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1.
以HSV-1为抗原,免疫BALB/C鼠,取其脾细胞在PGE介导下与SP2/0细胞常规融合,IFA法筛选鉴定,反复克隆,共获得7株能稳定、持续分泌抗HSV的McAb的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为87~103条之间,Ig类型分别为LgG_1、IgG_(2g)、IgG_3,腹水抗体效价在10 ̄(-5)~10 ̄(-7)之间免疫沉淀。SDS—PAGE分析,2株与132K多肽发生特异性反应,只具有HSV-1型特异性,其余3株与120~128K多肽,2株与60K多肽发生特异性反应,具有HSV型共同抗原特异性。7株McAb与CMV均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于HSV的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。 相似文献
2.
抗丙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初… 总被引:3,自引:3,他引:0
用丙型肝炎病毒(HCV)核心区合成肽作抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细节与骨髓瘤细胞SP^2/0进行融合。经有限稀释法克隆3代后获得一株抗HCV核心抗原CP10的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株3E7,并对其分泌抗体进行初步鉴定。杂交瘤细胞培养上清的抗体滴度为1:320,诱生同系小鼠腹水的滴度为1:12800,该McAb能与CP10特异性结合,杂交瘤细胞染色体数目为106条。分泌的抗体为IgG 相似文献
3.
本文以HER-2/neu癌基因表达产物为抗原免疫BALB/C小鼠,采用常规淋巴细胞杂交瘤技术立一株稳定分泌抗P^185McAb的杂交瘤株5E12,McAb5E12属IgG亚类,与SKBR-3,T47D乳癌细胞系呈阳性反应,与HT29,EC109,DAC-1,SP2/0,成纤维细胞及小鼠NIH3T3等细胞系列呈阴性反应,30例乳癌组织石蜡切片同时以自制抗P^185McAb5E12及进口McAbC-e 相似文献
4.
运用单克隆抗体技术,以结核杆菌H37Rv的培养滤液免疫Balb/c小鼠,以H37Rv及BCG抗原同时筛选杂交瘤细胞,得到了7析稳定分泌的抗结核杆菌的杂交瘤细胞株,并对它们的特性作了初步鉴定。在7株单克隆抗体杂交瘤中,5株(2C5、2C11、2D1、2E11及3D3)为IgG1亚类,另两株(3C3及5D8)为IgM。腹水经ELISA检测,效价可达10^-3~10^-4,同时应用ELISA及免疫印迹试 相似文献
5.
用SP2/0骨髓瘤细胞与经人促甲状腺激素(hTSH)免疫的BALB/C小鼠的脾细胞融合,融合率60.4%,抗体阳性率4.3%,经3-4次克隆化,筛出3株稳定分泌TSHMcAb的杂交瘤细胞株。用放射免疫分析法(RIA)检测小鼠腹水,抗体效价为10^-4时,抗体结合率为45.5%。用ELISA方法检测小鼠腹水,抗体效价达10^-5。其中3株细胞做琼脂糖免疫双扩散试验,均显示为IgG1,亚类。染色体计数 相似文献
6.
采用J5突变株免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合,建立了6株分泌单克隆抗体的杂交瘤,分别命名为 9G6,10H11,9H1,9F9,11E7和12H11。它们的亚类鉴定为IgM,IG1,IG2a和IG2b。 相似文献
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8.
用牛奶纯化的脂蛋白脂肪酶(LPL)一分子量为56KD,免疫Balb/c小鼠利用杂交瘤技术,建立了30余株分泌抗朱LPL单克隆抗体的杂交瘤细胞,对其中2E5,2G10,6D7,8D2,7F4进行特征分析表明:(1)其抗体类别均为IgG,亚类分别为IgG1,IgG2b,IgG2h,IgG1,IgG1;(2)抗体效价(细胞培养上清)5×10^-2-2×10^-3;(3)5种单抗可认为识别三个不同的抗原表 相似文献
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10.
将人外周血淋巴细胞(PBL)和腹腔淋巴结淋巴细胞(PLNL)移植入严重联合免疫缺陷疾病(SCID)小鼠腹腔,2个月后,小鼠血清内产生人源性IgG和抗EB病毒壳抗原IgG抗体(IgG/VCA)。比较结果显示,用B95-8细胞作为VCA来源所诱导的实验组10只小鼠,IgG/VCA阳性率为70%(7/10),对照组为17%(2/12)。IgG/VCA的几何平均滴度(GMT)和血清IgG浓度,在14只SCID-PLNL小鼠中为1∶108和(96.2±56.4)μg/L;在8只SCID-PBL小鼠为1∶7.8和(13.84±6.0)μg/L。该结果提示,SCID-PLNL小鼠较SCID-PBL小鼠更适合用于人源性特异IgG的诱导。 相似文献
11.
将人外周血淋巴细胞(PBL)和腹腔淋巴细胞(PLNL)移植入严重联合免疫缺陷疾病(SCID)小鼠腹腔,2个月后,小鼠血清内产生了源性IgG和抗EB病毒壳抗原IgG抗体(IgG/VCA),比较结果显示,用EB95-8细胞作为VCA来源实验组10只小鼠,IgG/VCA阳性率为70%(7/10),对照组为17%(2/12),IgG/VCA的几何平均滴度(GMT)和血清IgG浓度,在14只SCID-PLN 相似文献
12.
乙型肝炎病毒核心抗原基因疫苗对小鼠的体液和细胞免疫原性观察 总被引:11,自引:0,他引:11
目的 观察不同品系小鼠(H-2^b,H-2^d)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因疫苗免疫后特异性辅助性T细胞反应类型和特异性细胞毒性T细胞活性。方法 Western blot法鉴定该基因疫苗的体外表达产物;基因枪法和肌内注射法接种该基因疫苗;间接ELISA法检测小鼠血清抗-HBc IgG亚类(IgG1,IgG2a)水平;^51铬释放法测定小鼠脾细胞HBcAg特异性细胞毒性T细胞活性。结果 相似文献
13.
抗肺炎衣原体种特异性单抗制备及初步鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
以纯化的肺炎衣原体ATCCVR1310原体兔疫8周龄雄性BALB/c小鼠,并于第14天加强免疫,第24天将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1融合。杂交瘤细胞进行细胞与克隆的直接选择,在淘汰与沙眼衣原体L1、L2、A、B、C、E鹦鹉热衣原体EAE以及未感染的BGMK细胞有交叉反应的克隆后,最终获得2株分泌抗肺炎衣原体种特异性单克隆抗体(MAb9)杂交瘤(P17C2和P33C),其免疫球蛋白类型均为IgG2a。Westem印迹发现两株MAbs均与三个种的衣原体主要外膜蛋白反应,但micro-IF显示它们系肺炎衣原体种特异性单抗其腹水MAbs滴度>1:25600。 相似文献
14.
抗ENA单克隆抗体的研制 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:制备与分析抗可提取性核抗原(ENA)单克隆抗体;方法:以ENA为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经反复筛选和再克隆化,建立能稳定分泌抗ENA单克隆抗体(McAbs)的杂交瘤细胞株;结果:共获得11株能稳定分泌抗ENA的杂交瘤细胞株。对其中的5种单克隆抗体(IG5,2E5,2C6,4C10和4E6)进行了初步分析,结果如下:小鼠腹水抗体效价范围2×10-5~3×10-6;免疫球蛋白亚类鉴定,1株为IgG2a,1株为IgG2b,其余3株均为IgG1;结论:ENA作为弱免疫原可用于制备单克隆抗体 相似文献
15.
目的 观察IL-2真核表达载体(pWRG3169)对HBV-SDNA疫苗(pCR3.1-S)诱导Balb/c小鼠(H-2^d)的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达HBsAg的小鼠肥大细胞瘤P815细胞(P815-HBV-S)成瘤性的影响。方法肌肉注射DNA疫苗,背部皮下接种P815-HBV-S细胞,观察成瘤情况,4h^51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。结果 对照组、pCR3.1-S及共同免疫 相似文献
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17.
用人工合成沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)氨基端1/4肽链免疫8周龄雄性BALB/c小鼠3只,第14天用L1/440/Bu原体加强免疫,第24天将免疫反应良好的1只小鼠脾细胞与NS-1瘤细胞融合。用1/4MOMP和L1原体抗原包被的聚丙乙烯板检测上清中抗体,淘汰与鹦鹉热衣原体种(EAE株)、肺炎衣原体种(ATCCVR1310株)以及正常组织培养细胞(BGMK)有交叉反应的克隆,最后得到4株抗沙眼衣原体特异性单克隆抗体(MAbs),其抗体属IsG1和IgG2a亚类。微量免疫荧光试验(micro-IF)发现4株MAbs均与本实验室制备的沙眼衣原体L1、L2、A、B、C、E原体及L2包涵体抗原发生反应,并与沙眼衣原体所有15个标准血清型结合,其腹水MAbs滴度≥1:12800。免疫印迹试验显示4株MAbs均与沙眼衣原体分子量为40000的MOMP反应。 相似文献
18.
抗人乳腺癌血清抗原单克隆抗体GB2的制备及鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
采用人乳腺癌血清抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经ELISA筛选,有限稀释及克隆后获得了一析玢泌特异抗体的杂交瘤细胞株,命名为单克隆抗体GP2(McAbGB2)。McAbGB2经硫酸铵及DEAE纤维素纯化后效价达1:2×10^6,经琼脂糖免疫双扩证明McAbGB2属小鼠IgG1亚类。免疫印迹结果表明McAbGB2识别的抗原呈两条区带,分子量分别为116kd及45kd 相似文献
19.
目的:为研制抗丙型肝炎病毒(HCV)NS3抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的HCVNS3抗原。方法:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体(McAb)的细胞株。结果:获得有实用价值的两株McAb。两株McAb与免疫抗原有较强的抗原-抗体反应,与HCVNS4、NS5及核心区C33肽、CP9、CP10抗原无反应性,在竞争ELISA中,对HCV-IgG阳性血清有较好的抑制作用。结论:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。 相似文献
20.
用超声波快速乳化人Hb,作为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞经离心PEG法融合,微波ELISA筛选阳性克隆,获得三株分泌针对人Hb不同抗原位点的单克隆抗体杂交瘤细胞系。分别命名为Hb264、Hb210和Hb238。其中Hb264能特异识别人Hb的β链而不与动物Hb交叉反应;解离常数Kb为1.6×10 ̄(-8)mol/L,IgG_(2a)。Hb210能结合人Hb的α链,可被猪Hb抑制,但亲合力低100倍;Kd(人Hb)为2.8×10 ̄(-8)mol/L;Kd(猪Hb)为3.0×10 ̄(-4)mol/L;IgG_(2b)。Hb238是两个脾细胞与一个Sp2/0细胞融合而成的三体瘤(trioma);染色体132条;Hb238单克隆抗体可同人Hb的α和β链结合,Kd(人Hb)为8.9×10 ̄(-5)mol/L;IgG_(2a);经分析鉴定,Hb238是针对人Hbα和β链的双特异性抗体。本方法对免疫学隐血检测、法医学鉴定和双特异抗体的研制有一定意义。 相似文献