,P〉0.05）。提示两种方法均可用于临床检验,其有效性值得肯定。结论胶体金法具有操作简便、时间短、观察直观、不需特殊设备、经济可靠等特点,且可单份测定,尤其在急诊及临床应用中具有较强的优势,已在生物医学领域,尤其是医学检验得到广泛应用,可作为筛查丙型肝炎病毒抗体的重要手段,对丙型肝炎的早期发现以及预防控制有重要参考价值和意义。     

胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的结合临床实践经验,开展胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较研究。方法选取本站美沙酮维持治疗中心接受药物治疗的吸毒患者611例为研究对象,采用试验研究方法,常规采集吸毒人员的静脉血,离心取血清备用。采用英科新创(厦门)科技有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法)和北京万泰生物药业股份有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法),对上述研究对象进行检查,探讨两种方法的有效性。采用χ2检验,取P<0.05为差别有统计学意义。结果本次研究结果显示,两种方法的检验阳性率差别无统计学意义(χ2=1.21,P>0.05)。提示两种方法均可用于临床检验,其有效性值得肯定。结论胶体金法具有操作简便、时间短、观察直观、不需特殊设备、经济可靠等特点,且可单份测定,尤其在急诊及临床应用中具有较强的优势,已在生物医学领域,尤其是医学检验得到广泛应用,可作为筛查丙型肝炎病毒抗体的重要手段,对丙型肝炎的早期发现以及预防控制有重要参考价值和意义。     

流行性出血热患者对流行性出血热病毒抗原变态反应的研究

对47例流行性出血热（EHF）患者应用流行性出血热病毒（EHFV）抗原再次攻击后观察IgE,嗜酸粒细胞和临床变化以及EHFV抗原的皮试反应和皮窗试验中细菌渗出情况。结果发现EHFV抗原注射前后嗜酸粒细胞和血压等无明显变化;抗原注射前IgE正常的13例,注射后7例（53．83％）超出正常范围。皮试结果15min阳性14.8％,6h阳性57.44％,24～48h阳性8O.89％。皮窗试验淋巴细胞渗出较对照组明显升高,外单核细胞增高例数亦明显高于对照组。抗原组有3例嗜酸粒细胞增高。以上结果说明EHFV抗原再次攻击后可以出现Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型变态反应,但绝大多数为Ⅳ型变态反应。对以上各型变态反应在EHF发病中的作用进行探讨。     

温州口岸鼠类鼠疫抗原与流行性出血热抗体的监测结果分析

[目的] 监测温州口岸鼠类鼠疫和流行性出血热疫情动态，防止疫情传人与传出。[方法] 对2000年5月～2001年4月间在温州口岸捕获的263份活鼠血清，采用RIP—SAP法监测鼠疫F1抗体，采用间接免疫荧光法(IF)与间接血凝试验(IH)法定量比较监测流行性出血热(EHF)抗体滴度。[结果] 263份鼠类血清中，鼠疫F1抗原均为阴性；检测EHF抗体，采用IF法，阳性率17．49％，阳性平均抗体滴度为1：188；其中褐家鼠EHF抗体阳性最高，达到34．04％。[结论] 1、监测结果初步证明温州机场和龙湾码头港区内，近年来鼠间未曾感染鼠疫杆菌。2、温州口岸港口区内EHF抗体阳性达17．49％，说明鼠间感染EHF比较严重。     

放免法蛋白检测对流行性出血热的观察

用放射免疫分析法对流行性出血热患者进行血、尿β２－ＭＧ与尿ＡＩｂ、ＩｇＧ测定。结果显示ＥＨＦ组同对照组比较β２－ＭＧ、ＡＩｂ、ＩｇＧ有明显增高，故ＲＩＡ蛋白检测是对流行性出血热早期诊断的一种灵敏简单的方法。     

胶体金法与酶联免疫法相结合快速检测克伦特罗

目的研究胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附法(ELISA)相结合,以建立对饲养、屠宰、流通各环节的畜尿克伦特罗(Clenbutero1,CL)定性和定量检测的方法。方法用柠檬酸三钠还原氯金酸,制备20 nm粒径的胶体金,胶体金标记单抗后喷涂到玻璃纤维膜上,特异性抗原(CL-BSA)以线状包被在硝酸纤维素膜上,制成快速检测试纸条。用ELISA进行定量。结果对GC-MS不确定的36份阴性样品和24份阳性样品用GICA方法检测,其阴性符合率为97%,阳性符合率为96%。同样样品用ELISA方法检测,其符合率为100%。最低检测限为5.0 ng/mL;用GICA法只需在试纸条上滴加4~5滴样液5~10 min就可出结果;在2个月的随机抽查中,试纸条的检测结果没有变化。结论本方法准确性高、稳定性好,操作过程简单,适合于作现场大规模、高通量检测。因此本方法具有广泛的应用及推广价值。     

胶体金免疫层析法检测葡萄球菌B型肠毒素

目的通过优化制备中各关键步骤的实验条件,建立快速检测葡萄球菌B型肠毒素的胶体金免疫层析法。方法采用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备直径16nm的胶体金溶液,葡萄球菌B型肠毒素多克隆抗体制备免疫胶体金复合物,组装胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果用柠檬酸三钠还原法制备的16nm胶体金溶液呈亮红色,其颗粒大小比较均一。胶体金标记抗体蛋白的最低稳定量为15μg／mL,最适稳定量为18μg／mL,标记的最适pH为7．8。此方法检测限为0．2μg/mL,准确度为94．9％。结论制备了葡萄球菌B型肠毒素胶体金免疫试纸条,该方法简便、快速,而且灵敏度高、稳定性强,适用于食品中葡萄球菌B型肠毒素的快速检测。     

冷甘露醇静滴对高热患者降温的疗效比较

目的：探讨冷甘露醇商对高热和超高热患者降温的效果和机理。方法：应用4℃冷甘露醇静脉滴注对106例高热和超高热患者的降温进行随机单盲对照观察。结果：高热观察组显效（1h内降温）占80．85％，有效（2h内降温）占19．15％，总有效率100％，显著优于对照组（P〈0．001）。超高热观察组显效75％，有效25％，总有效率100％，优于对照组（P〈0．005）。结论：其方法简便，无毒副作用，降温同时能解除脑水肿，打断高热与脑水肿之间的恶性循环。其降温机理可能是：①直接降低血温。②高渗性利尿排出部分热量。③解除脑水肿，抑制中枢性高热。④清除自由基，有利于机体的康复。     

一次性真空采血器与一次性注射器采血效果比较

目的 探讨一次性真空采血器与一次性注射器采血的效果与差异.方法 50例观察组为真空采血器采血组、50例对照组为注射器采血组 ,观察采血成功率、采血时间及疼痛感.结果 实验组较对照组一次穿刺成功率高、采血时间短、采血中不适感轻. 结论使用真空采血管及与之相配套的双向采血针,在临床采血中效果优于注射器采血.     

从早产儿脐带血中分离出流行性出血热病毒的探讨

１９９２年１２月作者从一位ＥＨＦ患者的早产儿脐带血中分离出ＥＨＦＶ，证实ＥＨＦＶ沿母、婴垂直途径传播的可能性。     

荧光定量RT-PCR在快速检测流感病毒A型和B型上的应用研究

[目的]探讨荧光定量RT-PCR在流感病毒快速检测上的意义。[方法]收集疑似流感样本20例,分别用定量RT-PCR技术和鸡胚分离培养方法进行检测。[结果]26份标本中定量RT-PCR检测阳性率为57.7%（15/26）,鸡胚分离培养检测的阳性率为26.9%（7/26）。两者的阳性率有统计学差异。[结论]荧光定量RT-PCR方法在检测流感病毒方面具有快速、操作方便、特异性强、灵敏度高优点。因此可以作为一种快速流感病毒检测的诊断方法。     

微柱凝胶卡式法在交叉配血及不规则抗体检测中的应用

目的研究微柱凝胶卡式法在临床交叉配血及不规则抗体检测中的应用。方法采用微柱凝胶卡式法进行交叉配血,对配血结果呈特异性凝集的阳性标本进一步作不规则抗体检测,再选取不规则抗体相应抗原阴性的献血者与患者进行交叉配血。结果在1 051例配血标本中,交叉配血阳性结果有27例,在不规则抗体检测中检出抗-E 3例,抗-c 1例,抗-cE 1例,抗-M 1例,选取不规则抗体相应抗原阴性的献血者与患者进行交叉配血,配血成功。其余21例为非特异性抗体或自身抗体。结论微柱凝胶卡式法是交叉配血试验、不规则抗体筛查的最新方法,应该在临床大力推广使用。     

关节镜下异体骨-髌腱-骨与异体胫前肌腱重建前交叉韧带的疗效比较

目的比较分析膝关节镜下异体骨-髌腱-骨与异体胫前肌腱两种重建前交叉韧带(ACL)的疗效。方法 26例异体胫前肌腱移植和87例异体骨-髌腱-骨移植重建ACL的情况,随访6～48个月,平均22.3个月。采用Lysholm膝关节评分、国际膝关节文献编制委员会分级评估标准(IKDC)及KT-2000检测评价疗效。结果 两组间患者满意度、关节稳定性及功能差异均无统计学意义。但异体骨-髌腱-骨较异体胫前肌排斥反应发生率要高得多。结论异体胫前肌可能是一种更加适合重建ACL的移植物,异体胫前肌腱重建前交叉韧带方法能更加适合重建ACL。     

加强医院转诊对提高肺结核病人发现效果分析

[目的]探讨综合医院转诊对提高肺结核病人发现水平的作用.[方法]对2003～2006年结防机构初诊 病人构成、活动性肺结核检出率和2005～2006年综合医院网络直报、转诊及追踪等资料进行描述性分析.[结果]结防机构初诊病人逐年增加,转诊人数在初诊病人构成比例由2003年的21.7%上升至2006年的49.3%.2006年网络直报病人追踪到位率63.5%,总体到位率84%.[结论]加强综合医院转诊是提高肺结核病人发现的有效方法.     

北京市海淀区1997～2007年肾综合征出血热流行病学分析及防治效果的研究

[目的]明确肾综合征出血热(HFRS)、鼠间汉坦病毒(HV)感染分布状况和现患病例血清型,为进一步探索流行规律,确定疫源地性质和制定防治策略及效果评价提供科学依据.[方法]分别应用IFAT、微量细胞中和试验(MCPENT)方法检测人、鼠间HV感染状况和病人血清型别.[结果]1997～2007年共发生本地病例178例,死亡10例,病死率5.6%,发病呈现连续上升并且2002年达最高峰,近两年明显下降和高度散发与相对集中的流行特点.部分现患病例(27例)血清分型26例为汉城型(SEO型);其中1例SEO、HTN型中和抗体滴度等同,可能是两型病毒的感染.正常人群总感染率为12.5%.鼠间广泛存在着HV感染,年度带病毒率7.32%～32.90%.带病毒鼠指数较高,与人群发病率呈正相关(P<0.01).[结论]发病呈现连续5年上升后开始下降和高度散发与相对集中的基本流行特点;正常人群总感染率较低,鼠间广泛存在着HV感染,现患病例基本均属SEO型;对重点人群及密切接种者开展出血热疫苗免疫,可以明显降低发病率.