中药补阳还五汤对脊髓神经元的保护作用

目的 研究“补阳还五汤”在体外培养中是否具有一定的神经元保护作用。方法 本研究采用原代培养胎鼠脊髓神经元，分别将高浓度的补阳还五汤（20μl／ml）、低浓度的补阳还五汤（10μl／ml）与体外培养5d的原代脊髓神经元共同孵育24h，空白对照组不加中药只加入等量的培养液。选用100μmol／L的谷氨酸作用于细胞1h，建立谷氨酸诱导原代脊髓神经元调亡的细胞培养模型，采用酶学方法（MTT法）评价神经元损伤程度。结果 补阳还五汤组神经元线粒体内的琥珀酸脱氢酶的活性明显地高于空白对照组，组间有极显著的差异（P〈0．001）。结论 “补阳还五汤”可以部分地抑制谷氨酸的兴奋性神经毒性作用。     

补阳还五汤的抗氧化作用

目的：探讨复方中药制剂补阳还五汤的抗氧化机制。方法：用水煎醇沉法制备补阳还五汤提取液,从新生鼠坐骨神经分离纯化雪旺细胞,建立过氧化氢（H2O2）损伤模型。将培养细胞分为补阳还五汤处理组、氧化损伤组及正常组和空白对照组,培养12h时,检测丙二醛（MDA）的含量,用免疫组化方法检测Caspase-3的表达,用RT-PCR技术检测胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）的表达。结果：与氧化损伤组相比,补阳还五汤处理组的MDA含量明显减弱,Caspase-3呈弱阳性表达,GDNF mRNA的表达量减少不明显。结论：补阳还五汤具有良好的抗过氧化损伤效果,对H2O2引起雪旺细胞的损伤具有保护作用。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后移植间充质干细胞转分化的作用

目的观察脊髓损伤(SCI)后补阳还五汤是否有促进移植间充质干细胞(MSC)转分化为神经元作用。方法SD大鼠30只,以自制改良Allen装置造模成功后,随机分为模型组(不治疗)、补阳还五汤组、补阳还五汤加MSC组各10只。补阳还五汤组大鼠造模后当天即开始每天一次中药灌胃(3g/kg);补阳还五汤加MSCs组大鼠造模后随即移植MSC,细胞浓度1×106/mL,每鼠4.5!L,注入大鼠蛛网膜下隙,注射速度1!L/min,并开始每天一次中药灌胃,剂量3g/kg。4周后观察脊髓结构变化。结果与模型组相比,补阳还五汤组脊髓组织结构明显改善,前角运动神经元数量有所增加;补阳还五汤加MSC组结构最佳,并且前角运动神经元数量最多。结论由此推测补阳还五汤可能有促进移植MSC转分化为脊髓前角运动神经元作用。     

补阳还五汤对脑梗塞患者血浆NO的影响

补阳还五汤治疗脑梗塞疗效确切，已被大多数医家肯定。本文从其对脑梗塞患者血浆ＮＯ的影响探讨补阳还五汤的作用机制。材料与方法１临床资料脑梗塞患者共５８例。随机分为治疗组３７例和对照组２１例。两组年龄伴发疾病和既往史积分、神经功能缺损评分经统计学处理Ｐ＞０．０５。两组一般资料见表１。发病距入院时间１～１０天。均符合１９９５年１０月第四届全国脑血管病学术会议“各类脑血管疾病诊断要点”，并经头颅ＣＴ确诊。神经功能缺损程度、伴发疾病及既往史评分均根据上述会议“脑卒中患者临床功能缺损程度评分标准”，“伴发疾病…     

补阳还五汤对红核脊髓束横断后神经元的保护作用

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)对红核脊髓束横断后神经元保护作用的影响。方法:雌性SD大鼠随机分为3组:1.正常组;2.实验组:C3-4右侧红核脊髓束横断后灌服补阳还五汤;3.对照组:C3-4右侧红核脊髓束横断后灌服蒸馏水;用FG逆行示踪定位红核脊髓束神经元在红核的分布。动物存活8周后,Nissl染色计数红核脊髓束神经元并计算其平均截面积。结果:红核神经元的数目和平均截面积实验组分别减少了22%和35%,对照组分别减少了42%和64%。结论:BYHWT不仅提高了轴突横断后红核神经元的存活率,还对其萎缩有抑制作用。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后移植神经干细胞存活、增殖与迁移的影响

目的:探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)灌胃对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后移植胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)存活、增殖与迁移的影响。方法:将SD大鼠随机分为SCI组、NSCs移植组、NSCs移植联合补阳还五汤灌胃组。制作大鼠脊髓横断损伤模型,将BrdU标记NSCs细胞按浓度1×106/ml分别移植入移植组和联合组的脊髓横断处,损伤组用等量DMEM/F12完全培养基代替。术后联合组每天用BYHWD予以灌胃治疗1次,损伤组和移植组用生理盐水代替。各组在7、14、28 d后分别取材,用免疫荧光组织化学法检测移植在SCI处的NSCs存活、增殖和迁移情况。结果:损伤组未见BrdU标记阳性细胞;联合组各时间点BrdU标记阳性细胞数量均多于移植组各时间点,并有显著性统计学意义(P<0.05);联合组28 d时BrdU标记阳性细胞数量最多,与联合组7 d和14 d相比有显著性统计学意义(P<0.05);在联合组各时间点,BrdU标记阳性细胞向SCI处头尾端组织迁移的距离明显长于移植组各时间点。结论:脊髓横断损伤后,移植胚胎NSCs能够存活并增殖和迁移。补阳还五汤能够促进大鼠脊髓全横断损伤处移植的NSCs存活、增殖和迁移。     

补阳还五汤联合神经干细胞移植促进脊髓损伤髓鞘再生

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)灌胃联合神经干细胞(NSCs)移植对脊髓损伤(SCI)后髓鞘再生的影响.方法:将48只成年雌性SD大鼠随机分为脊髓损伤(SCI)组、BYHWD灌胃组、NSCs移植组、NSCs移植联合BYHWD灌胃(BYHWD+ NSCs)组.SCI组不做治疗;NSCs组于脊髓横断后局部移植NSCs; BYHWD+ NSCs组移植NSCs,并每天BYHWD灌胃;各组在损伤后14、28 d后分别留取损伤脊髓标本,用免疫荧光双标法检测髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达情况,透射电镜观察脊髓白质内髓鞘超微结构变化.结果:BYHWD+ NSCs组MBP阳性表达最多,较其他3组差异有统计学意义.电镜下BYHWD+NSCs组髓鞘结构较为规整,轴突微丝、微管排列有序,线粒体结构完整,可见薄髓的再生髓鞘.结论:SCI后BYHWD灌胃联合NSCs移植能够促进损伤脊髓MBP的表达及脱髓的轴突再髓鞘化.     

补阳还五汤对小白鼠额叶皮质神经细胞超微结构的影响

本文用细胞形态立体计量学方法对服用补阳还五汤中药的昆明种雌性小白鼠额叶皮质神经细胞的十一种形态参数进行统计分析，其结果发现，补阳组和对照组比较，在性成熟期溶酶体体密度Ｖｖ２、线粒体外膜比表面δ１及外膜面密度Ｓｖ１均有高度显著性差异；溶酶体的面数密度Ｎａ有显著性差异。文章还讨论了这些差异的医学意义。     

补阳还五汤治疗冠心病心绞痛临床观察

目的观察补阳还五汤为主方治疗冠心病心绞痛的临床疗效。方法将81例患者随机分为2组,治疗组46例以补阳还五汤加味治疗,对照组35例以常规西药消心痛治疗,1疗程后观察临床症状及心电图的改善情况。结果治疗组总有效率80.4%,对照组总有效率57.1%,2组总有效率比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论补阳还五汤为主方治疗冠心病心绞痛有良好疗效。     

体外培养的施万细胞在平面和聚乙醇酸纤维网架上的迁移

目的 观察培养的施万细胞（ＳＣｓ）在平面马聚乙醇酸（ＰＧＡ）纤维的立体网架上迁移特性。方法 用光、电镜技术观察在不同培养环境和培养时间中,ＳＣｓ在平面或立体网架上的形态变化。结果 平面上ＳＣｓ一般为长梭形,同群细胞间以突起相连接,同群细胞迁移有方向和速率一致的特征。立体网架上细胞有球形和长做形两种。细胞间也互相接触;细胞迁移速度快于平面,纤维上的长做槛形细胞块于球形细胞,长做榄形细胞长轴往往与纤维     

雪旺细胞在聚酯纤维上的迁移及对神经突起的引导作用

用组织培养技术，将ＳＤ大鼠的坐骨神经段及脊髓经节培养在聚酯纤维上，最长培养时间为３０天，对雪旺细胞的行为进行了研究。用倒置相差显微镜、扫描电镜及透射电镜对雪旺细胞的行为作了观察。结果显示：雪旺细胞沿聚酯纤维作螺旋式迁移；雪旺细胞支持并引导脊神经节突起的生长；聚酯纤维对神经段和脊神经节有良好的生物相容性。实验为非神经移植体研究提供了新的材料。     

体外培养人胎儿雪旺氏细胞的增殖及其细胞动力学研究

新鲜和液氮保存3个月的人胎儿雪旺氏细胞体外培养8天,细胞数量增加一倍,培养液中加入二丁基环磷酸腺苷和牛脑垂体浸出液,细胞增倍时间缩短近一倍.流式细胞计测定结果显示,培养早期,S期、G2+M期细胞所占比例<5%,随着培养时间的延长,其比例逐渐增加,第6天达高峰,环磷酸腺苷和垂体浸出液作用3天,S期、G2期+M期比例达15%.实验结果表明:人胎儿雪旺氏细胞在体外增殖缓慢,环磷酸腺苷和垂体浸出液能刺激雪旺氏细胞分裂;冷冻复苏后的雪旺氏细胞其生长特征以及对环磷酸腺苷和垂体浸出液的反应与新鲜细胞相同.     

雪旺细胞和层粘蛋白对脊髓前角运动神经元损伤的保护作用

选３０只成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠，坐骨神经切断后，分别应用体外培养的雪旺细胞，层粘蛋白和生理盐水于神经侧断端，４周后，观察损伤侧腰４、５节段脊髓前角运动神经元的存活率，神经元酸性磷酸酶和胆碱脂酶活性变化。结果：生理盐水组脊髓前角运动神经元存活率为５９％，酸性磷酸酶活性明显增强，胆碱脂酶活性明显降低；雪旺细胞组和层粘蛋白组脊髓前角运动神经元存活率分别为８２．３％和８１．１％，酸性磷酸酶和胆碱脂酶活性较对     

重组睫状神经营养因子对受损周围神经施万细胞相关基因表达的作用

目的研究重组睫状神经营养因子(CNTF)对受损周围神经施万细胞基因表达的作用。方法用硅管套接切断的大鼠坐骨神经,在受损神经局部给予重组CNTF,术后用免疫组织化学ABC法结合计算机图像分析观测S100蛋白(S100)、生长相关蛋白-43(GAP-43)、磷酸化酪氨酸(PTyr)、信号转导子和转录激活子(STAT)3的免疫反应阳性物质在修复侧远段神经的分布和相对含量。结果CNTF组修复侧远段神经相应区域S100、GAP-43、PTyr、STAT3阳性物质的含量显著或非常显著高于生理盐水组。结论重组CNTF能上调受损神经施万细胞S100、GAP-43、PTyr和STAT3的表达,提示重组CNTF通过强化受损神经施万细胞JAK-STAT途径,E调其S100和GAP-43的基因表达。     

雪旺细胞和层粘蛋白对背根节神经元损伤的保护作用

选用２月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠，在距梨状肌下孔０．５ｃｍ处切断右侧坐骨神经，近侧断端套入硅胶管，然后分别注入２０μｌＳｃｈｗａｎｎ细胞县液、层粘蛋白２０μｇ／ｍｌ和生理盐水。４周后观察到Ｌ４（Ｌ５）节神经元存活率分别是９０％、８０％和７２％（８８％、７３％和５３％）。     

格林巴利血清蛋白对体外培养的雪旺细胞的影响

目的：探讨格林巴利血清蛋白对聚酯纤维上雪旺细胞粘附力的影响。材料和方法：实验组和对照组分别用含格林巴利血清蛋白的培养液和含健康者血清蛋白的培养液培养聚酯纤维网架上SD大鼠的雪旺细胞（SchwannCellSC);常规培养组用小牛血清培养液培养,在培养60min,120min,4h,8h,24h,72h观察SC的形态和对纤维粘附力的变化。结果：和常规培养组比较,对照组SC无明显差异;实验组从120min到8h,已包卷纤维的单个SC或SC链由梭形变为球形或者聚集成团;最后,绝大部分SC溶解成碎屑漂浮在纤维旁;24h,有少量新的SC从神经段迁移到纤维上。结论：格林巴利血清蛋白降低SC的粘附力是髓鞘脱失的重要因素。     

雪旺氏细胞对中枢神经轴突生长的支持和促进作用

胚胎大鼠脊髓植块接种于纯度〉９５％的单层人胎儿雪旺氏细胞表面进行培养，观察雪旺氏细胞对神经突起生长的支持作用，脊髓神经突起在雪旺氏细胞表面活跃生长，突起生长速度〉４５０μｍ／天，与对照组相比有显著性差异。将长于鼠尾胶上的雪旺氏细胞移植于成年大鼠脊髓损伤腔内，移植后２１天后，透射电镜观察，有髓或无髓纤维长人移植物中，移植后３０天，长入移植物中的轴突更丰富，而无细胞的胶原移植物中未见轴突长入。结果表明     

龟板对脊髓损伤大鼠神经干细胞的作用

为了观察龟板对大鼠脊髓损伤后 nestin表达和后肢功能恢复的影响 ,本实验于手术后 1d、7d、14 d、2 1d、2 8d分别对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能 ,处死动物后应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白的表达 ,用图像分析仪进行定量分析 ,观察了龟板对脊髓损伤后神经上皮干细胞蛋白的影响。结果表明 ,脊髓损伤后第 1d,在两组受损伤脊髓灰质中都可见到 nestin的表达 ;第 14 d时达到高峰 ,龟板组为 3 8.2 4± 6.83 ,损伤组为 2 2 .48± 7.83 (P<0 .0 5 )。龟板组可使损伤的脊髓中 nestin持续高表达至术后第 2 8d,而损伤组仅持续高表达至术后 2 1d。增加的 nestin阳性细胞数量与神经功能的改善平行。本研究结果提示 :龟板可减轻神经损伤症状和促进脊髓损伤后神经干细胞的增殖     

移植周围神经对大鼠受损视网膜节细胞的影响

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠切断一侧视神经后，随即将自体坐骨神经段、神神经段或挤压后的坐骨神经段植入眼球玻璃体内，植入神经段长２ｍｍ。术后动物分别存活２、４或８周，将动物麻醉处死后，取同侧视网膜制备切片，Ｎｉｓｓｌ染色，观察视网膜节细胞的变化，并用计算机图像分析仪测量ＲＧＣ胞体截面积。结果表明，植入坐骨神经段各组ＲＧＣ大多数存活，并出现巨大的节细胞。存活２周时，ＲＧＣ胞体截面积均值比正常组大；４周时