欧前胡素抗肿瘤作用机制及治疗的研究进展

欧前胡素是从中药当归中提取的呋喃香豆素类化合物,临床上常用于治疗头痛、炎症、心血管疾病等。近年来研究发现,欧前胡素对多种类型的肿瘤细胞增殖均有抑制作用,能发挥抗肿瘤的功效。本文就欧前胡素对肿瘤及相关疾病的治疗作用和机制进行探讨,以期从不同的角度为肿瘤治疗提供新思路、新方法,并对欧前胡素的进一步研究和开发利用提供理论基础。     

欧前胡素急性毒性和安全药理学研究

目的观察欧前胡素对大、小鼠的急性毒性,以及对小鼠神经系统和犬心血管系统、呼吸系统的影响。方法通过腹腔内注射给药（ip）和灌胃给药（培）研究欧前胡素对小鼠的急性毒性,以及培对大鼠的急性毒性实验。安全药理学实验中以50、100、200mg／kg分别单次培给予小鼠欧前胡素,观察对小鼠神经系统的影响（包括小鼠自发活动、爬杆能力、小鼠阈下剂量戊巴比妥钠催眠协同实验）;以25、50、100mg／kg分别单次口服给药（po）欧前胡素,观察对犬心血管系统和呼吸系统的影响（包括心电图、血压、心率,以及呼吸频率、幅度、节律等指标）。结果欧前胡素培对小鼠的LD50为988．5mg/kg;ip对小鼠的LD50为603．3mg／kg;ig对大鼠的LD50为3188．7mg／kg。欧前胡素单次ig对小鼠神经系统无明显影响;单次po对犬心血管系统指标和呼吸系统指标无明显影响。结论欧前胡素安全范围较大,毒性较容易控制,且对正常动物（包括小鼠、大鼠和犬）的降压作用不显著,因此具有较大的临床应用可能性。     

中枢5-HT能系统在早发性抑郁中的作用研究

早发性抑郁的发病机制尚不明确。现仅有选择性5-HT重摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitors,SSRIs)SSRIs批准用于临床治疗早发性抑郁,显示出五羟色胺(5-hydroxytryptamine/serotonin,5-HT)5-HT是早发性抑郁发病机制中最重要的神经递质。目前有关中枢5-HT能系统在早发性抑郁中的作用研究主要集中在5-HT合成不足、5-HT运输功能障碍等方面,并与5-HT能系统较早发育成熟有关。色氨酸吸收障碍以及5-HT合成障碍都会导致5-HT合成不足;同时,5-HT转运体蛋白(5-HTT)基因多态性位点5-HTTLPR低转录效率基因型可能会增加早发性抑郁的患病风险。为进一步理解中枢5-HT能系统在早发性抑郁中的作用,未来需要进行更广泛更深入的基础及临床研究。     

5-HT_(2A)R异源二聚体功能研究进展北大核心CSCD

血清素2A受体(5-HT_(2A)R)作为致幻剂、抗抑郁药、抗焦虑药和非典型抗精神病药物等许多精神活性药物的作用靶点,受到人们的广泛关注。5-HT_(2A)R属于G蛋白偶联受体(GPCRs),与mGluR2、D_(2)R和CB_(1)R等多种GPCRs形成异源二聚体。二聚体中的mGluR2、D_(2)R与CB_(1)R影响5-HT_(2A)R偶联的信号通路和诱导的动物行为,并且3种受体分别被敲除后,致幻性5-HT_(2A)R激动剂诱导产生的甩头反应次数明显降低。基于5-HT_(2A)R/mGluR2、5-HT_(2A)R/D_(2)R和5-HT_(2A)R/CB_(1)R异源二聚体的重要性,该文将3种受体与5-HT_(2A)R形成异源二聚体的发现与功能进行详细综述,为探寻以5-HT_(2A)R为靶点的精神活性药物作用机制提供参考。     

HPLC法同时测定玉真散中天麻素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、欧前胡素、异欧前胡素的含量

摘 要 目的：建立HPLC法同时测定玉真散中天麻素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、欧前胡素、异欧前胡素含量。方法: 色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温为25℃,流速为1.0 ml·min^-1 ,流动相为甲醇 水梯度洗脱,检测波长为230 nm,进样量为5 μl。结果: 天麻素在2.68~214.00μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为100.2％,RSD为0.9％（n=6）;升麻素苷在5.22~418.00 μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）,平均回收率为99.9％,RSD为0.9％（n=6）;5-O-甲基维斯阿米醇苷在4.57~365.80 μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.999 5）,平均回收率为99.7％,RSD为1.0％（n=6）;欧前胡素在5.22~417.20μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.999 6）,平均回收率为99.0％,RSD为0.9％（n=6）;异欧前胡素在5.29~423.20μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为100.2％,RSD为0.8％（n=6）。结论: 该方法简单、准确,可同时测定5种成分的含量,可用于玉真散的质量控制。     

欧前胡素对顺铂的骨肉瘤细胞抗肿瘤作用的增效作用

目的 研究欧前胡素是否能提高人骨肉瘤细胞(human osteosarcoma cells,HOS细胞)对顺铂的敏感性。方法 HOS细胞用欧前胡素和顺铂处理,MTT法检测体外细胞活力,Western blot检测Bcl-2 蛋白家族成员(Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl、Bad和Bax)的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平和线粒体膜电位的变化情况。构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对欧前胡素联合顺铂治疗骨肉瘤疗效的影响。结果 欧前胡素在体外可显著提高顺铂对骨肉瘤细胞系HOS的杀伤活性。欧前胡素可显著降低HOS细胞Mcl-1的表达,而顺铂对Mcl-1的表达水平无影响。相比于欧前胡素或顺铂单治疗组,两者联合可显著诱导HOS细胞发生凋亡并降低其线粒体膜电位。体外转染Mcl-1真核表达载体显著降低顺铂联合欧前胡素对HOS细胞的杀伤活性。结论 欧前胡素通过靶向于Mcl-1增强顺铂对骨肉瘤细胞的杀伤活性。     

基于药物转运体的元胡止痛方药效成分延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素跨血脑屏障机制研究

目的 基于药物转运体研究元胡止痛方药效成分延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素跨血脑屏障转运机制。方法 建立hCMEC/D3-U87双层细胞模型研究延胡索乙素、巴马汀、原阿片碱、欧前胡素和异欧前胡素的跨血脑屏障吸收情况;通过实时荧光定量PCR （qRT-PCR）法测定hCMEC/D3细胞中相关转运体蛋白多药耐药蛋白1（MDR1）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）、有机阳离子转运体1（OCT1）、OCT2、OCT3、有机阴离子转运体1（OCTN1）、OCTN2、OATP1A2、OATP2B1的mRNA表达水平;使用6株过表达人转运体的细胞株（S2-OCT1、S2-OCT3、S2-OCTN1、S2-OCTN2、HEK293-OATP1A2、HEK293-OATP2B1）进行摄取实验,判断各药物成分是否为转运体蛋白的底物。结果 各成分均可以一定程度地跨越血脑屏障,延胡索乙素、欧前胡素、异欧前胡素具有更好的跨血脑屏障特性,巴马汀和原阿片碱的跨血脑屏障能力较弱。外排型转运蛋白MDR1、BCRP和摄入型转运蛋白OCTN1、OATP2B1、OATP1A2在hCMECD3细胞中有相对高的mRNA表达水平。延胡索乙素是OCT1、OCTN1和OATP1A2的底物;巴马汀是OCT1、OCT3、OCTN1、OCTN2和OATP2B1的底物;原阿片碱是OCT1、OCTN1和OCTN2的底物;欧前胡素、异欧前胡素是OCT3的底物。结论 延胡索乙素可能通过转运体OATP1A2、OCT1、OCTN1跨越血脑屏障进入脑组织细胞;巴马汀可能通过OATP2B1、OCT1、OCT3、OCTN1、OCTN2传递进入脑组织细胞;原阿片碱可能通过OCT1、OCTN1和OCTN2传递进入脑组织细胞;欧前胡素、异欧前胡素可能通过OCT3传递进入脑组织细胞。     

5-HT_(1A)和5-HT_2受体功能与觉醒、睡眠成分关系的研究

目的　观察 5 HT1A受体激动剂 8 OH DPAT和HT2受体拮抗剂利坦色林 (ritanserin)对大鼠清醒和睡眠成分的影响 ,给予 5 HT1A受体激动剂和剥夺REM睡眠后皮层 5 HT2 受体结合能力的变化 ,进一步分析两种 5 HT受体亚型之间的关系以及 5 HT2 受体在睡眠中的作用。方法　利用大鼠睡眠自动分析系统定量分析清醒和睡眠成分的变化 ,注射PCPA制作剥夺睡眠的大鼠模型 ,水上平台法制作剥夺REM睡眠的大鼠模型 ,利用放射配体结合实验研究配体与受体结合力的变化。结果　 8 OH DPAT小剂量 (0 0 1mg·kg-1,sc)可以增加深睡眠和浅睡眠 ,减少觉醒 ;大剂量(0 375mg·kg-1,sc)则增加觉醒 ,减少全部睡眠成分。 5 HT2 受体拮抗剂ritanserin可以明显增加深睡眠 ,减少觉醒和REM睡眠。而 8 OH DPAT低剂量与ritanserin联合用药则使深浅睡眠明显增加 ,清醒和REM睡眠明显减少 ,具有协同作用。对于PCPA化使 3种睡眠成分均明显减少 ,觉醒比例明显增加的大鼠 ,ritanserin仅使浅睡眠增加其它成分不变。用 [3 H] ritanserin放射性配基结合显示 ,剥夺大鼠REM睡眠后皮层 5 HT2 受体Bmax值明显增加但Kd 值无变化 ;给予 5 HT1A激动剂 8 OH DPAT后皮层 5 HT2 受体Kd 和Bmax均降低。结论　 5 HT1A受体和 5 HT2 受体与睡眠有密切关系     

5-HT_(1A)和5-HT_2受体功能与觉醒、睡眠成分关系的研究

目的　观察 5 HT1A受体激动剂 8 OH DPAT和HT2受体拮抗剂利坦色林 (ritanserin)对大鼠清醒和睡眠成分的影响 ,给予 5 HT1A受体激动剂和剥夺REM睡眠后皮层 5 HT2 受体结合能力的变化 ,进一步分析两种 5 HT受体亚型之间的关系以及 5 HT2 受体在睡眠中的作用。方法　利用大鼠睡眠自动分析系统定量分析清醒和睡眠成分的变化 ,注射PCPA制作剥夺睡眠的大鼠模型 ,水上平台法制作剥夺REM睡眠的大鼠模型 ,利用放射配体结合实验研究配体与受体结合力的变化。结果　 8 OH DPAT小剂量 (0 0 1mg·kg-1,sc)可以增加深睡眠和浅睡眠 ,减少觉醒 ;大剂量(0 375mg·kg-1,sc)则增加觉醒 ,减少全部睡眠成分。 5 HT2 受体拮抗剂ritanserin可以明显增加深睡眠 ,减少觉醒和REM睡眠。而 8 OH DPAT低剂量与ritanserin联合用药则使深浅睡眠明显增加 ,清醒和REM睡眠明显减少 ,具有协同作用。对于PCPA化使 3种睡眠成分均明显减少 ,觉醒比例明显增加的大鼠 ,ritanserin仅使浅睡眠增加其它成分不变。用 [3 H] ritanserin放射性配基结合显示 ,剥夺大鼠REM睡眠后皮层 5 HT2 受体Bmax值明显增加但Kd 值无变化 ;给予 5 HT1A激动剂 8 OH DPAT后皮层 5 HT2 受体Kd 和Bmax均降低。结论　 5 HT1A受体和 5 HT2 受体与睡眠有密切关系     

新型5-HT1A受体激动和5-HT重摄取抑制双重活性化合物YL-0919抗抑郁作用的行为学评价

目的研究兼有5-HT1A受体激动和5-HT重摄取抑制双重活性化合物YL-0919的抗抑郁作用。方法分别采用小鼠悬尾实验、小鼠强迫游泳实验、小鼠自发活动实验和大鼠获得性无助模型,观察不同剂量（0.625、1.25、2.5和5mg/kg）YL-0919的抗抑郁作用。结果在小鼠悬尾实验和小鼠强迫游泳实验中,单次灌胃给予YL-0919（0.625～2.5mg/kg）能够显著缩短小鼠悬尾不动时间和游泳不动时间;在小鼠自发活动实验中,YL-0919在上述剂量范围对自发活动无影响;在大鼠获得性无助模型上,灌胃给予YL-0919〔0.625～1.25mg/（kg·d）,1~4d〕能显著减少逃避失败次数。结论 YL-0919在小鼠和大鼠模型上具有明确的抗抑郁活性,并且在抗抑郁的有效剂量范围内无中枢兴奋和抑制作用,具有成为新型抗抑郁药物的研发潜力。     

蒺藜皂苷抗抑郁作用及机制研究

目的探讨蒺藜皂苷的抗抑郁作用及机制。方法采用孤立大鼠加慢性轻度不可预见性应激方法造抑郁大鼠模型,进行开放旷场,悬尾行为学测试,用LC-MS/MS液质联用法检测大鼠血液中5-羟色胺(5-HT)、γ氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)、谷氨酸(Glu)含量变化。实时定量PCR检测海马吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、核转录因子-κB(NF-κB)、炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)基因表达。Western blot检测海马中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、细胞因子NF-κB(p65)蛋白水平表达。结果与空白组比较,模型组小鼠旷场运动距离、站立次数和悬尾不动时间明显增加(P<0.05),血液中5-羟色胺明显下降(P<0.05),海马中IDO、NF-κB、IL-1β基因表达上调,IDO、NF-κB蛋白水平明显上调(P<0.05)。与模型组比较,蒺藜皂苷给药组能明显减少慢性应激导致大鼠旷场运动距离、站立次数和悬尾不动时间(P<0.05)。蒺藜皂苷给药组能明显提高大鼠血液中5-羟色胺含量(P<0.05),上调海马中抗炎因子IL-10基因表达,明显下调IDO、IL-1β基因表达(P<0.05),明显下调IDO蛋白表达水平(P<0.05)。结论蒺藜皂苷能明显改善动物行为学,具有抗抑郁作用,其作用可能与提高血液中5-羟色胺水平,下调色氨酸前体代谢酶吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、IL-1β基因表达和降低吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)蛋白表达水平有关。     

Antidepressant effect and mechanism of action of a novel aminouracil derivative

The psychotropic activity of a series of new aminouracil derivatives was studied on the widely applied models of pharmacological screening in rats. The most expressed antidepressant effect at the stage of primary pharmacological screening was been revealed for compound PIR-03-52 in a dose of 10 mg/kg. A profound study of the antidepressant activity on models of pathological states, PIR-03-52 exhibited a pronounced antidepressant effect that was comparable with that of a reference drug (imipramine). The given effect is related to the positive influence of PIR-03-52 on the serotoninergic and dopaminergic systems.     

反式白藜芦醇联合胡椒碱对慢性应激大鼠的抗抑郁作用及其下丘脑相关机制

目的探讨反式白藜芦醇(trans-REV)合用胡椒碱后的抗抑郁作用是否涉及下丘脑5-羟色胺(5-HT)系统及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴。方法建立慢性不可预知性应激模型,同时每天ip给予胡椒碱2.5 mg.kg-1+ig给予trans-REV 2.5,5,10,20和40 mg.kg-1。开野和穿梭箱实验验证药物的抗抑郁作用;高效液相-电化学法检测下丘脑中5-HT及其代谢产物水平,荧光分光光度法检测单胺氧化酶(MAO)活性;计算肾上腺指数;酶联免疫法检测血清皮质酮水平。结果胡椒碱合用trans-REV 20和40 mg.kg-1可改善应激大鼠在开野实验中爬格数和探究次数的降低及理毛次数和粪便粒数的增加;胡椒碱合用trans-REV10,20和40 mg.kg-1显著降低大鼠在穿梭箱中逃避失败次数;胡椒碱合用trans-REV 40 mg.kg-1显著逆转下丘脑中5-HT等递质水平的下降及MAO活性的相对增高;此外,trans-REV合用胡椒碱后可抑制肾上腺指数及血清皮质酮含量的升高。结论 trans-REV合用胡椒碱可拮抗慢性应激引起的抑郁样行为,其机制可能与下丘脑中5-HT系统和HPA轴功能改变有关。     

Chemosensitizing effect and mechanism of imperatorin on the anti-tumor activity of doxorubicin in tumor cells and transplantation tumor model

Multidrug resistance of tumors has been a severe obstacle to the success of cancer chemotherapy. The study wants to investigate the reversal effects of imperatorin (IMP) on doxorubicin (DOX) resistance in K562/DOX leukemia cells, A2780/Taxol cells and in NOD/SCID mice, to explore the possible molecular mechanisms. K562/DOX and A2780/Taxol cells were treated with various concentrations of DOX and Taol with or without different concentrations of IMP, respectively. K562/DOX xenograft model was used to assess anti-tumor effect of IMP combined with DOX. MTT assay, Rhodamine 123 efflux assay, RT-PCR, and Western blot analysis were determined in vivo and in vitro. Results showed that IMP significantly enhanced the cytotoxicity of DOX and Taxol toward corresponding resistance cells. In vivo results illustrated both the tumor volume and tumor weight were significantly decreased after 2-week treatment with IMP combined with DOX compared to the DOX alone group. Western blotting and RT-PCR analyses indicated that IMP downregulated the expression of P-gp in K562/DOX xenograft tumors in NOD/SCID mice. We also evaluated glycolysis and glutamine metabolism in K562/DOX cells by measuring glucose consumption and lactate production. The results revealed that IMP could significantly reduce the glucose consumption and lactate production of K562/DOX cells. Furthermore, IMP could also remarkably repress the glutamine consumption, α-KG and ATP production of K562/DOX cells. Thus, IMP may sensitize K562/DOX cells to DOX and enhance the anti-tumor effect of DOX in K562/DOX xenograft tumors in NOD/SCID mice. IMP may be an adjuvant therapy to mitigate the multidrug resistance in leukemia chemotherapy.     

花椒多酚类化合物急性给药的抗抑郁作用及机制研究

目的探讨花椒多酚类化合物总提取物（ZPPC）急性给药对ICR小鼠抑郁模型的拮抗作用及可能的机制。方法采用经典的行为绝望抑郁模型,即小鼠悬尾实验和强迫游泳实验,观察ZPPC急性给药对应激小鼠绝望不动时间的影响;同时观察ZPPC对小鼠自主活动的影响,采用荧光分光光度法测定ZPPC对小鼠脑内单胺氧化酶活性的影响。结果与空白组比较,ZPPC（50,100,200mg·kg-1,i.g.）明显缩短小鼠悬尾和强迫游泳实验中的不动时间,其作用类似于阳性对照药丙咪嗪（10mg·kg-1,i.p.）;ZPPC还明显抑制脑内单胺氧化酶的活性。结论 ZPPC急性给药在小鼠行为绝望模型中显示出明显的抗抑郁作用,其作用机制可能与抑制脑内单胺氧化酶活性有关。     

Antidepressant effect of 5-methoxypsoralen: a preliminary report

5-Methoxypsoralen (5 MOP) administred daily (40 mg at 9 p.m.) was compared with placebo in the treatment of severe depression. The clinical response was evaluated using the Hamilton Depression Rating Scale after 1 week of treatment. Our preliminary data indicate that patients receiving 5 MOP improved significantly after 1 week, whereas patients treated with placebo did not. The stimulating effect of 5 MOP on the melatonin secretion may be involved in this clinical effect.     

Antidepressant effect of carbamazepine--the role of dopaminergic and noradrenergic agents.

Fourteen days of treatment with 20 mg/kg/day carbamazepine (CBZ) reduced the immobility time in the behavioral "despair" test in rats. Two blockers of dopaminergic receptors: haloperidol (0.5 mg/kg) and sulpiride (100 mg/kg) antagonized the reduction of immobility caused by CBZ. The anti-immobility effect of CBZ was also counteracted by clonidine (0.1 mg/kg) an agonist of presynaptic alpha 2 adrenoreceptors and propranolol (5 mg/kg) beta-adrenolytic drug.     

酸枣仁总皂苷抗抑郁作用的实验研究

目的研究酸枣仁总皂苷对行为绝望小鼠抑郁模型的影响。方法采用小鼠强迫游泳实验和悬尾实验抑郁模型,小鼠行为绝望的不动时间作为指标,考察酸枣仁总皂苷抗抑郁活性。结果酸枣仁总皂苷中、高剂量组均能减少小鼠强迫游泳和悬尾不动时间,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论酸枣仁总皂苷具有一定的抗抑郁作用。