低剂量γ射线与香烟对胎鼠脑蛋白质及热休克蛋白的影响

目的　探讨低剂量γ射线、香烟及其联合作用对脑蛋白质及热休克蛋白 (HSP70 )合成的影响。方法　利用Westerndotblot和Lowrey方法对经低剂量γ射线 (6 0 Co,0～ 1.0Gy)和香烟烟雾 (0～ 2支 /只 )处理的孕鼠的胎脑蛋白质和HSP70进行定量研究。结果　 0 .2 5Gy以上的照射和高浓度的香烟烟雾(2支 /只 )与对照组比较胎脑蛋白质明显减少 ,并且低剂量γ射线与香烟具有联合作用 ;低剂量γ射线、香烟烟雾及其联合作用下 ,胎脑HSP70明显升高 (P <0 .0 1) ,其中高照射组和高浓度香烟组脑HSP70升高明显低于低照射组和低浓度香烟组 (P <0 .0 1) ,照射与高浓度的香烟组联合明显较单独照射组低 ,有剂量依存关系。结论　低剂量γ射线、香烟及其联合可引起脑蛋白质的含量减少 ,并诱导胎脑HSP70的合成 ,提示胎脑发育损伤与脑蛋白和HSP70的合成有一定关系。     

高温与电离辐射联合对鼠胎脑热休克蛋白及蛋白质的影响

目的　探讨高温与电离辐射联合对鼠胎脑热休克蛋白 (HSP70 )和蛋白质的影响。方法　孕d1 0的小鼠给予 4 2℃和 1 .0Gy( 6 0 Co)处理 ,取胎鼠全脑 ,用Westerndotblot和Lowrey方法测量HSP70和蛋白质含量。结果　 1 .0Gy照射组、照射联合高温 ( 42℃ )组与对照组比较胎脑蛋白质明显减少 ,并诱导HSP70合成。高温 ( 42℃ )联合照射组与 4 2℃组相比胎脑蛋白质含量没有显著性变化 ,但二组诱导HSP70合成能力强。结论　高温诱导合成HSP70能力较辐射强 ,辐射引起胎脑蛋白质含量减少 ,预先高温处理孕鼠 ,然后再给电离辐射 ,胎鼠表现出交叉适应性反应     

低剂量辐射与香烟联合对仔鼠学习记忆的影响

目的　研究低剂量γ -射线与香烟联合处理孕鼠对仔鼠学习记忆的影响。方法　使怀孕 4、7、10、13d的小鼠暴露于不同剂量γ -射线 (60 Co 0～ 1.0Gy) ,同时皮下注射不同浓度的香烟烟雾水溶物 (0～ 1.75支 /只 )观察仔鼠学习记忆行为。结果　当照射剂量达到 0 .5Gy时与香烟联合对仔鼠学习记忆行为的影响明显增加 (P <0 .0 1) ,与单独照射组和单独给烟组比较 ,仔鼠学习记忆能力明显下降 (P <0 .0 1) ,并与照射剂量和香烟浓度呈正相关。结论　低剂量γ -射线与香烟联合作用于孕鼠显著降低仔鼠的学习记忆能力。     

高温与低剂量香烟联合作用母鼠对仔鼠神经行为发育的影响

目的　探讨高温与香烟联合对仔鼠神经行为发育的影响。方法　孕d10的大鼠暴露于高温 (4 1℃和 42℃ ) ,同时在孕d2起 ,隔日皮下注射低剂量的香烟烟雾水溶物 (1.0支 /只 ) ,观察分析仔鼠体格发育、反射行为及学习记忆等神经行为。结果　高温组 (4 1℃和 42℃ )仔鼠体格发育 (开眼、张耳、生毛、出牙 )和反射感觉功能 (平面翻正、空中翻正、视觉定向和听觉惊愕 )的达标天数及学习与记忆能力达标时间 (min)与对照组及 37℃组比较明显延迟 (p <0 .0 1) ;同时还表明持续长时间 (>1.5min)的高温与香烟联合对仔鼠上述神经行为具有复合作用 ,与单独高温组比较有明显差异 (p<0 .0 1)。结论　持续较长时间的高温与香烟联合加强仔鼠生长发育延缓及学习记忆功能降低等神经行为异常     

高温和香烟对小鼠骨髓细胞微核的影响

目的探讨高温、香烟及其联合对小鼠骨髓细胞微核的影响。方法采用小鼠骨髓细胞微核检测的方法，研究高温和香烟的交互诱变作用。结果高温（４０℃、４１℃、４２℃）对小鼠骨髓细胞微核具有明显的诱变作用（Ｐ＜００１），并随温度升高而加强，腹腔注射（１０～２０支／只），皮下注射（１５～２０支／只），灌胃（２０支／只）香烟烟雾水溶物可明显诱发小鼠骨髓细胞微核的形成（Ｐ＜００１），并与高温具有明显的协同作用（Ｐ＜００５～００１）。结论高温和香烟可诱发小鼠骨髓细胞微核的形成，且有协同作用。     

高温与香烟联合对大鼠胚胎的毒性和致畸作用

目的探讨高温与香烟联合的胚胎毒性和致畸作用。方法用高温（40℃、41℃、42℃、43℃）、香烟烟雾水溶物及其联合处理孕10d的大鼠,孕20d后按致畸实验方法观察其胚胎的死亡率、吸收率和畸胎率。结果持续3min的高温（42℃）与香烟联合,胚胎致畸率达70％以上,与单独高温组、单独给烟组有明显差异（P＜0．01）。结论高温与香烟联合可加强胚胎的致畸作用,并与温度、香烟浓度和高温持续时间明显相关,持续高温与香烟联合有明显的胚胎毒性和致畸作用。     

苯并(a)芘、预热及其联合作用对人胚肺细胞HSP70合成的影响

用Western blot方法探讨苯并(a)芘、预热及其联合作用对人胚肺(HEL)二倍体细胞热应激蛋白70(HSP70)合成的影响.结果表明未经S9活化的HEL细胞,在不同剂量的BaP处理后,可轻度诱导HSP70的表达;经S9活化的BaP作用HEL细胞3 h,HSP70表达抑制,呈剂量-反应关系在较高浓度染毒时抑制作用表现明显(P＜0.05);预热应激的HEL细胞HSP70表达增加,但BaP染毒3 h后HSP70表达并不规律,具体表现为低剂量(10～50)μmol/L诱导,而高剂量(50～200)μmol/L呈抑制趋势.结果提示,体外未经代谢活化的BaP可以作为应激原诱导热休克反应;HSP70表达降低可能是BaP代谢活化产物作用的结果,预热诱导HSP70表达增加很可能掩盖了低浓度时BaP对HSP70合成的抑制作用.     

低剂量γ-射线与香烟联合对仔鼠行为的致畸作用

目的探讨低剂量γ-射线、香烟烟雾及其联合作用对仔鼠生后发育及反射行为的影响。方法用不同剂量的γ-射线（0、0．25、0．5、1．0Gy）、不同浓度的香烟烟雾（0、0．5、1．0、1．5、2．0支／只）及其联合处理孕鼠,观察其仔代行为功能的状况。结果低剂量γ-射线和高浓度香烟烟雾对仔鼠的生理发育及反射行为均有显著影响（P＜0．01）,4种生理指标（开眼、张耳、生毛、出牙）和4种反射行为（平面翻正、空中翻正、视觉定向、听觉惊愕）出现不同程度的延迟;低剂量γ-射线联合香烟对仔鼠的生理发育和反射行为的影响有极显著的协同效应。结论低剂量γ-射线与香烟联合可引起仔鼠行为功能的异常。     

氯胺酮诱导的热休克蛋白70在不同鼠龄大鼠海马中的表达

目的　探讨氯胺酮导致神经损害的可能机制。方法　 35只成年大鼠分别给予生理盐水和氯胺酮2 0 .0、4 0 .0、6 0 .0、80 .0、1 0 0 .0、1 2 0 .0 mg/ kg腹腔内注射 ;另取 0～ 1 0 ,1 1～ 2 0 ,2 1～ 30 ,31～ 4 5 ,4 6～ 6 0 ,6 1～ 90 ,91～1 2 0 d各年龄段大鼠共 35只 ,分别腹腔内注射氯胺酮 80 .0 mg/ kg。2 4 h后取鼠脑 ,应用免疫组化染色检测大鼠海马中热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达 ,并用 MIAS- 2 0 0 0图像分析系统分析大鼠海马 HSP70阳性细胞百分率、密度和灰度值。结果　氯胺酮可诱导成年大鼠海马神经细胞表达 HSP70。氯胺酮剂量在 80 .0 m g/ kg以内 ,随剂量的增加 ,HSP70阳性细胞密度、百分率和反应强度均显著增加 (P<0 .0 1 ) ;氯胺酮剂量在 80 .0 m g/ kg以上 ,随剂量的增加 ,HSP70阳性细胞密度、百分率和反应强度显著降低 (P<0 .0 1 )。氯胺酮不能诱导 2 0 d以下的幼鼠神经细胞表达HSP70 ;2 0～ 90 d大鼠 ,随着年龄的增加 ,HSP70表达增强 ;90 d以上的大鼠神经细胞 HSP70的阳性表达无显著性差异。结论　氯胺酮可诱导 HSP70在大鼠海马中表达 ,提示海马的神经元可能受到损害 ;随剂量的增加 ,其损害作用加强 ;氯胺酮对成年大鼠的脑损害作用较幼鼠强     

高温高湿环境下颅脑火器伤后兔脑HSP70变化

目的 研究高温高湿环境下颅脑火器伤后兔脑热休克蛋白70(HSP70)的变化及其作用。方法 采用高温高湿颅脑枪伤模型,24只新西兰大白兔随机分成常温(22.0±0.5℃、相对湿度50%)对照组、常温(22.0±0.5℃、相对温度50%)枪伤组和高温高湿(39.0±0.5℃、相对温度80%~85%)枪伤组,每组8只。采用Westernblot法检测脑组织、淋巴细胞中HSP70,应用化学发光和X线片显示,凝胶图像分析仪定量分析。结果 颅脑枪伤受高温高湿环境作用后,脑皮质、下丘脑和淋巴细胞的HSP70显著增高;淋巴细胞中的HSP70与大脑皮质、下丘脑的变化趋势相一致。结论 脑组织和淋巴细胞中HSP70在高温高湿环境颅脑火器伤时显著增加。     

绿茶抗高温与香烟诱变作用的研究

目的探讨绿茶抗高温、香烟及其联合诱变作用。方法在４２℃高温下,给实验小鼠皮下注射香烟烟雾水溶物,同时用不同浓度的绿茶水灌胃,统计分析对小鼠骨髓细胞微核的影响。结果绿茶可明显抑制高温、香烟及其联合诱导小鼠骨髓细胞微核的形成,各剂量组与对照组相比有显著差异。并且绿茶低于１０ｍｇ时,抑制微核的形成与绿茶的剂量呈明显的剂量关系;在绿茶剂量高于１０ｍｇ时各剂量组之间抑制微核形成无显著差异。结论适当剂量的绿茶对高温、香烟及联合诱变作用呈明显的抑制效应。     

芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠Ach、PGE2和HSP70含量的影响

目的:探讨在超高温饲养环境下,芍药甘草汤及其拆方抗高温环境大鼠死亡机理与血清乙酰胆碱(Ach)、前列腺素E2(PGE2)和脑、心、肝组织热休克蛋白70(HSP70)含量变化的关系。方法:实验将SPF级SD大鼠饲养于超高温(36℃~39℃)环境中,记录大鼠死亡率,于给药13d后,采集血清检测Ach、PGE2含量、取脑、心、肝组织检测HSP70含量。结果:与高温正常组相比,芍药甘草汤、单味白芍、单味甘草组大鼠死亡率均有不同程度的下降,死亡率分别为33.33%、46.67%和26.67%;超高温环境可使大鼠血清Ach、PGE2和脑、心、肝组织HSP70含量均呈上升趋势,其中以血清Ach和脑、肝组织HSP70含量上升幅度尤为显著(P<0.05,P<0.01);各给药组均可显著对抗高温所致大鼠脑组织HSP70含量的增加(P<0.05,P<0.01),而芍药甘草汤组和单味白芍组则可协同增加高温所致大鼠血清PGE2的含量。结论:超高温环境大鼠的死亡机制与血清Ach、PGE2和脑、心、肝组织HSP70含量的变化密切相关,而芍药甘草汤及拆方耐高温机理可能与上调血清PGE2水平进而干预大鼠脑、心、肝组织HSP70活性有关。     

热疗对2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶表达和C6胶质瘤细胞侵袭作用的影响

目的：探讨热疗与2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(CNP)表达的关系，阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。 方法： 将对数生长期C6胶质瘤细胞随机分为对照组（37℃孵育）和热疗组（42℃孵箱内孵育10、30、60、120、180和240 min）。各组细胞均行细胞爬片，采用免疫组织化学法检测各组细胞中热休克蛋白70(HSP70)的表达水平；Western blotting法检测各组细胞中CNP蛋白的表达水平；于Transwell上室构建胶质瘤侵袭模型，经热疗后采用结晶紫染色法观察透过Transwell下室面的胶质瘤细胞数。结果：与对照组比较，热疗组C6细胞经热疗后HSP70表达水平增加，于热疗30、60、120和180 min时HSP70表达水平高对于照组(P<0.05或P<0.01)，且于热疗30 min时达高峰（P<0.01）。热疗组C6细胞中CNP蛋白表达水平亦于热疗后开始增加，热疗60、120和180 min时CNP蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01)，并于热疗120 min时达高峰（P<0.01）。热疗后透过Transwell的胶质瘤细胞数减少，细胞数于热疗120 min时达到最低水平（P<0.01）。结论： 热疗可能是通过增加HSP70的表达而使CNP蛋白的表达增多，增多的CNP又通过某种机制降低了胶质瘤的侵袭性。     

长期摄入低浓度酒精对大鼠胃黏膜热休克蛋白表达的影响

目的：探讨长期低浓度酒精刺激对大鼠黏膜热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：以6％的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源，用免疫组化技术观察饮酒不同时程中大鼠黏膜HSP70阳性细胞的分布情况，并对不同的胃腺细胞通过形态学观察或HSP70与增殖细胞核反应抗原（PCNA）免疫双重染色进行鉴定，结果：正常对照组大鼠的主细胞呈HSP70弱阳性反应。饮用酒精水溶液1天的大鼠，胃腺表面黏液性细胞呈HSP70强阳性反应，主细胞弱阳性反应。饮用3－14天的大鼠，HSP70阳性细胞分布于胃黏膜表面，胃腺颈部和胃基底部，胃腺颈部HSP70阳性细胞经PCNA和HSP70免疫双重染色 实为胃腺干细胞，饮用28天的大鼠HSP70阳性细胞分布区域和饮用1天的大鼠相同。结论：适当低浓度的酒精刺激可引起胃黏膜干细胞HSP70的表达，并可能在大鼠胃黏膜的适应性细胞保护机制中起重要作用。     

化瘀克塞汤预处理对局灶性脑缺血大鼠HSP70表达的影响

目的探讨不同剂量化瘀克塞汤对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及对热休克蛋白(heat shock protein, HSP)70表达的影响。方法采用线栓法制备大脑中动脉缺血模型。Wistar大鼠60只随机分为假手术组、缺血组、化瘀克塞汤预处理高剂量组（含生药2.34g/mL，1mL/100g）、化瘀克塞汤预处理低剂量组（含生药1.17g/mL，1mL/100g），造模前7d灌胃给药, 1次/d，假手术组与缺血组则相应给予生理盐水。持续性缺血6h后处死动物, 观测各组大鼠脑梗死体积，神经元受损程度，采用RT-PCR法和免疫组化方法分别检测缺血脑组织HSP70 mRNA和蛋白的含量。结果局灶性脑缺血6h后,化瘀克塞汤预处理高、低剂量组可明显减轻神经元受损程度，降低脑梗死体积（P<0.01,P<0.05）。缺血组HSP70 mRNA及蛋白表达明显增强,化瘀克塞汤高剂量组与缺血组相比,HSP70 mRNA及蛋白表达水平明显较低(P<0.01,P<0.05),在低剂量组也较低(P<0.01,P<0.05)。结论化瘀克塞汤预处理可使局灶性脑缺血大鼠HSP70表达下降，可能与化瘀克塞汤对脑缺血的保护作用减轻了应激反应有关。