急性肺损伤患者外周血Th17细胞水平及功能的研究

目的探讨Th17细胞在急性肺损伤发病中的作用。方法以10名急性肺损伤患者和10名健康志愿者为研究对象,分别留取外周血标本。利用RT-PCR技术检测外周血中淋巴细胞所表达的RORγt mRNA的相对量,流式细胞仪检测外周血中Th17细胞的比例,ELISA法检测血浆中IL-17的水平。结果 RORγt mRNA在急性肺损伤组的表达水平（0.56±0.08）高于对照组（0.19±0.05）,差异显著（P〈0.01）。Th17细胞在急性肺损伤组的比例（32.60±5.51）%高于对照组（12.29±1.71）%,差异有统计学意义（P〈0.01）。IL-17在急性肺损伤组的浓度（87.33±6.08）pg/ml明显高于对照组（52.71±3.19）pg/ml,P〈0.01。结论 Th17细胞与急性肺损伤具有相关性,可能通过分泌IL-17来上调炎症反应,加重炎症反应的失控。     

Th17细胞调控哮喘患者体内炎性反应的研究

目的探讨Th17细胞调控哮喘患者体内炎性反应的机制。方法以10例哮喘患者和10例健康志愿者为研究对象,分别留取外周血标本。利用流式细胞仪检测外周血中Th17细胞的比例,ELISA法检测血浆中IL-17的水平。结果 Th17细胞在哮喘组的比例(28.53±7.20)%高于对照组(14.72±2.33)%,有统计学差异(P<0.01)。IL-17在哮喘组的浓度(102.31±11.45)pg/mL明显高于对照组(59.68±8.85)pg/mL,P<0.01。结论 Th17细胞与哮喘具有相关性,可能通过分泌以IL-17为主的细胞因子来上调炎性反应,加重哮喘病情。     

肺炎支原体社区获得性呼吸窘迫综合征毒素对单核细胞亚群的影响

目的 探讨肺炎支原体社区获得性呼吸窘迫综合征（CARDS）毒素对小鼠外周血单核细胞亚群的影响。方法 制备重组CARDS毒素。32只小鼠按随机数字表分为模型组和正常对照组，每组16只。模型组每只小鼠气管注射40μL含有50μg CARDS毒素的PBS，正常对照组气管注射同等剂量的PBS。造模后24 h腹主动脉采血，流式细胞术检测外周血单核细胞亚群（CD11b+Ly6G-Ly6C+）比例变化；采用HE染色观察肺组织病理学变化，进行肺组织损伤评分；Real-time PCR检测肺组织中白细胞介素（IL）-1β和IL-18表达水平；采用酶联免疫吸附试验检测外周血IL-1β和IL-18水平。结果 与正常对照组相比，模型组小鼠单核细胞CD11b+Ly6G-Ly6C+比例升高（P<0.05）;HE染色可见模型组肺泡壁增厚、炎性细胞浸润增加，病理评分显著增高（P<0.01）；肺组织及血清炎性因子IL-1β和IL-18表达水平均增高（P<0.01）。结论 CARDS毒素诱导的小鼠中Ly6C+单核细胞占比升高，其可能与肺炎支原体肺炎的发病密切相关。     

外周血Th22细胞在免疫相关性全血细胞减少症中的变化及意义

目的 探讨Th22细胞在免疫相关性全血细胞减少症(IRP)患者外周血中的变化及意义.方法 选择2013年12月至2015年3月潍坊医学院附属医院及潍坊市人民医院住院IRP患者45例为研究对象,其中初诊组22例,复诊治疗有效组(血常规恢复正常)18例,治疗无效组(均为造血衰竭患者)5岁,同期12名健康体检者设为对照组.应用流式细胞术检测Th22细胞在各组外周血中所占比例,ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)在各组外周血中的表达水平.结果 IRP初诊组、治疗无效组和治疗有效组Th22细胞比例、IL-6、TNF-α的表达水平均高于健康对照组(均P＜0.05);IRP治疗无效组高于初诊组(P＜0.05),IRP初诊组高于IRP治疗有效组(P＜0.05).在IRP治疗有效组,Th22细胞数量与缓解(血常规恢复正常)时间呈正相关.IRP治疗无效组、初诊组和治疗有效组TGF-β的表达水平均低于健康对照组(均P＜0.05),且治疗有效组高于初诊组(P＜0.05),初诊组高于治疗无效组(P＜0.05).结论 外周血Th22细胞数量的增多与IRP的发生、病情进展可能呈正相关,且IRP患者细胞因子IL-6、TNF-α表达水平的升高及TGF-β的表达水平下降在一定程度上促进了Th22细胞的分化发育.     

sST2/IL-33与Th17/Treg相关细胞因子在原发免疫性血小板减少症中的作用研究

目的 观察可溶性ST2（sST2）和白细胞介素（IL）-33在原发免疫性血小板减少症（ITP）中的表达水平变化及其对Th17/Treg细胞平衡的调节机制。方法 30例ITP患者作为ITP组,选取同期健康体检者20例作为对照组,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 2组外周血血清中 IL-33、sST-2、IL-17和转化生长因子-β（TGF-β）的水平。结果 与对照组比较,ITP组血清sST2及IL-17水平均升高（P＜0.01）,TGF-β表达水平降低（P＜0.01）,而IL-33的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）;在 ITP 组中 sST2 与 TGF-β 呈负相关（r=-0.471,P＜0.01）,与 IL-17 无相关性（r=0.189,P＞0.05）。结论 sST2表达水平增加和Th17/Treg细胞失衡可能是导致ITP发病的免疫机制之一。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-12、IL-6的水平变化和CD_（28）表达的研究

目的探讨IL-12、IL-6和淋巴细胞CD28分子在慢性乙型肝炎发病中的作机制。方法严格按照病例入选标准选取50例患者和20例健康志愿者,每例空腹抽取外周静脉血5 ml,3000 rpm离心10 min,吸取上层血清1.0 ml,放置-70℃冰冻保存备检,同时通过流式细胞仪检测所有患者外周血CD2＋8淋巴细胞所占比例。采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测患者外周静脉血血清中细胞因子IL-12、IL-6的水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康对照组及急性乙型肝炎之间Th1和Th2细胞因子表达的差异。结果HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者IL-12、IL-6水平显著高于健康对照组（P〈0.01）,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞所占比例升高,显著高于健康对照组（P〈0.01）,急性乙型肝炎组水平最高,HBeAg（-）慢性乙型肝炎患者CD2＋8T淋巴细胞水平低于HBeAg（＋）慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论慢性乙型肝炎患者Thl型细胞因子表达强弱与HBV感染肝脏的炎症活动密切相关;Th2细胞因子表达增强,与HBV的持续感染、免疫耐受形成有关;CD28分子在乙型肝炎病毒的清除过程中起重要作用。     

IL-35 Th17/Treg失衡在系统性红斑狼疮中的表达与意义

目的 分析系统性红斑狼疮（SLE）患者血清白细胞介素-35（IL-35）水平、外周血辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）的变化,探讨IL-35及Th17/Treg失衡在SLE发展中的作用。方法 选取2019年1月至4月在南京鼓楼医院就诊的54例新发SLE患者为研究对象,根据SLE疾病活动度（SLEDAI）分为轻度活动组,26例;中度活动组,10例;重度活动组,18例。另外选择同时期体检中心健康体检者30例作为对照组。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测4组研究对象血清IL-35水平,流式细胞术检测外周血Th17与Treg细胞占T细胞的比例,比较4组血清IL-35及外周血Treg、Th17、Th17/Treg表达水平,并采用Pearson相关性分析IL-35与Treg、Th17、Th17/Treg和SLEDAI的相关性。结果 SLE组患者Th17细胞百分比、Th17/Treg比值均高于对照组,IL-35水平、Treg细胞百分比均低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。重度活动组Th17细胞百分比高于中度活动组,中度活动组高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）;3组SLE患者Treg细胞百分比比较,差异无统计学意义（P>0.05）;中度活动组IL-35水平低于轻度活动组,而Th17/Treg高于轻度活动组,差异均有统计学意义（P<0.05）,重度活动组与中度活动组IL-35、Th17/Treg表达比较,差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析显示,SLE患者IL-35水平与Treg呈显著正相关（r=0.373,P=0.006）,与Th17、Th17/Treg和SLEDAI呈负相关（r=-0.563,-0.480,-0.686,P<0.001）。SLE患者经过短暂治疗后IL-35与Treg表达较治疗前升高,Th17与Th17/Treg的表达较治疗前降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 SLE患者体内血清IL-35水平降低,并与SLE患者病情活动相关;低表达的IL-35可能参与了Th17/Treg的失衡,促进SLE的形成。     

真性红细胞增多症患者外周血Th17和CD4~+CD25~+调节性T细胞亚群研究

目的探讨真性红细胞增多症(PV)患者外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。方法选取30例初发(PV)患者,30名健康体检者作为对照。应用流式细胞术检测PV患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白细胞介素(IL)-17,并与健康对照组比较。结果 1PV组外周血Th17淋巴细胞比例(2.9±5.6)%高于健康对照组(1.6±4.2)%;PV组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例(2.0±5.4)%,低于健康对照组(4.6±4.4)%;2PV组血浆中IL-17表达水平(36±20)pg/mL,高于健康对照组水平(21±15)pg/mL;PV组IL-21水平(36±14)pg/mL,高于健康对照组(29±15)pg/mL。结论 PV患者外周血Th17淋巴细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,发病可能与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。     

类风湿关节炎患者外周血辅助性T细胞17和白细胞介素-17的变化及与疾病活动性的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及细胞因子白细胞介素17(IL-17)与疾病活动性的关系。方法 100例RA患者根据DAS28评分分为高、中、低活动组,采用流式细胞术检测RA患者及20名健康对照组外周血Th17细胞水平,采用流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)测定其IL-17水平。结果 RA患者Th17细胞所占外周细胞比例高于健康对照组(P<0.05),且随着DAS28评分增高比例增高;RA患者IL-17A血清浓度高于健康对照组(P<0.01)。结论 Th17/IL-17参与RA的发病过程,且与疾病活动性相关。     

盘龙七片对膝骨性关节炎患者疗效与外周血Th17细胞及相关细胞因子的关系

目的探讨膝骨性关节炎患者不同中医证型患者外周血Th17细胞和相关的细胞因子(IL-17、IL-1β和IL-6)的水平与盘龙七片疗效的关系。方法选取淤血阻滞、阳虚寒凝、肾虚髓空三种中医证型患者各25、24和26例,正常对照组24例,患者采用盘龙七片治疗,每日3次,每次3片,治疗前和治疗6周后,留取正常对照组和患者外周血,采用流式细胞术和ELIS法检测Th17细胞和血清细胞因子IL-17、IL-1β和IL-6浓度,并进行疗效评估。结果肾虚髓空、阳虚寒凝、瘀血阻滞三种中医证型患者Th17细胞比例和细胞因子浓度均高于正常对照组,且呈现逐渐增高的趋势,差异有统计学意义(P<0.05);三种中医证型有效治疗者,Th17细胞比例和细胞因子浓度显著降低,差异有统计学有统计学意义(P<0.05);三种中医证型患者疗效呈现增高的趋势,肾虚髓空型高于另外两种证型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论膝骨性关节炎患者外周血Th17细胞比例和细胞因子IL-17、IL-1和IL-6浓度与盘龙七片的疗效有关,可作为中医证型和预后的参考指标。