葛根对大鼠成骨细胞增殖分化影响的血清药理学实验

目的：观察葛根含药血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖分化的影响。方法：将32只SD大鼠随机分为实验组与对照组，在同等条件下制备葛根处理大鼠含药血清和对照血清，观察不同采血时间及血清添加量对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶（ALP）的影响。结果：葛根末次灌胃后1～2小时采血的含药血清对成骨细胞增殖和ALP的作用明显（P〈0．01），随着含药血清添加量的增加，对成骨细胞增殖和ALP的作用明显增强（P〈0．01）。结论：含葛根处理大鼠血清可促进成骨细胞增殖和分化。     

柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphos-phatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05)。结论低浓度柚皮苷(0.1μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的。     

赤芍总苷退黄降酶的作用及机制研究

目的探讨赤芍总苷退黄降酶的作用及机制。方法ICR小鼠随机分成正常对照组,模型对照组,赤芍总苷低、中、高剂量组和苯巴比妥钠组;灌胃α-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导小鼠黄疸模型,分别在实验第6天和第12天观察各组药物对小鼠总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、胆汁酸（TBA）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等血清学指标及对小鼠胆汁分泌量和肝组织中尿苷二磷酸葡萄糖酸转移酶（UDPG—T）活性的影响,实验第6天观察各组药物对戊巴比妥钠睡眠时间的影响。结果与模型对照组比较,除第6天赤芍总苷中剂量组ALT、第12天低剂量组AST无显著差异外,赤芍总苷3个剂量组血清学指标均明显下降（P〈0．05或P〈0．01）;赤芍总苷中、高剂量组胆汁分泌量显著增加（P〈0．01或P〈0．05）;3个剂量组和苯巴比妥钠组睡眠时间均明显缩短（P〈0．01）;赤芍总苷组肝组织UDPG—T活性明显提高（P〈0．05）。结论赤芍总苷具有退黄降酶作用,其作用机制可能与增加胆汁分泌量、提高肝药酶及UDPG—T活性有关。     

脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及c—fos蛋白表达研究

目的：观察脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及c-fos蛋白的表达。方法：采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型,取海马组织,用免疫组织化学方法检测海马神经元c-fos蛋白表达及TUNEL法观察细胞凋亡情况。结果：脑缺血再灌注损伤大鼠与对照组比较海马区c-fos蛋白阳性细胞表达增强（P〈0．05）,凋亡细胞表达增多（P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注损伤大鼠海马区c-fos蛋白阳性细胞表达增强,凋亡细胞表达增多。     

阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管重建的影响及作用机制

目的研究阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管形态、p53及PCNA蛋白表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法30只雄性SD大鼠采用随机单位组设计方法分为对照组、低氧组和联合治疗组,每组10只。采用常压间断低氧8h/d,连续21d的方法复制慢性低氧性肺动脉高压模型。对照组吸入空气（其他条件与低氧组相同）。联合治疗组大鼠腹腔注射15mg／（kg·d）的阿魏酸钠。观察阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管形态学指标、p53及增殖细胞核抗原PCNA基因蛋白表达、细胞的增殖与凋亡的影响。结果低氧21d后,低氧组管壁厚度占血管外径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖指数及p53基因表达较对照组均明显升高（P〈0．01）,管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数较对照组明显降低（P〈0．01）;联合治疗组管壁面积占血管总面积的百分比、管壁厚度占血管外径的百分比、增殖指数及p53基因表达与低氧组相比明显降低,差别有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数与低氧组相比明显升高,差别有统计学意义（P〈0．01）;联合治疗组除管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数及p53基因表达与对照组差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）外,其他指标与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿魏酸钠可抑制慢性低氧大鼠肺血管重建,其机制可能与抑制p53及PCNA基因的表达,导致细胞增殖被抑制、细胞凋亡被促进等有关。     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏肾素受体表达的影响

目的：研究替米沙坦对链脲佐菌素糖尿病大鼠肾脏肾素受体表达的影响。方法：18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（N组）、糖尿病组（DM组）、替米沙坦组（T组）。大鼠左下腹腔注射链脲佐菌素60mg·kg-1建立糖尿病模型。测定第4，8周尿蛋白。8周后心脏取血检测血糖、血肌酐、血钠、血钾；取肾脏行PAS染色观察病理改变；免疫组化检测肾脏肾素受体表达水平；RT—PCR检测肾脏肾素受体mRNA表达水平；western blot检测肾素受体表达情况。结果：4周和8周时DM组大鼠24h尿蛋白较N组显著升高（P〈0．05或P〈0．01），T组24h尿蛋白与DM组相比明显降低（P〈0．01）；DM组8周时肾小球损伤指数明显高于N组（P〈0．05），T组则明显低于DM组（P〈0．05）；免疫组化、RT—PCR以及Westernblot检测显示T组肾素受体表达较DM组显著降低（P〈0．05），而N组和DM组肾素受体表达没有明显差异（P〉0．05）。结论：替米沙坦可能部分通过抑制肾素受体的表达减轻早期糖尿病大鼠肾脏损伤。     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏抗氧化应激作用机制的研究

目的：观察缬沙坦对实验性2型糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法：链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病肾病大鼠模型随机分为对照组糖尿病组及治疗组（缬沙坦10mg·kg^-1·d^-1），治疗6周后，比较各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量等。采用RT-PCR方法检测P22phoxmRNA表达。结果：治疗组较非治疗组明显改善尿白蛋白、尿素氮水平和肾脏肥大指数。肾脏MDA含量明显下降（P〈0．05），SOD活性显著上升（P〈0．05）。p22phox的mRNA相对含量在糖尿病组为（0．875±0．94），明显高于单切对照组（0．297±0．067）（P〈0．01），在治疗组为（0．484±0．064），较糖尿病组显著降低（P〈0．01），但仍高于对照组（P〈0．05）。结论：缬沙坦对2型糖尿病肾脏病变有一定的保护作用，其机制可能是通过抑制氧化应激反应，下调糖尿病大鼠P22phoxmRNA的表达对2型糖尿病模型大鼠肾脏产生保护作用。     

金属钴、铬离子对成骨细胞ALP活性及I型胶原表达的影响

目的：观察钴、铬离子对小鼠成骨细胞（MC3T3E1）的碱性磷酸酶（ALP）活性及I型胶原蛋白合成的影响,探讨钴、铬离子对成骨细胞的生物学作用。方法试验分为对照组（成骨细胞培养液无金属离子）和实验组（钴、铬离子与小鼠成骨细胞体外共培养）,检测培养上清液ALP活性及I型胶原蛋白含量、收集细胞检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果与对照组相比,钴、铬离子能明显抑制成骨细胞的ALP活性;离子组干预24h后,成骨细胞I型胶原蛋白及mRNA分别下降45.3%、26.8%（P〈0.05）,48h后分别下降49.2%、32.6%（P〈0.05）。结论钴、铬离子明显抑制成骨细胞ALP活性及降低I型胶原蛋白的分泌及其mRNA的表达。     

可卡因对性成熟期大鼠睾丸谷胱甘肽过氧化物酶基因表达的影响

目的：研究可卡因对大鼠睾丸谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase GSH-PX）基因表达的影响。方法：性成熟期健康SD雄性大鼠皮下注射可卡因制造吸毒动物模型。化学比色法检测睾丸氧化应激指标;半定量RT-PCR方法检测睾丸组织的GSH-PXmRNA表达。结果：可卡因处理第7天,实验组GSH-PX活性、MDA含量与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）;而GSH-PXmRNA水平显著高于对照组（P〈0．05）。可卡因处理第14天,实验组GSH-PX活性显著低于对照组（P〈0．05）,MDA含量显著高于对照组（P〈0．05）,而GSH-PXmRNA水平显著高于对照组（P〈0．05）。可卡因处理第21天,实验组GSH-PX活性及mRNA表达水平显著低于对照组（P〈0．05）,MDA含量显著高于对照组（P〈0．05）。可卡因处理第28天,实验组GSH-PX活性及mRNA表达水平显著低于对照组（P〈0．05）,MDA含量显著高于对照组（P〈0．05）。     

活性维生素D3对大鼠系膜增生性肾炎细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究活性维生素D3对系膜增生性肾小球肾炎细胞增殖与凋亡的影响。方法：72只雄性SD大鼠随机分为对照组、肾炎组、活性维生素D3干预组,每组24只,分别于造模和给药后第1,3,7,14天每组随机处死6只大鼠,肾组织标本HE染色确定肾脏病理损害分级,免疫组化法检测PCNA、Bcl-2在肾组织中的分布,Westernblot检测PCNA蛋白的表达量。结果：与对照组相比,肾炎组PCNA和Bcl-2表达明显增强（P〈0．01）;活性维生素D,干预组PCNA和Bcl-2表达明显减少（P〈0．01）。PCNA、Bcl．2表达与病理分级呈正相关（P〈0．01）,PCNA、Bcl-2各指标问的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：活性维生素D3可以通过抑制PCNA的表达而抑制系膜细胞增生,减少Bcl-2表达促进凋亡,延缓疾病的进展。     

辛伐他汀对成骨细胞分化和成骨基因的影响

目的 探讨辛伐他汀对成骨细胞分化及成骨基因表达的影响.方法 选取成骨肉瘤细胞株 MG-63,采用不同浓度辛伐他汀（0.0625、0.125、0.25、0.5和 1.0 μmol/L）处理成骨细胞,ALP活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量 RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因 mRNA的表达.结果 通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,不同浓度辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞ALP 活性差异均有统计学意义 （ P〈0.05）,其中 0.25 μmol/L 浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著.采用 0.25 μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、ALP、I型胶原 mRNA表达差异均有统计学意义 （ P〈0.05）.结论 辛伐他汀可能通过上调成骨基因mRNA的表达水平来促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点.     

淫羊藿甙对体外培养大鼠成骨细胞Cbfa1基因表达的影响

目的观察淫羊藿甙对体外培养大鼠成骨细胞功能及对转录因子核心结合因子a1（Cbfa1）mRNA表达的影响,探讨淫羊藿甙抗骨质疏松的作用机制。方法用酶消化法获得新生（〈24 h）SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行体外原代培养。将不同浓度的淫羊藿甙（1,10,100 ng/ml）分别加入培养液中,观察成骨细胞的形态、增殖和分化功能。用RT-PCR法测定成骨细胞Cbfa1、碱性磷酸酶（ALP）和Ⅰ型胶原（ColⅠ）mRNA表达水平的变化。结果 1、10和100 ng/ml淫羊藿甙均可促进Cbfa1、ALP和ColⅠmRNA表达（P〈0.05）,且以10 ng/ml组作用最显著。结论淫羊藿甙能促进体外培养成骨细胞增殖与分化,通过提高成骨细胞转录因子Cbfa1的基因表达水平诱导骨形成,是其抗骨质疏松作用机制之一。     

仙灵骨葆联合钙剂治疗高龄患者老年性骨质疏松症的临床研究

目的：观察仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D和骨化三醇对高龄患者老年性骨质疏松症的治疗效果.方法：选择60例高龄老年性骨质疏松症患者随机分为两组,治疗组（仙灵骨葆＋钙尔奇D＋骨化三醇）30例,对照组（钙尔奇D＋骨化三醇）30例.观察两组患者治疗前后和两组间的VAS评分、SF-36评分、BMD、血Ca、血P、ALP、TRACP的差异.结果：两组治疗后VAS评分较治疗前均明显降低（P＜0.01）,治疗组降低较对照组更明显（P＜0.01）.两组治疗后SF-36评分较治疗前均明显提高（P＜0.01）,治疗组升高较对照组更明显（P＜0.01）.治疗组治疗后BMD明显升高,对照组BMD变化不大,两组比较有显著差异（P＜0.05）.治疗前后两组血Ca和血P均变化不大,组间比较无差异（P＞0.05）.治疗组治疗后ALP明显升高,对照组ALP变化不大,两组比较有显著差异（P＜0.05）.两组治疗后TRACP较治疗前均有所降低,治疗组降低明显,组间比较有显著差异（P＜0.01）,两组所有患者无严重不良反应发生.结论：仙灵骨葆胶囊联合钙尔奇D和骨化三醇治疗高龄患者老年性骨质疏松症效果确切,且安全性良好.     

依普黄酮对防治女性绝经后骨质疏松的疗效评价

目的评价依普黄酮对防治女性绝经后骨质疏松的疗效。方法对46例绝经后骨质疏松患者服用依普黄酮,治疗2个月后,对治疗前后患者的骨痛进行评价,测定血生化指标碱性磷脂酶（ALP）、钙（Ca）、磷（P）和晨尿羟脯安酸（Hop／Cr）的比值。结果与治疗前相比,使用依普黄酮治疗后,患者疼痛状态明显缓解（P〈0．01或P〈0．05）．而且腰椎、股骨颈、大转子和髋部的BMD分别增长了4．5％、5．1％、4．8％和3．9％（P〈0．01或P〈0．05）;ALP、磷和晨尿羟脯安酸水平均显著下降,而总钙含量明显的升高（P〈0．01或P〈0．05）。结论依普黄酮能够促进骨的形成,对预防女性绝经后骨质疏松有较好的疗效。     

益骨汤对体外培养成骨细胞增殖及分泌胰岛样生长因子I的影响

目的：探讨益骨汤含药血清对新生大鼠成骨细胞增殖及分泌的胰岛样生长因子I（IGF-I）的影响.方法：采用酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞,然后以益骨汤含药血清作用于成骨细胞,用Alamar Blue法检测成骨细胞增殖,ELISA法测定培养上清中IGF-I的含量.结果：益骨汤含药血清能促进成骨细胞的增殖,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.益骨汤含药血清作用于成骨细胞能使其IGF-I 分泌量升高,益骨汤高、中、低剂量组分别与空白组比较,差异有统计学意义（P＆lt;0.05或0.01）.结论：益骨汤含药血清能够促进成骨细胞的增殖与分化,同时促进成骨细胞分泌IGF-I的作用.     

毛蕊花糖苷对新生大鼠体外培养成骨细胞增殖与分化作用研究

目的研究毛蕊花糖苷对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖、分化作用的影响。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法分离制备新生大鼠颅骨ROB细胞,MTT法测定ROB细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒法测定ROB细胞内ALP活性,以细胞的增殖率和ALP活性作为考察指标,观察不同浓度的毛蕊花糖苷对ROB细胞增殖和分化作用的影响。结果 1×10-7～1×10-9mol·L-1的毛蕊花糖苷对ROB细胞的增殖具有显著的促进作用(P<0.05),且终浓度为1×10-7mol·L-1的毛蕊花糖苷在作用72h后能显著提高ROB细胞内碱性磷酸酶的活性(P<0.05)。结论一定浓度的毛蕊花糖苷能显著的促进ROB细胞的增殖和分化。     

罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响研究

目的:研究罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响。方法:以小鼠MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型,分别加入1、2、5、10μmo·lL-1罗格列酮干预,MTT法测定细胞活性并计算生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫组化法分析细胞中促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达;测定细胞中分化指标碱性磷酸酶(ALP)的活性。设立只加入培养基处理的空白对照组。结果:与空白对照组比较,罗格列酮各浓度组生长抑制率、细胞凋亡率升高(P均<0.05),Bax表达增强、Bcl-2表达减弱、ALP活性下降(P均<0.05),且呈浓度依赖性。结论:罗格列酮可抑制MC3T3-E1细胞生长及分化,并诱导其凋亡;而Bax/Bcl-2可能参与凋亡的发生,并可能起关键调控作用。     

中西医结合治疗儿童慢性乙型病毒性肝炎50例疗效观察

目的:观察芪龙汤联合α-干扰素治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效。方法:将100例患儿随机分为α-干扰素组(对照组)和用自拟芪龙汤联合a-干扰素组(治疗组)各50例,2组疗程均为9月。观察治疗后2组的临床症状、体征、肝功能情况、HBV-DNA定量及e抗原转阴等指标。结果:治疗后2组临床症状及体征均明显改善,治疗组优于对照组(P0.05);治疗组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)复常率明显高于对照组,2组比较,差异有统计意义(P0.05或P0.01);乙型肝炎病毒e抗原转阴率治疗组为56%,对照组为26%,2组比较,差异有高度统计意义(P0.01)。结论:自拟芪龙汤联合α-干扰素是治疗慢性乙型病毒性肝炎安全有效的方案,能明显改善临床症状和体征,肝功能复常率较高,有明显抑制乙型肝炎病毒的复制和e抗原转阴率增高的作用。     

大黄素对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的影响

目的　观察大黄素(emodin)对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化作用特点及量效关系,并观察大黄素对骨保护蛋白(Osteoprotegerin,OPG)mRNA表达的影响。方法　在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的大黄素,加药后 1、2、3d用MTT法检测细胞增殖, 3、5、7、9d用PNPP法检测细胞内碱性磷酸酶含量,加药后 7d检测细胞内OPGmRNA表达的量, 24d检测细胞上清中钙和细胞内羟脯氨酸含量。结果　大黄素能促进大鼠颅骨成骨细胞ALP活性,实验中最佳作用浓度为 1×10-6 mol·L-1,最佳作用时间是 7d。大黄素能增加细胞内羟脯氨酸含量,促进OPGmRNA的表达。结论　大黄素可促进成骨细胞分化,增加OPGmRNA的表达。