刺五加皂甙对缺氧复氧性神经元损伤的保护作用

目的:从细胞分子水平研究刺五加皂甙(acanthopanaxsenticosussaponins,ASS)对培养神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法:取孕13～15dICR胎鼠大脑皮质神经元进行原代分离培养,建立缺氧复氧诱导的皮质神经元损伤模型。随机分成正常对照组、缺氧复氧组及ASS组;用MTT法测定神经元存活率,用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)的含量,用流式细胞仪检测神经元凋亡率。结果:神经元缺氧2,4,6,8h复氧24h后,存活率分别为(0.604±0.022)%,(0.592±0.017)%,(0.543±0.037)%,(0.534±0.021)%;缺氧8h复氧24h后,神经元凋亡率由(4.13±0.87)%增加至(31.34±0.85)%,NOS含量由(5.23±0.28)μmoL/L增加至(11.39±0.21)μmoL/L(P<0.01);ASS组神经元存活率、神经元凋亡率、NOS含量分别为(0.636±0.021),(16.37±0.66)%,(8.02±0.18)μmoL/L,与缺氧8h复氧24h比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:ASS对缺氧复氧引起的神经元损伤有保护作用;ASS可能是通过抑制一氧化氮的释放、抑制神经元凋亡来拮抗神经元损伤。     

刺五加皂甙对缺氧复氧性神经元损伤的保护作用

目的：从细胞分子水平研究刺五加皂甙(acanthopanax senticosus saponins，ASS)对培养神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法：取孕13～15d ICR胎鼠大脑皮质神经元进行原代分离培养，建立缺氧复氧诱导的皮质神经元损伤模型。随机分成正常对照组、缺氧复氧组及ASS组；用MTT法测定神经元存活率，用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)的含量，用流式细胞仪检测神经元凋亡率。结果：神经元缺氧2，4，6，8h复氧24h后，存活率分别为(0．604&;#177;0．022)％，(0．592&;#177;0．017)％，(0．543&;#177;0．037)％，(0．534&;#177;0．021)％；缺氧8h复氧24h后，神经元凋亡率由(4．13&;#177;0．87)％增加至(31．34&;#177;0．85)％，NOS含量由(5．23&;#177;0．28)μmoL／L增加至(11．39&;#177;0．21)μmoL／L(P&;lt;0．01)；ASS组神经元存活率、神经元凋亡率、NOS含量分别为(0．636&;#177;0．021)，(16．37&;#177;0．66)％，(8．02&;#177;0．18)μmoL／L，与缺氧8h复氧24h比较差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：ASS对缺氧复氧引起的神经元损伤有保护作用；ASS可能是通过抑制一氧化氮的释放、抑制神经元凋亡来拮抗神经元损伤。     

防治缺血性脑损伤的新途径--抑制神经元凋亡

近年对细胞死亡机制尤其是对凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)的研究 ,使人们对迟发性神经元死亡有了新的认识。缺血后脑损伤的发生不仅与神经细胞坏死有关 ,而且与凋亡关系密切。目前认为迟发性神经元死亡即是凋亡。该理论在成年动物全脑[1] 、局部脑缺血[2 ,3 ] 、新生动物缺氧缺血性脑损伤[4 ,5] 、人类心跳骤停后[1] 、婴儿猝死综合征[6] 、新生儿窒息[7] 均已得到证实。随着分子生物学技术飞速发展 ,及凋亡机制的逐步阐明 ,通过抑制神经元凋亡防治脑缺血损伤成为研究脑保护的热门课题。本文重点介绍有关抑制神经元凋亡的前沿研究。一、抑制凋…     

刺五加皂甙对自由基作用和无血清培养条件下两种神经元衰老模型细胞的保护作用

目的：对体外小鼠胎鼠皮质神经元采用自由基作用和无血清培养条件建立衰老模型，观察刺五加皂甙对衰老神经元的保护作用。方法：实验于2000-05／11在南通大学航海医学研究所生化教研室完成。选择孕15～17d的小鼠胎鼠，在无菌条件下，分离大脑皮质，进行原代细胞培养。自由基作用建立神经元衰老模型：①模型组：H2O2和FeS04加入到被培养7d的神经细胞内。②刺五加皂甙组：在H2O2和FeSO4处理前后24h加入12．5，25，50mg／L的刺五加皂甙。③正常对照组：不加FeSO4和H2O2及刺五加皂甙。无血清培养建立神经元衰老模型：①模型组：加入无血清的L15培养基。②刺五加皂甙组：从无血清培养前24h和无血清培养过程中分别加入12．5，25，50mg／L的刺五加皂甙。③正常对照组：在无血清处理前测各项指标。观察刺五加皂甙对两种衰老条件下的神经元存活率，乳酸脱氢酶活性，超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响。并在光镜和电镜下观察神经细胞形态。结果：自由基作用条件下：①神经细胞的存活率：12．5, 25, 50mg／L刺五加皂甙组高于模型组。②乳酸脱氢酶活性和丙二醛含量：12．5, 25, 50mg／L刺五加皂甙组均低于模型组[（0．542&;#177;0．020），（0.505&;#177;0.022），（0.502&;#177;0.076），（0．613&;#177;0．063） μkat；（10．20&;#177;0．51），（9．17&;#177;0．9），（8．95&;#177;1．72），（11．46&;#177;1．23） μmol／g，P〈0．05～0．01]。③超氧化物歧化酶活性：12．5，25，50mg／L刺五加皂甙组明显高于模型组[（32．91&;#177;1．71），（32．91&;#177;1．71），（36．10&;#177;5．37），（30．37&;#177;1．83）NU／mg，（P〈0．05-0．01）]。无血清培养条件下：①神经细胞的存活率：12．5，25，50mg／L刺五加皂甙组高于模型组。②乳酸脱氢酶活性和丙二醛含量：12．5，25，50mg／L刺五加皂甙组均低于模型组[（0．333&;#177;0．018）。（0．302&;#177;0．027），（0．309&;#177;0．064），（0．385&;#177;0．044） μkat；（7．07&;#177;0．18）。（6．33&;#177;0．48）．（6．64&;#177;1．58），（8．38&;#177;1．02） μmol／g，P〈0．05-0．01]。③超氧化物歧化酶活性：12．5，25，50mg／L刺五加皂甙组明显高于模型组[（33．98&;#177;1．52），（37．85&;#177;9．71），（38．40&;#177;6.29），（31.23&;#177;2．07）NU／mg，P〈0．05-0.01]。显微镜及扫描电镜观察，加用刺五加皂甙保护的神经细胞损伤明显减轻。部分细胞形态基本趋于正常。结论：刺五加皂甙通过降低脂质过氧化物含量，增加自由基清除力；增强细胞膜稳定性，提高皮质神经元的存活率来发挥对神经元的保护作用，改善其功能，从而延缓了神经细胞的衰老。形态学变化也表明刺五加皂甙能明显减轻衰老神经元细胞的损伤，减缓其衰老。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的 从组织形态学和行为学来探讨高压氧（HBO）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的保护作用。方法 将117只健康7日龄Sprague—Dawley新生大鼠随机分为正常对照组（CON组）、HIBD组、高压空气治疗组（HBA组）和高压氧治疗组（HBO组）。采用Rice法制作HIBD模型。HBO组和HBA组于缺氧缺血处理后即行HBO或高压空气治疗，每天1次，共治疗7d。大鼠9日龄时采用原位缺口末端标记法（TUNEL法）检测皮质和海马细胞凋亡情况，14日龄时检测左／右脑重比值及体重增长率，30日龄时进行放射型迷宫觅水测试，试验结束后（35日龄）采用Nissl染色法检测海马CA1区锥体细胞密度。结果 ①HIBD组体重增长率和左／右脑重比值均明显低于CON组（P〈0．01）；HBA组与HBO组治疗后体重增长率均无明显改善，但左／右脑重比值均明显增加，尤其是HBO组（P〈0．01）。②与CON组比较，HIBD组皮质和海马中均存在大量的凋亡细胞，CA1区锥体细胞密度明显下降（均P〈0．01）；与HIBD组比较，HBO组凋亡细胞明显减少，CA1区锥体细胞密度明显增加（均P〈0．01）；HBA组凋亡细胞和CA，区锥体细胞密度均无明显改变。③行为学检测结果显示，HIBD组觅水时间、错误次数和重复次数均明显高于CON组（P〈0．05）；HBO组各项指标均明显低于HIBD组（P〈0．05），而HBA组改善不明显。结论 HBO治疗在近期内能够减轻脑组织缺血后损伤，对远期学习记忆功能的恢复也有良好的促进作用。     

人参皂苷 Rb1对谷氨酸导致海马神经元损伤的保护作用

目的在体外研究人参皂苷Rb1（ GRb1）对谷氨酸漏出所导致海马神经元损伤的保护作用,并探讨可能的作用机制。方法培养至10 d的海马神经元分为谷氨酸损伤组和GRb1治疗组,以MTT法测定细胞存活率,以Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡,丙二醛（ MDA）、超氧化物歧化酶（ SOD）测定细胞氧化损伤程度。结果与正常对照组比较,谷氨酸（1.25、2.5、5、10μmol/L ）作用2 h后细胞活力下降,分别为（93.9±2.1）％、（82.3±1.4）％、（51.2±1.2）％、（32.7±1.3）％。其中谷氨酸5μmol/L作用2 h后存活（51.2±1.2）％的细胞（与对照组比较,P＜0.01）,接近对照组的50％。与对照组相比,给予5μmol/L谷氨酸作用2 h后,谷氨酸组脂质过氧化产物MDA水平上升[（7.52±0.11）nmol/mg pro vs．（3.93±0.36）nmol/mg pro];抗氧化的SOD活性明显下降[（37.28±1.72）NU/mg pro vs．（55.39±1.73）NU/mg pro]。同时观察到大量的凋亡细胞出现[（34.5±1.8）％,与对照组比较,P＜0.01]。而与谷氨酸组（5μmol/L,2 h）相比, GRb1（1、10、100、200μmol/L）能够明显提高细胞存活率,分别是（64.9±1.7）％、（72.3±2.2）％、（70.4±3.2）％、（71.6±2.3）％,P＜0.01,GRb11、10、100μmol/L组可以观察到MDA水平的轻度下降,但与谷氨酸组比较没有统计学差异,GRb110、100μmol/L可以提高SOD活性（ P＜0.01）,GRb11μmol/L组未观察到该效应。给予GRb11、10、100μmol/L 干预后细胞凋亡率下降,分别为（27.3±1.7）％、（19.4±1.2）％、（23.5±1.9）％,P＜0.01。结论 GRb1具有良好的神经保护作用,其保护作用与抗氧化及抗凋亡有关。     

缺血预处理对缺血性脑损伤的保护作用

急性脑损伤后药物治疗和神经功能的恢复尚不能令人满意。近年来,通过缺血预处理激活脑组织的内源性抗损伤保护机制及损伤后的修复机制受到重视,为脑损伤的临床保护治疗提供了新的理念和方法。该文就缺血预处理对缺血性脑损伤的保护作用的研究进展作以综述。     

刺五加皂甙对自由基作用和无血清培养条件下两种神经元衰老模型细胞的保护作用

目的:对体外小鼠胎鼠皮质神经元采用自由基作用和无血清培养条件建立衰老模型,观察刺五加皂甙对衰老神经元的保护作用。方法:实验于2000-05/11在南通大学航海医学研究所生化教研室完成。选择孕15～17d的小鼠胎鼠,在无菌条件下,分离大脑皮质,进行原代细胞培养。自由基作用建立神经元衰老模型:①模型组:H2O2和FeSO4加入到被培养7d的神经细胞内。②刺五加皂甙组:在H2O2和FeSO4处理前后24h加入12.5,25,50mg/L的刺五加皂甙。③正常对照组:不加FeSO4和H2O2及刺五加皂甙。无血清培养建立神经元衰老模型:①模型组:加入无血清的L15培养基。②刺五加皂甙组:从无血清培养前24h和无血清培养过程中分别加入12.5,25,50mg/L的刺五加皂甙。③正常对照组:在无血清处理前测各项指标。观察刺五加皂甙对两种衰老条件下的神经元存活率,乳酸脱氢酶活性,超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响。并在光镜和电镜下观察神经细胞形态。结果:自由基作用条件下:①神经细胞的存活率:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组高于模型组。②乳酸脱氢酶活性和丙二醛含量:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组均低于模型组犤(0.542±0.020),(0.505±0.022),(0.502±0.076),(0.613±0.063)μkat;(10.20±0.51),(9.17±0.9),(8.95±1.72),(11.46±1.23)μmol/g,P<0.05～0.01犦。③超氧化物歧化酶活性:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组明显高于模型组犤(32.91±1.71),(32.91±1.71),(36.10±5.37),(30.37±1.83)NU/mg,(P<0.05～0.01)犦。无血清培养条件下:①神经细胞的存活率:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组高于模型组。②乳酸脱氢酶活性和丙二醛含量:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组均低于模型组犤(0.333±0.018),(0.302±0.027),(0.309±0.064),(0.385±0.044)μkat;(7.07±0.18),(6.33±0.48),(6.64±1.58),(8.38±1.02)μmol/g,P<0.05～0.01犦。③超氧化物歧化酶活性:12.5,25,50mg/L刺五加皂甙组明显高于模型组犤(33.98±1.52),(37.85±2.71),(38.40±6.29),(31.23±2.07)NU/mg,P<0.05～0.01犦。显微镜及扫描电镜观察,加用刺五加皂甙保护的神经细胞损伤明显减轻,部分细胞形态基本趋于正常。结论:刺五加皂甙通过降低脂质过氧化物含量,增加自由基清除力;增强细胞膜稳定性,提高皮质神经元的存活率来发挥对神经元的保护作用,改善其功能,从而延缓了神经细胞的衰老。形态学变化也表明刺五加皂甙能明显减轻衰老神经元细胞的损伤,减缓其衰老。     

肢端缺血预处理对缺血性脑损伤保护作用的初探

[目的]通过观察肢端缺血预处理(LIP)对大鼠脑缺血性损伤后炎症反应及海马区神经元细胞的影响,探讨LIP对脑缺血的保护作用.[方法]选取36只SD大鼠,实验组(LIP组)15只、缺血组15只和对照组6只.实验组和缺血组设立5个时间点:6h、12h、24h、48h和72h,每点3只.通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血模型及LIP法建立脑缺血耐受模型,观察并计算每组大鼠的神经功能缺损评分(NSS)、脑组织形态学与组织学改变、炎性细胞计数以及神经元密度的变化.[结果]缺血组和实验组在各时间点的NSS均无统计学差异.实验组脑组织学病理改变程度明显轻于缺血组;在24h、48 h和72h时间点,实验组炎性细胞计数明显少于缺血组,海马CA1区正常神经元细胞明显多于缺血组,且两组相比均有统计学差异(P＜0.05).[结论]LIP诱导脑缺血耐受,可以减轻脑部炎症反应和延迟海马区神经元死亡,从而减轻缺血后脑组织损伤,对缺血性脑损伤有一定的保护作用.     

腺苷三磷酸-氯化镁对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的干预作用

目的：探讨腺苷三磷酸-氯化镁对新生大鼠缺氧缺血脑损伤脑细胞凋亡的影响。方法：实验于2003—03／08在延边医学院儿科实验室完成。选用7d龄Wistar大鼠75只随机分为5组，即正常对照组15只，缺氧缺血性脑损伤组15只，生理盐水组15只，腺苷三磷酸治疗组15只，腺苷三磷酸-氯化镁治疗组15只，制备缺氧缺血性脑损伤模型腹腔内注射腺苷三磷酸及腺苷三磷酸-氯化镁，在缺氧缺血后72h麻醉状态下处死，取脑组织常规固定，切片行苏木精-伊红染色及原位缺口末端标记染色，测定脑细胞凋亡细胞数、凋亡百分率及凋亡面密度。结果：进入统计分析的大鼠为73只，模型组和腺苷三磷酸组各有1只大鼠在制作模型过程中死亡。①缺氧缺血性脑损伤组凋亡细胞数、凋亡百分率、凋亡面密度明显高于正常对照组[（34．24&;#177;3．96），（6．93&;#177;1．39）个／视野；（48．91&;#177;5．66）％，（9．90&;#177;1．98）％；（41．00&;#177;0．03）％，（7．93&;#177;0．0175）％，P〈0．01]。②腺苷三磷酸组凋亡细胞数、凋亡百分率、凋亡面密度与缺氧缺血性脑损伤组及生理盐水组较接近（P〉0．05）。③腺苷三磷酸一氯化镁凋亡细胞数、凋亡百分率、凋亡面密度[（16．27&;#177;2．55）个／视野，（23．24&;#177;3．64）％，（22．00&;#177;0．0262）％]明显低于缺氧缺血性脑损伤组、生理盐水组及腺苷三磷酸治疗组（P〈0．01）。结论：腺苷三磷酸-氯化镁能通过血脑屏障，抑制脑细胞凋亡，对缺氧缺血脑细胞有保护作用。     

三七皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨三七皂甙对大鼠脑缺血再灌注后的保护作用。方法采用线栓法建立鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注模型。于缺血2h再灌注22h,测定脑梗死体积并观察血脑屏障破坏的程度。结果再灌注后22h,三七皂甙治疗组可有效降低脑梗死体积,明显减轻脑缺血区血脑屏障破坏的程度。结论三七皂甙对脑缺血再灌注有确切的脑保护作用,并能减轻脑缺血再灌注对血脑屏障破坏的程度。     

红光照射对大鼠缺氧缺血性脑损伤急性期凋亡因子表达的影响

目的 观察红光照射对大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)急性期凋亡因子Caspase-8及Caspase-3表达的影响.方法 采用随机数字表法将45只SD大鼠分为假手术组、缺氧缺血性脑损伤组(简称模型组)及红光照射组.采用经典Rice法将模型组及红光照射组大鼠制成HIBD模型,假手术组仅分离左颈总动脉后缝合.红光照射组于HIBD损伤后立即对其额顶部进行红光照射,连续照射3d.于制模后第3天时取各组大鼠损伤侧海马组织,采用实时PCR技术检测Caspase-8及Caspase-3 mRNA表达,采用Western blot 技术检测Caspase-8及Caspase-3蛋白表达;采用免疫荧光法观察各组大鼠Caspase-8及Caspase-3定位并进行半定量分析.结果 制模后第3天时发现模型组和红光照射组Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达均较假手术组明显增强(P＜0.05);红光照射组Caspase-8基因表达(1.55 ±0.12)及蛋白表达(0.70 ±0.18)、Caspase-3基因表达[(1.48±0.16)×10-4]及蛋白表达(0.74 ±0.13)均较模型组显著降低(P＜0.05).结论 红光照射可通过抑制细胞凋亡因子Caspase-8、Caspase-3表达,减轻HIBD急性期神经细胞凋亡,从而发挥HIBD治疗作用.     

刺五加皂甙保护PC12细胞活性与缺氧诱导因子1α的表达

目的：观察刺五加皂甙对正常培养和缺氧条件下PC12细胞的活性和缺氧诱导因子1α表达的影响，探讨刺五加皂甙抗神经元缺氧损伤的可能机制。 方法：实验于2004—09／2005—05在南通大学医学院航海医学研究所进行。培养大鼠肾上腺嗜铬瘤PC12细胞株，加入终浓度为0．05mg／L的神经生长因子和终浓度为12.5mmol／L的氯化钻分别建立神经生长因子诱导PC12细胞分化的神经元模型和氯化钴诱导缺氧的模型；四甲基偶氮唑法检测12．5，25，50，100，150mg／L的刺五加皂甙对正常培养的和氯化钴诱导缺氧的PC12细胞活性的影响；蛋白免疫印迹检测刺五加皂甙对正常培养和氯化钴诱导缺氧的PC12细胞中缺氧诱导因子1α表达的影响，以上实验均以神经生长因子作为阳性对照。 结果：①正常培养的PC12细胞为圆形，呈簇状生长。50mg／L神经生长因子诱导3d后，细胞停止增殖，部分PC12细胞开始呈现出神经元样的形态，产生类似于神经元的突起。随着诱导时间延长神经元样的细胞逐渐增多。至第7天，PC12细胞的突起形成网络。②12.5～100mg／L的刺五加皂甙可增加正常培养PC12细胞的活性，其中50mg／L刺五加皂甙作用最强。50mg／L刺五加皂甙的预处理可降低因缺氧引起的细胞活性的下降（P〈0．01），其作用与50mg／L神经生长因子相当（P〉0.05）。③正常培养的PC12细胞不表达缺氧诱导因子1α，氯化钴引起的缺氧可诱导PC12细胞表达缺氧诱导因子1α，刺五加皂甙、神经生长因子也可诱导缺氧诱导因子14表达；刺五加皂甙和神经生长因子的预处理可以进一步增强缺氧PC12细胞中缺氧诱导因子1α的表达（P〈0．01），刺五加皂甙和神经生长因子的作用差异无显著性（P〉0．05）。 结论：50mg／L的刺五加皂甙对PC12具有明显的缺氧保护作用，其抗缺氧损伤的作用与促进缺氧诱导因子1α的表达有关。     

刺五加皂甙保护PC12细胞活性与缺氧诱导因子1α的表达

目的:观察刺五加皂甙对正常培养和缺氧条件下PC12细胞的活性和缺氧诱导因子1α表达的影响,探讨刺五加皂甙抗神经元缺氧损伤的可能机制。方法:实验于2004-09/2005-05在南通大学医学院航海医学研究所进行。培养大鼠肾上腺嗜铬瘤PC12细胞株,加入终浓度为0.05mg/L的神经生长因子和终浓度为125mmol/L的氯化钴分别建立神经生长因子诱导PC12细胞分化的神经元模型和氯化钴诱导缺氧的模型;四甲基偶氮唑法检测12.5,25,50,100,150mg/L的刺五加皂甙对正常培养的和氯化钴诱导缺氧的PC12细胞活性的影响;蛋白免疫印迹检测刺五加皂甙对正常培养和氯化钴诱导缺氧的PC12细胞中缺氧诱导因子1α表达的影响,以上实验均以神经生长因子作为阳性对照。结果:①正常培养的PC12细胞为圆形,呈簇状生长。50mg/L神经生长因子诱导3d后,细胞停止增殖,部分PC12细胞开始呈现出神经元样的形态,产生类似于神经元的突起。随着诱导时间延长神经元样的细胞逐渐增多,至第7天,PC12细胞的突起形成网络。②12.5～100mg/L的刺五加皂甙可增加正常培养PC12细胞的活性,其中50mg/L刺五加皂甙作用最强。50mg/L刺五加皂甙的预处理可降低因缺氧引起的细胞活性的下降(P<0.01),其作用与50mg/L神经生长因子相当(P>0.05)。③正常培养的PC12细胞不表达缺氧诱导因子1α,氯化钴引起的缺氧可诱导PC12细胞表达缺氧诱导因子1α,刺五加皂甙、神经生长因子也可诱导缺氧诱导因子1α表达;刺五加皂甙和神经生长因子的预处理可以进一步增强缺氧PC12细胞中缺氧诱导因子1α的表达(P<0.01),刺五加皂甙和神经生长因子的作用差异无显著性(P>0.05)。结论:50mg/L的刺五加皂甙对PC12具有明显的缺氧保护作用,其抗缺氧损伤的作用与促进缺氧诱导因子1α的表达有关。     

氯沙坦对脑缺血-再灌流损伤保护作用的实验研究

目的研究氯沙坦对脑缺血再灌流大鼠神经功能的影响.方法 32只Wistar大鼠被随机分为氯沙坦用药组、缺血再灌流组、假手术组和正常对照组,每组各8只.用药组给予氯沙坦(10mg*kg-1*d-1)灌胃,其余3组给予生理盐水灌胃.2周后制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血4h再灌流2h后断头处死,处死前进行神经功能评分,用TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法检测神经细胞c-fos、c-jun蛋白的表达.结果氯沙坦用药组神经功能评分、细胞凋亡率及c-fos和c-jun阳性细胞率均明显低于未用药缺血再灌流组(P＜0.05).结论氯沙坦可抑制脑缺血再灌流诱导的c-fos、c-jun蛋白表达和细胞凋亡并降低神经功能评分,对脑缺血再灌流损伤有一定保护作用.     

L-精氨酸对创伤性休克大鼠的保护作用研究

目的　探讨左旋精氨酸 (L -Arg)对创伤性休克大鼠的保护作用。方法　通过外力致大鼠双侧后肢骨折 ,制作创伤性休克模型 ,复苏时分别输注L -Arg 10、10 0、30 0mg/kg ,非选择性一氧化氮合成酶 (NOS)抑制剂L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME 10mg/kg) ,诱导型NOS (iNOS)选择性抑制剂氨基胍 (AG 10 0mg/kg)观察存活时间、存活率。结果　L -Arg诸组及AG组大鼠存活时间显著延长 ,存活率提高。结论　L -Arg对创伤性休克大鼠具有保护作用。     

高压氧对大鼠脑缺血后NOS阳性神经元的影响

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)阳性细胞在大鼠急性局灶性脑缺血 /再灌注损伤和高压氧 (HBO)治疗后表达的变化。方法　应用血管内细丝栓堵大脑中动脉 (MCA)的局灶性脑缺血大鼠模型 ,利用黄递酶 -NADPH组织化学方法 ,观察MCA缺血 1h ,再灌注 4、11、2 3、71hNOS阳性细胞在视交叉平面梗死区皮层、视前区、纹状体外侧区和纹状体内侧区域分布的变化 ,在以上期间应用 0 2 5MPaHBO于开始缺血后 2、9、2 1、4 5和 6 9h分别治疗 1次 (1h)。结果　脑缺血后 ,在上述区域形态改变的NOS阳性细胞数随着再灌注时间的延长逐渐增多。HBO治疗后 ,各时间点在皮层、视前区和纹状体内侧区 ,形态改变的NOS阳性细胞数明显减少 (P <0 0 5 ) ,而纹状体外侧区无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　HBO可明显抑制大鼠急性局灶性脑缺血 /再灌注损伤区NOS阳性细胞的变性     

血塞通预处理对心肌缺血再灌注损伤的早期保护作用

目的观察血塞通预处理对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的早期保护作用,并研究其可能机制.方法采用开胸冠状动脉结扎建立缺血再灌注模型,25只雄性SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注组(I/R组),缺血预处理组(IPC组),血塞通预处理组(PNS预处理组).再灌注后2 h测定各组血清肌酸磷酸激酶-MB(CK-MB)含量以及心肌细胞凋亡情况和心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达,并观察心肌超微结构变化.结果IPC组及PNS预处理组血清CK-MB均明显低于I/R组(P＜0.05).IPC组及PNS预处理组TUNEL阳性细胞数,Bax阳性细胞数均明显低于I/R组(P＜0.05).和I/R组相比,IPC组及PNS预处理组心肌超微结构损伤减轻.结论PNS预处理后心肌细胞凋亡减少,心肌细胞损伤减轻,对I/R损伤产生有和缺血预处理类似的早期保护作用.     

辛伐他汀对新生鼠脑缺氧缺血后海马区一氧化氮合酶的影响

目的探讨新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)后海马区各型一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及辛伐他汀对其的调节作用。方法选用7日龄SD大鼠,随机分组、建立新生大鼠HIBD模型后,于不同时间点剥取脑海马,测定各型NOS的变化并比较各组之间的差别。结果HIBD后生理盐水组诱导型NOS(iNOS)活力水平于12h时始显著增高,48h达高峰,7d时接近假手术组水平(P>0.05),12h、24h、48h、72h时胞二磷胆碱组、辛伐他汀组明显低于生理盐水组,72h时,辛伐他汀组显著低于胞二磷胆碱组(P<0.01)。生理盐水组结构型NOS(cNOS)水平于0h即显著升高,然后逐渐下降,72h时接近假手术组水平,而胞二磷胆碱组、辛伐他汀组仍继续增高,48h达高峰,但辛伐他汀组升高更显著。结论各型NOS均参与了HIBD的发病过程,辛伐他汀和胞二磷胆碱对新生大鼠HIBD的保护作用与其调节NOS有关,且辛伐他汀的作用更强。