新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对实验性大鼠肺纤维化的干预作用

目的：研究新型内皮素受体拮抗剂ETP-508对实验性大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其机制．方法：实验分为4组：博莱霉素组、ETP-508组、地塞米松组和正常对照组．博莱霉素组、ETP-508组和地塞米松组均给以博莱霉素（5mg／kg）气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,正常对照组给以气管内注射等量生理盐水替代．ETP-508组和地塞米松组造模开始后次日又分别给以腹腔注射ETP-508（100μg／kg）和地塞米松（1mg／kg）,隔日1次．博莱霉素组和正常对照组以等量生理盐水替代．造模后第28日处死所有大鼠,测定肺组织ET-1和羟脯氨酸含量,并进行组织病理学观察．结果：博莱霉素组肺组织内羟脯氨酸明显高于正常对照组,病理为肺纤维化改变．博莱霉素组的ET-1水平高于正常对照组和地塞米松组,差异有统计学意义（P〈0．01）;ETP-508组ET-1水平均高于上述各组,与博莱霉素组（P〈0．05）,正常对照组和地塞米松组比较（P〈0．01）有统计学意义;地塞米松组与正常对照组比较,无统计学意义（P〉0．05）．结论：ETP-508对肺纤维化的形成有一定的干预作用,其机制可能通过拮抗ET-1与内皮素受体结合的作用有关．     

内皮素受体拮抗剂ETP-508对大鼠肺纤维化中P物质和MMP-2的影响

目的 研究内皮素受体拮抗剂ETP-508对实验性大鼠肺纤维化组织中P物质(SP)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)变化的影响.方法 实验分为博莱霉素组、ETP-508组和正常对照组.博莱霉素组和ETP-508组经气管内注射博莱霉素(5mg/kg)复制肺纤维化模型;正常对照组气管内注射等量0.9％氯化钠注射液.气管内注药次日后,ETP-508组腹腔注射ETP-508 100μg/kg,隔日1次,博莱霉素组和正常对照组以等量0.9％氯化钠注射液替代.第7、28天分别处死动物,测定肺组织羟脯氨酸、SP和MMP-2含量,并进行病理组织学观察.结果 博莱霉素组肺组织中羟脯氨酸含量明显高于正常对照组,病理为肺纤维化改变,第7、28天的SP水平均高于正常对照组和ETP-508组(P＜0.01);第28天MMP-2水平较第7天水平降低(P＜0.01),同时也低于正常对照组和ETP-508组(P＜0.01).ETP-508组第7、28天的SP和MMP-2水平与正常对照组相应时间点比较无明显差异(P＞0.05).结论 ETP-508具有抗肺纤维化形成作用,其机制可能与降低SP水平和阻止MMP-2水平下降的降解有关.     

浓当归注射液对博莱霉素致鼠肺纤维化治疗作用的研究

为观察当归对博莱霉素致鼠肺纤维化后的治疗作用,对用博莱霉素气管内灌注30d后的SD大鼠,治疗组给予25%当归注射液每日注射共15d,对照组注射生理盐水,结果显示：治疗组肺组织学检查,纤维化明显轻于对照组;肺间质所占面积百分比显著低于对照组;肺匀浆羟脯氨酸含量显著减少（P＜0.01)。结果表明,当归能延缓博莱霉素诱导的肺纤维化进程,缓解其所致的肺纤维化病变。     

地塞米松对大鼠肺纤维化及其肺组织ET-1的影响

目的探讨地塞米松对实验性大鼠肺纤维化肺组织内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的影响。方法实验分为博莱霉素组、地塞米松组和正常对照组。博莱霉素组和地塞米松组给以博莱霉素（5mg/kg）气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,正常对照组以生理盐水替代。气管内注药,次日地塞米松组给以腹腔注射地塞米松（1mg/kg）隔日1次,博莱霉素组和正常对照组以生理盐水替代。造模后第28d处死大鼠,测定肺组织ET-1和羟脯氨酸（HYP）含量,并进行组织病理学观察。结果博莱霉素组肺组织内羟脯氨酸（790.530±131.930μg/g）高于正常对照组（570.964±62.411μg/g）和地塞米松组（584.447±51.921μg/g）（P〈0.01）,病理为肺纤维化改变。博莱霉素组肺组织中的ET-1水平（61.001±2.722pg/mL）高于正常对照组（57.618±2.731pg/mL）和地塞米松组（56.083±3.379pg/mL）（P〈0.01）。结论ET-1可能参与肺纤维化的形成,地塞米松可能通过降低ET-1水平抑制肺纤维化形成。     

黄芪丹参甘草等中药对大鼠肺纤维化的影响

目的　研究黄芪、丹参、甘草等中药对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的阻抑作用。方法　将７２只ＳＤ大鼠一次性气管内注入博莱霉素Ａ５ 复制肺纤维化模型,次日随机分为３ 组,分别为模型组（ｎ＝２４） 、泼尼松组（ｎ＝ ２４） 和中药组（ｎ＝ ２４） ,另２４ 只大鼠作为对照组。测定分析各组给药后第７ 、１４、２８ｄ肺组织内羟脯氨酸、脂质过氧化物含量、组织病理学变化以及比较各组第２８ｄ 肺系数。结果　中药组及泼尼松组各期肺组织脂质过氧化物及羟脯氨酸含量均较模型组明显降低（ Ｐ＜ ０．０５ 或Ｐ＜ ０．０１）,肺系数明显减少（ Ｐ＜０ ．０１）,肺组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻,其中中药组优于泼尼松组。结论　黄芪、丹参、甘草等中药联合应用对肺间质纤维化具有良好的防治作用。     

C型钠尿肽对博莱霉素介导的小鼠肺纤维化的保护作用

目的 观察C型钠尿肽对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的抑制作用.方法 经气管注射博莱霉素制作肺纤维化小鼠模型,将实验动物分为三组,包括空白对照组、博莱霉素处理组(BLM组)和C型钠尿肽干预组(CNP组),于第1、3、7、14天进行肺泡灌洗,回收各组肺泡灌洗液并检测炎性细胞和IL-1β量;记录药物处理后小鼠死亡率;第14天处死小鼠,取肺组织制备病理切片后评价各组模型肺组织形态学变化,测定肺组织匀浆中羟脯氨酸含量.结果 BLM组的肺纤维化和炎症反应较明显,死亡率高;CNP组与BLM组相比,肺纤维化程度减轻,炎性细胞较少,组织羟脯氨酸含量减低,死亡率下降.结论 C型钠尿肽能减轻博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,与干预炎症因子的产生及纤维化过程有关.     

罗格列酮对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的影响

目的 采用博莱霉素(BLM)腹腔注射诱导大鼠肺纤维化的模型,探讨过氧化物体增殖活化受体γ激动剂(PPAR-γ)--罗格列酮对肺纤维化的治疗作用.方法 经腹腔给予BLM致大鼠肺纤维化模型,将实验大鼠随机分为3组,即对照组、模型组(BLM组)、干预组(罗格列酮组).于造模完成后第21天处死大鼠,取肺组织制备病理切片,行HE,Masson染色后评价各组模型肺组织形态学变化,测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)含量.结果 BLM组的肺组织炎症反应较明显;罗格列酮组与BLM组相比,肺组织HYP下降,肺纤维化程度减轻.结论 罗格列酮能通过活化PPAR-γ信号通路减轻大鼠肺纤维化,机制与干预炎症因子产生及纤维化过程有关.     

氧化苦参碱对肺纤维化大鼠肺内Th1/Th2平衡的影响

目的：观察博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化肺内Th1/Th2状态,以及氧化苦参碱（OMT）对肺纤维化大鼠的干预作用。方法：气管内注射博来霉素制作大鼠肺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠分组为正常对照组、模型组、氧化苦参碱治疗组。治疗组于造模后第2天起予腹腔注射氧化苦参碱注射液,直至处死。每组在造模后第3、7、14、28天随机处死6只,观察肺组织病理变化,计算机图形自动分析系统（C IAS）评估肺纤维化程度;检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织匀浆γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）。结果：与正常组比较,模型组表现为明显肺泡炎,炎性细胞浸润、严重肺纤维化。治疗组与模型组比较,肺泡炎和肺间质的纤维胶原组织增生均减轻（P〈0.05）。模型组第14、28天肺HYP含量高于同期正常组（P〈0.05）;治疗组第28天肺HYP含量明显低于同期模型组（P〈0.05）。与正常组比较,模型组IFN-γ均降低（P〈0.05）,但治疗组各时间点IFN-γ水平较模型组升高（P〈0.05）,且与正常组比较无统计学差异（P〉0.05）。正常组、治疗组和模型组各时间点IL-4含量均无统计学差异（P〉0.05）。结论：博莱霉素肺纤维化大鼠体内存在Th1反应不足现象,氧化苦参碱能减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其可能与纠正肺纤维化大鼠Th1/Th2的失衡有关。     

两个品系小鼠肺纤维化模型的比较观察

目的采用气管内注射博莱霉素（Bleomycin,BLM）的方法,比较观察两个品系小鼠肺纤维化程度,确定适用的肺纤维化小鼠模型。方法BALB／c小鼠和C57BL／6小鼠分别分成模型组和对照组,模型组气管内注射博莱霉素（5mg／kg）,对照组气管内注射相同体积生理盐水。所有小鼠于造模后第28日处死,观察肺系数、肺组织病理学改变及羟脯氨酸含量的变化。结果光镜下各模型组肺组织呈不同程度纤维化,其中以C57BL／6小鼠最为明显;模型组的羟脯氨酸（HYP）含量均显著高于对照组;C57BL／6小鼠模型组肺系数及HYP明显高于BALB／c小鼠模型组。结论通过气管内注射博莱霉素,BALB／c及C57BL／6小鼠均能复制肺纤维化模型,以C57BL／6小鼠肺纤维化程度最高,获得的肺纤维化模型较为理想。     

苦胆草对博来霉素致大鼠肺纤维化的防治作用

［摘要］目的　探讨苦胆草对博莱霉素致大鼠肺纤维化的防治作用．方法　健康成年SD大鼠40只（200±20）g随机分为4组:正常对照组（未做处理）、生理盐水组（气管滴入生理盐水）、模型组（气管滴入博莱霉素5 mg/kg）和苦胆草干预组［灌胃给予苦胆草片混悬液0.705 g/(100 g.d),2次/d、共5次,末次给药1 h,气管滴入博莱霉素5 mg/kg］．分别于气管内滴注后14 d和28 d处死动物,检测各项指标．采用碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量,HE染色和银染观察肺组织病理变化．结果　与正常对照组和生理盐水组比较,模型组大鼠肺组织HYP含量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,苦胆草干预组大鼠肺组织HYP含量明显降低（P＜0.01）;病理检查发现,模型组大鼠肺组织有明显肺纤维化样改变,苦胆草干预组可明显减轻肺纤维化程度．结论　苦胆草能降低博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织羟脯氨酸含量,减轻肺纤维化程度,有望成为防治肺纤维化的候选药物．     

大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-SMA和TGF- β1表达的影响

目的 观察大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨大蒜素对大鼠肺纤维化抑制作用的机制.方法 通过气管内注射博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,空白对照组大鼠用生理盐水代替.造模后的Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(气管内注入生理盐水+生理盐水灌胃)、大蒜素组(博莱霉素造模+大蒜素灌胃)、秋水仙碱组(博莱霉素造模+秋水仙碱灌胃)和模型组(博莱霉素造模+生理盐水灌胃),分别于第7天和第28天处死大鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺组织肺纤维化程度,碱水解法检测大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度,免疫组织化学染色检测大鼠肺组织α -SMA及TGF-β1的表达.结果 在HE染色和Masson染色中,大蒜素组及秋水仙碱组肺炎分级和肺纤维化分级较模型组降低.与模型组相比,大蒜素组大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度降低,肺组织内α-SMA及TGF-β1的表达均明显减少,与秋水仙碱组相似.结论 大蒜素对大鼠肺纤维化的干预作用可能与下调TGF-β1的表达,从而减少成纤维细胞α-SMA基因的表达有关.     

博莱霉素致大鼠肺纤维化的晚期动态观察

①目的 观察博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的晚期变化.②方法 30只Wistar大鼠随机分为模型组、对照组,气管内灌注博莱霉素A5制备大鼠肺纤维化模型,第28、42、56天取肺组织行HE和Masson染色、测定肺系数和羟脯氨酸含量.③结果 模型组肺泡炎、肺纤维化严重(P 均<0.01).④结论大鼠肺纤维化晚期仍有明显炎症反应,肺纤维化程度逐渐加重.     

氯沙坦对大鼠实验性肺纤维化的治疗作用及其机制

目的:研究血管紧张素Ⅱ的1型受体拮抗剂氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用及其可能机制。方法:45只大鼠随机分为3组,每组15只。①氯沙坦组,经气管插管灌注博莱霉素诱导肺纤维化,随后每日用氯沙坦10 mg/kg灌胃进行干预;②模型组,气管内灌注用博莱霉素,灌胃用生理盐水;③对照组,气管内灌注和灌胃均用生理盐水。各组动物于气管内灌注后第7,14,28天分别处死5只。取肺组织用Masson胶原染色法及检测羟脯氨酸来评价治疗效果。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达水平。结果:模型组肺纤维化程度和肺组织羟脯氨酸含量在各时间点均高于对照组,氯沙坦组肺纤维化程度在各时间点均低于同期模型组,其肺组织羟脯氨酸含量在第14和28天均低于同期模型组,差异有统计学意义(P均<0.05);模型组肺组织TGF-β蛋白水平在各时间点均高于对照组,该组HGF蛋白水平在第7天高于对照组,而第14和28天低于对照组,氯沙坦组在第14和28天肺组织TGF-β蛋白水平均低于同期模型组,而HGF蛋白水平均高于同期模型组(P均<0.05)。结论:氯沙坦对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,可能与抑制肺组织TGF-β表达和促进HGF表达有关。     

肺特灵Ⅲ对博莱霉素致小鼠肺纤维化的影响

目的观察肺特灵Ⅲ对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用。方法通过气管内注射博莱霉素制作小鼠肺纤维化模型,给予肺特灵Ⅲ灌胃（ig）治疗14d后,进行肺系数、肺组织病理形态及羟脯氨酸（HYP）、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）等血清和肺组织中生化指标水平的测定和分析,观察肺特灵Ⅲ对小鼠肺纤维化的影响。结果经肺特灵Ⅲ治疗后,与模型组相比,各组小鼠肺系数和HYP含量显著降低,小鼠血清中T-AOC增强、MDA含量明显降低,肺组织中GSH含量明显增加,肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻。上述变化均有统计学意义（皆P〈0.05或〈0.01）。结论肺特灵Ⅲ对博莱霉素致鼠肺纤维化早期病变有一定的治疗作用,其机制可能与抑制炎症细胞的浸润活化、抗氧化作用及抑制胶原的形成有关。     

泛素特异性蛋白酶7在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中的表达及作用

目的:观察和评价泛素特异性蛋白酶7（USP7）在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中的作用。方法:正常野生型成年小鼠36只,随机分为空白组及博莱霉素组。博莱霉素组采用博莱霉素气管内滴注复制小鼠肺纤维化模型,空白组用同等方法注入同样体积的0.9%氯化钠注射液制备对照模型。造模后第7、14、21天处死小鼠,取小鼠肺组织进行肺系数测定、羟脯氨酸含量测定、HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色,观察博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程,肺组织中USP7表达水平的动态变化及其与肺胶原蛋白含量的关系。结果:在各时间点博莱霉素组肺系数显著高于空白组（P<0.01）。博莱霉素组羟脯氨酸含量在各时间点的差异均有统计学意义（P<0.01）,在第14天和第21天均显著高于空白组（P<0.01）。肺组织病理切片HE染色、Masson染色结果表明博莱霉素气管内给药能诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程。免疫组织化学观察半定量USP7结果显示,USP7弱表达于正常肺组织中。在各时间点,博莱霉素组USP7表达差异均有统计学意义（P<0.01）,且均较空白组明显增强（P<0.05~P<0.01）,并随着时间的延长,表达逐渐减弱（P<0.01）。结论:USP7在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中呈现明显的动态变化,可能在肺纤维化的发生、发展各个环节中起着一定作用。     

丙戊酸钠对博莱霉素致肺纤维化大鼠TNF-α表达的影响

目的 探讨组蛋白脱乙酰基转移酶抑制剂丙戊酸钠在博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的TNF-α表达的调节.方法 54只雄性SD大鼠随机分为控制对照组(CG)、肺纤维化模型组(MG)、丙戊酸钠干预组(VG).MG组、VG组予以博莱霉素溶液按5mg/kg气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,CG组予以等体积0.9% 氯化钠溶液注射.各组于造模后第7、14、28天分3批处死,观察肺组织大体及HE和Masson染色,Szapiel评分,进行大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)免疫组化检测.结果 与CG组相比,MG组14d和28d肺组织TNF-α及HYP含量明显增高(均P＜0.01),VG组Szapiel评分、HYP受到明显抑制,TNF-α表达下降.结论 丙戊酸钠能抑制TNF-α表达,抑制BLM诱导的大鼠肺纤维化.     

丹芍化纤对肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子表达的影响

目的：观察辛伐他汀对博来霉素引起的肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组（对照组）、肺纤维化模型组（模型组）和丹芍化纤胶囊治疗组（治疗组）。模型组和治疗组气管内注射博来霉素（5 mg/kg）诱导肺纤维化,对照组气管内注射等量生理盐水。次日起治疗组大鼠给予丹芍化纤混悬液（0.8 g/kg/d）灌胃,其余两组给予等量生理盐水灌胃。治疗第28 d处死各组大鼠,计算肺系数,HE染色观察肺组织病理变化,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化ABC法观察肺组织CTGF表达的变化。结果：与对照组比较,模型组大鼠肺系数明显增加,肺组织胶原沉积明显,羟脯氨酸含量、CTGF表达增加。与模型组比较,治疗组大鼠肺系数明显降低,肺组织胶原沉积有所减轻,肺组织羟脯氨酸含量、CTGF蛋白表达减少。结论：丹芍化纤具有较好的抗大鼠肺纤维化作用,其作用机制部分是通过下调肺组织内CTGF的表达,从而延缓甚至抑制纤维化的进展。     

川穹嗪联合胚胎干细胞治疗大鼠肺纤维化的机制研究

目的:研究静脉注射胚胎干细胞(ESC)和川穹嗪(TMP)对肺纤维化大鼠的治疗作用。方法:气管内滴注博莱霉素8.5mg/kg制作雌性大鼠的肺纤维化模型。治疗组分别单独(联合)静脉注射大鼠ESC与川穹嗪,对照组注射生理盐水。记录大鼠的生存状态,测定大鼠肺组织的羟脯氨酸含量,肺脏病理学观察炎症状态、细胞凋亡情况以及相关蛋白的变化。结果:与对照组相比,接受ESC与TMP联合治疗后,肺纤维化模型大鼠的体质量增加,状态良好;肺羟脯氨酸含量明显降低;肺脏病理检查显示肺组织炎症程度降低,结构破坏减轻。流式细胞结果显示细胞凋亡指数降低,其核心蛋白MMP-2和MMP-9的表达明显下调。结论:静脉注射ESC与TMP可以减轻博莱霉素诱导的大鼠肺部炎症和肺纤维化。     

益气化纤汤对博来霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的影响

目的：研究益气化纤汤对博莱霉素A5（BLMA5）诱导的大鼠肺间质纤维化的治疗作用。方法：利用博莱霉素气管内注射制作大鼠肺纤维化模型。90只健康雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、强的松组和小、大剂量益气化纤汤组。在同样条件下，药物灌胃饲养28d后，断颈处死。取双肺标本进行病理切片、测定转化生长因子（TGF-β1）表达和羟脯氨酸（HYP）含量。结果：从病理切片、肺组织中TGF-β1表达和肺组织匀浆中羟脯氨酸的含量方面来看，药物治疗各组的肺纤维化均比模型组轻。结论：益气化纤汤对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有一定的治疗作用，其作用机制可能通过抑制TGF-β1生成实现。     

不同剂量吉非替尼对博莱霉素所致大鼠肺纤维化影响的比较

目的：对比观察不同剂量吉非替尼对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响。方法将75只雄性SD大鼠分为5组：对照组、博莱霉素组、低剂量吉非替尼联用组、中剂量吉非替尼联用组、高剂量吉非替尼联用组,每组15只。观察大鼠存活情况,第21天时杀鼠取左肺石蜡切片行HE染色及Masson染色,右肺ELISA方法检测羟脯氨酸含量。结果高剂量吉非替尼联用组能明显加重博莱霉素所致肺纤维化,Ashcroft评分、肺组织胶原沉积及羟脯氨酸含量明显增多（P＜0．05）。中等剂量吉非替尼联用组Ashcroft评分较博莱霉素组差异无统计学意义（P＞0．05）,羟脯氨酸含量明显增加（P＜0．05）。而低剂量吉非替尼联用组各项指标与博莱霉素组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论吉非替尼能加重博莱霉素所致大鼠肺纤维化,且吉非替尼剂量越大,大鼠肺纤维化程度越高。