注射用盐酸苦参碱对卡介苗加脂多糖致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

[目的]研究注射用盐酸苦参碱对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.[方法]采用BCG加LPS致小鼠免疫性肝损伤,采用不同剂量盐酸苦参碱干预,对其血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)进行测定和比较,取肝脏、脾脏、胸腺测定脏器指数并进行比较.[结果]与模型组比较,盐酸苦参碱各剂量组均能显著对抗BCG加LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST及小鼠肝脏指数和脾脏指数的升高. [结论]盐酸苦参碱各剂量对BCG加LPS致小鼠免疫性肝损伤具有保护作用.     

丹参肠内营养防护兔多脏器损伤的研究

目的:探讨丹参(DS)肠内营养对内毒素所致大白兔多脏器损伤的防护作用。方法:将近交系纯种大耳白幼兔44只,按体重随机分为正常对照组(N)、内毒素攻击组(LPS)、内毒素攻击+能全力组(LPS+EN)和肉毒素攻击+DS肠内营养组(LPS+DS),除正常对照组8只外,其余三组均为12只。内毒素攻击前3d始,LPS+DS组每日给予DS肠内营养液80ml/kgbw(其中每100ml营养液含丹参15g)灌胃,LPS+EN组按每日给予能全力营养液80ml/kgbw灌胃,N组灌胃等量生理盐水,至试验结束。同时观察:动物血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、内毒素、小肠粘液SIgA含量。整个实验期为10d。动物处死后,取心脏、肝脏、肾脏、小肠、肺进行组织形态学检查。结果:病理检查显示,LPS组小肠绒毛损伤、坏死、绒毛变短;肝脏可致汇管区出血、胞浆气球样变等;肺和肾脏也有变化。而LPS+DS组可见小肠绒毛损伤较轻,间隙致密。绒毛高度有轻微减少。其他脏器损伤较轻。内毒素攻击后,LPS+DS组血清MDA水平显著低于LPS组,内毒素水平亦低于LPS组,小肠粘液SIgA含量LPS+DS组高于LPS组。结论:DS肠内营养可以减少氧化损伤,维持肠道粘膜细胞的结构和功能,提高小肠免疫球蛋白的释放,对多脏器损伤防护有一定作用。     

罗汉果皂甙提取物对1型糖尿病小鼠细胞免疫功能的影响

目的:探讨罗汉果皂甙提取物(mogrosideextract,MG)对1型糖尿病(type1diabetesmellitus,TIDM)小鼠脾脏淋巴细胞亚群及细胞因子表达的影响。方法:给予Balb/c小鼠腹腔注射200mg/kgbw四氧嘧啶造模(TIDM)。成模后按血糖随机分为,糖尿病对照组,低、高剂量MG治疗组(150、300mg/kgbw);正常小鼠也按血糖随机分为正常对照组以及低、高剂量MG组。连续灌胃30d,实验结束时测小鼠血糖水平,流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞CD4、CD8亚群以及细胞因子IFN-γ,TNF-α和IL-4的表达,并观察胰腺组织学变化。结果:与正常对照组相比,TIDM小鼠血糖显著升高,脾脏CD8+淋巴细胞数目显著增加,CD4/CD8比值降低;IFN-γ、TNF-α的表达水平升高。MG尤其是低剂量组能降低血糖,改善胰腺的病变程度以及下调IFN-γ、TNF-α的表达水平,增加TIDM小鼠脾脏CD4+淋巴细胞数目,使CD4/CD8比值恢复正常,此外,还可显著增加正常小鼠和TIDM小鼠脾脏淋巴细胞IL-4的表达水平,但对正常小鼠其它各项指标无明显影响。结论:MG能通过免疫调节机制对TIDM小鼠脾脏淋巴细胞的抗原表达进行调控,拮抗TIDM时出现的细胞免疫功能失衡,进而对TIDM起到一定的治疗作用。     

美颜胶囊对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

目的观察美颜胶囊对大鼠酒精性肝损伤肝脏组织匀浆生化指标及肝脏病理组织学的改变。方法采用清洁级(Ⅱ级)Wistar种雄性大鼠60只,随机分为5组。美颜胶囊3个剂量组和酒精肝损伤模型对照组、蒸馏水阴性对照组。3个剂量组大鼠灌胃给予相应浓度的美颜胶囊,模型对照组和阴性对照组给予蒸馏水,每天灌胃1次,连续灌胃30天。试验至第31天时,模型对照组和美颜胶囊3个剂量组动物一次灌胃给予50％乙醇溶液1．2ml／100gBW,制造肝损伤模型;阴性对照组灌给等量蒸馏水。禁食16小时后处死大鼠,部分肝脏制成肝匀浆分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及甘油三酯(TG)含量,部分肝脏作冷冻切片,进行病理组织学检查,观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积并进行评分。结果美颜胶囊能显著降低酒精性肝损伤模型大鼠肝组织中的MDA和TG含量,提高肝组织中还原型GSH含量,减轻其肝组织脂肪变性程度,对大鼠的体重无明显影响。结论美颜胶囊对酒精性肝损伤具有一定保护作用。     

海洋深层水预防小鼠急性酒精性肝损伤北大核心CSCD

目的研究海洋深层水对急性酒精性肝损伤的预防作用。方法 105只雄性昆明小鼠随机分为7组,即去离子水对照组,酒精性肝损伤模型对照组,阳性药对照组,海洋深层水配方A 1倍、5倍、10倍浓度组,海洋深层水配方B 5倍浓度组。去离子水对照组和酒精性肝损伤模型对照组自由饮用去离子水,阳性药对照组每日灌胃给予某品牌保健品(水溶液),4个试验组均自由饮用含相应浓度受试物的水。连续干预14天,第15天除去离子水对照组外,其余6组动物灌胃给予0.15 m L/g的56%乙醇溶液。测定血清中丙氨酸氨基转移酶(GPT)和天门冬氨酸氨基转移酶(GOT)活力、甘油三酯(TG)水平,以及肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平等抗氧化指标,并对肝脏进行组织病理检查。结果酒精性肝损伤模型对照组抗氧化指标、GOT和肝组织病变与去离子水对照组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),即模型建立成功。与酒精性肝损伤模型对照组相比,海洋深层水配方A10倍浓度组小鼠肝组织SOD、GSH升高(P<0.01),血清GOT活性下降(P<0.05);海洋深层水配方A 5倍、10倍浓度组和海洋深层水配方B 5倍浓度组小鼠肝脏病理评分显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论海洋深层水对酒精所致急性肝损伤具有预防和保护作用。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对免疫性肝损伤小鼠NF-κB的影响

目的探讨核转录因子-κB(nuclear fastor kappa B,NF-κB)在免疫性肝损伤小鼠模型中的作用。方法通过尾静脉注射BCG(125 mg/kg)14 d制备免疫性肝损伤小鼠模型。采用免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中NF-κB的表达程度。结果免疫组化结果显示,模型组肝细胞的NF-κB p65平均细胞阳性数明显增高,差异具有统计学意义(P0.05);PDTC干预组肝组织中NF-κB p65的表达显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且PDTC各剂量干预组之间肝组织中NF-κB p65的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PDTC可显著抑制免疫性肝损伤小鼠肝组织中NF-κB的表达,明显改善免疫性肝损伤肝组织病理表现。提示可通过PDTC抑制NF-κB的活化,干预肝损伤过程。     

砷暴露对小鼠脾脏炎症反应及Th1/Th2的影响

目的探讨慢性饮水砷暴露对小鼠脾脏的炎症反应及Th1/Th2细胞因子和转录因子表达的影响。方法将30只健康SPF级雌性昆明小鼠根据体重按照随机数字表分为对照组和25、50 mg/L NaAsO_2染毒组,每组10只。采用自由饮水方式染毒,染毒6个月后,测定小鼠脾脏组织中炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平。采用Real-time PCR方法分别检测脾脏Th1和Th2的转录因子T-bet、Gata3和细胞因子Ifn-γ、IL-4的mRNA表达水平。同时用Western blot法观察Nrf2、NQO1和GSTO1/2的蛋白表达水平。结果与对照组比较,随着染毒剂量的上升,各染毒组小鼠脾脏炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平均上升,除IL-12的25 mg/L剂量组外,差异均具有统计学意义(P0.05);各染毒组小鼠脾脏细胞因子Ifn-γ和IL-4的转录水平呈上升趋势;Nrf2及其调控的下游蛋白NQO1和GSTO1/2的表达水平明显增加。结论慢性砷暴露小鼠免疫器官脾脏的炎症相关因子IL-12和IL-6明显增加,同时上调Th1和Th2特异性细胞因子的表达水平,调节CD4~+T淋巴细胞亚群的分化,从而发挥对小鼠脾脏的免疫调节效应。     

褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱影响的体内外研究

目的研究褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响。方法体内实验:分别设阴性对照组和两个褐藻胶组(0.50g/kgbw和1.50g/kgbw),每组各5只C57BL/6小鼠,分别经口给予纯净水和褐藻胶,30天后分离脾淋巴细胞,培养48h后取上清采用流式微球分析术(CBA)方法分析白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-5)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。体外实验:分离C57BL/6种小鼠脾淋巴细胞,与褐藻胶(25mg/ml和50mg/ml)培养48h后取上清采用CBA方法分析IL-2、IL-4、IL-5、TNF和IFN-γ水平。结果体内实验:0.5g/kgbw和1.5g/kgbw褐藻胶组IFN-γ表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01),而IL-2和IL-4表达水平下降(P<0.01,P<0.05)。体外实验:25mg/ml和50mg/ml褐藻胶组TNF、IL-2和IL-4表达均明显高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01),50mg/ml褐藻胶组IL-5表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01)。结论无论是在体内还是体外实验条件下,褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞分泌的Th1/Th2细胞因子谱均有影响。     

低聚木糖联合壳寡糖保护小鼠急性肝损伤及提高脾脏细胞免疫活性的作用

目的研究低聚木糖联合壳寡糖对小鼠急性肝损伤及脾细胞免疫活性的调节作用。方法取低聚木糖(0.045~0.26 g/kg)和壳寡糖(0.055~0.32 g/kg)混合物灌胃30 d后,分别以酒清性肝损伤模型和正常小鼠为对照,采用肝匀浆中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和三酰甘油(TG)含量测定,肝脏组织病理学检查,脾脏NK细胞活性、淋巴细胞转化能力和抗体生成能力检测,评价低聚木糖协同壳寡糖对急性酒清性肝损伤模型小鼠肝脏的保护作用,以及对正常小鼠脾脏细胞免疫活性的影响。结果急性肝损伤试验结果显示,与空白对照组比较,模型对照组小鼠MDA升高,GSH降低,差异均有统计学意义(P0.05);各剂量组小鼠MDA水平,低、中剂量组小鼠TG水平,高剂量组小鼠肝脏细胞病理组织学脂肪变性得分均值均低于模型对照组(P0.05)。免疫活性试验显示,各剂量组和空白对照组小鼠脾脏NK细胞活性比较,差异无统计学意义(P0.05);与空白对照组比较,中、高剂量组脾淋巴细胞增殖能力和抗体生成能力增强(均P0.05)。结论在本实验条件下,低聚木糖联合壳寡糖对小鼠急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用,可增强小鼠脾细胞免疫活性。     

消退素RvE1对日本血吸虫病所致肝损伤的保护作用

目的 通过检测日本血吸虫病肝损伤模型小鼠肝功能指标及有关细胞因子的表达水平,研究消退素RyE1对小鼠日本血吸虫病肝损伤的保护作用及其机制.方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、治疗组(RvE1)共3组,每组10只,用日本血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染小鼠,构建日本血吸虫病肝损伤模型.感染5周后,模型对照组小鼠每天每只单次尾静脉注射N.S.,治疗组小鼠每天每只单次尾静脉注射100 ng RyE1,上述各组均连续给药至感染第10周末.感染10周后,观察其肝脏组织形态,测定肝脏系数,ELISA检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ala-nine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用Real-Time PCR或Western Blot检测TNF-α mRNA和蛋白的表达变化.结果 感染10周后,模型组中小鼠的肝脏系数、血清ALT和AST活性分别为(84.9±10.3) mg/g, (331.60±49.21) U/L, (368.74±72.76) U/L,与模型对照组比较,RvE1治疗组对小鼠肝损伤有明显的修复作用,能降低日本血吸虫病所致肝损伤小鼠的肝脏系数(68.6±5.1)、血清ALT (97.82±21.66) U/L和AST (156.19±38.81) U/L活性,两者差异有统计学意义(P＜0.01);RyE1治疗组小鼠肝组织中促炎介质TNF-α的mRNA和蛋白表达较模型对照组有明显降低.结论 给予外源性RvE1可以通过抗炎作用,有较好的保肝作用,拮抗日本血吸虫病所致肝损伤.     

L-精氨酸对脂多糖诱导免疫应激大鼠血清生化指标和肝脏的影响

目的探讨外源性精氨酸对动物机体在免疫应激状态下的保护作用。方法以腹腔注射大肠杆菌内毒素(LPS)的方式复制免疫应激动物模型。将SD大鼠32只随机分成4组:正常对照组;生理盐水配对组;免疫应激组(LPS组);L-精氨酸+LPS组(L-Arg+LPS组)。结果腹腔注射LPS 4mg/kg.bw,可以使大鼠产生免疫应激。L-Arg+LPS组大鼠血清中Arg浓度非常显著高于其余各组(P<0.01),与对照组相比,L-Arg+LPS组和LPS组血液中谷丙转氨酶(ALT)活性非常显著(P<0.01),L-Arg+LPS组和LPS组血清中总的一氧化氮合酶(T-NOS)活性显著增高(P<0.05),NO浓度和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性达到非常显著(P<0.01)。免疫组化显示:L-Arg+LPS组的大鼠肝组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达呈强阳性,其他组未见eNOS表达;而LPS组肝组织iNOS表达呈中度阳性,L-Arg+LPS组iNOS表达呈痕迹反应,对照组和配对组均无iNOS表达。L-Arg+LPS组和LPS组分别与对照组相比,肝细胞凋亡极显著增多(P<0.01),但L-Arg+LPS组细胞凋亡数显著低于LPS组(P<0.05),对照组和配对组之间差异不显著。结论对免疫应激大鼠添加精氨酸后,可抑制由iNOS催化生成NO而导致的肝脏组织炎症及肝细胞凋亡,缓减免疫应激对大鼠机体的损害作用。     

溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA的损伤作用

[目的]探讨农药溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA是否有损伤作用及3种器官对溴虫腈的敏感性差异。[方法]溴虫腈按4.9、9.8、19.6mg/kg体重3个剂量,一次性灌胃染毒雄性小鼠,2 4h后用彗星试验检测3种脏器的彗星细胞率和彗星尾长。[结果]各剂量组的彗星细胞率和彗星尾长都显著增加(P <0 .0 5～P <0 .0 0 1) ;脾、肝、肾3种细胞的彗星细胞率及彗星尾长均具有剂量 反应或剂量 效应关系(前者r值依次为0 .9948,0 .9993 ,0 .9890 ,后者r值依次为0 .9999,0 .9999,0 .9898,P值均<0 .0 5 )。比较同剂量组不同器官之间的彗星细胞率,3个剂量组中均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P <0 .0 5～P <0 .0 1) ;比较同剂量组不同器官之间的彗星尾长,3个剂量组均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P<0 0 5 ) ,肝、脾细胞间差异无显著性。[结论]溴虫腈可诱发小鼠脾、肝、肾细胞DNA断裂损伤,肾细胞对溴虫腈致DNA断裂作用最为敏感。     

DHA对脂多糖致小鼠急性肺损伤保护作用

目的观察二十二碳六烯酸(DHA)预防脂多糖(LPS)性小鼠急性肺损伤(ALI)的效果,探讨其抗氧化作用机制。方法雄性昆明种小鼠经灌胃给予DHA 250、500 mg/kg,连续10 d,然后经腹腔注射6 mg/kg脂多糖建立ALI模型;染毒16 h后,分别对各组动物肺组织进行病理学观察,支气管-肺泡灌洗液(BALF)和肺脏中氧化、抗氧化指标检测。结果脂多糖明显损伤肺组织氧化和抗氧化系统,DHA能明显改善脂多糖导致的肺脏病理学改变;给予250、500 mg/kg的DHA可分别使肺脏髓过氧化酶活性比脂多糖组降低12.2%和27.6%(P<0.05或P<0.01),丙二醛降低12.5%和25.5%(P<0.05或P<0.01);BALF和肺脏中超氧化物歧化酶活性分别升高13.2%和23.0%(P<0.05或P<0.01),19.9%和36.1%(P<0.01);谷胱甘肽过氧化物酶活性升高20.2%和33.1%(P<0.01);总抗氧化能力升高48.5%和102.4%(P<0.01)。结论 DHA对脂多糖导致的肺组织损伤具有预防作用,可能与其抗氧化功能相关。     

大鼠免疫性肝损伤的机制和低铁负荷的影响

目的　探讨超氧化物歧化酶 (SOD)在免疫性肝损伤中的作用以及低铁负荷的影响。方法　通过放血或去铁胺 (DFO)处理 ,建立低铁动物模型 ;采用卡介苗加脂多糖诱导法复制免疫性肝损伤模型 ;检测血清铁 (SI)、转铁蛋白 (TRF)、总蛋白 (TP)含量及天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)活性 ;检测肝组织中丙二醛(MDA)含量、SOD活性和铁 (HIC)的变化。结果　与空白对照组比较 ,DFO对照组、放血对照组和肝损伤组SI显著降低。除DFO组外 ,其它组的TRF均降低。与其相应对照组比较 ,各损伤组AST增高 ,TP均降低 ;DFO损伤组和放血损伤组AST活性增高的幅度和TP含量的降低的幅度均小于单纯肝损伤组。与对照组比较 ,DFO对照组及放血对照组MDA均显著降低 ;各损伤组与其相应对照组比较 ,MDA含量均增高 ,SOD活性均降低。结论　在免疫性肝损伤时 ,肝组织SOD活性降低 ,脂质过氧化产物清除障碍 ,是肝细胞损伤的主要原因之一。低铁对肝细胞有保护作用 ,可能是由于铁催化的脂质过氧化过程减弱的结果     

内毒素在小鼠过敏性哮喘模型所起作用的实验研究

目的建立小鼠过敏性哮喘模型,在过敏原的致敏和激发阶段给予不同剂量内毒素(即脂多糖LPS),探讨内毒素在哮喘模型中的作用机制。方法建立BALB/c小鼠哮喘模型,设立实验组和对照组开展后续实验。实验组包括:鸡卵清白蛋白(OVA)致敏,OVA激发组;OVA致敏,LPS激发组;OVA致敏,OVA+LPS联合激发组;LPS暴露于OVA致敏前,OVA激发组;对照组包括试剂对照组和健康对照组。各实验组的LPS剂量均分为高、中、低三个剂量组。通过测定小鼠气道阻力和肺顺应性来反映其肺功能改变;流式细胞术(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数,表征CD4+CD2+5调节性T淋巴细胞(以下简称Treg细胞)的相对比例;荧光实时聚合酶链反应定量测定肺脏和脾脏Foxp3mRNA表达的水平;ELISA法测定血浆总IgE和OVA特异性IgE水平,抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th2细胞因子(IL-4和IL-5)的水平;计数BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞等各类白细胞所占百分比;常规病理切片观察肺组织改变情况。结果结果表明,与哮喘模型组小鼠相比,在LPS各处理组中,总体上能诱导Treg细胞的产生,改善肺功能,降低IgE滴度,降低Th2介导的免疫反应,同时诱导肺部炎症。尤其是在致敏阶段腹腔注射内毒素可以缓解由过敏原诱导的气道炎症和改善肺功能,诱导肺组织和脾组织Foxp3mRNA表达的增加。结论LPS抑制了Th2介导的过敏反应,可能与Foxp3表达量的增加相关,后者诱导Treg细胞增殖,对哮喘症状起到缓解作用。     

Induction of Th2-directed immune responses by IL-4-transduced dendritic cells in mice

Dendritic cell (DC)-based vaccines have been used to generate Th1-mediated, protective immunity against cancers and infectious microorganisms. As an attempt to develop a new vaccine protocol for the induction of Th2-directed responses, we introduced an IL-4 plasmid vector into the XS106 DC line (derived from A/J mice). Although relatively small fractions of XS106 cells exhibited apparent intracellular deposition of IL-4, they secreted biologically relevant amounts of the cytokine. IL-4-transduced XS106 DC and control XS106 DC transfected with vector alone were pulsed with KLH and injected s.c. into A/J mice. The overall magnitude of KLH-specific cellular and humoral responses was comparable between the two animal groups. However, they differed in the isotype profile albeit only transiently, with the IL-4-transduced DC group showing higher IgE and lower IgG2a responses, and in the cytokine profile, with spleen cells isolated from the IL-4-transduced DC group producing higher IL-13 and lower IL-12. Thus, delivery of IL-4 gene to relatively small numbers of DC is sufficient to modify the immunological outcome of DC-based vaccines.     

三氯乙烯暴露致小鼠肝功能损害与Treg细胞的关系

目的检测分析TCE暴露小鼠肝功能、肝脏Treg细胞分泌的细胞因子IL-10含量以及脾脏Treg细胞数量的变化,探讨Treg细胞与TCE暴露所致肝功能损害的关系。方法雌性BALB/c小鼠饮水摄入2.5 mg/ml和5 mg/ml的TCE,在2、4、8、12周时采集外周血用全自动生化仪测定肝功能,ELISA检测肝组织匀浆IL-10含量,流式细胞仪检测脾脏Treg细胞数量。结果与对照组相比,TCE染毒组小鼠AST和ALT水平明显升高,2周和4周时差异有统计学意义(P<0.05),肝组织匀浆中IL-10含量则明显降低(4周时最低);脾脏Treg细胞数量也明显降低,2、4、8周时差异均有统计学意义(P<0.05);相关分析显示肝功能与肝组织中IL-10含量和Treg细胞数量均呈负相关,且有统计学意义(P<0.05)。结论 TCE暴露引起的肝脏损伤与体内Treg细胞数量减少或功能受损相关。