人类乳腺癌细胞抗药性和突变率差异的研究

为研究人类乳腺癌细胞抗药性和突变率的差异及产生机理,作者检测了同来源于ＭＤＡ－ＭＢ－４３５的人类乳腺癌细胞Ｌ－２和Ｂｒ－１的突变率和对药物ＰＡＬＡ的敏感性,并用流式细胞仪测定两细胞株经ＰＡＬＡ处理后细胞周期分布的变化,用ＤＮＡ碎片法研究细胞凋亡,及用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ测定Ｐ５３蛋白的表达。结果显示：Ｌ－２和Ｂｒ－１细胞的突变率和对ＰＡＬＡ的敏感性存在巨大差异;经ＰＡＬＡ处理后,两细胞株皆表现出细胞周期滞留在Ｓ期,但Ｌ－２细胞开始出现细胞凋亡而Ｂｒ－１细胞仍能存活。在去除培养液中的ＰＡＬＡ后,Ｂｒ－１细胞能恢复正常细胞周期和生长,而Ｌ－２细胞则一直停留在Ｓ期并继续细胞凋亡;在ＰＡＬＡ处理两细胞的过程中都未检测到Ｐ５３蛋白表达的变化。以上结果表明,一种非ｐ５３依赖型的细胞周期Ｓ期滞留启动的细胞凋亡机理,是造成Ｌ－２和Ｂｒ－１乳腺癌细胞抗药性和突变率差异的原因。     

变异型p53蛋白表达对人乳腺癌细胞阿霉素抗药性的 …

目的：探讨变异型Ｐ５３蛋白表达对人乳腺癌细胞阿霉素抗药性的影响。方法应用琼脂培养ＭＴＴ法检测阿霉素（ＡＤＭ）对９例人乳腺癌新鲜标本药物敏感性，用Ｓ－Ｐ免疫组化技术观察变异型Ｐ５３蛋白表达，并用ＩＣＭ－１００细胞ＤＮＡ图像分析系统作半定量分析；同时观察阿霉素对人乳腺癌手术前化疗效。结果（１）９例人乳腺癌新鲜标本中７例变异型Ｐ５３蛋白表辽阳性（阳性率为７７．７７％）。（２）变异型Ｐ５３蛋白表达量（阳性     

重组P_(53)基因在HepG-2中的表达及作用

为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用,本文用磷酸钙 ＤＮＡ共沉淀法,将本室构建的ＰＸＴ１ Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ ２ 肝癌细胞系内,经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实,外源性Ｐ５３ 基因已在ＨｅｐＧ ２ 细胞中稳定表达,导入的Ｐ５３基因亦能抑制ＨｅｐＧ ２ 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常Ｐ５３ 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。     

重组P53基因在HepG-2中的表达及作用

为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用,本文用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法,将本室构建的ＰＸＴ１Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系内,经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实,外源性Ｐ５３ 基因已在ＨｅｐＧ２ 细胞中稳定表达,导入的Ｐ５３基因亦能抑制ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常Ｐ５３ 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。     

人类乳腺癌细胞抗药性和突变率差异的研究

为研究人类乳腺癌细胞抗药性和突变率的差异及产生机理，作者检测了同来源于ＭＤＡ－ＭＢ－４３５的人类乳腺细胞Ｌ－２和Ｂｒ－１的突变率和对药物ＰＡＬＡ的敏感性，并用流式细胞仪测定两细胞株经ＰＡＬＡ处理后细胞周期分布的变化，用ＤＮＡ碎片法研究细胞凋亡，及用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ测定Ｐ５３蛋白的表达，结果显示，Ｌ－２和Ｂｒ－１细胞的突变率和对ＰＡＬＡ的敏感性存在巨大差异，经ＰＡＬＡ处理后，两细胞株皆表现出细     

人野生型P53基因真核表达载体的构建及其转染胃癌细胞后对胃癌细胞的影响

人野生型Ｐ５３基因真核表达载体的构建及其转染胃癌细胞后对胃癌细胞的影响赵亚刚１，张学庸１，惠宏襄２，赵永同２，王成济２（１第四军医大学西京医院消化内科，西安７１００３３，２第四军医大学生物化学教研室）关键词Ｐ５３基因，逆转录病毒载体，基因治疗，流式细...     

α-干扰素对人肺腺癌A549细胞周期和P53蛋白表达的影响

目的：探讨α－干扰素（ＩＦＮ－α）对人肺腺癌细胞株Ａ５４９细胞周期和Ｐ５３蛋白表达的影响。方法：用２种不 同质量浓度ＩＦＮ－α（２５μｇ／Ｌ,１００ μｇ／Ｌ）处理人肺腺癌Ａ５４９细胞,并设空白为对照。用流式细胞仪测定ＩＦＮ－α对Ａ５４９细 胞细胞周期的影响,用免疫荧光标记法测定Ｐ５３蛋白的表达。结果：ＩＦＮ－α作用后的Ａ５４９细胞,细胞周期明显改变,Ｓ期细 胞数显著降低,且Ｐ５３蛋白表达明显减少。结论： ＩＦＮ－α能阻止Ａ５４９细胞细胞周期的进程,抑制Ｐ５３蛋白的表达。     

食道鳞癌凋亡相关基因表达及原位凋亡的同步检测

用免疫组织化学染色法对食道鳞癌标本进行凋亡相关基因Ｐ５３、Ｆａｓ、Ｂｃｌ ２和Ｂａｘ表达的检测,同时采用ＴＵＮＥＬ方法原位探测细胞凋亡。检测结果显示：①５２例食道鳞癌标本中,Ｐ５３、Ｆａｓ、Ｂｃｌ ２、Ｂａｘ和细胞凋亡的阳性率分别是６１．５％、６１．５％、６９．２％、９８．１％和２８．８％。②１８例对照标本中相应指标的阳性率分别为１６．７％、１００％、３８．９％、１００％和６１．１％。③比较２组标本,肿瘤组Ｐ５３和Ｂｃｌ ２的阳性率显著高于对照组（Ｐ＜０．０１及Ｐ＜０．０５）,肿瘤组Ｆａｓ与ＴＵＮＥＬ的阳性率显著低于对照组（Ｐ＜０．０１及Ｐ＜０．０５）。④以上４种蛋白与细胞凋亡存在与否无独立相关性。上述结果表明,在食道癌变中,不仅存在细胞凋亡功能的减低,同时伴有多种凋亡相关基因的表达异常。凋亡功能的异常,可能是多基因共同调控的结果。     

阿霉素对人肝癌细胞SMMC—7721抑制作用的研究

目的 研究阿霉素对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。方法 应用ＭＴ法、流式细胞术及航向电镜技术观察阿霉素对ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变。结果 阿霉素明显抑制人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的生长（Ｐ〈０．０５）,半数生长抑制剂量（ＩＣ５０）为０．４４ｍｇ／Ｌ。流式细胞术证实,阿霉素作用１２ｈ,细胞阻滞于Ｇ２期,４８ｈ细胞阻滞于Ｇ１期。航向电镜超微结构观察发现阿霉素可使肿     

热诱导鼠纤维肉瘤细胞凋亡

热诱导鼠纤维肉瘤细胞凋亡郭爱林１范清宇１张盈华２殷缨２张殿忠１（第四军医大学唐都医院：１骨肿瘤实验室，２临床实验室西安７１００３８）全军九五重点课题基金资助９６Ｚ０４８关键词凋亡肉瘤细胞周期热疗中图号Ｒ４５４０引言凋亡是广泛存在的生理与病理现象．...     

逆转录病毒介导的野生型p53基因转入对慢粒多药耐药细胞？…

以Ｋ５６２／ＨＨＴ细胞为模型,采用重组逆转录病毒载体介导的基因转移技术,将人野生型Ｐ５３ｃＤＮＡ转入该细胞系,研究外源性野生型Ｐ５３基因在白血病多药耐经细胞表达的意义。结果显示,外源性野生型Ｐ５３基因抑制细胞增殖,一般形态学观察见细胞明显向成熟发化,流式细胞仪分析还显示Ｐ５３基因诱导Ｋ５６２／ＨＨＴ细胞死亡且伴有细胞周期Ｇ１基因的生长阻滞,结果表明,野生型Ｐ５３基因对多药耐药的白血病细胞能部分降低     

肝细胞癌宿主防御的分子与细胞水平研究的进展

研究表明，机体可通过复杂的分子和细胞机制阻止肿瘤的形成与发展。本文简要介绍宿主对原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）防御机制分子生物学研究的进展情况。１肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因的正常功能是延缓损伤细胞ＤＮＡ的复制，直至ＤＮＡ修复。若肿瘤抑制基因正常功能失效则可导致肿瘤的形成和发展。Ｐ５３就是肿瘤抑制基因主要的一种。肿瘤宿主Ｐ５３表达增加，野生型Ｐ５３具有抑制肿瘤形成的能力。当Ｐ５３不能阻止细胞的复制或不能修复细胞ＤＮＡ时，即可造成细胞的自身破坏。通过有丝分裂停滞和凋亡两个机制Ｐ５３控制细胞周期，其作用受细胞…     

肝癌细胞转染野生型p53基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡

肝癌细胞转染野生型ｐ５３基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡＊张晓东１王文亮１穆峰２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２第四军医大学唐都医院胸外科）关键词肝肿瘤细胞凋亡ｐ５３基因转染中图号Ｒ７３－３１目的进一步探讨ｐ５３基因与细胞凋亡（ａｐｏ...     

重组P_(53)基因转染的肝癌细胞克隆株的建立及其生物学活性观察

人Ｐ５３基因位于１７ 号染色体短臂上（１７ｐ１３．１） ,编码一个由３９３ 个氨基酸组成的核磷酸蛋白,有调控细胞的生长,维持基因组的稳定,其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型Ｐ５３ 基因的抗肿瘤特性,我室采用分子克隆方法构建了重组野生型Ｐ５３ 真核表达载体（ｐｘＴ１—Ｐ５３） ,用磷酸钙—ＤＮＡ 共沉淀法将其导入人肝癌ＨｅｐＧ ２ 细胞内,通过标记基因ＮｅＯＲ 筛选带外源Ｐ５３ 基因的Ｇ４１８ 抗药性克隆,对Ｇ４１８ 抗药性克隆细胞的生长增殖和粘附能力进行观察。结果表明,导入野生型Ｐ５３基因能使肝癌ＨｅｐＧ ２ 细胞的生长增殖速度较对照细胞明显减慢,细胞粘附能力下降。提示野生型Ｐ５３ 基因能抑制肝癌细胞的生长。本研究为肝癌的Ｐ５３ 实验性基因治疗提供了一定的依据。     

细胞凋亡水平及ER,p53,Bcl—2基因产物表达与乳腺癌生物学行 …

目的：探讨细胞凋亡、ＥＲ、ｐ５３及Ｂｃｌ－２基因产物表达在人类乳腺癌中的生物学意义。方法：对８６例乳腺癌和２４例乳腺良性病变行细胞凋亡检测（ＴＵＮＥＬ法）和ｐ５３、Ｂｃｌ－２、ＥＲ的免疫组化染色（Ｓ－Ｐ法）。结果：细胞凋亡水平与Ｂｃｌ－２、ＥＲ的表达和淋巴结转移;ｐ５３表达与组织学分级和ＥＲ的表达;Ｂｃｌ－２表达与组织学分级和患者的生存期差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。细胞凋亡和ｐ５３、Ｂｃｌ－２基     

重组P53基因转染的肝癌细胞克隆株的建立及其生物学活性观察

人Ｐ５３基因位于１７ 号染色体短臂上（１７ｐ１３．１） ,编码一个由３９３ 个氨基酸组成的核磷酸蛋白,有调控细胞的生长,维持基因组的稳定,其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型Ｐ５３ 基因的抗肿瘤特性,我室采用分子克隆方法构建了重组野生型Ｐ５３ 真核表达载体（ｐｘＴ１—Ｐ５３） ,用磷酸钙—ＤＮＡ 共沉淀法将其导入人肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞内,通过标记基因ＮｅＯＲ 筛选带外源Ｐ５３ 基因的Ｇ４１８ 抗药性克隆,对Ｇ４１８ 抗药性克隆细胞的生长增殖和粘附能力进行观察。结果表明,导入野生型Ｐ５３基因能使肝癌ＨｅｐＧ２ 细胞的生长增殖速度较对照细胞明显减慢,细胞粘附能力下降。提示野生型Ｐ５３ 基因能抑制肝癌细胞的生长。本研究为肝癌的Ｐ５３ 实验性基因治疗提供了一定的依据。     

卵巢癌细胞凋亡和细胞倍性与p53基因突变的关系

目的了解Ｐ５３基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型Ｐ５３基因在肿瘤发生中的作用机制。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测２０例正常卵巢组织、２０例良性卵巢肿瘤、４５例恶性卵巢癌（其中肿瘤未转移组２０例,肿瘤转移组２５例）患者的Ｐ５３基因突变,流式细胞仪Ｆａｃｓｃａｎ检测卵巢癌细胞染色体倍性,凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果卵巢癌转移组的Ｐ５３基因突变率为６０％,未转移组为４０％（Ｐ     

转促凋亡基因胃癌细胞的光动力学治疗实验研究

目的;评价转促凋亡基因胃癌细胞的光动力学治疗效果。方法：分析用携带野生型ｐ５３ｃＤｎＡ和我ｂｃｌ－１序列的逆转录志导胃腺癌细胞系ＭＧＣ８０３,稳定表达后加光敏剂并红光照射,检测细胞存活及凋亡。结果：在序列的逆转录病毒转导胃腺癌细胞系ＭＧＣ８０３,稳定表达后加光敏剂并红光照,检测细胞存活及凋亡。结果：在光敏剂及红光作用以生型Ｐ５３反义ｂｃｌ－２都能使转导细胞的存活率降低,凋亡增加。结论：野生型Ｐ５３     

顺铂诱导人卵巢癌COC_1、COC_1/DDP细胞凋亡的研究

目的：探讨顺铂作用于卵巢癌细胞的作用机理。方法：通过电镜、光镜、流式细胞仪等方法观察顺铂诱导人亲代和耐药卵巢癌细胞ＣＯＣ１ 、ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡,进行细胞周期分析及计算凋亡率。结果：顺铂引起细胞Ｓ期增多、Ｓ期细胞凋亡,ＣＯＣ１ 、ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞凋亡率不同。结论：顺铂药理机制之一是诱导细胞凋亡,耐药与凋亡减少有关。     

顺铂诱导人卵巢癌COC1,COC1／DDP细胞凋亡的研究

目的：探讨顺铂作用于卵巢癌细胞的作用机理。方法：通过电镜,光镜,流式细胞仪等方法观察顺铂诱导人亲代和耐药卵巢癌细胞ＣＯＣ１、ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡,进行细胞周期分析及计算凋亡率。结果：顺铂引起细胞Ｓ期增多、Ｓ期细胞凋亡,ＣＯＣ１,ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞凋亡率不同,结论：顺铂药理机制之一是诱导细胞凋亡,耐药与凋亡减少有关。