透明质酸对白细胞介素-1β诱导软骨细胞iNOS活性和表达的影响

目的:研究透明质酸对重组大鼠白细胞介素-1β(rrIL-β)诱导体外骨关节炎软骨细胞iNOS活性和表达的影响,并探讨其作用机制.方法:体外分离、培养大鼠软骨细胞成功后,加入不同浓度的透明质酸(10,20,40 mg/L)1 h后,以10 μ g/L IL-1β刺激,培养24 h后,通过RT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达;以Griess反应测定上清液中一氧化氮(NO)浓度,并通过iNOS催化L-精氨酸和分子氧反应生成NO推算iNOS的活力.结果:透明质酸可有效抑制IL-1β诱导骨关节炎软骨细胞iNOS的活性和NO的产量;RT-PCR检测显示透明质酸能抑制iNOS的mRNA表达,且呈现剂量依赖的趋势.结论:透明质酸能通过降低iNOS的活性和其蛋白表达,来抑制骨关节炎软骨细胞上清液中NO的含量.     

川芎嗪对IL-1β诱导的兔原代软骨细胞iNOS表达和NO合成的影响

目的观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对IL-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的兔原代软骨细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达及一氧化氮(NO)合成的影响。方法体外培养兔软骨细胞,用甲苯胺蓝染色检测蛋白多糖,免疫荧光检测兔原代软骨细胞Ⅱ型胶原;用IL-1β10 ng/ml和(或)不同浓度(5、10、15、20μg/ml)川芎嗪共培养兔原代软骨细胞48 h后,RT-PCR和免疫组化检测iNOS基因及蛋白表达;用硝酸还原法检测细胞培养上清液NO的表达。结果软骨细胞呈三角形或多角形,蛋白多糖表达于细胞质中,Ⅱ型胶原主要表达于细胞质,少见于细胞核。与对照组比较,IL-1β单独作用软骨细胞iNOS和NO的表达显著增加(P<0.01);IL-1β和川芎嗪联合作用后,软骨细胞iNOS和NO的表达较IL-1β单独作用显著降低(P<0.05,P<0.01),但仍显著高于对照组(P<0.01)。结论川芎嗪能有效抑制IL-1β诱导兔软骨细胞iNOS的表达和NO的合成。     

大骨节病、骨关节炎软骨细胞分泌IL-1β、TNF-α及透明质酸对其影响实验研究

目的:探讨在不同剂量透明质酸作用下,人大骨节病(KBD)软骨细胞和骨关节炎(OA)软骨细胞对IL-1β、TNF-α合成分泌的影响,为临床上透明质酸钠治疗OA及KBD提供实验依据。方法:将符合临床诊断标准的KBD及OA患者与从遭遇意外事故的病人作为正常对照,分离、体外培养三组患者关节软骨细胞,分别给予100μg/ml(H100组)、500μg/ml(H500组)不同剂量的透明质酸钠(HA)干预及阴性对照(0.00μg/ml,H0组),通过放免测定细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α的含量变化。结果:与正常组比较,KBD和OA组软骨细胞IL-1β、TNF-α明显增高;HA干预随其剂量增高抑制IL-1β、TNF-α合成增强,对TNF-α的抑制有统计学意义。结论:骨关节炎和大骨节病患者软骨细胞合成分泌IL-1β、TNF-α明显增加;应用透明质酸后,可降低两种炎性因子的分泌。     

细胞因子在气道上皮细胞iNOS表达中的作用研究

目的　探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶 (inducible nitric oxide synthase,i NOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮 (NO)产生中的调节作用。方法　取原代培养的大鼠气道上皮细胞用 IL- 1β(10 ng/ ml)或 TNF- α(5 ng/ m l)处理 16小时 ,而后用特异性引物 RT- PCR研究 i NOS m RNA的表达 ,用特异性抗 i NOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究 i NOS蛋白的表达。NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良 Griess法。结果　 RT- PCR显示 ,经 IL- 1β及 TNF- α处理 16小时的大鼠气道上皮细胞表达 i NOS m R-NA。免疫组织化学提示 ,IL- 1β及 TNF- α可诱导大鼠气道上皮细胞 i NOS蛋白的表达并刺激 NO产生 ,其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高 (P<0 .0 1)。结论　气道上皮细胞具有表达 i NOS的能力。细胞因子 IL- 1β及TNF- α可诱导大鼠气道上皮细胞 i NOS的表达及 NO产生     

IL-1β对人晶体上皮细胞中NO和iNOS活性的影响

目的：探讨白细胞介素-1β（interleukin-1,βIL-1β）对人晶体上皮细胞（human lens epithelial cells,HLEC）中一氧化氮（nitric oxygen,NO）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）活性的影响。方法：用IL-1β作用于HLEC后,用MTT法检测细胞增殖;用Griess法测定NO含量和iNOS的活性。结果：IL-1β作用于HLEC 24 h后刺激细胞增殖,NO含量增高,iNOS活性增高。结论：IL-1β诱导的NO和iNOS在HLEC增殖中可能发挥重要作用。     

白藜芦醇对白细胞介素-1β诱导软骨细胞iNOs表达的影响

目的:探讨白藜芦醇对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导下大鼠软骨细胞细胞一氧化氮合酶(i NOs)表达的影响。方法:体外培养大鼠膝关节软骨细胞,用IL-1β(10μg/L)刺激,并不加或加入不同浓度的白藜芦醇处理,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测i NOs基因及相关蛋白表达。结果:IL-1β诱导下软骨细胞i NOs的表达显著增加(和对照组比较,P<0.05),而加入不同浓度白藜芦醇能明显抑制IL-1β诱导软骨细胞i NOs的表达。结论:白藜芦醇抑制IL-1β诱导软骨细胞i NOs的表达是其保护骨关节炎软骨细胞的机制之一。     

复元胶囊对兔膝骨关节炎滑膜IL-1β、MMP-13及iNOS表达的影响

目的:通过观察复元胶囊对实验性兔膝骨关节炎(Osteoarthritis,OA)滑膜组织形态学变化的影响,以及复元胶囊对滑膜自细胞介素-1β(Interleukin-1β)、基质金属蛋白酶-13(Matrix metallo proteinase-13)及诱导型一氧化氮合酶(Induced nitric oxide synthase)表达的影响,探讨具有补益肝肾、益气活血作用的复元胶囊对实验性兔膝OA的治疗作用及其机理.方法:60只新西兰兔,随机分为复元胶囊低、中、高剂量组、模型组和正常组.用改良Hulth法制造兔膝OA模型,中药组给予复元胶囊灌胃,模型组给予生理盐水灌胃,连续分别用药4、8周和12周.HE染色光镜观察滑膜组织形态并评分,透射电镜观察滑膜组织超微结构,免疫组化检测滑膜IL-1β、MMP-13及iNOS的表达.实验后对滑膜评分和3个指标(IL-1β、MMP-13、iNOS)进行前后比较和组间比较.结果:复元胶囊低、中、高剂量组3个时间段的滑膜炎症明显小于同期模型组(P<0.05).这3个治疗组3个时间段的滑膜IL-1β、MMP-13及iNOS的表达显著低于同期模型组(P<0.05),中、高剂量组的差异非常显著(P<0.01).结论:复元胶囊可明显改善实验性兔膝OA滑膜组织形态学的病理改变,显著抑制实验性兔膝OA滑膜组织的IL-1β、MMP-13和iNOS的表达.复元胶囊可改善实验性兔膝OA滑膜组织形态学的病理改变的作用与其抑制滑膜组织IL-1β、MMP-13和iNOS的表达密切相关.     

细胞因子在气道上皮细胞iNOS表达中的作用研究

目的：探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮（NO）产生中的调节作用。方法：取原代培养的大鼠气道 上皮细胞用IL－1β(10ng/ml)或TNF－α（5ng/ml)处理16小时，而后用特异性引物RT－PCR研究iNOS mRNA的表达，用特异性抗iNOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究iNOS蛋白的表达。NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良Griess法。结果：RT－PCR显示，经IL－1β及TNF－α处理16小时的大鼠气道上皮细胞表达iNOS mRNA。免疫组织化学提示，IL－1β及TNF－α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS蛋白的表达并刺激NO产生，其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高（P＜0．01）。结论：气道上此细胞具有表达iNOS的能力。细胞因子IL－1β及TNF-α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS的表达及NO产生。     

萆薢化浊栓对大鼠前列腺组织中TNF-α、IL-1β及iNOS作用的实验研究

目的：从免疫学角度,进一步探讨慢性非细菌性前列腺炎可能的病机,以及萆薢化浊栓在其中的可能作用机制。方法：应用大鼠前列腺蛋白提纯液辅以双重免疫佐剂造成实验性慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型,以空白栓为空白对照组,前列安栓为阳性对照组,分别检测TNF-α、IL-1β在前列腺组织中的含量以及iNOS的表达水平。结果：萆薢化浊栓高剂量组、前列安栓对照组IL-1β、TNF-α含量以及iNOS的表达与模型对照组有显著性差异（P〈0．01）。结论：萆薢化浊栓对免疫性大鼠慢性非细菌性前列腺炎有治疗效果,其效果与剂量相关,其作用可能主要是通过抑制炎症及免疫调节而实现。免疫因素可能是慢性非细菌性前列腺炎重要致病因素之一。     

华中五味子酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内IL-1β及iNOS表达的影响

目的:观察华中五味子酮(schisandrone)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)样大鼠海马内白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA水平的影响,探讨华中五味子酮对AD可能的防治作用.方法:30只雄性SD大鼠, 8～12周龄,体质量250～300 g,随机分为3组:空白对照组、AD模型组和华中五味子酮干预组(n=10).采用侧脑室立体定向注射β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein)Aβ25-35(溶于无菌生理盐水,浓度10 mmol/L)的方法,建立AD的动物模型,并用华中五味子酮(溶于玉米油,浓度1 mmol/L)灌胃进行药物干预,通过半定量RT-PCR的方法观察华中五味子酮对AD样大鼠海马区IL-1β及iNOS mRNA水平的影响.结果:用华中五味子酮干预,AD样大鼠海马内IL-1β及iNOS mRNA水平(0.333 7±0.122 3和0.266 6±0.088 5)较AD样大鼠(0.969 3±0.153 9和0.666 0±0.121 1)有显著降低(P<0.001).结论:华中五味子酮能够抑制Aβ诱导的氧化应激和炎性反应,在AD发病中可能具有保护作用.     

诱生型一氧化氮合成酶N端蛋白的诱导表达与纯化

诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）Ｎ端蛋白的表达,对阐明其功能和制备ｉＮＯＳ特异性抗体具有重要意义。本文对ｉＮＯＳ１ １９６ＡＡ重组蛋白在大肠杆菌中的表达条件进行了优化,结果表明：在优化条件下,经ＩＰＴＧ诱导,重组蛋白表达量可达菌体蛋白的１５％２０％。为获得重组蛋白纯品,建立了Ｈｉｓ．ＢｉｎｄＴＭ柱亲和层析法和凝胶蛋白的两步纯化法,得到了电泳纯级的重组蛋白     

COX-2和iNOS在肺癌组织中的表达及其临床意义

[目的]研究诱导型环氧化酶(COX-2)和一氧化氮合酶(iNOS)在肺癌组织中的表达及其临床意义.[方法]用免疫组化法检测42例肺癌组织中COX-2和iNOS蛋白表达.[结果]COX-2和iNOS表达的阳性率分别为31%和33%;COX-2表达与术后生存期的长短呈负相关;iNOS与肿瘤组织的分化程度密切相关,分化越低,iNOS表达越强;COX-2与iNOS表达之间未见相关性.[结论]COX-2和iNOS在肺癌中表达与否与患者的预后相关.     

透明质酸对体外培养大鼠退变关节软骨细胞的影响

目的:观察体外培养大鼠关节软骨生长特性及分泌蛋白多糖(PG)功能,研究中分子量透明质酸(HA)对体外培养大鼠退变关节软骨细胞的影响。方法:机械分离和胰酶、胶原酶二步消化法消化,将大鼠膝、髋关节软骨细胞进行体外分离培养,白细胞介素1β(IL-1β,10μg/L)体外造模,观察中分子质量HA(分子质量2×106U)对骨关节炎细胞模型中细胞生长增殖及细胞蛋白多糖分泌功能的影响。结果:体外培养的大鼠正常关节软骨细胞呈多角形,富含分泌颗粒。当培养基中加入IL-1β后,关节软骨细胞胞质回缩,细胞内出现空泡,骨关节炎模型组细胞增殖率及蛋白多糖的含量均较空白组低(P<0.05)。加入HA的实验组软骨细胞增殖率与模型组相比无差异(P>0.05),较空白组低(P<0.05);蛋白多糖的含量较模型组高(P<0.05),与空白对照组无差异(P>0.05)。结论:HA对体外培养大鼠退变关节软骨细胞增值率无影响,但可以增加其蛋白多糖的合成。     

地塞米松对大鼠星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶活性的影响

目的：探讨地塞米松对内毒素诱导的大鼠星形胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）活性的影响。方法：应用Ｇｒｉｅｓｓ法,动态测定内毒素（ＬＰＳ）诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性的变化以及地塞米松（ＤＥＸ）对其的影响。结果：细菌ＬＰＳ能够刺激星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性的表达,且与ＬＰＳ剂量和作用时间有关,ＤＥＸ对星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性表达具有负调节作用,而且与加入ＤＥＸ的间隔时间有关。结论：星形胶质细胞ｉＮＯＳ可能参与中枢神经系统细菌感染的病理过程,而ＤＥＸ能抑制这种损害作用。     

诱导型一氧化氮合酶在哮喘大鼠肺组织的表达

目的　观察哮喘大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)活性的表达 ,探讨一氧化氮在哮喘大鼠气道炎症中的作用。方法　用卵白蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型 ,用 SP免疫组化染色方法检测肺组织 i NOS的表达并观察 i NOS在气道组织分布的改变。结果　哮喘大鼠肺组织 i NOS的表达阳性率 (90 % )明显高于正常对照组 (2 0 % ) (P<0 .0 0 1)。哮喘大鼠气道组织 i NOS表达阳性细胞主要位于气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、血管内皮和平滑肌细胞、浸润的中性粒细胞和巨噬细胞 ,而淋巴细胞表达不明显。用甲基强的松龙处理后哮喘大鼠肺组织i NOS表达阳性率 (30 % )明显降低。结论　以上结果提示一氧化氮在哮喘气道炎症中起重要作用 ,用甲基强的松龙治疗哮喘可以使哮喘大鼠肺组织中 i NOS表达阳性率降低 ,提示哮喘时产生过多的一氧化氮可能有加重气道炎症的作用     

诱生型一氧化氮合酶基因在心肌梗死大鼠中的表达

目的 :观察诱生型一氧化氮合酶基因在心肌梗死后大鼠早期的表达变化。方法 :将大鼠 36只随机分为心肌梗死组和假手术组 ,心肌梗死组又分为 1、4、8、1 2、2 4h组 ,用RT PCR检测各组心肌iNOSmRNA的表达。结果 :假手术组心肌无iNOSmRNA的表达 ,心肌梗死后 1h心肌组织即有iNOSmRNA的表达 ,8h、1 2h达到高峰 ,随后下降 ,8、1 2h和 1h相比差异显著 (P <0 .0 5 )。结论 :正常心肌组织无iNOSmRNA的表达 ,心肌梗死后早期心肌组织即有iNOSmRNA的表达     

COX-2和iNOS在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化法检测NPC组织和正常鼻咽黏膜组织中COX-2、iNOS的表达。结果:COX-2和iNOS在NPC中阳性率为77.8%和68.9%,在正常鼻咽膜中的阳性率为10%和5%,差异有统计学意义(P<0.01)。COX-2在NPC中的表达与分化程度、颈淋巴结转移密切相关(P<0.05)。iNOS在NPC中的表达与颈淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:COX-2和iNOS在NPC组织中高表达,两者在鼻咽癌的发生发展及淋巴结转移中可能起重要作用。     

颊癌模型中环氧合酶-2和诱导型一氧化氮合酶表达的意义

 [目的]研究环氧合酶-2（COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在地鼠颊囊肿瘤发生发展中的表达,探讨两者可能的相关性。[方法]90只金黄地鼠被分成两组：实验组80只,对照组10只,利用二甲基苯并蒽（9,10-dimethyl-1,2-benz-anthracene,DMBA）诱导地鼠颊囊癌变,免疫组化法检测iNOS和COX-2的动态表达。[结果]在16周时所有存活的实验组地鼠颊囊全部发生癌变,iNOS从正常黏膜、异常增生到浸润癌阳性表达率增加,分别为0%,62%,82.14%,有显著性差异;COX-2从正常黏膜、异常增生到浸润癌阳性表达率增加,分别为11.11%,16.67%,56.25%,有显著性差异;iNOS,COX-2存在呈正相关性（γ=0.279,P〈0.05）。[结论]iNOS和COX-2表达在地鼠颊囊鳞癌发展中起重要作用,并呈正相关作用。     

诱生型一氧化氮合酶在糖尿病早期大鼠肾脏中的表达

目的 观察糖尿病早期大鼠肾组织内诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达情况,探讨糖尿病早期大鼠肾组织内iNOS变化的规律与糖尿病肾病的关系.方法应用免疫组织化学链霉菌素亲和生物素--过氧化物酶连接法及图象分析方法（CIAS-1000细胞图象分析系统）,测定STZ诱发的糖尿病早期大鼠肾脏内iNOS表达并进行分析.结果（1）1周、2周组iNOS在肾小球部位的表达逐渐上升,且2周为高峰,到4周明显下降.（2）iNOS在近端小管1周、2周、4周均有表达,但无明显峰值变化.结论通过iNOS在糖尿病早期大鼠肾脏（以肾小球中表达的变化较明显）的表达,推测iNOS的表达可能参与糖尿病早期肾损害.