抗耐药性叶酸拮抗剂的研究：1—取代苯基三嗪类化合物的合…

用丙酮、二氰二胺和取代苯胺三组分法合成了９个新的１－取代苯基三嗪类化合物。测定了它们的抗癌活性，３，４，７有抑制人白血病ＨＬ－６０细胞的作用，人鼻咽癌ＫＢ细胞可被２，５，７抑制。     

喹唑啉类化合物的合成及抗肿瘤活性

目的 合成亲脂性叶酸拮抗剂２,４－二氨基－５－甲基－６－取代苄胺基喹啉类化合物,并研究其对肿瘤细胞的抑制作用。方法 以邻甲苯胺为原料设计并合成喹唑啉类化合物,用四甲基偶氮唑蓝比色法和磺酰罗丹明Ｂ法测定其对肿瘤细胞的抑制作用,结果 该类化合物对Ｌ１２１０白血病细胞有较强的抑制作用,在已测定的部分化合物的药理结果中化合物Ｄ１,Ｄ３,Ｄ５和Ｄ６对人结肠癌ＨＣＴ－８细胞,化合物Ｄ１－５对人红白细胞病Ｋ５６     

DNA末端标记法检测番荔枝内酯诱导人乳癌细胞凋亡

目的：用ＤＮＡ末端标记法（ＴＵＮＥＬ法）研究番荔枝内酯凋亡诱导作用，以及ＴＵＮＥＬ法用于凋亡检测和抗癌药所致凋亡的探讨。方法：用台盼蓝拒染法，ＴＵＮＥＬ法，ＤＮＡ凝胶电泳，电镜等技术，研究番荔枝内酯对具有多药抗药性的耐阿霉素的人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的生长抑制作用及凋亡诱导。结果：电镜下观察到细胞染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等典型的凋亡细胞形态学改变。凝胶电泳可见明显的ＤＮＡ梯形条带。ＴＵＮＥＬ法检测的凋亡细胞明显多于形态学改变的凋亡细胞。结论：番荔枝内酯对人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞具有明显生长抑制作用，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为１０．５ｍｇ／Ｌ，并诱导其凋亡。ＴＵＮＥＬ法可配合其他方法用于检测抗癌药诱导的人癌细胞凋亡及抗癌药的评价。     

三苯氧胺、放线菌素D和肿瘤坏死因子－a对人乳腺癌MCF－7细胞株的体外作用

用荧光流式细胞计和细胞簇集试验证实雌激素可促使ＭＣＦ－７细胞进入分裂周期，三苯氧胺作用与雌激素相反。放线菌素Ｄ在达到一定剂量时可直接杀死细胞而非抑制细胞进入分裂周期。肿瘤坏死因子－ａ（ＴＮＦ－ａ）对ＭＣＦ－７细胞作用类似三苯氧胺但效果远明显于三苯氧胺；放线菌素Ｄ对雌激素作用有抑制，但对三苯氧胺和ＴＮＦ－ａ作用无拮抗。     

肿瘤化疗药物对人LAK细胞活性的影响

用四氮唑（ＭＴＴ）法分别检测顺氨氯铂（ＰＤＤ），丝裂霉素－Ｃ（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＭＤ）、氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ），长春新碱（ＶＣＲ）对ＩＬ－２诱导人外周血ＬＡＫ细胞活性的影响，及其与ＬＡＫ细胞对胃癌细胞的相加杀伤作用。①ＭＭＣ、ＡＤＭ、５－Ｆｕ、ＶＣＲ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性稍有下降，Ａｒａ－Ｃ能抑制ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性，ＰＤＤ对ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞活性明显提高。     

6-氯/甲基-2/3-芳基取代喹喔啉衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的合成6-氯/甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物,并测试其对SGC-7901和HepG2肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法以4-氯/甲基邻苯二胺为起始原料,通过与草酸二乙酯环合、氯代、亲核取代反应合成6-氯/甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物(3c-1~7m-1),并用MTT法测试所得目标化合物的抗肿瘤活性。结果合成得到15个相应的目标化合物,通过IR和1 H NMR确认结构。此类化合物对SGC-7901肿瘤细胞增殖抑制作用较HepG2细胞强,6-氯-2/3-芳基喹喔啉衍生物抗肿瘤活性多数大于6-甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物。6-氯-2/3-芳基喹喔啉衍生物(5c-1)和6-甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物(7m-1)对SGC-7901细胞增殖抑制IC50值分别为2.02和0.001 6μg/mL。结论目标产物(5c-1,7m-1)对SGC-7901肿瘤细胞增殖抑制活性好,可以进行结构优化,以期开发毒副作用小、耐受性好的新型抗肿瘤药物。     

新型金雀异黄素衍生物5-羟基-4'-硝基-7-取代酰氧基异黄酮的合成及抗肿瘤活性研究

目的:对金雀异黄素进行结构改造,设计合成7-取代酰氧基-5-羟基-4'-硝基金雀异黄素衍生物,并进行抗肿瘤活性测试.方法:以氯苄为起始原料,经取代、硝化、Friedel-Crafts反应和环合,再与各种酰氯反应得到8个目标化合物.结果:合成的目标化合物经元素分析和1HNMR确证其结构;其中化合物5B(5-羟基-4'-硝-7-丙酰氧基异黄酮)体内外对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435均具有较强的抑制活性,IC50为0.017 mmol/L.结论: 金雀异黄素的4'引入硝基,同时7位丙酰化产物具有良好的抗肿瘤活性.     

PB230体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究ＰＢ２３０对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、人红白血病细胞（Ｋ５６２）和人乳腺癌细胞（ＭＣＦ－７）的生物抑制作用,探讨其抗癌作用机制,方法：采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＰＢ２３０对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＭＣＦ－７细胞系的生长抑制作用,结果：ＰＢ２３０明显抑制ＭＧＣ８０－３、Ｋ５６２和ＭＣＦ－３三种细胞系的生长,其ＩＣ５０值分别为２&;#215;１０＾－６－１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ之间,２&;#215;１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ,结论：ＰＢ２３０能直接抑制肿瘤细胞生长。     

Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7／Adr多药抗药性的靶向逆转

设计合成能切割人ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因并构建成真核细胞表达克隆（ｐＨβＡｐｒ－１ｎｅｗ／５ｍＲ３），以靶向切割耐药癌细胞株（ＭＣＦ－７／Ａｄｒ）的ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ，抑制Ｐ－糖蛋白的表达，逆转多药抗药性。方法将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞，采用斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测得Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在细胞中稳定表达，并使细胞中ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ降解８３．５％，Ｐ－糖蛋白表达明显下降（ＡＢＣ法）。结果Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞耐药性下降至敏感细胞的６倍，而无Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ耐药性是敏感细胞的１０００倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。     

VP—16诱导HL—60细胞凋亡的研究

探讨ｔｏｐｏⅡ抑制剂的抗瘤机制。方法：选择人急性早幼粒细胞白血病细胞株ＨＬ－６０为实验模型，以ＶＰ－１６为诱导剂，用形态学观察、ＤＮＡ电泳及流式细胞术（ＦＣＭ）等方法人凋亡情况进行了研究。结果：经ＶＰ－１７处理的ＨＬ－６０细胞呈典型凋亡形态学改变，出现梯状ＤＮＡ条带（ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ），ＦＣＭ ＤＮＡ直方图上Ｇ０／Ｇ１峰前是明显的亚二倍体凋亡峰。表明经ＶＰ－１６处理的ＨＬ－６０细胞的确发生了凋     

对位取代苯胺形成P－450－MI络合物构效关系的判别分析研究

本文测定了一组对位取代苯胺与未经处理或经苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体形成细胞色素Ｐ－４５０代谢中间体络合物的活性，并用Ｆｉｓｈｅｒ线性判别分析研究了它们的构效关系。结果表明，除４，４＇－二氨基二苯醚与经苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体形成细胞色素Ｐ－４５０代谢中间体络合物的活性被错分外，其余的对位取代苯胺均被正确分类；脂溶性较大和拉电子能力较强的对位取代基对形成代谢中间体络合物有利；经苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体与对位取代苯胺形成代谢中间体络合物的活性较大。     

8—氯腺苷对Molt—4细胞的生长抑制和凋亡诱导作用细胞

目的：研究８－氯腺苷（８－Ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８－Ｃｌ－Ａｄｏ）对人Ｔ淋巴母细胞白血病细胞株Ｍｏｌｔ－４的生长和凋亡的作用,以及对相关基因和ＣＲＥＢ结合活性的影响。方法：Ｐ以不同浓度８－Ｃｌ－Ａｄｏ处理体外培养的Ｍｏｌｔ－４细胞,采用ＭＴＴ法测定药舶半数抑制浓度（ＩＣ５０）,用光学显微镜、流工细胞仪和琼脂糖电泳分析细胞凋亡,分别用斑点杂交法和免疫组化法观察ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２的表达情     

板蓝根二酮 B 体外抗癌活性研究

目的：板蓝根二酮Ｂ抗人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞,卵巢癌Ａ２７８０细胞体外活性研究,方法：ＭＴＴ法测定板蓝根二酮Ｂ对肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞和卵巢癌Ａ２７８０细胞的抑制作用,集落形成实验观察药物的诱导分化作用,ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果：板蓝根二酮Ｂ具有抑制肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞、卵巢癌Ａ２７８０细胞增殖的能力,其ＩＣ５０分别为８．２μｇ／ｍＬ和７．８μｇ／ｍＬ,且具有诱导     

C-myc反义寡脱氧核苷酸抑制人乳腺癌细胞系生长的研究

采用胎盼蓝染色法，３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验和流式细胞计数分析技术研究了ｃ－ｍｙｃｍＲ－ＮＡ帽区反义寡脱氧核苷酸对人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞系增殖及其ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的影响，结果表明：ｃ－ｍｙｃ反义寡脱氧核苷酸能抑制人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞系生长和增殖，这种抑制作用有明显的剂量依赖性，同时也能抑制ＭＣＦ－７细胞ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。此外，本文对ｃ－ｍｙｃ基因调控细胞增殖及反义核苷酸的可能机制进行了探讨。     

红景天素抗肿瘤作用的研究

本研究通过体外培养５种人癌细胞（肝癌、胃癌、肺癌、Ｈｅｌａ细胞和咽癌）和小鼠移植性肿瘤实验，证明了红景天素可明显抑制３种癌细胞的生长增殖，可提高荷瘤小鼠的存活率，延长其生存期，抑瘤率在５０％以上，结果提示红景天素对体外培养３种癌细胞和小鼠Ｓ１８０细胞均有一定的抑制作用。     

6-[4-[4-(取代苯乙酮基)哌嗪基]苯基]哒嗪酮类化合物的合成及抑制血小板聚集作用

目的：设计合成一类６－（取代苯基）－４,５－二氢－３－（２Ｈ）哒嗪酮类化合物,以期发现作用更强的血小板聚集抑制剂。方法：以乙酰苯胺为原料,经酰化反应、傅－克反应、水解反应及水合肼环合反应、溴化反应、烷基化反应等一系列反应合成目标化合物,并参考Ｂｏｒｎ方法进行体外药理实验。结果：共合成６－「４－（取代哌嗪基）苯基」－４,５－二氢－３（２Ｈ）哒嗪酮类化合物１１个,均属首次报道,并通过元素分析、＾１ＨＮＭＲ确证结构。初步的体外药理实验表明：大部分目标化合物都有不同程度的抑制ＡＤＰ诱导的新西兰大白兔血小板聚集的作用。结论：首次合成了１１个６「４－「４－（取代苯乙酮基）哌嗪基」苯基」－４,５－二氢－３（２Ｈ）哒嗪酮类化合物,其中化合物（４）抑制抑制血小板聚集作用的活性最强,与先导化合物ＣＣＩ１７８１０相当,化合物（３）,     

新蒽环类抗肿瘤化合物AD—89对DNA的作用机理研究

采用琼脂糖电泳、紫外光谱法及碱性洗脱法研究新蒽环类抗肿瘤化合物ＡＤ－８９对细胞内外ＤＮＡ的作用以了解其抗肿瘤作用机理，结果发现，ＡＤ－８９能明显抑制肿瘤细胞生长，减慢超螺旋的ＰＵＣ９ＤＮＡ的电泳迁移率，小牛胸腺ＤＮＡ和ＡＤ－８９作用后可使ＡＤ－８９的紫外吸收峰出现明显红移，提示ＡＤ－８９能嵌入ＤＮＡ，ＡＤ－８９在大剂量时能引起ＤＮＡ单链断裂，但不引赶快旧白相关的ＤＮＡ单链断理解，而在５μｍｏｌ／Ｌ     

α—双炔失碳酯诱导阿霉素抗药的MCF—7乳癌细胞凋亡

目的 研究α－双炔失碳酯（α－ａｎｏｒｄｒｉｎ,ＡＮＯ）对阿霉素抗药的ＭＣＦ－７乳癌细胞（ＭＣＦ－７＾ａｄｒ细胞）的凋亡诱导作用。方法 采用形态学、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果：ＡＮＯ１０～５０μｍｏｌ／Ｌ作用４８ｈ明显抑制７＾ａｄｒ细胞的生长,诱导ＭＣＦ－７＾ａｄｒ细胞核碎裂,染色质凝缩,电泳显示核小体之间ＤＮＡ裂断。流式细胞术检测发现经ＡＮＯ作用后约有２６％的细胞出现在“亚Ｇ１     

新蒽环类抗肿瘤化合物AD─89对DNA的作用机理研究

采用琼脂糖电泳、紫外光谱法及碱性洗脱法研究新蒽环类抗肿瘤化合物ＡＤ－８９对细胞内外ＤＮＡ的作用，以了解其抗肿瘤作用机理。结果发现：ＡＤ－８９能明显抑制肿瘤细胞生长，减慢超螺旋的ＰＵＣ９ＤＮＡ的电泳迁移率；小牛胸腺ＤＮＡ与ＡＤ－８９作用后可使ＡＤ－８９的紫外吸收峰出现明显红移，提示ＡＤ－８９能嵌入ＤＮＡ；ＡＤ－８９在大剂量时能引起ＤＮＡ单链断裂，但不引起蛋白相关的ＤＮＡ单链断裂，而在５μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ浓度时均可引起明显的ＤＮＡ链间交叉联接，同时还可引起少量ＤＮＡ－蛋白交联。由此表明，ＡＤ－８９可能是一个主要通过引起细胞内ＤＮＡ链间交联而发挥抗肿瘤作用的嵌入剂。     

A—LAK细胞与LAK细胞全外增殖及抗肿瘤作用的比较

本实验观察了Ａ－ＬＡＫ细胞的体外扩增及其抗肿瘤作用，并与ＬＡＫ细胞进行了比较。结果表明，Ａ－ＬＡＫ细胞在短期内大量扩增，在培养第７天时达到增殖高峰，Ａ－ＬＡＫ细胞增１２．０２倍，而ＬＡＫ细胞增加２．６９倍，培养３周后Ａ－ＬＡＫ细胞增加５３．５０倍，而ＬＡＫ细胞仅增加４．４５倍。１８小时ＬＤＨ－Ｌ释放试验表明，Ａ－ＬＡＫ细胞对Ａｎｉｐ９７３和Ｋ５６２细胞较显示较高的杀伤活性，与ＬＡＫ细胞相比有显著差