高盐饮食增强内皮细胞TRPV4与cPLA2的空间偶联作用

目的探究内皮细胞中香草素受体4型瞬时感受器电位通道(TRPV4通道)与胞浆型磷脂酶A2(c PLA2)在空间上的偶联作用。方法通过设定梯度盐(培养基中外源加入20、40、80、160 mol·L~(-1)Na Cl)确定高盐处理内皮细胞的最适盐浓度;在细胞水平上,通过免疫荧光能量共振转移(immuno-FRET)技术检测人微血管内皮细胞(HMEC)和小鼠胸主动脉原代内皮细胞中TRPV4与c PLA2的空间偶联作用;在动物组织水平,通过同样的技术检测正常小鼠与高盐诱导的高血压小鼠的胸主动脉血管环上的内皮细胞中TRPV4与c PLA2的空间偶联情况。结果高盐诱导内皮细胞的最适盐浓度为40 mol·L~(-1)Na Cl;在细胞水平和动物组织水平上,高盐处理的HMEC、小鼠胸主动脉原代内皮细胞和高盐诱导的高血压小鼠胸主动脉血管环上的内皮细胞中,TRPV4与c PLA2的空间偶联作用均明显增强。结论在细胞和组织水平上,高盐饮食能增强内皮细胞中TRPV4与c PLA2的空间偶联作用,这种空间偶联可能进一步引起两者的功能偶联,为血管内皮功能紊乱的研究提供了新的思路。     

杜鹃花总黄酮对缺血/再灌注损伤模型大鼠脑基底动脉TRPV4的作用研究

目的探讨杜鹃花总黄酮(TFR)对缺血/再灌注损伤模型大鼠脑基底动脉(CBA)瞬时感受器电位通道香草酸受体亚型Ⅳ(TRPV4)的作用。方法以改良四血管阻断法(4-VO)建立大鼠缺血/再灌注模型(IR);运用加压灌注法和细胞膜电位记录法,离体观察TFR对KCl预收缩IR大鼠CBA的舒张作用和超极化反应及TRPV4阻断剂钌红(RR)对其的影响;采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法,在体观察TFR对IR大鼠脑血管内皮细胞TRPV4 mRNA和蛋白表达以及RR对其的影响。结果递增浓度的TFR可诱导IR大鼠离体CBA产生明显剂量依赖性的舒张效应和超极化反应。去除血管内皮细胞后,TFR仍能介导CBA产生较弱的舒张作用和超极化反应,与血管内皮完整组比较,差异有显著性(P<0.01);去除一氧化氮(NO)和前列环素(PGI2)舒张作用后,TFR仍能诱导IR大鼠CBA产生明显的舒张效应和超极化作用,此作用可被TRPV4通道阻断剂RR抑制;TFR可明显上调IR大鼠脑血管TRPV4 mRNA和蛋白表达,而阻断TRPV4可明显抑制TFR上调的TRPV4基因表达。结论 TFR能介导IR大鼠CBA产生较强的内皮依赖性和较弱的内皮非依赖性血管舒张反应和超极化作用,其内皮依赖性效应推测可能与TFR促使脑血管内皮激活,促进内皮细胞生成和释放内皮衍生性超极化因子(EDHF)增多,继而激活TRPV4,引发Ca~(2+)内流,导致血管平滑肌细胞膜超极化,产生血管舒张效应有关。     

蛇床子素对家兔主动脉条的钙拮抗作用

蛇床子素30μmol·L~(-1)及100μmol·L~(-1)使NE、CaCl_2和高K~+除极化所致的家兔主动脉条收缩量—效曲线右移,最大反应降低.表明蛇床子素有松弛血管平滑肌作用,并与Ca~(2+)呈非竞争性拮抗作用.和阻滞α受体或激动β受体无关;选择性作用于电位依赖性Ca~(2+)通道,抑制细胞外Ca~(2+)内流;在100μmol·L~(-1)时,明显减弱NE诱导的依赖细胞内Ca~(2+)收缩。证明蛇床子素松弛血管平滑肌作用可能与其Ca~(2+)拮抗作用有关。     

三七皂甙对血管平滑肌α受体引起~(45)Ca外溢与内流的影响

在血管平滑肌,三七总皂甙明显减少苯肾上腺素引起的~(45)Ca内流量,不影响高钾引起的~(45)Ca内流;而硝苯吡啶几乎完全阻断后一种的~(45)Ca内流。三七总皂甙不抑制~(45)Ca外溢。结果表明,三七总皂甙能特异阻断血管平滑肌α受体操纵的Ca~(2+)通道而不影响胞内Ca~(2+)释放过程。     

尼莫地平对离体豚鼠左心房的抑制作用及其机理探讨

尼莫地平(50μmol/L)明显减低豚鼠左心室收缩幅度,其强度与戊脉安(25μmol/L)相当;明显抑制正阶梯现象,但不象戊脉安那样使其翻转成负阶梯现象;明显抑制静息后增强效应;逆转或预防哇巴因诱发的心律失常。以上结果提示尼莫地平既能减少胞外Ca~(2+)通过Ca~(2+)通道内流,又能减少胞内贮Ca~(2+)释放。     

何谓钙拮抗剂?目前临床上常用的有哪几种?

<正> 钙拮抗剂的基本作用是阻滞心肌及平滑肌(如冠脉或外周血管平滑肌)细胞的慢Ca~(2+)通道,抑制Ca~(2+)向细胞的内流,故又称钙通道阻滞剂(或抑制剂)。电生理研究证实,心肌细胞动作电位曲线中0相的快速上升是由于Na~+内流所致,钙拮抗剂不影响或很少影响其过程;2相的平台由Ca~(2+)内流所维持,故能被钙拮抗剂所抑制。而属于慢自律细胞的窦房结和房室     

Fura—2荧光测定眼镜蛇心脏毒引起细胞胞浆Ca~(2+)浓度的变化

用Fura—2荧光技术直接测定眼镜蛇心脏毒(CTX)对大鼠泪腺细胞胞浆Ca~(2+)浓度的影响。在无Ca~(2+)的介液下,CTX可使胞浆Ca~(2+)浓度升高;随之加入1mmol/L CaCl_2可使胞浆Ca~(2+)浓度进一步升高。表明CTX能引起胞内Ca~(2+)释放和胞外Ca~(2+)内流。8mmol/L CaCl_2能阻断CTX升高胞浆Ca~(2+)浓度的作用。     

钙和钙调素与血管平滑肌细胞的增殖

采用MTT法,一种快速和不用放射物的新方法测定血管平滑肌细胞的增殖。本法与[~3H]TdR参入法和细胞计数法之间均有良好的线性关系。人胚和家兔主动脉平滑肌细胞的增殖依赖于FCS和Ca~(2+)。在FCS存在下,Ca~(2+)可促使细胞进入增殖周期和增加G_1晚期CaM含量;TFP可完全逆转Ca~(2+)的作用;阻断Ca~(2+)内流也能抑制细胞增殖;说明Ca~(2+)-CaM可刺激血管平滑肌细胞增殖,可能通过触发DNA合成所致。     

眼镜蛇毒活性组分抑制内皮细胞生长及其生化机制初探

目的探讨中华眼镜蛇毒活性组分(CCVAF)抑制新生牛肺主动脉血管内皮细胞(BAVEC)生长的作用及其生化机制。方法用MTT法测定CCVAF抑制BAVEC的增殖活性,用伊红-考马斯亮蓝法观察细胞骨架,罗丹明-鬼笔环肽荧光探针F-actin骨架蛋白定位,荧光标记流式细胞法测荧光强度表胞内钙离子浓度[Ca2+]i及分光光度法测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)的含量。结果CCVAF(0.625~20μg/mL)剂量依赖性地抑制内皮细胞的生长,IC50=2.45μg/mL。CCVAF与BAVEC共同孵育后,引起细胞间连接减少,细胞F-actin分布混乱;细胞上清液中LDH活力及NO的含量及胞内[Ca2+]i分别增加。结论CCVAF抑制BAVEC增殖,可能与CCVAF导致细胞骨架改变,LDH及NO分泌量及胞内Ca2+浓度增加等生化机制有关。     

牛磺酸对大鼠心肌Ca~(2+)调节作用的研究

研究了牛磺酸对大鼠离体左心室肌~(45)Ca内流的影响。对照组~(45)Ca内流与KH液中Ca_-~(2+)浓度有关。当Ca~(2+)浓度分别为0.62(低Ca~(2+)),1.25(正常Ca_-~(2+))和1.87(高Ca_-~(2+))mmol/L时,~(45)Ca内流相应为1.02±0.25,1.37±0.14,和1.45±0.14μmol/g。加入牛磺酸后,上述情况显著改变。低Ca_-~(2+),Tau 10、20、40mmol/L能分别使~(45)Ca内流增加为1.11±0.11,1.45±0.12和1.48±0.09μmol/g:正常Ca~(2+)时,Tau 10、20、40mmol/L能分别使~(45)Ca内流减少为1.19±0.07,1.14±0.23和0.97±0.24μmol/g:高Ca~(2+)时、Tau 10、20、40mmol/L能使~(45)Ca内流显著降低为1.12±0.05,0.58±0.18和0.53±0.10μmol/g。结果表明不同Ca~(2+)浓度能影响心肌~(45)Ca内流,牛磺酸对心肌~(45)Ca内流有双向调节作用,这可能在其抗心律失常机制中起重要作用。