含氯消毒剂对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

[目的]研究不同剂量含氯消毒剂对小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。[方法]以样品(有效氯含量为34.9 mg/L)低(1/1 000 LD50)、中(1/200 LD50)、高(1/50 LD50)剂量进行小鼠灌胃,1次/d,同时设阴阳性对照组。7 d后采小鼠外周血以单细胞凝胶电泳法(SCGE)观察DNA损伤情况。[结果]3个剂量对小鼠外周血淋巴细胞DNA均有损伤(与阴性对照组比较2=920.33,P<0.01);低、中、高剂量有剂量-反应关系(2=210.6,P<0.01)。[结论]不同剂量含氯消毒剂对小鼠灌胃对其外周血淋巴细胞DNA有损伤作用,日常使用时应引起注意。     

DHPO生殖毒性的毒理学评价

目的研究1，2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮（DHPO）的急性毒性及不同剂量、不同时间的生殖毒性。方法以昆明种近交小鼠为实验对象．首先进行半数致死量（LD50）实验，然后对DHPO低（1／8LD50）、中（1／4LD50）、高（1／2LD50）剂量组染毒小鼠进行精子畸变率观察。结果DHPO染毒小鼠经口LD50为562．34mg／kg.精子畸变实验显示，1／8LD50组、1／4LD50组与阴性对照组比较，在第14．28，35，42，70d观察，差异均无统计学意义（P〉0．05）；1／2LD50组与阴性对照组比较，在第14，28，35d观察．差异均有统计学意义（P〈0．05），而在第42，70d观察，差异无统计学意义（P〉O．05）。结论DHPO的低（1／8LD50）、中（1／4LD50）剂量未显示有生殖毒性，高剂量（1／2LD50）具有一定生殖毒性。但可在42d后恢复。     

锌对镉致淋巴细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨锌对镉致淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法小鼠经腹腔同时注射1．25,2．50,5．00mg／kg硫酸锌和2．50mg／kg氯化镉水溶液,染毒24h和48h后分别取外周血和胸腺,采用单细胞凝胶电泳（singlecell gel eletrophoresis,SCGE）技术观察不同浓度锌对镉致小鼠外周血和胸腺淋巴细胞DNA损伤的保护作用。结果与阴性对照组比较,镉组的淋巴细胞DNA平均迁移长度明显增加,且差异有显著性（P〈0．05）。不同剂量的锌和镉同时作用时,无论染毒24h还是48h,外周血和胸腺淋巴细胞的DNA平均迁移长度明显下降,与镉组比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论锌对镉致淋巴细胞DNA损伤有保护作用。     

甲醛和苯联合吸入致雄性小鼠骨髓细胞的遗传毒性

[目的]研究甲醛和苯联合吸入染毒对雄性小鼠骨髓细胞的遗传毒性作用。为评价甲醛和苯的安全性提供科学依据。[方法]60只健康清洁级昆明种纯系雄性小鼠,随机分为10组,每组6只。各组分别为阴性对照组（清洁空气）,甲醛低（1．0mg／m^3）、中（3．0mg／m^3）、高（5．0mg／m^3）剂量组;苯低（500．0mg／m^3）、中（1500．0mg／m^3）、高（2500．0mg／m^3）剂量组,联合染毒低（0．5mg／m^3甲醛＋250．0mg／m^3苯）、中（1．5mg／m^3甲醛＋750．0mg／m^3苯）、高（2．5mg／m^3甲醛＋1250．0mg／m^3苯）剂量组。采用静式吸入染毒,每天2h,连续14d。染毒结束次日处死小鼠,采用微核试验和单细胞凝胶电泳试验（彗星试验）检测甲醛和苯单独或联合染毒致骨髓细胞的遗传毒性。[结果]与阴性对照组相比,甲醛、苯单独及联合染毒各剂量组均呈现骨髓细胞微核率升高、彗星尾部DNA含量增多、尾距增大（P〈0．05）。与相应单独染毒组相比,联合染毒各剂量组骨髓细胞微核率明显升高（P〈0．05）;联合染毒低、中剂量组彗星尾部DNA含量增多、尾距增大（P〈0．05）;联合染毒高剂量组彗星尾部DNA含量和尾距高于甲醛高剂量染毒组（P〈0．05）,与苯高剂量染毒组比较,其差异无统计学意义。[结论]甲醛和苯联合吸入染毒对雄性小鼠骨髓细胞的遗传损伤作用大干甲醛、苯单独染毒时的作用,二者对雄性小鼠骨髓细胞的联合遗传毒性作用可能具有协同作用。     

氡暴露对大鼠淋巴细胞的免疫毒性

[目的]通过研究氡暴露对大鼠胸腺、脾脏、外周血及骨髓淋巴细胞的损伤作用,探讨氡对大鼠免疫功能的影响,为探索氡致机体免疫损伤的可能机制提供实验资料。[方法]将15只健康雄性Wistar大鼠随机分成3组,每组5只,动物整体暴露于HD-3型多功能生态氡室,累积受照剂量分别达200工作水平月（WLM）和400WLM后,腹主动脉采血,胸腺、脾脏制成单细胞悬液,分离股骨取骨髓。采用五分类血液分析仪进行骨髓、外周血细胞计数及分类。采用荧光探针检测不同剂量氡暴露组淋巴细胞内活性氧（ROS）、游离钙离子浓度、线粒体膜电位（MMP）水平的变化。采用碘化丙啶（PI）染色后,观察脾脏、胸腺淋巴细胞周期及凋亡率。[结果]200WLM氡暴露组大鼠外周血淋巴细胞数为（6．84土1．40）×10-9／L,高于对照组的（3．34±1．10）×10-9／L（P〈0．01）,2剂量组骨髓淋巴细胞计数均明显增加（P〈0．01）;200WLM组胸腺淋巴细胞ROS高于对照组（P〈0．01）,骨髓、外周血淋巴细胞MMP低于对照组（P〈0．01）,脾脏、胸腺淋巴细胞钙离子浓度明显升高（P〈0．01）;与对照组比较,胸腺细胞Go／G,期细胞比例明显降低,而s期细胞比例显著升高,脾脏细胞则相反;200WLM氡暴露组胸腺细胞凋亡率为（1．63±0．46）％,高于对照组的（0．69±0．64）％（P〈0．05）,而400WLM氡暴露组未见明显改变。[结论]氡及其子体可暴露对大鼠免疫细胞和免疫功能产生毒性作用。     

单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤与修复在辐射生物剂量学中的应用

目的探索细胞DNA辐射损伤后离体修复与整体修复的关系，拟合修复曲线，在辐射生物剂量估算中结合应用剂量一效应关系曲线，提高剂量估算的准确性。方法用中性单细胞凝胶电泳技术检测1Gyγ射线辐照后不同时间点的小鼠和人淋巴细胞DNA双链断裂，分别拟合DNA修复曲线，并对二者曲线模型进行比较。结果人外周血和小鼠辐照后，随照后时间的推移，DNA损伤的修复增加，残余损伤逐渐减少，呈明显的时相一效应关系。人淋巴细胞辐照后体外修复曲线方程模型与动物体内修复曲线方程模型均以对数方程为最佳，分别为：小鼠：YTM=55．8256—10．792 lnX（R^2=0．629，P〈0．01）和YOTM=25．4173—4．5273 lnX（R^2=0．661，P〈0．01）；人：YTM=30．2427—7．3836 lnX（R^2=0．686，P〈0．01）和YOTM=17．9772—3．9125 lnX（R^2=0．752，P〈0．01）。结论人淋巴细胞离体辐照后的修复过程可基本反映体内DNA双链断裂的修复水平与速度，修复曲线可以作为辐射生物剂量估算时的参考。     

用彗星试验检测苯并(a)芘致小鼠体细胞DNA的损伤

[目的]建立彗星试验检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠体细胞DNA损伤的方法。[方法]雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和高、中、低剂量3个染毒组，每组4只。3个染毒组和溶剂对照组分别腹腔注射二甲基亚砜（0．01ml／g体重）和苯并（a）芘（250、125、62．50mg／g体重）。染毒3h后，处死小鼠，取出肝、肾和小肠组织制备单细胞悬液用于彗星试验。IMI彗星分析软件分析彗星尾距（oliver tail moment，TM）评价细胞DNA损伤的程度。[结果]高剂量组小鼠肝、肾和小肠细胞的彗星尾距值均增加，中、高剂量组小肠细胞的彗星尾距值均是溶剂对照组的5．22倍（P〈0．05）；中、高剂量组小鼠肾细胞的尾距值分别是溶剂对照组的8．27和7．16倍（P〈0．05）。高剂量组肝细胞的彗星尾距值是溶剂对照组的3．99倍。低剂量组仅小肠细胞的彗星尾距均值（1．285μm）增加（P〈0．05）。[结论]彗星试验可检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠肝、肾和小肠细胞的DNA损伤。     

甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞凋亡作用

目的研究甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞凋亡及其作用机制。方法采用原位末端标记（TUNEL）和免疫组织化学方法研究甲基汞对小鼠睾丸生殖凋亡及其凋亡基因的表达。结果甲基汞可使雄性小鼠睾丸生殖细胞的凋亡率增加，随着甲基汞染毒剂量的增加，1150LD50、1／10LD50组凋亡率与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．0S）。1／10LD50剂量染毒组低于1150LD50组，差异无统计学意义（P〉0．05）。Fas、Fas—L、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（caspase-3）表达增强，11100LD50组阳性表达率最高，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），随着染毒剂量的增加。各染毒组的阳性表达率有所下降。结论甲基汞可以诱导雄性小鼠生殖细胞的凋亡。     

细颗粒物暴露对人群DNA损伤的影响

[目的]研究人群PM2.5暴露对外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。[方法]选择不吸烟或戒烟半年以上且家庭中也无人吸烟的男性交通警察107人为高暴露组,普通社区男性居民101人为低暴露组。使用个体采样器24h连续监测两组的PM2.5暴露情况,并采集血液进行淋巴细胞彗星试验（单细胞凝胶电泳试验）,以判断两组的DNA损伤情况。[结果]高暴露组PM2,日平均暴露浓度为（115．40±46．17）μg／m^3,高于低暴露组的（74．94±40．09）μg／m^3（P〈0．01）。高暴露组彗尾率（15．20±3．46）％和Olive尾矩1．25±0．29高于低暴露组的（10．05±3．45）％和0．86±0．22（P〈0．01）。DNA损伤程度随着PM2.5日均暴露量增大而增加（OR=1．032,P〈0．01）,未发现年龄与工龄对DNA损伤程度的明显影响。[结论]在正常大气暴露下,PM2.5浓度升高能导致人群DNA损伤程度增加。     

芦荟排毒胶囊通便作用的动物实验研究

[目的]研究芦荟排毒胶囊对小鼠的通便功能作用。[方法]将120只昆明雄性小鼠根据体重随机分为小肠运动实验组和排便实验组,每大组60只。随机分为模型对照组、空白对照组、低（0．24g／kg·bw）、中（0．48g／kg·bw）、高（1．44g／kg·bw）剂量组。用蒸馏水溶解芦荟排毒胶囊受试样品进行灌胃,模型、空白对照组给予蒸馏水。小鼠连续灌胃10d后进行小肠运动实验和排便实验,测定小鼠小肠的墨汁推进率、排首粒黑便时间和5h内粪便粒数和重量。[结果]各剂量组的墨汁推进率均高于便秘模型对照组,且差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;各剂量组的首粒黑便时间与便秘模型对照组比较均显著缩短（P〈0．01）;中、高剂量组粪便粒数均显著多于便秘模型对照组（P〈0．05或P〈0．01）。[结论]芦荟排毒胶囊具有通便功能。