二氟甲基鸟氨酸及反义bcl-2协同诱导HL60细胞凋亡

目的　观察二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)及反义bcl 2调控bcl 2基因表达对HL6 0细胞凋亡的诱导作用。方法　构建反义bcl 2逆转录病毒重组体 ,建立产病毒细胞系 ,转染HL6 0细胞 ,用形态观察、生长曲线、FCM分析、集落形成、DNA电泳图谱、分子杂交及免疫组化等方法研究细胞生长特性及细胞凋亡诱导。结果　成功地构建了反义bcl 2逆转录病毒重组体及产病毒细胞系。以此转染HL6 0细胞 ,引起了bcl 2mRNA及蛋白表达下降 ,但生长速率、细胞周期分布及鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因表达水平与亲本细胞比较差别不大 ;无明显的细胞凋亡 ,仅集落形成能力有所减弱。用小剂量DFMO处理反义bcl 2转染的细胞 ,不仅生长受到明显抑制 ,而且可诱导细胞凋亡。结论　DFMO与反义bcl 2对HL6 0细胞增殖抑制及凋亡诱导有协同作用。抑制bcl 2表达能提高肿瘤细胞对DFMO作用的敏感性。     

抑制多胺生物合成对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨二氟甲基鸟氨酸 (difluoromethylornithine, DFMO)抑制多胺生物合成对人子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:HEC-1B细胞经不同浓度DFMO作用不同时间后,绘制生长曲线,观察DFMO对细胞生长的抑制作用,MTT检测细胞抑制率,用流式细胞仪(FCM)分析细胞周期变化;Giemsa染色显微照相观察凋亡细胞形态,DNA Ladder检测凋亡细胞DNA是否出现凋亡特征性梯形条带,FCM检测凋亡细胞百分率.结果:DFMO对人子宫内膜癌细胞HEC-1B有明显的生长抑制作用,呈剂量和时间依赖关系,2.5 mmol/L DFMO即可抑制HEC-1B细胞增殖,DFMO作用时间为5 d时,细胞增殖抑制率为60%.细胞周期分析示,DFMO使HEC-1B细胞阻滞于G1期,5 mmol/L DFMO作用2 d可使G1期细胞由68.3%增加到85.5%;5 mmol/L DFMO可诱导HEC-1B细胞凋亡,作用5 d时细胞凋亡率为63.8%,Giemsa染色可见凋亡小体,DNA Ladder显示典型的细胞凋亡梯形条带,加入40 μmol/L外源性腐胺可阻止DFMO的作用.结论:抑制多胺生物合成可抑制子宫内膜癌细胞HEC-1B细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

二氟甲基鸟氨酸对K562细胞生长特性的影响及其与端粒酶活性的相关性

目的研究二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对K562细胞生长特性、凋亡及端粒酶活性的影响。方法采用细胞计数、形态观察、FCM分析及DNA电泳分别检测DFMO处理的细胞生长速率、周期分布及细胞凋亡。按TRAP法对细胞端粒酶活性进行检测。结果DFMO处理的细胞生长速率明显减慢;G1期细胞增多而S期细胞减少;细胞表现凋亡诱导,且其端粒酶活性受到抑制。结论DFMO引起的K562细胞生长抑制及凋亡诱导与端粒酶活性抑制有关。端粒酶的失活是抑制多胺生物合成的抗癌分子机制重要事件之一。     

α-二氟甲基鸟氨酸用于预防小鼠眼内黑素瘤的转移

最近有人研究设计一种新的化疗药物——α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)用于治疗跟内黑素瘤的鼠模型,以评价其抗肿瘤转移的可能性。体内研究表明,DFMO可以阻止小鼠眼内黑素瘤的生长和自发性转移。口服DFMO也可以发挥其抗肿瘤作用,能阻止黑素瘤转移的血液生长期。体外研究显示,DFMO已在3只鼠黑素     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

Raji肿瘤细胞株培养过程中多胺水平的动态改变

Ｒａｊｉ肿瘤细胞株培养过程中多胺水平的动态改变张春晓，蒋滢（导师）苏州医学院生化教研室（２１５００５）多胺包括腐胺、精脒、精胺，是机体内鸟氨酸脱羧后的衍生物，与核酸、蛋白质合成及细胞的生长繁殖密切相关。已有实验表明：静止细胞鸟氨酸脱羧酶活性很低，而胚...     

多胺生物合成抑制剂DFMO对人膀胱癌细胞抑制及凋亡的实验研究

 目的 探讨多胺生物合成抑制剂DFMO对人膀胱癌EJ细胞的抑制作用。方法 应用细胞培养、活细胞摄影技术、伊红染色细胞计数和原位DNA片段末端标记，观察DFMO抑制人膀胱癌EJ细胞的增生及诱导其凋亡。结果 活细胞摄像结果显示：与空白对照组相比：4 mmol/L，6 mmol/L，8 mmol/L DFMO给药第5天，细胞生长明显抑制，随DFMO剂量增大，上述变化逐渐明显。伊红染色结果显示：4 mmol/L，6 mmol/L，8 mmol/L的DFMO均可抑制EJ细胞生长，并随剂量的增加，抑制作用逐渐增强。原位DNA片段末端标记结果显示：4 mmol/L，6 mmol/L，8 mmol/L DFMO均可诱导EJ细胞凋亡；6 mmol/L为较适宜剂量；三种检测方法均显示同时加入外源性腐胺后，EJ细胞的凋亡与对照组无明显差别。结论 DFMO可以抑制膀胱癌EJ细胞的增生并诱导其凋亡。     

兔抗hCG CP22抗血清体外抑制肿瘤细胞生长的研究

目的:探讨抗原抗体反应检验若干人肿瘤细胞分泌β-hCG情况,和抗hCGCP22抗血清体外抑制肿瘤的作用。方法:采用细胞免疫荧光染色测定5个肿瘤细胞株是否表达β-hCG,用CCK-8试剂盒检测CP22抗血清(AS CP22)和β-hCG羧基端37肽(CTP)抗血清(AS CTP)体外抑制肿瘤细胞生长的光密度。结果:以AS CP22为探针和AS CTP为阳性对照,体外培养的人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞膜上都能观察到绿色荧光,提示肿瘤细胞均表达β-hCG亚单位,而人前列腺癌PC-3和Du-145细胞则未检测到绿色荧光;与正常兔血清(NS)比较,AS CP22和AS CTP均可显著的体外抑制BXPC-3和HO-8910细胞生长,P<0.001。AS CP22抑制BXPC-3和HO-8910肿瘤细胞的作用都强于AS CTP,P<0.05。结论:人胰腺癌BXPC-3、人卵巢癌HO-8910和人结肠癌Lovo细胞在体外培养的情况下均表达β-hCG亚单位,且它们的体外生长都能被兔抗hCG嵌合肽(CP22)抗血清体外抑制。     

ODC反义寡核苷酸对K562细胞生长抑制作用

鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)是催化多胺生物合成的限速酶.过去的研究表明多胺在维持肿瘤恶性表型中起着重要作用.用ODC不可逆抑制剂抑制多胺生物合成不仅能抑制肿瘤细胞的增殖而且还诱导细胞分化.近年我们采用反义技术,以ODC反义RNA转染肿瘤细胞,通过对ODC表达的封闭,成功地使其恶性表型得到了逆转.提示抑制肿瘤细胞的多胺合成可能是抗癌的有效途径.本文用ODC反义寡核苷酸控制肿瘤细胞的多胺生物合成,观察了其对K562细胞生长特性的影响,以期为ODC反义寡核苷酸在肿瘤临床的应用提供实验依据.     

白首乌C-21甾体总苷体外抑制大鼠胶质瘤细胞生长的作用研究

[目的]探讨白首乌C-21甾体总苷(CGB)体外抑制大鼠胶质瘤细胞(C6细胞)生长的作用,并初步探讨其作用机制。[方法]采用MTT法检测CGB对C6细胞活性的影响,倒置普通光学及荧光显微镜观察CGB对细胞核形态的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。[结果]CGB对C6细胞的生长呈浓度依赖性抑制;CGB 90mg/L处理48h后,C6细胞的凋亡率显著增高(P<0.01),细胞核出现固缩、断裂;CGB作用48h对体外培养8d的神经元毒性小。[结论]CGB能明显抑制体外培养的C6细胞的生长;诱导肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一。     

重组人NDRG2蛋白对肿瘤细胞抑制作用研究

目的:考察原核表达的重组人NDRG2蛋白对肿瘤细胞的作用.方法:通过设置不同浓度的蛋白剂量并设置对照组,采用细胞MTT比色法和细胞计数检测NDRG2蛋白对7901、HHCC细胞的抑制效果,流式细胞仪检测细胞周期的变化,体内实验采用裸鼠抑瘤试验.结果:重组人NDRG2对肿瘤细胞生长有较强的抑制作用,约50μg/ml浓度时对肿瘤细胞生长的抑制作用明显,流式细胞术结果显示肿瘤细胞G1期变化,体外能抑制裸鼠肿瘤的生成.结论:重组人NDRG2蛋白在体内体外具有一定的抑制肿瘤细胞生长作用,在肿瘤治疗方面将具有一定的意义.     

生长抑素及类似物治疗肿瘤机理的研究进展

生长抑素抑制不同正常细胞和肿瘤细胞的生长和发展。在体内和体外实验中。生长抑素类似物对多种实验室模型显示出抗肿瘤作用。多种人类肿瘤上表达有生长抑素受体。生长抑素抑制肿瘤细胞的生长有直接作用和间接作用两个方面，本文综术其目前研究进展。     

应用逆向转化诱导剂治疗癌症

逆向转化一词是Puck在描述肿瘤细胞于体外接触N~6-O~(21)-二丁酰cAMP后恢复正常细胞膜功能时所使用的一个术语。cAMP可以恢复细胞的接触抑制,抑制肿瘤细胞的生长和增殖。其作用机制尚属不明。 Gosalvez研究了一系列能够作用于细胞膜调节机制的新化合物,并建立了一个在体外试验受筛药物的筛选系统。这个系统包括诱导淋巴细胞产生帽盖(capping),于体外恢复肿瘤细胞培养中的接触抑制以及诱导霉菌Dyctostelium dicoideum生长中的分化作用。第一个能在肿瘤细胞中诱导逆向转化的化合物就是噻唑烷-4-羧酸(硫代脯氨酸)。下面报告对晚期癌症病人试用硫代脯氨酸的初步结果。     

天然药物莪术醇抑制肿瘤细胞生长及RNA合成影响的初步研究

目的探索莪术之有效活性成分莪术醇对部分肿瘤细胞生长抑制及对RNA合成的影响.方法采用四氮唑盐还原法(MTT)及提取检测RNA等方法,研究天然药物单体莪术醇对13种妇科肿瘤细胞和2种正常乳腺细胞生长抑制及其RNA含量的影响.结果天然药物莪术醇明显抑制MCF7、OV-UL-2、MM231、HeLa细胞的生长(P<0.05);莪术醇抑制肿瘤细胞生长的最佳抑制浓度为50 μg/mL;莪术醇能明显抑制MCF7、MM231、HeLa肿瘤细胞RNA的合成(P<0.05);天然药物莪术醇对正常乳腺细胞MCF12a、MCF10a生长无影响.结论莪术醇在体外能抑制MCF7、MM231、HeLa、OV-UL-2细胞的增殖,并能阻止MCF7、MM231、HeLa细胞RNA的合成.     

海胆肠提取物体外抗肿瘤活性的研究

目的 :研究海胆肠提取物对体外培养的SGC 790 1人胃腺癌细胞和Bel74 0 2人肝癌细胞系的作用 ,了解其体外抗肿瘤活性 ,并对其作用机制进行初步探讨。方法 :从海胆肠内提取水溶性多糖类成分。应用四氮唑蓝 (MTT)快速比色法测定肿瘤细胞生长抑制率。利用扫描电镜和透射电镜观察提取物对培养细胞超微结构的影响。结果 :MTT实验显示 ,海胆肠提取物对培养的SGC 790 1人胃腺癌细胞和Bel74 0 2人肝癌细胞的生长有明显的抑制作用 ,且抑制程度随浓度升高而增强 ;经海胆肠提取物作用后的细胞 ,透射电镜和扫描电镜观察均显示发生了特征性的形态学改变。结论 :海胆肠提取物在体外可显著抑制人癌细胞株生长 ,其作用机制主要是诱导肿瘤细胞凋亡     

IL-24对B16细胞生长抑制作用的体内外实验研究

目的:构建白细胞介素24(Interleukin24,IL24)真核表达质粒,研究其体内外表达对肿瘤细胞的生长抑制作用。方法:采用重组DNA技术构建IL24真核表达质粒pEGFPIL24。用脂质体法将重组质粒及空载体体外转染B16细胞,再经激光扫描共聚焦显微镜(LSM)观察其表达,用MTT法检测B16细胞的体外增殖能力,用流式细胞仪检测细胞周期。小鼠实体瘤模型研究基因转染对肿瘤的体内生长抑制作用。结果:pEGFPIL24转染B16细胞后,LSM可观察到IL24在细胞中的表达。转染IL24基因的B16细胞体外增殖能力明显受到抑制,细胞被阻滞在G2/M期。与对照组相比,IL24基因治疗组肿瘤在体内的生长受到明显抑制,P<0.05。结论:IL24基因转染的肿瘤细胞体外生长受抑。于荷瘤小鼠的瘤内注射pEGFPIL24可抑制肿瘤生长,提示IL24具有明显的体内外抗肿瘤作用。     

鸟氨酸脱羧酶—新的大肠肿瘤标记物

鸟氨酸脱羧酶(Ornithinl decarboxy ase ODC)在体内催化鸟氨酸脱羧生成腐胺, 腐胺可转化成精胺、精膜。腐胺、精胺、精膜合称为多胺,它们是细胞内调节物质代谢的重要物质,对DNA复制、转录和翻译都有着广泛的影响。与肿瘤的发生发展有着密切联     

去氢骆驼蓬硷抗癌作用的研究

目的研究去氢骆驼蓬硷对小鼠移植性肿瘤及肿瘤细胞株的抑制作用.方法体内抑瘤试验选用肉瘤S-180、肝癌H22、艾氏腹水癌等瘤株腹腔注射给药,观察对实体瘤的抑制作用及对腹水癌的生命延长作用.体外细胞毒试验选用K562、Hela细胞株,采用MTT法,计算对肿瘤细胞株平均细胞生长抑制率.结果去氢骆驼蓬硷对肉瘤S-180及肝癌H22的抑制率具有非常显著性差异(P＜0.01)对艾氏腹水癌作用不明显.对K 562细胞生长半数抑制浓度IC50为3.8μg/ml,对Hela细胞生长半数抑制浓度IC50为13.1μg/ml.结论去氢骆驼蓬硷对肿瘤细胞体内抑瘤试验、体外细胞毒试验均有明显的抑制作用.     

海胆肠提取物体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究海胆肠提取物对体外培养的SGC-7901人胃腺癌细胞和Bel7402人肝癌细胞系的作用，了解其体外抗肿瘤活性，并对其作用机制进行初步探讨。方法：从海胆肠内提取水溶性多糖类成分。应用四氮唑蓝(MTT)快速比色法测定肿瘤细胞生长抑制率。利用扫描电镜和透射电镜观察提取物对培养细胞超微结构的影响。结果：MTT实验显示，海胆肠提取物对培养的SGC-7901人胃腺癌细胞和Bel7402人肝癌细胞的生长有明显的抑制作用，且抑制程度随浓度升高而增强；经海胆肠提取物作用后的细胞，透射电镜和扫描电镜观察均显示发生了特征性的形态学改变。结论：海胆肠提取物在体外可显著抑制人癌细胞株生长，其作用机制主要是诱导肿瘤细胞凋亡。     

苹果提取物抑制肝癌细胞系生长的实验性研究

目的观察苹果提取物在体外对肝癌细胞系(HepG2)生长的抑制作用.方法新鲜富士苹果利用丙酮法提取,不同浓度苹果提取物与Hepg2细胞系混合培养,利用MTS法检测提取物对于肿瘤细胞生长的抑制程度.结果富士苹果提取物对于HepG2细胞生长有一定程度的抑制作用,在50mg/ml时,抑制率达39.03%.结论苹果提取物在体外具有抑制肝癌细胞系生长的作用.