HPLC法测定卤米松乳膏中卤米松含量

目的：建立HPLC法测定卤米松乳膏中卤米松含量。方法：采用Allitama C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以乙腈-水-冰醋酸（43∶57∶0.1）为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长240nm。结果：卤米松的浓度在0.008~0.032mg/ml范围内,线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率101.51%,RSD为0.83%。结论：本方法简便、准确、稳定可靠。     

血浆中美托洛尔的快速手性分离

本文建立了血浆中美托洛尔(Ⅰ)的直接手性分离方法。色谱条件采用Chiralcel OD分析柱(250×4.6 mm,id),RCSS硅胶预柱,流动相为异丙醇-正己烧-二乙胺(25:75:0.05,v/v),流速1.0 ml/min,荧光检测225 nm/295 nm。样品制备于每份0.5～1.0 ml血浆中加入100μl 1mol/L NaOH,涡旋10s,加正己烧3ml,振摇10min,离心(2000g,10min),水层于CO_2和甲醇混合液中冷冻,有机层于60℃挥去溶剂,残渣用50μl外标(S-烯丙洛尔)溶液(2μg/ml;溶剂为正己烷-异丙醇,5:1,v/v) 溶解,涡旋15s,进样     

HPLC法测定片剂中左旋甲状腺素钠的含量均匀度

本文报道可测定单个片剂中左旋甲状腺素钠含量均匀度的方法,降解产物及赋形剂对测定无干扰。步骤:精密秤取相当于左旋甲状腺素钠片剂粉末100μg 于具塞试管中,加玻璃珠及流动相[乙腈-水-磷酸(40∶60∶0.05)]10ml,激烈混和5min,离心,上清液进样100μl。用Zorbax-CN 柱,流速1～2ml/min;洗脱液于225nm 波长处测定。用外标法进行测定计算。片剂含量均匀度测定时,按上制备样品,25～150μg剂型用流动相10ml 提取;175～300μg 剂型则用流动相20ml 提取。结果:用美国药典标准左旋甲状腺素制备1～13μg/ml 8份标准液,以峰面积对浓度作标准曲线,相关系数为0.999。作者以25μg 及300μg 作为标示量,于     

人血浆中吡格列酮的固相萃取高效液相色谱法测定

以吡格列酮的同系物 PIOGA为内标 ,采用 C2 固相萃取紫外检测的 HPL C分析法测定人血浆中吡格列酮的浓度。 C1 8分析柱 (15 0× 4.6 mm,5 μm) ,流动相 :水 -乙腈 -冰醋酸 (5 40∶ 46 0∶ 1.2 ,用氨试液调至 p H6 .0 ) ,流速 :1.0 ml/ min,检测波长 2 6 9nm。取血样 0 .5 m l,加入内标经 C2 固相萃取后进样 40μl。最低定量限 (L OQ)为10 ng/ ml,线性范围为 10～ 16 0 0 ng/ ml     

用柱切换HPLC法测定大鼠、狗及人血浆中的氢氯噻嗪

已有的 HPLC 测定生物液体中氢氯噻嗪(Ⅰ)浓度的方法大多需繁琐的样品处理步骤,采用本文方法,血浆样品可直接注入色谱系统作全自动分析。溶液的制备分别配制1.0mg/ml 的(Ⅰ)和内标氢氟噻嗪(Ⅱ)的甲醇溶液作为贮备液,于-20℃保存。将(Ⅰ)的贮备液用10mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH7.2)稀释至100μg/ml,并以空白血浆(先离心去微粒)进一步稀释制得血浆标准液。以相同缓冲液稀释内标液至1500ng/ml。血浆样品室温解冻后离心(3000rpm,10min)去微粒,将150μl 血浆标准液或样品液与150μl 内标液混合,采用自动进样器将100～200μl 混合液注入 HPLC 仪。色谱系统包括提取柱(两个串联的Guard-Pak C_(18)柱,柱长0.4cm)和串联Guard-Pak C_(18)保护柱的分析柱(HypersilODS,5μm,4.6×250mm),分别联于六孔     

用于自动生物分析方法的实验室机器人系统的发展:Ⅰ.血浆中茶碱的测定

近几年来,许多不同类型的自动化样品制备技术取得较大进展,使用实验室机器人便是其中之一。人工操作步骤(Ⅰ法):将200μl 血浆置于5ml 聚丙烯试管中,加入水、内标液和饱和(NH_4)_2SO_4溶液各200μl,涡旋混合10s,再加入1.6ml 氯仿-异丙醇(95∶5),涡旋混合80s,离心10min,将有机相转移至自动取样器小瓶中,进样20μl 于 LichrosorbSi-60柱进行测定。流动相的组成为:氯仿(1325ml)、正庚烷(950ml)、甲醇(225ml)、四氢     

微柱HPLC法测定洋地黄毒甙片和去乙酰毛花甙C注射液中的强心甙

强心甙常用的测定方法有比色法、荧光法、TLC 法和 HPLC 法等。本文报道用微柱HPLC 方法测定洋地黄毒甙片(1)和去乙酰毛花甙 C 注射液(Ⅱ)及它们的含量均匀度,具有快速、准确、省时的特点色谱条件:测定洋地黄毒甙用 ODS 反相柱(102×0.5mm,id),流动相为乙腈-甲醇-水(10∶20∶17)。流速8μl/min,检测波长:220nm,进样量0.5μl,黄体酮为内标。测定去乙酰毛花甙 C 用 ODS 反相柱(114×0.5mm,id),流动相为乙腈-水(21∶70)。流速及检测波长同测定洋地黄毒甙法。进样量1.0μl,可的松为内标。     

高效液相色谱法测定人血浆中磷酸哌喹

目的:建立人血浆中磷酸哌喹的高效液相色谱紫外检测法。方法:以1 mol·L~(-1)氢氧化钠溶液碱化血浆样品,乙醚萃取,吸取有机相,N_2气流吹干后,流动相复溶;采用 Alltima C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%(w/v)三氯乙酸-磷酸(25∶75∶0.035,v/v/v),流速0.4 mL·min~(-1),柱温为室温,检测波长345 nm,以磷酸氯喹为内标,进样分析。结果:磷酸哌喹、内标和内源性杂质分离良好,线性范围0.02～1.0μg·mL~(-1)(r=0.9993),定量下限为0.01μg·mL~(-1),日内、日间RSD 小于12%,提取回收率为69.3%～76.3%,方法回收率为93.4%～106.5%。结论:该法准确、稳定,灵敏度高,适用于磷酸哌喹药物动力学及生物利用度的研究。     

高效液相色谱法测定人血清美西律浓度

目的:用高效液相色谱法测定血清中盐酸美西律浓度。方法:以卡马西平为内标,采用C_(18)柱及保护柱;流动相为甲醇:磷酸缓冲液(55:45v/v),含乙腈0.5％(v/v);流速为0.6ml/min;提取液为正庚烷;采用紫外检测,检测波长为220nm。结果:美西律与内标分离良好,保留时间分别为9.64min和14.18min;在血清中提取的绝对回收率为84.61％;盐酸美西律在0.3～3.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数γ=0.9998,回归方程为Y=2.4337X-0.2595;日内及日间变异均<6％;最低检测浓度为 0.025μg/ml。结论:本方法适用于盐酸美西律的药物动力学研究。     

治疗疟疾新药——卤泛曲林

近来重新发现的抗疟药卤泛曲林(halo-fantrine)与甲氟喹和青蒿素衍生物一起为未来抗疟治疗带来了希望。本品是9-菲甲醇,属氨基乙醇类的一种。首次开发于二次大战,由于种种原因,1984年才开始投放市场。本品对恶性疟和间日疟的疗效已在马拉维等地验证。对106名主要患耐氯喹疟疾的肯尼亚儿童用药,表明作用     

用HPLC测定人体液中利福布丁及其去乙酰化代谢物的灵敏定量方法

利福布丁(rifabutin)是利福平S的半合成衍生物,具有广谱抗菌活性,其主要代谢产物为25-去乙酰基衍生物LM-565。本文报道用HPLC-UV法测定血浆及尿液中利福布丁及LM-565。色谱条件:Ultrasphere ODS反相柱(25cm×4.6mm,5μm),柱温40℃,流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸钾(pH 4.2)-三乙胺(38:61.5:0.5,v/v),流速为1.0ml/min,吸收波长为275 nm,内标为美达西泮(5ng/ml)甲醇溶液。标准品及对照品制备:在棕色容量瓶中配制利福布丁和LM-565甲醇储备液,于4℃     

高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺的血药浓度

目的建立人血清中异环磷酰胺的HPLC测定法.方法取血清1.0 ml,以环磷酰胺为内标,用氯仿提取,在60 ℃水浴条件下氮气挥干,残渣用100 μl流动相复溶,进样25 μl.在Hypersil-C4色谱柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水 ( 35∶65,v/v) 为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长200 nm.结果本方法在10～200 μg/ml 范围内线性良好,相关系数r=0.999 4 ( n=5).检测限为5 μg/ml .高、中、低三种浓度的绝对和相对回收率分别为 84.32%～88.14% , 95.00%～98.10%,日内和日间RSD分别为0.74%～2.21%, 1.60%～2.40%.结论 本方法灵敏、特异、简便,可用于临床异环磷酰胺血药浓度检测.     

人血清中氟卡胺HPLC立体选择测定

本文报道了人血清中氟卡胺的HPLC立体测定方法。氟卡胺标准贮备液及内标溶液(2,5-二乙氧基-N-(2-哌啶基甲基)苯甲酰胺盐酸盐)分别由10mg外消旋醋酸盐溶于1000ml去离子水中(10μg/ml),工作标准液则将贮备液稀释10倍而得。在试管中放入1.0 ml血浆,然后加入50μl内标溶液(50 ng),1 ml Tris盐酸(2.0 M,pH 8.5)缓冲液和过量(3 g)氯化钠。NaCl极度溶解后,用5 ml氯丁烷:2-丙醇(95∶5v/v)旋涡提取30秒钟。在室温以每分钟3000     

RP-HPLC法测定人血浆中莫西沙星的浓度

目的:建立测定人血浆中莫西沙星浓度的方法。方法 :血浆样品采用萃取法处理后进行反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分析,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为乙腈-水(含0.05%三氟醋酸,22∶78),流速为1.0ml/min,紫外检测波长为296nm(0².5min)、256nm(2.52.5min)、256nm(2.5⁴.5min)、296nm(4.54.5min)、296nm(4.5⁸.0min),柱温为25℃,进样量为20μl。结果:莫西沙星与内标的保留时间分别为6.2min和3.4min。莫西沙星血药浓度在0.058.0min),柱温为25℃,进样量为20μl。结果:莫西沙星与内标的保留时间分别为6.2min和3.4min。莫西沙星血药浓度在0.05¹0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6),定量下限为0.05μg/ml,日内、日间RSD分别低于3.96%、4.72%,低、中、高3个质量浓度及内标的提取回收率分别为72.13%、84.12%、85.85%和97.31%。结论:该检测方法简便、准确、专属性强,适用于临床莫西沙星的血药浓度检测及Ⅰ期临床试验。     

用HPLC法测定原料药和制剂中的替马氟沙星、沙拉氟沙星和双氟沙星

本文建立了用 HPLC 法测定原料药和制剂中三种氟喹诺酮类合成广谱抗生素——替马氟沙星(temafloxacin)、沙拉氟沙星(sarafloxacin)和双氟沙星(difloxacin)含量的方法。色谱条件 Nucleosil C_(18)柱(5μm,4.6mm×15cm),流动相为缓冲溶液,(0.02mol/L 柠檬酸-0.02mol/L 柠檬酸钠,高氯酸调 pH 至2.4):乙腈(65:35,v/v),流速1.0ml/min,检测波长280nm,进样量50μl。以对-硝基苯乙酮为内标,一点校正法定量。、样品溶液的制备原料药:将三种药分别溶于乙腈/水(1:1),制成1.2 mg/ml(游离碱浓度)的储备液,再用乙腈/水(1:1)怖释至约12弘g/ml,并加入内标使其浓度约为14腭/ml。同法制备参比标准溶液。片剂及胶囊:取片剂20片研磨或胶囊20粒的内容物混合,取样(相当于100 mg药物)用乙腈/水(1:’1)提取并稀释至100 ml,待赋形剂沉降后,按原料药项下稀释制备。羟丙基甲基纤维     

高效液相色谱法测定石杉碱乙含量

研究高效液相法测定石杉碱乙含量的方法和条件。色谱柱:C_(18)反相柱,流动相:0.02mol/l磷酸二氢钾(PH=4.5)-乙腈(88:12),流速:1.0ml/min,检测波长:309nm,该方法操作简便,准确度高。     

在线样品预处理限进色谱测定人血清中多奈哌齐浓度

目的通过在线样品预处理限进色谱柱切换技术建立一种测定人体血清中多奈哌齐血药浓度的高效液相色谱法。方法样品预处理采用LiChroCART（25mm×4mm,25μm）限进预柱,分析柱为Microsorb-MV C₁₈柱（150mm×4.6mm,4μm）,以水-乙腈（99:1,v/v）为血浆蛋白冲洗流动相,流速2ml/min,0.02M磷酸缓冲液-乙腈-三乙胺（65:35:0.1,v/v/v）为分析流动相,流速1ml/min,检测波长315nm。结果本方法线性范围为0.02～1.0μg/ml,r=0.9995,日内、日间精密度RSD小于7%,回收率为87.9%～91.1%。结论该方法准确、稳定;灵敏度高,适用于多奈哌齐药物动力学及生物利用度的研究。     

HPLC法测定八珍液中芍药苷

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定八珍液中芍药苷的含量。方法:流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(14∶86∶0.04),流速1.0ml/min,柱温30℃,检测波长230nm,进样量10μl。结果:范围为0.0626μg～0.626μg/ml,R=0.9998,平均回收率为99.18%,RSD=0.83%。结论:该方法简单可靠,可用于制剂的质量控制。     

用HPLC测定新生儿口服液中的咖啡因和山梨酸钾

临床常用咖啡因作为早产新生儿的呼吸兴奋剂。一种医院自制的口服制剂含咖啡因10mg/ml及1 mg/ml的山梨酸钾防腐剂。使用100 mm×4.5 mm Spherisorb 5.μm己基反相柱。流动相为12％乙腈在0.1mol/L乙酸钠缓冲液(pH 4.5)中,流速2ml/min,注射体积为20μl,UV检测波长258 nm。咖啡因口服液(1.0 g)用水稀释至25ml。取该溶液5 ml,加入5 ml含3 mg/ml苔黑酚单水合物(内标)的水溶液,该混合物     

反相离子对HPLC法测定人血浆中的氟喹诺酮类药物

本文建立了用反相离子对 HPLC 法测定血浆中三种氟喹诺酮类广谱抗生素药物——诺氟沙星(Ⅰ)、阿米氟沙星(amifloxacin,Ⅱ)和依诺沙星(Ⅲ)的方法。样品制备取血浆样品1ml,加50μl 内标液(吡哌酸,50μg/ml),稍加涡旋后,再加50μl 高氯酸(60％,w/v),并同时涡旋30s,离心(10000×g)10min,取上清液20μl 注入色谱柱中进行测定。色谱条件不锈钢柱(100×2mm,id)匀浆填充5μm 的 ODS Hypersil 作为固定相;流动相为乙腈/水(25:75),其中含10mmol/L Na_2HPO_4、10mmol/L 十二烷基硫酸钠和5mmol/L 溴化四丁基铵,以磷酸调 pH 值至2.0;流速0.5ml/min;荧光检测280nm/418nm。