miRNA-301a-3p调控结直肠癌对5-氟尿嘧啶敏感性的机制研究

目的 探讨miRNA-301a-3p对结直肠癌细胞HCT-8化疗敏感性的影响及可能的作用机制。 方法 采用CCK-8法检测结直肠癌亲本细胞株HCT-8和对5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药细胞株HCT-8/FU化疗敏感性,RT-PCR法检测miRNA-301a-3p和PTEN基因在HCT-8和HCT-8/FU细胞中的表达。在HCT-8/FU细胞中转染miRNA-301a-3p inhibitor,CCK-8检测化疗敏感性。通过生物信息学软件分析miRNA-301a-3p的下游靶基因,双莹光素酶报告基因法进行验证。观察抑制PTEN的表达对化疗敏感性的影响,并检测抑制miRNA-301a-3p表达后对PTEN、AKT及pAKT蛋白表达的影响。结果 HCT-8/FU细胞株的化疗敏感性明显低于HCT-8细胞株。miRNA-301a-3p在HCT-8/FU细胞中的表达明显高于HCT-8细胞,但PTEN在HCT 8/FU细胞中的表达则明显低于HCT-8细胞。miRNA-301a-3p inhibitor抑制HCT-8/FU细胞中miRNA-301a-3p的表达后,HCT-8/FU细胞化疗敏感性明显增高。PTEN是miRNA-301a-3p的靶基因。抑制PTEN表达可降低HCT 8/FU细胞化疗敏感性,抑制miRNA-301a-3p表达可提高PTEN蛋白表达,并下调pAKT蛋白表达。结论下调HCT-8/FU细胞株中miRNA-301a-3p的表达可提高细胞的化疗敏感性,其机制可能与miRNA-301a-3p/PTEN/AKT信号通路有关。     

miR-125a-3p介导DUSP1信号通路对急性髓系白血病细胞化疗敏感度的影响

目的:分析沉默微小RNA-125a-3p(miR-125a-3p)介导双特异性磷酸酶1(DUSP1)信号通路对急性髓系白血病细胞化疗敏感性的影响。方法:购买人急性白血病细胞株进行培养,分为空白组、耐药组、沉默组、过表达组。检测每组细胞增殖、细胞凋亡、细胞DUSP1信号通路蛋白表达情况,并分析其作用机制。结果:与耐药组相比,沉默组miR-125a-3p表达量降低,过表达组miR-125a-3p表达量升高(均P<0.05),与沉默组相比,过表达组miR-125a-3p表达量升高(P<0.05),说明miR-125a-3p转染成功。与耐药组相比,沉默组细胞增殖抑制率、凋亡率降低,过表达组细胞增殖抑制率、凋亡率升高(均P<0.05);与沉默组相比,过表达组细胞增殖抑制率、凋亡率升高(均P<0.05)。与耐药组相比,沉默组化疗敏感性降低,过表达组化疗敏感性升高(均P<0.05),与沉默组相比,过表达组化疗敏感性升高(P<0.05)。与耐药组相比,沉默组DUSP1蛋白表达量升高,p38、MAPK蛋白表达量降低,过表达组DUSP1蛋白表达量降低,p38、MAPK表达量升高(P<0.05);与沉默组相比,过表达组DUSP1蛋白表达量降低,p38、MAPK表达量升高(均P<0.05)。结论:过表达miR-125a-3p可抑制急性髓性白血病细胞凋亡、促进增殖、增强敏感性,其作用机制可能与DUSP1信号通路被激活相关。     

miRNA-193a-3p靶向TGF-β2基因诱导肝癌细胞凋亡的分子机制研究

目的：探讨微小RNA（microRNA,miRNA）-193a-3p在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞迁移及凋亡的影响和潜在分子机制。方法：利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qRT-PCR）检测miR-193a-3p在肝癌及其癌旁正常组织中的表达;将miR-193a-3p mimic转染肝癌HepG2细胞系（NC为对照组）,利用CCK-8（Cell Counting Kit-8）实验、Transwell实验以及流式细胞仪评估HepG2细胞的活性、迁移及凋亡情况;利用生物信息学分析、qRT-PCR及双荧光素酶报告实验确证miR-193a-3p对下游靶标转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β2的影响;在miR-193a-3p过表达的HepG2细胞中转染TGF-β2质粒,检测过表达TGF-β2对miR-193a-3p诱导HepG2细胞活性、迁移及凋亡的影响。结果：miR-193a-3p在肝癌组织中的表达显著低于正常肝脏组织,差异具有统计学意义（P< 0.01）;与NC组比较,miR-193a-3p组细胞的增殖活性及迁移数量减少,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义（分别为：t = 6.11,8.90,11.53,均P< 0.05）,且以时间依赖性方式诱导HepG2细胞凋亡;miR-193a-3p与靶基因TGF-β2的互补结合序列在进化上高度保守,TGF-β2是miR-193a-3p的下游靶标;与miR-193a-3p+ 空质粒组比较,miR-193a-3p+ TGF-β2组肝癌细胞的增殖活性及迁移数量增多,细胞凋亡率显著减少,差异有统计学意义（分别为：t = 3.43,2.88,9.32,均P< 0.05）。结论：miR-193a-3p在肝癌组织中表达减少,miR-193a-3p通过靶向调控TGF-β2基因抑制HepG2细胞的活性和迁移,促进HepG2细胞的凋亡。     

miR-27a-3p调控XIAP表达对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-27a-3p对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的T-ALL Jurkat细胞分为未转染组(未处理)、miR-NC组(转染阴性对照miR-NC)和miR-27a-3p组(转染miR-27a-3p模拟物),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-27a-3p表达水平,噻唑蓝(M T T)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和X染色体连锁的凋亡抑制基因(XIAP)蛋白表达水平,比色法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性,双荧光素酶报告基因(DLR)实验检测miR-27a-3p和XIAP的靶向关系.结果 与未转染组或miR-NC组比较,miR-27a-3p组细胞中miR-27a-3p表达水平、细胞凋亡率、细胞中Bax表达水平和caspase-3活性均明显升高,而细胞增殖活力和细胞中Bcl-2、XIA P蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);miR-NC组和未转染组上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).DLR实验证实miR-27a-3p可与XIAP靶向结合.结论 miR-27a-3p可抑制T-ALL Jurkat细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向调控XIA P表达有关.     

miR-520a-3p靶向ABCG2增强肺鳞癌细胞对多西他赛的敏感性

目的:探讨miR-520a-3p影响肺鳞癌(LUSC)细胞多西他赛(DTX)敏感性的潜在分子机制。方法:收集2017年5月至2018年12月在我院胸部肿瘤外科确诊并进行新辅助化疗的51例LUSC组织标本,采用RT-qPCR检测癌组织中miR-520a-3p的表达,并分析miR-520a-3p水平与DTX化疗耐受和临床病理学特征的相关性。采用RT-qPCR检测LUSC细胞系(H226和H2170)和其对应的DTX耐药细胞系(H226/DTX和H2170/DTX)中miR-520a-3p和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ABCG2)mRNA的表达,采用Western Blot检测上述细胞系中ABCG2蛋白的表达。转染miR-520a-3p模拟物后,采用细胞毒性实验观察LUSC细胞对DTX敏感性的变化,并分别采用RT-qPCR和Western Blot检测ABCG2 mRNA和蛋白水平的变化。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-520a-3p对ABCG2的靶向调控作用。结果:化疗耐药组新辅助化疗前后肿瘤原发部位的miR-520a-3p表达水平明显降低,同时相关性分析发现,miR-520a-3p低表达与肿瘤低分化、淋巴结转移及高TNM分期显著相关(均为P<0. 05)。miR-520a-3p在DTX耐药细胞系(H226/DTX和H2170/DTX)中的表达水平分别低于对应正常的LUSC细胞系(H226和H2170),而ABCG2的表达却明显升高。上调miRNA-520a-3p后,DTX耐药细胞系(H226/DTX和H2170/DTX)和对应正常的LUSC细胞系(H226和H2170)对DTX敏感性均增强,同时ABCG2在mRNA和蛋白水平的表达均显著下降。双荧光素酶报告基因实验结果提示ABCG2是miR-520a-3p的下游靶基因。结论:miR-520a-3p可逆转LUSC细胞对DTX的耐药性,这一作用可能与负调控肿瘤耐药相关蛋白ABCG2的表达从而抑制药物外排有关。     

miR-27a-3p调控XIAP表达对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-27a-3p对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的T-ALL Jurkat细胞分为未转染组(未处理)、miR-NC组(转染阴性对照miR-NC)和miR-27a-3p组(转染miR-27a-3p模拟物),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-27a-3p表达水平,噻唑蓝(M T T)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和X染色体连锁的凋亡抑制基因(XIAP)蛋白表达水平,比色法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性,双荧光素酶报告基因(DLR)实验检测miR-27a-3p和XIAP的靶向关系.结果 与未转染组或miR-NC组比较,miR-27a-3p组细胞中miR-27a-3p表达水平、细胞凋亡率、细胞中Bax表达水平和caspase-3活性均明显升高,而细胞增殖活力和细胞中Bcl-2、XIA P蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);miR-NC组和未转染组上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).DLR实验证实miR-27a-3p可与XIAP靶向结合.结论 miR-27a-3p可抑制T-ALL Jurkat细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向调控XIA P表达有关.     

miR-409-3p和Rab10在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达和临床意义

目的 探讨miR-409-3p和Rab10对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的影响。方法 qRT-PCR检测转染miR-409-3p模拟物(miR-409-3p mimic)、无关序列模拟物(mimic NC)、miR-409-3p抑制物(miR-409-3p inhibitor)、无关序列抑制物(inhibitor NC)和空白对照组(control组)后miR-409-3p的表达水平，使用Targetscan 7.2和miRNA靶基因预测数据库(miRDB)预测miR-409-3p的下游靶基因，Western blot检测Rab GTP酶10(Rab10)的表达，细胞计数试剂盒-8(CCK-8)和流式细胞仪用来检测细胞增殖和凋亡，然后使用免疫组化(IHC)检测石蜡包埋组织中Rab10的表达水平并进一步分析Rab10与DLBCL患者临床特征的关系。结果 miR-409-3p可以促进细胞凋亡，抑制细胞增殖；过表达miR-409-3p后Rab10的表达增加；Rab10在DLBCL组织中的表达水平高于淋巴结反应性增生（RHL）组织，高水平乳酸脱氢酶(LDH)、高水平β2微球蛋白(β2-MG...     

EphA2在结直肠癌细胞中的生物学功能及其信号调控机制

[目的]探讨EphA2在结直肠癌细胞中的生物学功能及其信号调控机制。[方法]qRT-PCR法检测EphA2在结直肠癌细胞系中的表达情况,筛选得到表达量较高细胞株系,利用si RNA沉默该细胞系中EphA2的表达,利用MTT、Transwell、Western blot、qRT-PCR法检测细胞生物学功能变化及Wnt/β-catenin信号通路相关基因及蛋白的表达变化。[结果]在人结肠癌细胞HCT116、HT29和SW480中筛选得到EphA2高表达细胞HCT116,构建载体EphA2-si RNA并成功转染细胞HCT116。MTT、Transwell法检测结果显示,与对照组相比,EphA2-si RNA组中细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR和western blot分析表明,与对照组相比,EphA2-si RNA组中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白E-cadherin、TCF-4、β-catenin和p-GSK-3βSer9的表达量均呈现下降趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]结直肠癌细胞中EphA2的表达与结直肠癌的进展和侵袭转移密切相关,EphA2可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠癌的进展。     

miR-143-5p靶向AGR2在肝癌细胞增殖和凋亡中的作用

目的 探讨miR-143-5p在肝癌细胞增殖和凋亡中的作用及其机制。方法 qRT-PCR检测正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞(BEL-7402、HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H和Hep3B)中的miR-143-5p表达。选取肝癌细胞BEL-7402和HepG2,将每株肝癌细胞分别分为：mimics-NC组(转染阴性对照mimics-NC)和miR-143-5p mimics组(转染miR-143-5p mimics)。采用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术和Western blot分别检测mimics-NC组和miR-143-5p mimics组细胞增殖能力、克隆形成能力、凋亡率和凋亡相关基因(Bax、Caspase-3和Bcl-2)的表达。通过靶基因预测网站RNA22预测miR-143-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-143-5p和靶基因前梯度蛋白2(AGR2)关系。qRT-PCR和Western blot检测mimics-NC组和miR-143-5p mimics组肝癌细胞BEL-7402和HepG2中AGR2的表达水平。再将肝癌细胞BEL-7402和...     

miR-16-5p通过靶向YWHAQ调控乳腺癌耐药细胞的凋亡与迁移能力

目的 探究miR-16-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生物学活性的影响及分子机制。方法 以人乳腺癌亲本细胞（SKBR-3）与乳腺癌紫杉醇耐药细胞（SKBR-3/PR）为研究对象。实验设空白对照组、阴性对照组、miR-16-5p类似物组（miR-16-5p mimics）、miR-16-5p抑制剂组（miR-16-5p inhibitor）,YWHAQ干扰组（si-YWHAQ）,以及联合组（miR-16-5p mimics+si-YWHAQ）。利用qRT-PCR检测乳腺癌组织与癌旁组织、SKBR-3与SKBR-3/PR间miR-16-5p的表达水平。使用生信数据对miR-16-5p的靶基因做预测,双荧光素酶实验验证靶向结合。免疫印迹检测细胞YWHAQ、Bcl-2和Bax表达。CCK-8和Transwell检测细胞增殖迁移能力。流式细胞术检测耐药细胞周期凋亡改变。结果 qRT-PCR显示乳腺癌组织中miR-16-5p水平低于癌旁组织（-1.19±1.90 vs 1.59±1.76,P<0.01）。生物信息预测YWHAQ是miR-16-5p的靶基因,荧光素酶实验证实miR-16-5p能够靶...     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …