苦参碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用研究

目的研究苦参碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法采用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测苦参碱对U87细胞的增殖能力和侵袭能力。采用Western blotting法和qPCR法检测苦参碱对U87细胞的COX2蛋白和mRNA表达情况。结果药物作用24 h时,与对照组比较,随着苦参碱浓度(5、50、100μg/mL)的增加,苦参碱对U87细胞生长的抑制率不断地增加;相同浓度下,苦参碱对U87细胞增殖率在24、48、72 h时逐渐出现显著性差异(P0.05)。对照组通过的细胞数量明显多于苦参碱100μg/mL组,两组比较差异具有统计学意义(P0.01)。与对照组比较,随着苦参碱浓度的增加,COX-2的蛋白和mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05、0.01)。结论苦参碱通过降低COX-2的蛋白和m RNA表达来抑制U87细胞的增殖和侵袭。     

宁夏枸杞总黄酮对恶性胶质瘤细胞株U87-MG表型的影响

目的：研究宁夏枸杞总黄酮对人恶性胶质瘤U87-MG细胞增殖、迁移以及侵袭的影响。方法：采用贴壁法培养人恶性胶质瘤细胞。实验分为空白对照组（不加任何处理）和黄酮处理组（20,40,80,160 mg·L^-1）。用CCK-8法测定不同浓度宁夏枸杞总黄酮作用U87-MG细胞不同时间后,细胞的增殖变化情况;RT-PCR和real-time PCR法检测肿瘤细胞内增殖细胞核抗原（PCNA）mRNA水平的表达;免疫细胞化学（immunocytochemistry,ICC）检测PCNA蛋白表达;Transwell和细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell法检测细胞侵袭能力。结果：与对照组相比,处理组的U87-MG细胞增殖被抑制,且呈一定的时间-剂量依赖关系;处理组的PCNA mRNA和蛋白水平含量均降低,迁移以及侵袭能力减弱;且上述指标的变化随枸杞总黄酮浓度的增加而趋于明显。结论：宁夏枸杞总黄酮能够抑制恶性胶质瘤细胞的增殖、迁移以及侵袭。     

山楂叶总黄酮分散片的制备

目的研究山楂叶总黄酮分散片的制备工艺。方法以崩解时间为指标,采用正交设计法对山楂叶总黄酮分散片的处方进行筛选,并对最佳处方进行溶出度测定。结果分散片在30s内完全崩解,分散均匀度测定能通过2号筛网,体外溶出度优于市售片。结论本实验山楂叶总黄酮分散片制备处方和工艺可行。     

山楂叶总黄酮的药理作用研究进展

山楂叶总黄酮(TFHL)是山楂叶提取物中一系列黄酮类化合物的总称,包括槲皮素、金丝桃苷、黄酮苷、荭草素、葡荆牡黄酮等多种黄酮类化合物,具有丰富的生物活性,在植物生物学和人体健康中发挥重要作用.现将近年来人们对山楂叶总黄酮在心、脑血管以及其他方面的药理作用研究做一综述,旨在为山楂叶总黄酮的临床合理应用以及进一步研究提供理论依据.     

山楂叶总黄酮分散片的处方研究

目的:优选山楂叶总黄酮分散片的处方。方法:以表面形态和崩解时限为指标,采用单因素试验优选填充剂和黏合剂;以压片黏冲情况为指标,采用单因素试验优选润滑剂;以崩解时限为指标,采用正交试验优选崩解剂。结果:优选的处方以200片投料量计算,选取90g微晶纤维素为填充剂,以交联聚乙烯吡咯烷酮(2g)和羧甲基淀粉钠(6g)为崩解剂,以80ml水为黏合剂,以1.6g十二烷基硫酸钠为润滑剂。结论:所选处方合理、可行,可为山楂叶总黄酮分散片的制备提供理论依据。     

山楂叶总黄酮对糖尿病大鼠视网膜中muller细胞功能的影响

2型糖尿病亦称非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM),主要特征是胰岛素作用不足或胰岛素抵抗从而血糖升高.糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病患者微血管改变在眼部的表现.糖尿病造成眼部的改变体现在多方面,而视网膜病变对患者的影响最大,它也成为导致糖尿病患者失明的一个主要方面[1].Muller细胞是脊椎动物视网膜内最主要的神经胶质细胞.它贯穿整个视网膜,对视网膜起着支撑、营养等重要作用.Muller细胞的结构及功能发生变化在DR中起到重要作用[2].本研究通过激光共聚焦技术观察山楂叶总黄酮(Hawthorn Leaves Flavonoids,HLF)对Muller细胞以及谷氨酰胺合成酶活性的影响,希望为DR的治疗提供理论依据.     

山楂叶总黄酮对小鼠脑缺血的保护作用研究

目的探讨山楂叶总黄酮（FMCL）对小鼠脑缺血的保护作用。方法选用结扎双侧颈总动脉、迷走神经作为小鼠脑缺血的模型,观察小鼠的存活时间,测定小鼠脑组织匀浆中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和乳酸（LD）、丙二醛（MDA）含量。结果与模型组比较,FMCL180mg/kg和60mg/kg小鼠的生存时间明显延长（P〈0.05,P〈0.01）,其脑组织匀浆中LD、MDA含量明显下降,SOD活性明显升高（P〈0.05,P〈0.01）,受试药各剂量LDH含量均有降低（P〈0.05）。结论山楂叶总黄酮可减轻脑缺血损伤,对脑细胞具有保护作用,其机制可能与增强自由基、清除酶活性和防止脂质过氧化作用有关。     

不同纯度山楂叶总黄酮降血脂作用的比较研究

目的观察不同纯度的山楂叶总黄酮降血脂作用的差异,为开发新一代降脂药物采用何种纯度的总黄酮样品为原料提供依据。方法采用高脂饲料造模的小鼠高脂血症模型,分别给予含等量总黄酮的不同纯度的山楂叶总黄酮样品,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的值。结果两种实验样品均显著降低小鼠血清TC和TG值,两者之间无显著性差异。结论不同纯度的山楂叶总黄酮样品均有明显降低高脂血症小鼠TC和TG的作用,但纯度为80%的样品用量仅为20%样品的1/4,为减少服用量,提倡用纯度80%的山楂叶总黄酮为原料进行制剂。     

数字全息显微镜观察哇巴因对人胶质瘤U87-MG细胞的影响

目的　应用数字全息显微镜观察哇巴因（ouabain）对人胶质瘤U87-MG 细胞的影响。方法　不同浓度ouabain（0.05、0.5、2.5、25 μM）干预U87-MG 细胞,24 h 后使用光学显微镜观察细胞形态学改变,MTT 法检测细胞活力,数字全息显微镜观察ouabain 作用后细胞的动态变化和运动能力改变。结果　与Control 组比较,ouabain 明显减低细胞活力［0.05 μM（75.92±3.21）%,0.5μM（49.61±3.95）%,2.5 μM（42.74±3.21）%,25 μM（32.86±2.00）% vs. Contro（l 100±0.01）%;P<0.01］,减少细胞数量［0.05 μM（170.7±4.7）,0.5 μM（162.3±4.4）,2.5 μM（142.0±2.6）,25 μM（110.3±1.2）vs. Contro（l 193.7±2.6）;P<0.05或P<0.01］,并降低细胞运动能力［0.05 μM（809.0±19.8）μm,0.5 μM（626.9±23.5）μm,2.5 μM（476.7±22.9）μm,25 μM（386.5±19.6）μm vs. Control（ 959.7±18.9）μm;P<0.01］,且呈浓度依赖性。结论　ouabain可抑制人胶质瘤U87-MG细胞的生长、降低肿瘤细胞运动能力并最终引起细胞死亡,数字全息显微镜可起到良好的评价作用。     

寒地山楂树栽培技术及山楂叶总黄酮含量测定

目的:总结山楂树寒地栽培技术和采用紫外分析法测定山楂叶总黄酮含量,为山楂树的选育、繁殖提供参考。方法:采用育苗移栽方式种植山楂树。结果:寒地栽培山楂叶总黄酮含量高于中国药典规定标准^[1]。结论:种植技术先进,可推广性强。     

山楂籽黄酮提取物抗实验性心律失常作用的研究

目的观察山楂籽黄酮提取物对三氯甲烷及乌头碱诱发的心律失常作用。方法采用三氯甲烷诱导小鼠心律失常,静注乌头碱诱发大鼠心率失常,术前5 d给予山楂籽黄酮提取物,心电图连续示波观察并记录心室颤动、室性早搏、室性心动过速的发生次数、室性早搏出现时间以及乌头碱累积消耗量。结果与模型组相比山楂籽黄酮提取物能明显降低三氯甲烷诱导的小鼠室颤发生率,且可明显增加诱发大鼠发生心律失常的乌头碱消耗量,推迟心率失常出现时间,但对降低室性早搏和室性心动过速的发生次数无明显作用。结论山楂籽黄酮提取物能明显减轻由三氯甲烷及乌头碱引起的实验性心律失常。     

银合欢叶总黄酮降血糖作用的实验研究

目的探讨银合欢叶总黄酮(TF,totalflavonoidsinleaves)的降血糖作用。方法采用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型以及由肾上腺素和葡萄糖引起的高血糖小鼠模型,观察TF对实验动物的降血糖效果。结果TF对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有明显的治疗效果,对肾上腺素和葡萄糖引起的高血糖模型小鼠也有明显的降血糖作用,但对正常小鼠血糖无明显影响。结论TF对高血糖模型小鼠有明显的降血糖作用,但对正常小鼠血糖无明显影响。     

氧化苦参碱与奈达铂联用对人胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖的影响

目的观察氧化苦参碱与奈达铂联用抑制人胶质母细胞瘤U87 MG细胞增殖的效果。方法将传代的U87 MG细胞分为对照组、奈达铂单药处理组(NDP组)、氧化苦参碱单药处理组(OXY组)和两种药物联合处理组(联合组),分别在不同时间点,使用不同浓度的药物,用MTT方法检测U87 MG细胞光密度值(OD490),观察细胞增殖情况;用流式细胞仪检测不同处理对各组细胞周期的作用。结果对细胞处理48 h后,OXY组、NDP组及联合组U87 MG细胞的增殖抑制率分别为18.74%±2.66%、27.66%±0.87%、75.87%±1.19%。两种药物联合使用对U87 M G细胞的抑制作用显著高于各单药组相同剂量药物对细胞的抑制率,各组抑制率比较差异有统计学意义(P<0.01)。对照组、OXY组、NDP组、联合组细胞周期G1期的百分比分别为67.81%±0.55%、71.87%±1.64%、78.01%±2.06%、84.75%±0.72%。两药联合应用对细胞G1期的阻滞作用增强,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论氧化苦参碱与奈达铂联合使用对抑制胶质母细胞瘤细胞增殖有协同效果,可以降低奈达铂的使用浓度,进而减轻治疗时化疗药物的毒副作用。     

三氧化二砷对人胶质瘤细胞株U251影响的实验研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)抗人胶质瘤细胞株U251的作用及机制。方法采用0．5、1．0、2．0、4．0μmol／L AS2O3诱导人胶质瘤细胞株U251,于培养第1、2、3、4、5、6d应用倒置相差显微镜、四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞仪观察人胶质瘤细胞株U251的存活,形态学改变及细胞DNA含量的变化。结果0．5～4μmol／L的As2O3明显抑制U251的增殖。流式细胞仪分析显示,加药组在G1期细胞前均出现亚二倍体峰,且G0/G1期细胞减少,诱导细胞凋亡。结论体外三氧化二砷能抑制人胶质瘤细胞U251增殖,提示有希望用于神经胶质瘤患者的治疗。     

呋喃二烯抑制脑胶质瘤作用

目的观察呋喃二烯(furanodiene,FDE)纳米乳对颅内移植G422胶质母细胞瘤小鼠化疗后的生存期变化及病理改变,并初步探讨其作用机制,评估FDE纳米乳对胶质母细胞瘤的抑制作用。方法将G422胶质母细胞瘤细胞植入昆明小鼠脑白质中建模,考察FDE纳米乳及其与卡莫司汀联合组对荷瘤小鼠生存期的影响,观察各组瘤组织的病理结构变化。采用细胞增殖抑制法、Hoechst33258染色法和Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率等方法初步探索FDE对人胶质瘤U251细胞的作用机制。结果 FDE纳米乳(80 mg·kg^(-1))组治疗荷瘤小鼠生命延长率为28.1%,联合组生命延长率可达69.0%;组织病理学分析显示,FDE纳米乳组肿瘤细胞排列疏松,未见明显侵润;联合组肿瘤体积小,且与周围组织间边界清晰。细胞增殖抑制和Hoechst33258荧光染色实验均表明FDE对U251细胞增殖抑制具有浓度依赖性,流式细胞术结果分析当FDE浓度为18.5μmol·L(-1))组治疗荷瘤小鼠生命延长率为28.1%,联合组生命延长率可达69.0%;组织病理学分析显示,FDE纳米乳组肿瘤细胞排列疏松,未见明显侵润;联合组肿瘤体积小,且与周围组织间边界清晰。细胞增殖抑制和Hoechst33258荧光染色实验均表明FDE对U251细胞增殖抑制具有浓度依赖性,流式细胞术结果分析当FDE浓度为18.5μmol·L^(-1)时,U251细胞早期凋亡率可达71.8%。结论 FDE通过调节胶质母细胞的增殖、早期凋亡等机制,有效抑制小鼠胶质瘤的生长。     

山楂叶总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的探讨

目的:探讨山楂叶总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:采用改良Zea Longa’s法制作大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。将健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、尼莫地平组、山楂叶总黄酮(HLF)低、中、高剂量组6组。用神经功能评分评价大鼠脑缺血再灌注后行为障碍;用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定梗死灶面积;用相应试剂盒测定脑组织内白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:模型组缺血脑组织内的IL-1β、TNF-α含量显著升高,与假手术组相比差异有显著性,尼莫地平组和HLF组能明显降低缺血脑组织内IL-1β、TNF-α含量,与模型组相比有显著差异,HLF高剂量组和尼莫地平组缺血脑组织内IL-1β、TNF-α含量与HLF与低剂量组相比也有显著差异。结论:HLF可能通过抑制缺血再灌注后炎症反应过程而起到抗脑缺血再灌注损伤作用。     

Preparation and characterization of teniposide PLGA nanoparticles and their uptake in human glioblastoma U87MG cells

Many studies have demonstrated the uptake mechanisms of various nanoparticle delivery systems with different physicochemical properties in different cells. In this study, we report for the first time the preparation and characterization of teniposide (VM-26) poly(d,l-lactide-co-glycolide) (PLGA) nanoparticles (NPs) and their cellular uptake pathways in human glioblastoma U87MG cells. The nanoparticles prepared with oil-in-water (O/W) single-emulsion solvent evaporation method had a small particle size and spherical shape and provided effective protection against degradation of teniposide in PBS solution. Differential scanning calorimeter (DSC) thermograms concluded that VM-26 was dispersed as amorphous or disordered crystalline phase in the PLGA matrix. A cytotoxicity study revealed that, in a 24h period, blank PLGA NPs had no cytotoxicity, whereas teniposide-loaded PLGA NPs (VM-26-NPs) had U87MG cytotoxicity levels similar to free teniposide. Confocal laser scanning microscopy (CLSM) and transmission electron microscopy (TEM) images showed the distribution and degradation processes of nanoparticles in cells. An endocytosis inhibition test indicated that clathrin-mediated endocytosis and macropinocytosis were the primary modes of engulfment involved in the internalization of VM-26-NPs. Our findings suggest that PLGA nanoparticles containing a sustained release formula of teniposide may multiplex the therapeutic effect and ultimately degrade in lysosomal within human glioblastoma U87MG cells.     

山楂叶总黄酮对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的实验研究

目的 研究山楂叶总黄酮对缺血缺氧损伤后心肌细胞的影响。方法以3d龄SD乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺血缺氧损伤模型。研究山楂叶总黄酮对缺血缺氧心肌细胞心率失常、停搏时间、细胞乳酸脱氢酶(LDH)的泄漏量、细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量等生化指标的影响。结果山楂叶总黄酮能减轻缺血缺氧损伤后心肌细胞心率失常的程度,推迟心肌细胞的停搏时间,减少心肌细胞LDH的释放量,降低MDA含量并提高细胞内SOD酶的活力和NO的含量。结论山楂叶总黄酮对缺血缺氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用。     

伊马替尼与顺铂联用对人胶质母细胞瘤U87细胞株及其裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的探讨伊马替尼与顺铂联合对胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为临床治疗提供实验依据。方法 SubG1法检测U87细胞株在伊马替尼及顺铂单药处理和联合处理时各组细胞的凋亡率;观察不同治疗对U87荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率及Q值;测量各组裸鼠体质量变化,评价药物的毒副作用。结果伊马替尼与顺铂联合处理对U87细胞凋亡诱导率显著高于相同剂量的各单药处理组;联合治疗组与相同剂量的各单药治疗组比较,抑瘤率差异有统计学意义(P<0.05),Q值为1.264;与顺铂高剂量组比较,抑瘤率差异无统计学意义(P>0.05)。结论伊马替尼与顺铂联用有协同效应,二者联用可降低顺铂使用剂量,减轻对裸鼠的毒副作用。