胃癌细胞P53、P16蛋白表达与化疗药物敏感性的关系

目的探讨胃癌对化疗药物的耐药性及其与P53和P16蛋白表达的关系。方法收集75例新鲜胃癌标本,制备单细胞悬液,分别加入HCPT、CDDP、ADM、5-FU和MMC培养48h,用MTT比色法检测胃癌细胞对化疗药物的敏感性;免疫组化技术检测P53和P16 蛋白在胃癌组织中的表达。结果胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同：5-FU（43.4±9.2）、CDDP（41.9±8.7）和HCPT（40.6±8.3）对胃癌细胞的抑制率与ADM（31.6±7.8）和MMC（28.7±7.3）比较有统计学意义（P〈0.05）。胃癌组织中P53和P16 蛋白的阳性率分别为81.33%（61/75）和38.67%（32/75）。P53阳性者显示对5-FU、ADM、HCPT有明显的体外耐药性（P〈0.05）,P16在5-FU和CDDP耐药组阳性率低于敏感组（P〈0.05）。结论P53和P16蛋白参与了胃癌对化疗药物原发性耐药的产生。MTT药敏检测有助于筛选有效化疗药物。     

胃癌细胞转铁蛋白受体的表达与化疗药物敏感性的关系

目的　研究胃癌细胞转铁蛋白受体 (CD71)的表达与化疗药物敏感性的关系。方法　利用流式细胞仪 (FCM)检测 5 8例胃癌组织CD71+ 细胞表达率 ,同时用MTT比色法检测化疗药物敏感性。结果　胃癌组织CD71+细胞表达率与 5 -氟脲嘧淀 (5 -FU)及氨甲喋呤 (MTX)相对抑制率存在正相关 (均P <0 0 5 ) ,而与顺铂 (DDP)及丝裂霉素 (MMC)相对抑制率无相关 (均P >0 0 5 ) ;5 -FU、MTX药物敏感与不敏感两组间的胃癌组织CD71+ 细胞表达率有明显差异 (均P <0 0 1) ,而DDP、MMC药物敏感与不敏感两组间胃癌组织CD71+ 细胞表达率无差异 (均P >0 0 5 )。结论　胃癌组织CD71+ 细胞表达增高时 ,细胞处于增殖状态 ,对周期特异性化疗药物的敏感性增高 ;而对周期非特异性化疗药物不敏感。     

结直肠癌Tip60表达与肿瘤化疗药物敏感性的关系

目的探讨在结直肠癌组织中Tip60表达与肿瘤化疗药物敏感性及耐药蛋白表达的关系。方法采用免疫组织化学检测Tip60蛋白在62例结直肠癌组织中的表达,运用MTT比色法测定62例结直肠癌患者癌细胞对5种临床常用化疗药物的敏感性,并观察结直肠癌组织中Tip60的表达与药物敏感性的关系;观察结直肠癌组织中耐药基因GST-π,MDR,TOPO-Ⅱ的表达,及与Tip60蛋白表达的相关性。结果 Tip60在结直肠癌中的表达与结直肠癌化疗敏感性呈负相关（P〈0.05）。Tip60和GST-π的表达呈正相关（r=0.43,P〈0.05）,和MDR、TOPO-Ⅱ蛋白的表达无关（P〉0.05）。结论 Tip60蛋白在结直肠癌组织中表达与结直肠癌的化疗药物敏感性有关,Tip60可作为预测结直肠癌化疗药物敏感性的新指标。     

18种人肿瘤细胞株药物敏感性与基因表达的关系

目的 探讨18种人肿瘤细胞对化疗药物的敏感性与基因表达的关系。方法 采用MTT法检测细胞株对阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）和卡氮芥（BCNU）的敏感性。流式细胞术检测P-糖蛋白（P-gP）、谷胱甘肽-s-转移酶-π（GSTπ）、肺耐药蛋白（LRP）、多药耐药相关蛋白（MRP）和甲基鸟嘌呤甲基转移酶（MGMT）等耐药相关基因和Fas、bcl-2、p53和p16等凋亡调控基因的表达。结果 不同细胞株对同一药物敏感性有较大差异。相关分析表明，细胞株对DDP的敏感性与p53表达呈负相关（P=0．041），对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关（P〉0．05）。结论 细胞株对DDP的敏感性与p53表达有关。     

乳腺癌中p73α和p53表达与化疗药物敏感性的关系

目的:研究乳腺癌细胞p73α、p53表达与化疗药物敏感性的关系.方法:选取病理诊断为乳腺癌(术前未行放疗、化疗)的手术切除标本12例,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析表阿霉素(EPI)、丝裂霉素(MMC)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)4种化疗药物对乳腺癌细胞的相对抑制率,通过免疫细胞化学染色法分析乳腺癌细胞p73α、p53的表达.结果:0.1×PPC浓度时乳腺癌细胞对4种化疗药物的敏感率分别为MMC(42%)、EPI(33%)、5-Fu(17%)、DDP(17%);p73α( )的乳腺癌细胞对4种化疗药物敏感性均高于p73α(-)的乳腺癌细胞(P＜0.05),p73α阳性表达程度与乳腺癌细胞对EPI、MMC、5-Fu、DDP4种化疗药物的敏感性存在正相关关系(r=0.736,P＜0.05;r=0.744,P＜0.05;r=0.674,P＜0.05;r=0.721,P＜0.05).结论:p73α的表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性有关.     

胃实体肿瘤细胞周期蛋白非时相表达的研究

目的评价细胞周期蛋白E(cyclin E)非时相表达在胃癌发生发展中的意义。方法收集新鲜胃癌组织标本18例、正常胃粘膜组织标本8例，采用机械法制备成单细胞悬液，应用流式细胞术(FCM)检测胃癌组织和正常胃粘膜组织中cyclin E的表达及表达时相。结果发现33．8％的胃癌组织中有cyclin E的非时相表达，而相应的正常胃粘膜组织中无1例出现非时相表达。结论胃癌细胞中cyclin E的非时相性表达可能是引起细胞增殖紊乱，参与胃癌发生发展的重要分子事件之一。     

Bcl-2、Bad表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的关系

目的:研究bcl-2、bad表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的关系.方法:选取术中冰冻病理诊断为乳腺癌(术前未行放疗、化疗)的手术切除标本20例,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-y1)-2,5--diphenylt etrazolium bromide,MTT)法分析表柔比星(Epirubicin adriamyein,EADM)、5一氟脲嘧啶(Fluorouracil,5一Fu)、盖诺(Navelbine,NVB)、顺铂(Diaminedichloroplatinum,DDP)4种化疗药物对乳腺癌肿瘤细胞的相对抑制率,通过免疫组织化学染色法分析乳腺癌组织bcl-2、bad的表达.结果:0.1倍血浆峰值浓度(Plasma peak concentration,PPC)浓度时乳腺癌细胞对4种化疗药物的敏感率分别为EADM 30%、5-Fu 20%、NVB45%、DDP25%;bcl-2(-)的乳腺癌细胞对4种化疗药物敏感性均高于bcl-2(+)的乳腺癌细胞(P<0.05),bel-2阳性表达程度与乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性存在负相关关系(19<0.05).bad(+)的乳腺癌细胞对EADM敏感性高于bad(-)的乳腺癌细胞(P<0.05),bad阳性表达程度与乳腺癌细胞对EADM、NVB的敏感性存在正相关关系(P<0.05).结论:联合检测bcl-2、bad的表达可对乳腺癌化疗药物的选择起到指导作用,调节bcl-2、bad表达水平能成为治疗乳腺癌的新途径.     

miR-218和Survivin基因/蛋白在喉癌中的表达及其与喉癌化疗敏感性的关系

目的探讨微小核糖核酸-218(miR-218)和存活素(Survivin)基因/蛋白在喉癌中的表达情况及其与喉癌化疗敏感性的关系。方法选取2011年2月—2015年8月邯郸市中心医院耳鼻喉头部外科收治的喉癌85例(观察组)组织标本和正常喉黏膜组织30例(对照组)石蜡切块,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测喉癌组织和正常喉组织标本miR-218和Survivin mRNA表达,免疫组织化学法检测Survivin蛋白表达,分析miR-218和Survivin mRNA表达与喉癌患者临床病理特征及肿瘤化疗敏感性的关系,用Spearman方法分析miR-218和Survivin mRNA表达的相关性。结果与对照组比较,喉癌组织中miR-218表达显著降低(t=12.003,P<0.01),Survivin mRNA和蛋白表达均显著升高(t=12.953,χ~2=8.012,P<0.01)。miR-218和Survivin mRNA表达均与肿瘤直径大小、TNM分期、分化程度及淋巴结是否转移相关(miR-218:χ~2=11.318、12.584、16.910、20.102;Survivin:χ~2=12.966、8.300、9.910、13.963,P均<0.01),miR-218和Survivin mRNA表达均与喉癌患者性别、年龄、是否吸烟及病理类型无关(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示,喉癌组织中miR-218和Survivin mRNA表达呈明显负相关(r=-0.534,P<0.05)。与化疗不敏感患者比较,化疗敏感患者miR-218表达水平显著升高(χ~2=6.139,P<0.05),Survivin表达水平显著降低(χ~2=5.818,P<0.05)。结论喉癌组织miR-218和Survivin mRNA均表达异常,与术前化疗敏感性关系密切,可能作为预测化疗疗效的参考指标。     

老年消化道肿瘤体外化疗药物敏感性与临床病理特征的关系

目的 探讨老年消化道肿瘤体外化疗药物敏感性与临床病理特征的关系.方法 对33例老年消化道肿瘤患者(老年组)及35例低龄消化道肿瘤患者(对照组)进行MTT法肿瘤细胞原代培养药敏试验,同时检测肿瘤组织多药耐药相关因子P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽转移酶-π(GST-π)、p53蛋白的表达情况.结果 9种实验用化疗药物中,老年组5-氟尿嘧啶、奥沙利铂、表阿霉素、吡喃阿霉素、丝裂霉素对肿瘤细胞的抑制率与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);老年组中高分化腺癌患者所占比例与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);老年组中高分化腺癌组织中P-gp、GST-π的表达情况与低未分化癌比较,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组中高分化腺癌组织P-gp的表达情况与低未分化癌比较,差异有统计学意义(P＜0.05);不同分化程度的老年组和对照组肿瘤组织p53的表达情况差异无统计学意义(P＞0.05).结论 部分化疗药物对老年消化道肿瘤的抑制率低于低龄消化道肿瘤患者,这与老年消化道肿瘤分化程度较高的临床病理特征有关.     

应用流式细胞术对胃癌细胞细胞周期蛋白D1、E表达的研究

为了解胃癌细胞周期蛋白（Cyclin)D1、E的表达情况，采用多参数流式细胞技术对手术切除22例胃癌标本和9例正常胃粘膜标本的CyclinD1、CyclinE的表达含量进行检测分析。结果显示，肿瘤组织有不同程度的CyclinD1,CyclinE的异常表达（分别为40．90％和59．09％），且CyclinE的表达在胃癌淋巴结转移阳性组显著高于淋巴结转移阴性组。提示胃癌细胞的CyclinD1，CyclinE的异常表达是胃癌发生、发展过程中的一个重要的分子事件；CyclinE的检测可望成为临床上评估胃癌淋巴结转移的指标之一。     

临床乳腺癌细胞周期蛋白非时相性表达的初步探讨

目的 初步探讨临床乳腺癌细胞的细胞周期蛋白(Cyclin)表达规律并予以归类，为进一步研究肿瘤的细胞周期机制提供依据。方法 采用Cyclin／DNA双参数流式细胞术对临床上获取的乳腺癌细胞的Cyclin(Cyclin D1、E、A和B1)和DNA表达进行检测。结果 在16例乳腺癌标本中，细胞周期蛋白的非时相性表达可以归类如下：①Ⅰ型Cyclin D1、E、A和B1均呈非时相性过表达(5例)。②Ⅱ型Cyclins D1、E、A和B1均呈低表达或不表达(3例)。②Ⅲ型Cyclin D1呈过表达并贯穿于整个细胞周期，而Cyclins E、A和B1呈低表达成不表达(3例)．④Ⅳ型Cyclins E、A和B1呈不同程度的非时相性过表达，而Cyclin D1呈低表达成不表达(5例)。结论 Cyclins在乳腺癌细胞中的非时相性表达存在着一定的规律，而每一种表达类型则显示了某一特定的细胞周期破坏机制。     

卵巢癌细胞内Ca~(2 )含量与化疗敏感的相关性研究

不同浓度的五种化疗药物(顺铂、阿霉素、长春新碱、平阳霉素和更生霉素)以及碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)分别作用于卵巢癌COCl细胞系,荧光法动态测定肿瘤细胞内Ca~(2 )浓度.结果:①在静息状态下肿瘤细胞浆内游离Ca~(2 )浓度是85.6±9.7nmol/L;在bFGF作用下胞内游离Ca~(2 )浓度增高,若细胞外液中有CaCl_2,则胞内Ca~(2 )浓度增高.②在化疗药物作用下,肿瘤细胞内游离Ca~(2 )浓度呈短暂快速下降,随后恢复到初始浓度乃至稍高于初始浓度,但各药各剂量对Ca~(2 )的影响无明显规律性.     

恶性肿瘤组织肿瘤转移相关基因的表达与肿瘤细胞生物学特性的关系研究

目的:探讨各种肿瘤转移促进基因和肿瘤转移抑制基因编码蛋白在恶性肿瘤转移中的表达。方法:采用流式细胞术对56例肿瘤转移和61例肿瘤未转移患者瘤组织的CD44V5~+、CD44V6~+、cerbB-2~+、nm23~+、DCC~+和p16~+细胞检出率和DNA含量进行检测和分析。结果:恶性肿瘤患者瘤组织细胞的CD44V5~+、CD44V6~+和cerbB-2~+细胞表达率均显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05);而nm23~+,DCC~+,p16~+细胞表达率则显著低于正常对照组(P<0.01或P<0.05)。肿瘤转移者、多器官转移者、DNA异倍体者、SPF增高者、Apo降低者的CD44V5~+、CD44V6~+、cerbB-2~+细胞表达率均显著高于未转移者、单器官转移者、DNA二倍体者、SPF降低者、APO增高者(P<0.01或P<0.05);而nm23~+、DCC~+、p16~+细胞的表达率与此相反。结论:肿瘤转移相关基因编码蛋白在各种恶性肿瘤转移中均出现异常表达,但有一定的倾向性,且与瘤细胞的生物学特性(DNA倍性、细胞增殖活性、细胞凋亡水平)的关系均十分密切。     

凋亡相关蛋白BCL-2与白血病化疗药物敏感性的研究

目的 :研究急性白血病 (AL)细胞BCL 2表达及其与体外化疗药物敏感性的关系。方法 :采用Westernblotting技术和四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 ) ,分别检测HL 60、U93 7细胞株和 6例急性髓性细胞白血病 (AML)细胞BCL 2表达水平及体外对柔红霉素 (DNR)的敏感性。结果 :( 1)BCL 2表达水平HL 60细胞高于U93 7细胞 ,而 6例AML细胞BCL 2表达水平不同 ;( 2 )MTT检测结果显示 ,DNR对HL 60抑制率低于U93 7;BCL 2高表达的AML细胞 ,DNR抑制率低。结论 :细胞系和白血病原代细胞的BCL 2高表达伴低药敏与AML疗效有关。     

结肠直肠癌细胞DNA及CD44含量与肿瘤形成和转移的关系

目的 :探讨结肠直肠癌细胞DNA含量及CD4 4的定量检测与癌形成和转移的关系。方法 :采用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)对手术切除的结肠直肠癌组织及癌旁周围正常组织细胞进行DNA含量及倍体测定、CD4 4定量检测。结果 :DNA含量在结直肠癌组明显增高 ,二倍体细胞明显减少 ,而异倍体明显增多 ,在结直肠癌组异倍体率为 6 6 6 % ;同时CD4 4在结直肠癌组明显高于癌旁周围正常组织组 (P <0 0 1) ,CD4 4在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组中有极显著差异 (P <0 0 1)。结论 :癌细胞DNA含量及异倍体率增加 ,CD4 4的表达与结肠直肠癌形成、转移有关。     

Cyclin A与P27在卵巢癌中的表达及相关分析

目的 研究细胞周期蛋白A(Cyclin A)和P27蛋白在卵巢癌组织中的表达及相关性.方法 用免疫组化法检测51例卵巢癌、13例卵巢良性肿瘤、15例正常卵巢组织中Cyclin A和P27的表达及相关性,并分析他们与病理分级,临床分期的关系.结果 正常卵巢和卵巢良性肿瘤之间,Cyclin A与P27的表达无差异(P>0.05),其中Cyclin A在卵巢癌中的表达明显高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织,差异具有统计学意义(P<0.01),且随着肿瘤分级,分期增高阳性率呈递增趋势.而P27的表达则相反.两者的表达呈负相关.结论 Cyclin A、P27的表达异常与卵巢癌的发生发展有密切的关系,检测Cyclin A、P27的表达有可能评估卵巢癌恶性程度和预后.     

Cyclin D1在食管癌中的表达及其临床意义

【目的】检测食管癌中CyclinD1的表达并探索其临床意义。【方法】运用RT-PCR与组织芯片免疫组化法检测CyclinD1在食管癌组织、配对的邻近食管上皮中的表达状态。分析探讨CyclinD1的表达状态与食管癌临床和病理参数之间的关系。【结果】61%和35%的病例分别在食管鳞癌及其邻近上皮组织中显示CyclinD1表达增加。食管癌组织与其邻近的上皮组织之间CyclinD1的表达具有显著差异(!2=8.776,P<0.01)。不同T分期的肿瘤组织中CyclinD1的表达差异具有统计学意义,在T3+T4期的表达率为70%,T1+T2期的表达率为40%(T3+T4vsT1+T2,!2=5.363,P<0.05);在T3期的表达率为70%,T1期的表达率为30%(T3vsT1,!2=4.646,P<0.05)。【结论】CyclinD1可能是参与食管癌化的分子标志物,并且可能是区分不同食管癌T分期的有价值的分子标志物。     

周期蛋白A、D1和增殖细胞核抗原在肺癌中的表达及临床意义

目的观察细胞周期蛋白A、D1（Cyclin A、D1）和增殖细胞核抗原（PCNA）在肺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化和RT-PCR方法观察94例肺癌组织和10例假瘤炎性肺组织（对照组）中Cyclin A、D1和PCNA的表达。结果在94例肺癌中，Cyclin A蛋白表达阳性率为84.0%；Cyclin D1蛋白表达阳性率为63．8％;PCNA蛋白表达阳性率为68．1％；肺癌的分期与Cyclin A和PCNA蛋白的表达相关（P〈0．05）。在小细胞癌、鳞癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组均存非常显著的提高（P〈0.01）;在腺癌中Cyclin A、D1的mRNA表达较对照组也有明照增强（P〈0．05）。结论肺癌中Cyclin A和PCNA蛋白表达有显著升高，Cyclin A和PCNA蛋白的过表达与肺癌的分期相关。     

Cyclin E在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨CyclinE的表达在乳腺癌的发生、转移和复发中的作用。方法:通过免疫组化SP法检测CyclinE在69例乳腺癌组织中的原位表达,并对肿瘤临床分期与其表达结果做相关性分析。结果:CyclinE在乳腺癌中的表达率为47.8%,其与肿瘤临床分期及淋巴结转移呈正相关。CyclinE在不同临床分期的乳腺癌组织中过表达率的差异具有显著性意义(χ2=8.154,P<0.05)。在乳腺癌患者淋巴结转移组,CyclinE蛋白的阳性表达率为64.52%,远高于无淋巴结转移组的阳性率36.84%(χ2=5.231,P<0.05)。结论:CyclinE的表达可预测乳腺癌患者淋巴结转移和复发,并可作为推断预后的重要指标之一。