迷迭香酸类似物-11通过抑制ERK/MAPK通路诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡

目的对迷迭香酸类似物-11(rosmarinic acid analogue-11,RAA-11)诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡及其机制进行初步探究。方法 MTT法和克隆形成法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258染色法观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;流式细胞术检测RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡率的影响;Western blot观察RAA-11对人胃癌MGC-803细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2、Bax及通路蛋白ERK、p-ERK表达的影响。结果 MTT结果提示RAA-11可以抑制人胃癌MGC-803细胞增殖(P<0.01),且呈时间浓度依赖性;克隆形成实验结果提示,RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的集落形成能力;Hoechst 33258染色结果提示,RAA-11干预人胃癌MGC-803细胞48 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术结果提示,RAA-11对人胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用; Western blot结果显示,RAA-11上调人胃癌MGC-803细胞促凋亡相关蛋白caspase-3、Bax(P<0.01),下调抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平,并降低了通路蛋白ERK、p-ERK的表达水平(P<0.01)。结论 RAA-11能抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并能够诱导凋亡,其机制可能与抑制ERK/MAPK通路有关。     

白藜芦醇调控miR-491抑制胃癌细胞增殖和迁移

目的 探讨白藜芦醇抑制胃癌细胞增殖和迁移的机制.方法 CCK-8实验检测胃癌SGC-7901细胞株的增殖活性,RT-qPCR检测miRNA-491在SGC-7901细胞内的表达水平,Transwell实验检测各组SGC-7901细胞的迁移能力.结果 随白藜芦醇浓度增加,SGC-7901细胞的增殖活力受到相应抑制,且白藜...     

氯化钆对胃癌 MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

目的：观察氯化钆（ Gdcl3）对胃癌细胞株MGC-803增殖及凋亡的影响。方法实验设对照组、10μmol· L－1 Gdcl3处理组及100μmol· L－1 Gdcl3处理组。不同浓度的Gdcl3对MGC-803处理24 h后,用MTT比色法观察Gdcl3对细胞活性的影响;用流式细胞术检测细胞凋亡率;用Caspase活性检测试剂盒来检测细胞Caspase3,8,9活性检测。结果与空白对照组相比,Gdcl3抑制MGC-803增殖,具有统计学意义差异（P＜0．05）;Gdcl3促进MGC-803凋亡（P＜0．05）;Gdcl3可增强MGC-803细胞Caspase-3,9的活性（P＜0．05）,对Caspase-8影响不明显。结论 Gdcl3抑制MGC-803增殖,促进癌细胞凋亡,可能主要通过线粒体途径来促凋亡。     

紫草素通过抑制STAT3-MMP2信号通路抑制胃癌MGC803细胞的迁移能力

目的:研究紫草素对人胃癌MGC803细胞迁移能力的影响,并探究其作用机制.方法:不同浓度的紫草素(0,1,2μg·mL-1)作用于人胃癌MGC803细胞,利用Transwell小室实验检测紫草素对人胃癌MGC803细胞侵袭和迁移能力的影响.进一步利用实时定量PCR和Western blot技术,检测不同浓度紫草素作用的...     

迷迭香酸衍生物RAD-9通过PI3K/Akt和p38 MAPK信号通路诱导胃癌MGC-803细胞凋亡

目的研究迷迭香酸衍生物RAD-9诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用及其机制。方法 MTT法观察RAD-9对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞的凋亡;Hoechst 33258染色法观察RAD-9对MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;Western blot检测RAD-9干预MGC-803细胞36 h后,对Akt、p-Akt、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的影响。结果MTT结果显示,RAD-9呈时间、浓度依赖性抑制胃癌MGC-803细胞增殖;流式细胞术结果显示,RAD-9对胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用(P<0.01);Hoechst 33258染色实验结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;Western blot结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax、caspase-3蛋白表达水平明显提高,Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调,p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。结论 RAD-9能抑制胃癌MGC-803细胞生长,且能诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt和激活p38 MAPK信号通路相关。     

miR-876靶向Pax6抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的 探讨miR-876靶向Pax6对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 采用RT-qPCR检测胃癌组织与癌旁组织中miR-876和Pax6的表达水平,分析miR-876表达与胃癌患者临床指标的关系。检测胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞MGC-803、BGC-823、SGC-7901中miR-876的表达水平。将MGC-803细胞分为对照组、miR-876 mimic组、mimic-NC组和miR-876 mimic+pcDNA-3.1-Pax6组,采用RT-qPCR和Western blotting检测各组细胞中miR-876以及Pax6的mRNA和蛋白表达水平;MTT检测各组细胞增殖情况;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭情况;双荧光素酶实验验证miR-876与Pax6的靶向关系。结果 与癌旁组织相比,miR-876在胃癌组织中低表达(t=13.962,P<0.05),而Pax6 mRNA和蛋白在胃癌组织中均呈高表达(t=23.368,13.757;P<0.05),且两者呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。miR-876低表达与胃癌患者TNM分期(...     

青藤碱通过COX-2/VEGF通路抑制胃癌MGC803细胞迁移和侵袭的研究

摘要：目的:探讨青藤碱对胃癌MGC803细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:将胃癌MGC803细胞随机分成4组:对照组、青藤碱300,600,1 200 mg·L-1组,采用划痕愈合实验检测细胞迁移率,Transwell实验检测迁移细胞数和侵袭细胞数,qRTPCR检测环氧合酶2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶2（MMP2） mRNA表达,Western blot检测COX-2、VEGF、MMP9、MMP2蛋白表达。结果:青藤碱300,600,1 200mg·L-1组胃癌MGC803细胞迁移率、迁移细胞数、侵袭细胞数、COX-2、VEGF、MMP9、MMP2 mRNA和蛋白表达显著低于对照组（P<0.05或P<0.01）。结论:青藤碱抑制胃癌MGC803细胞迁移和侵袭,其机制与下调COX-2、VEGF、MMP9、MMP2表达有关。     

非诺贝特抑制人胃癌MGC 803细胞增殖及机制

目的: 探讨非诺贝特对胃癌MGC 803细胞生物活性的影响及作用机制。方法: 采用MTT法检测非诺贝特对胃癌MGC 803细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察非诺贝特对MGC 803细胞周期和凋亡的影响;免疫荧光染色检测非诺贝特对MGC 803细胞Bcl-2/Bax蛋白表达及细胞生长的抑制作用;蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测非诺贝特对MGC 803细胞p-ERK1/2、p-AKT、ERK1/2 和AKT蛋白表达的影响。结果: 非诺贝特对MGC 803细胞增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。非诺贝特使MGC 803细胞的周期阻滞于G2/M期,并诱导其凋亡,Bcl-2表达逐渐减少,Bax表达逐渐增加,且下调 ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化水平,但对ERK1/2 和AKT蛋白表达水平没有影响。结论: 非诺贝特能够抑制胃癌MGC 803细胞增殖,并诱导其凋亡。其分子机制可能包括下调ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化水平。     

硫酸右旋糖苷对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

摘要： 目的 探讨硫酸右旋糖苷 （DS） 对人胃癌MGC-803细胞增殖、 集落形成和凋亡的影响及可能的机制。方法 培养人胃癌MGC-803细胞, 分为对照组 （PBS处理） 和实验组 （0.3%DS处理）; 应用EdU细胞增殖实验检测DS对胃癌MGC-803细胞增殖能力的影响; 平板克隆形成实验检测DS对胃癌MGC-803细胞集落形成能力的影响; AnnexinⅤ-PI双染流式检测细胞凋亡的变化; 蛋白质印迹法 （Western blot） 检测细胞不同时间点 （2、 8、 12、 24 h） EZH2、 Cleaved-caspase3蛋白表达水平。结果 EdU实验结果显示, 与对照组相比, DS明显抑制胃癌MGC-803细胞增殖 （P＜0.01）。平板克隆形成实验结果表明, DS组集落形成能力较对照组显著降低 （P＜0.01）, AnnexinⅤ-PI双染流式结果显示, 实验组细胞凋亡率明显高于对照组 （P＜0.01）; Western blot结果表明, 实验组EZH2的表达较对照组明显下调 （P＜0.05）, Cleaved-caspase3的表达较对照组明显上调 （P＜0.05）。结论 DS能明显抑制人胃癌MGC-803 细胞增殖, 诱导凋亡, 其机制可能与抑制EZH2的表达有关。     

Apoptosis induced by isoliquiritigenin in human gastric cancer MGC-803 cells.

Isoliquiritigenin, which is possibly a principal anti-tumor constituent of licorice, a traditional Chinese herb, was examined for apoptosis-inducing activity in human gastric cancer MGC-803 cells. Typical morphological and biochemical features of apoptosis including cell shrinkage, chromatin condensation, DNA ladder formation, and appearance of apoptotic peaks (subG(1)) were observed in MGC-803 cells with isoliquiritigenin treatment. Using Fluo-3 and Rh123 as fluorescent probes, respectively, it was found that the intracellular free calcium concentration increased and the mitochondrial transmembrane potential (Deltapsi(m)) decreased in a dose-dependent manner in apoptotic cells. These results suggest that isoliquiritigenin induced apoptosis of MGC-803 cells through calcium- and Deltapsi(m)-dependent pathways, indicating that it is potentially useful as a natural anti-cancer agent.     

2′,4′-Dihydroxychalcone-induced apoptosis of human gastric cancer MGC-803 cells via down-regulation of survivin mRNA

2′,4′-Dihydroxychalcone (TFC), a main component in Herba Oxytropis, is grouped under flavonoids, which are well known to have antitumor activities in vitro. In this study, the possible antitumor mechanism of TFC in human gastric cancer MGC-803 cells is examined. Hoechst 33258 staining analysis indicates that TFC causes MGC-803 cell shrinkage and apoptotic body formation, typical characteristics of apoptosis. Flow cytometric analysis demonstrates that TFC causes cell cycle arrest in the G2/M phase. Furthermore, TFC significantly increases caspase-3 activity but decreases survivin mRNA expression. Therefore, TFC can induce the apoptosis of MGC-803 cells via down-regulation of survivin mRNA expression.     

锰超氧化物歧化酶模拟化合物对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的观察Mn SOD模拟化合物(Mn SODm)对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,MTT法观察Mn SODm对MGC-803细胞增殖的影响;用Hoechst33258染色观察MGC-803细胞形态学的变化;Annexin V-FITC/PI检测MGC-803细胞凋亡;Western blot法检测p53、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 MTT法检测结果显示1~20μg·m L~(-1)Mn SODm对MGC-803细胞有显著的抑制作用,24、48、72 h的IC50分别为10.18、6.93和5.05μg·m L~(-1);20μg·m L~(-1)Mn SODm作用细胞48 h后,细胞凋亡率为(69.33±4.07)%(P<0.01);Western blot结果显示,用5、10、20μg·m L~(-1) Mn SODm处理细胞48 h后,Bcl-2表达显著降低,同时p53、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论 Mn SODm对人胃癌MGC-803细胞有明显的抑制作用,可能是通过下调Bcl-2表达,增加p53、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax表达来诱导MGC-803细胞凋亡。     

Bcl-XL siRNA对人胃腺癌MGC-803细胞药物敏感性的影响

目的:研究靶向Bcl-XL基因的小干扰RNA对胃腺癌MGC-803细胞Bcl-XL基因表达的作用及对药物敏感性的影响。方法:构建的Bcl-XLsiRNA载体或阴性siRNA并稳定转染到胃癌MGC-803细胞,G418抗生素筛选阳性克隆,克隆扩大培养,免疫荧光观察细胞蛋白表达。用不同浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,MTT观察细胞增殖的变化。用一种浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,流式细胞术观察亚G1细胞的比例。结果:免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA稳定转染组细胞中Bcl-XL蛋白的表达比阴性siRNA稳定转染组细胞Bcl-XL基因的表达均有明显的降低。当不同浓度的5-FU(13、130、1 300、13 000 mg.L-1)或DADS(20、35、50mg.L-1)处理细胞24 h后,MTT结果表明Bcl-XLsiR-NA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照明显降低,细胞生长抑制率明显增高。5-FU或DADS药物的IC50值在Bcl-XLsiRNA细胞组有明显降低。使用5-FU(130 mg.L-1)或DADS(50mg.L-1)处理细胞24 h后,流式结果表明,Bcl-XL-siRNA细胞组较阴性siRNA和正常对照细胞组亚G1细胞比例有明显增高。结论:Bcl-XL siRNA下调了MGC-803细胞Bcl-XL基因的表达;Bcl-XLsiRNA能够促进MGC-803细胞凋亡,增强细胞对化疗药物的敏感性。     

Inhibitory effect of siRNA targeting survivin in gastric cancer MGC-803 cells

Gastric cancer is the fourth most common cancer in the world and the leading cause of cancer death in China. It is necessary to find a safe and effective way to treat this disease. A sustained overexpression of survivin is a characteristic feature of gastric cancer as it gives cancer cells a survival and growth advantage. RNA interference (RNAi), which has been proven to be a powerful tool for suppressing gene expression, may provide a promising way forward in gastric cancer therapy. Few studies have been conducted on the inhibitory effects of small interfering RNA (siRNA) against survivin in gastric cancer. In this study, we constructed the recombinant Psilencer 2.1-survivin siRNA plasmids and transfected them into gastric cancer MGC-803 cells in vitro, and also injected MGC-803/Silence (+) cells into nude mice to observe the inhibitory effects in vivo. The transfection of Psilencer 2.1-survivin (+) plasmid led to remarkable inhibition of survivin mRNA expression, the intensity of survivin mRNA was lower (P<0.05), the expression of survivin protein was strongly suppressed, the amount of survivin protein was also lower (P<0.05) and the percentage of apoptotic cells was much higher (P<0.05). The tumor size and growth ratio were lower in nude mice injected with MGC-803/Silence (+) cells and the inhibition ratio of survivin expression was higher (P<0.05). In summary, siRNA targeting of survivin can effectively inhibit the growth of gastric cancer cells and may be used as a potent therapy.     

二烯丙基二硫诱导人胃癌MGC803细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的　研究二烯丙基二硫 (diallyldisulfide ,DADS)诱导人胃癌MGC80 3细胞凋亡和对细胞周期的影响。方法　采用MTT法、丫啶橙染色、流式细胞仪等方法检测DADS对MGC80 3的增殖抑制 ,诱导凋亡以及细胞周期分布的影响。结果　MTT法显示 ,DADS对MGC80 3细胞有明显的抑制增殖作用 ,2 0、3 0、40mg·L- 1DADS作用MGC80 3细胞72h后 ,生长抑制率分别达 2 5 7%、58 6%、69% ;经 3 0mg·L- 1DADS作用MGC80 3细胞 48h后 ,用丫啶橙染色法观察到不同阶段的凋亡细胞形态学改变 ;流式细胞仪分析结果显示 ,DADS对MGC80 3细胞有明显的G2 /M期阻滞作用 ,3 0mg·L- 1DADS作用MGC80 3细胞 2 4h ,与对照组相比 ,可使G2 /M期细胞增加到 4倍多 ,且DADS呈时间依赖性诱导MGC80 3细胞凋亡 ,3 0mg·L- 1DADS作用MGC80 3细胞48h ,凋亡率从对照组的 3 5%升高到 3 9 5%。结论　DADS引起MGC80 3细胞G2 /M期阻滞并诱导凋亡可能是其抗肿瘤的机制之一