三峡库区肺吸虫病与血吸虫感染ELISA检测的交叉反应研究

目的探索三峡库区肺吸虫病与血吸虫病免疫反应的交叉反应率。方法在酶联免疫吸附试验（ELISA）标准条件下进行严格质量控制后,采用ELISA方法分别用肺吸虫成虫抗原检测血吸虫病人阳性血清,用血吸虫虫卵抗原检测肺吸虫病人阳性血清．观察二者间的交叉反应率。结果在质控条件下ELISA的检测结果显示,80例三峡库区肺吸虫患者血清经血吸虫虫卵ELISA检测阳性19例,交叉反应率为23．75％。30例血吸虫患者血清经肺吸虫成虫抗原检测阳性11例,交叉反应率为36．67％。二者间差异无统计学意义（χ^2=1．835,P〉0．05）。结论三峡库区肺吸虫病与血吸虫病ELISA检测有较高的交叉反应率,需建立肺吸虫和血吸虫病的特异性免疫学检测方法,减少交叉反应。对三峡库区上下游的血吸虫病流行区传入库区的血吸虫病作出特异诊断、早期预防,以达到控制血吸虫病在库区流行、扩散的目的。     

基于纳米抗体和石墨烯/金复合材料的免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原的研究

将抗日本血吸虫SEA纳米抗体固定于镀金的石墨烯薄膜上,制备一种新型的阻抗型免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原。使用扫描电镜、原子力显微镜和拉曼光谱对石墨烯薄膜及石墨烯/金复合材料进行了表征,并对制备的免疫传感器的特异性和灵敏度进行了测试。结果显示,所制备的免疫传感器具有较好的特异性和灵敏度,与曼氏裂头蚴、刚地弓形虫、颚口线虫、简单异尖线虫、华支睾吸虫和卫氏并殖吸虫抗原没有交叉反应,检测日本血吸虫可溶性虫卵抗原达到0.01 ng/m L水平;血吸虫病患者血清的阳性检出率为66.7%,优于现有试剂盒ELISA法56.7%的检出率,与ELISA的符合率为90%。该免疫传感器检测日本血吸虫循环抗原具有较高的灵敏度和特异性,制作方法简便、快速等优点,具有较好的应用潜能。     

三种初筛方法检测HIV抗体的结果比较及评估

目的比较酶联免疫吸附试验（ELISA）、明胶颗粒凝集试验（PA）、胶体硒免疫层析法（ICA）检测人类免疫缺陷病毒抗体的结果，了解这三种方法的优劣，探讨临床实验室初筛诊断HIV方法的灵敏性和准确性。方法用卫生部HIV质控血清和免疫印迹法（WB）确认的HIV抗体阳性标本和阴性标本。分别用ELISA法、PA法及ICA法检测；用免疫印迹法确认的HIV阳性的标本作倍比稀释后，再分别用PA法、ELISA法及ICA法检测。结果80例经免疫印迹法确认的HIV阳性患者，ELISA法、PA法、ICA法的检出符合率分别为100％、98．8％、97．5％；经稀释法检测。ELISA法较PA法和ICA法敏感。其检测的准确性分别为97．5％、97．5％、92．5％。结论筛查HIV抗体方法最好选用ELISA法或PA法。以防漏检。     

血清学方法在检测抗

目的 分析血清学检测方法在抗-HIV中的应用。方法 选取2018年1月~6月我院行HIV抗体检测的血清标本140例,分别采用化学发光免疫法（CLIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）和胶体硒免疫层析法（ICA）三种方法检测,并与WB金标准法比较,观察每种检测方法的阳性率,灵敏度,特异性。结果 CLIA的阳性和阴性（73.61%,89.71%）符合率高于ELISA（70.83%,86.76%）和ICA（66.75%,82.09%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。CLIA的灵敏度、特异性、准确度高于ELISA和ICA,差异有统计学意义（P＜0.05）;CLIA的漏检率、误诊率低于ELISA和ICA,但差异无统计学意义（P＞0.05）;CLIA的阳性预测值、阴性预测值高于ELISA和ICA,但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 CLIA和ELISA的灵敏度、特异性及自动化程度均较高,适用于大批量标本的筛查。ICA的灵敏度和特异性相对较低,但操作简便快捷,对于急诊及小量标本的筛查比较适合。     

6种虫媒病毒蛋白芯片检测方法的建立

目的 建立针对6种虫媒病毒的蛋白芯片检测方法,用以检测流行性乙型脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、登革病毒(1～4型)、西尼罗病毒、西部马脑炎病毒和东部马脑炎病毒的特异性抗体.方法 将病毒特异性抗原作为捕获抗原点样制备蛋白芯片,利用双抗夹心ELISA原理检测血清中的病毒特异性抗体.首先利用免疫兔血清进行特异性诊断抗原的筛选,并对抗体芯片检测条件进行优化,然后采用56份临床疑似的阳性血清标本及阴性对照标本对该方法进行验证,并与常规ELISA方法进行比对.结果 共筛选出11个特异性较好的重组诊断抗原.抗原点样浓度在0.125 ～0.900mg/ml时可获得良好的检测效果,血清检测范围为1:100～1:1000.对26份临床疑似的蜱传脑炎病毒血清标本,22份登革病毒血清标本及8份流行性乙型脑炎病毒临床血清标本的检测结果为:共检测出蜱传脑炎病毒IgG阳性血清标本20份,阳性检出率为76.9％,IgM阳性血清标本17份,阳性检出率65.3％,与ELISA检测符合率分别为96.1％和84.6％.乙型脑炎病毒IgG阳性血清4份,阳性检出率50.0％,IgM阳性血清5份,阳性检测率62.0％,与ELISA检测符合率分别为87.5％和100％.登革病毒IgG阳性血清标本13份,阳性检出率63.6％,IgM阳性血清标本14份,阳性检测率68.1％,与ELISA检测符合率分别为86.3％和90.1％,结果经一致性Kappa检验后,与ELISA检测结果一致性良好.阴性对照血清结果显示检测特异性为100％.结论 本研究建立的虫媒病毒抗体芯片检测方法具有较高的特异性和可靠性,可用于6种虫媒病毒抗体的临床检测.     

非平衡法在乙型肝炎e抗体和核心抗体检测中的效果评价

目的 探讨酶联免疫吸附试验非平衡法对乙型肝炎e抗体和核心抗体检测结果的影响.方法 收集电化学发光免疫分析法（ECLIA）检测抗-HBe阳性标本44例和抗-HBc阳性标本57例,再用酶联免疫吸附试验法（ELISA）对阳性标本进行检测,样本加入反应孔中分别于0min、30min后加入酶标志物,余下步骤均严格按照说明书操作.结果 对ECLIA检测抗-HBe阳性标本44例、抗-HBc阳性标本57例进行ELISA复检后,平衡法抗-HBe的漏检率为52.3％,抗-HBc漏检率为40.4％;非平衡法抗-HBe的漏检率为34.1％,抗-HBc漏检率为24.6％.结论 竞争法检测抗-HBe和抗-HBc时应适当延迟加酶的时间,以降低漏检率.     

ELISA差减分析——一种简便实用的免疫逃逸变异HBsAg检测新方法

目的:立足现有实验技术与试剂,建立一项血清免疫逃逸变异HBsAg检测的新方法。方法:以市售ELISA试剂筛选其检测信号在灰区范围的HBV感染者;采用2种不同免疫逃逸变异HBsAg检测能力的ELISA试剂对选留血清进行检测,以"ELISA差减分析"方式确认免疫逃逸变异HBsAg阳性者;以中和实验及雅培化学发光试剂验证检测结果的特异性;并对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性者以PCR及直接测序做HBV DNA分析。结果:自10231例受检者中筛选HBsAgELISA检测信号灰区标本244例;复核检测显示G6ELISA、市售ELISA两者对野生HBsAg检测敏感性分别为0.0625ng/ml,与0.125ng/ml;检测阳性率分别为16.80%(G6ELISA)及5.73%(市售ELISA)。ELISA差减分析确定免疫逃逸变异HBsAg阳性者27例,阳性率为11.07%。对部分免疫逃逸变异HBsAg阳性血清做进一步考核,抗HBs中和强度为(84.07%±6.32%),中和率100%(13/13);雅培化学发光试剂复核阳性率为94.4%(17/18,阳性者中包括两份单项G6-ELISA检测最低阳性信号标本);HBV DNA阳性率36.9%(7/19),略低于同期HBsAg低信号阳性者(6/14,42.9%,P0.05);直接测序发现其中"a"区变异3例,分别为P142L、T126A及M133T/K160T;S蛋白亲水区非"a"决定簇变异1例,变异类型为L109Q。结论:ELISA差减分析法能有效地用于部分免疫逃逸变异HBsAg的临床诊断,其诊断能力视所依托试剂免疫逃逸变异检测能力不同而有显著差别。     

斑点金免疫渗滤法测定人全血中抗HBc抗体

目的：建立一种适合斑点免疫渗滤法（Ｄｏｔ Ｉｍｍｕ ｎｏ ｇｏｌｄ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ ＤＩＧＦＡ）特点的快速全血诊断方法,方法：选择可瞬间分离血中细胞和血清的膜,依据ＤＩＧＦＡ的原理对３３份ＨＢｃＡｂ阳性血样和４８份阴性血样进行了全血抗ＨＢｃＡｇ抗体的检测。结果：测定阳性标本率为９６．７％,阴性标本符合率为１００％。结论：提供了一种简便、快速、可行的全血检测抗ＨＢｃＡｇ抗体的方法。     

滴金免疫渗滤法检测广州管圆线虫抗体的实验研究

目的建立一种检测广州管圆线虫抗体的简便、快速、敏感、特异的新方法。方法以广州管圆线虫成虫抗原为包被抗原，金标记SPA为显色剂，建立检测广州管圆线虫抗体的滴金免疫渗滤法（DIGFA）；并以ELISA平行检测比较。结果用DIGFA检测广州管圆线虫实验感染鼠血清50份，其阳性检出率为96．0％，50份正常鼠血清的阴性符合率达100％。DIGFA分别检测蛲虫阳性鼠血清13份。绦虫阳性鼠血清11份和粪类圆线虫阳性鼠血清18份，前二者均为阴性，后者交叉反应率为5．6％；DIGFA与ELISA平行检测30份广州管圆线虫阳性鼠血清，两法符合率达96，7％。结论DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性。且具有简便、快速、不需特殊仪器设备等优点。是一种检测广州管圆线虫抗体的新方法。     

无偿捐血者HBsAg三种试剂检测结果比较分析

目的分析比较三种乙型肝炎表面抗原检测试剂在血液筛查中的应用价值。方法采用试剂厂家提供的ELISA试剂（两步法）、进口试剂和国产ELISA试剂（一步法）对3600份无偿献血标本进行平行实验,对单试剂筛查为HBsAg阳性的样本进行确证实验。结果以进口试剂为对比试剂,评估国产ELISA试剂（两步法）的灵敏度、特异度和符合率分别为96.12%、99.63%和99.28%,国产ELISA一步法的灵敏度、特异度和符合率分别为90.86%、98.92%和98.11%。结论应选择高灵敏度的试剂,以提高乙肝表面抗原的检出率,保障临床用血安全和提高临床乙肝的确诊率。     

抗日本血吸虫SEA特异性IgY应用于循环抗原检测的研究

本研究应用抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)建立敏感、特异的检测循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验( ELISA).用SEA皮下多点注射法免疫海蓝鸡,水稀释法制备IgY抗体,以辣根过氧化物酶标记纯化的IgY抗体(IgY-E)和兔抗IgG抗体(IgG-E)分别作为检测抗体,IgY抗体和兔抗...     

2008-2010年重庆市血吸虫病潜在流行区监测报告

目的了解重庆市血吸虫病潜在流行区血吸虫病潜在流行因素,为血吸虫病潜在流行区提供预警信息,防止钉螺的扩散与血吸虫病疫情的传播。方法在三峡库区中段万州和支流上游开县设立固定监测点和流动监测点,调查当地居民、流动人口及家畜的血吸虫感染情况;在固定危险地带和流动可疑环境开展输入性钉螺调查。采用ELISA方法检测人群血清血吸虫抗体情况。结果 2个监测点共调查当地居民2006人,血清阳性率为1.50%（30/2006）,开县血清阳性率高于万州（2.29%vs0.70%）,差异有统计学意义（χ2=8.66,P〈0.01）。调查流动人员1970人,血清阳性率为2.39%,返乡人员血清阳性率高于疫区来渝人员（2.92%vs0.26%）（χ2=9.54,P〈0.01）,万州区的流动人员阳性率高于开县（3.61%vs1.32%）（χ2=11.03,P〈0.01）。监测点未发现从血吸虫病流行区引进的家畜,检测当地的牛和羊血清均为阴性。固定监测和流动监测分别调查133875、545530m2,未发现钉螺。结论重庆市血吸虫病潜在流行区存在血吸虫病传播的危险因素,应加强潜在流行区的传染源监测和管理,防止钉螺输入潜在流行区。     

白细胞介素-4受体基因多态性与RSV毛细支气管炎相关性的病例对照研究

目的检测白细胞介素-4(IL-4)受体α链(IL-4Rα)I50V和Q576R基因多态性与呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎的相关性。方法采用聚合酶链-限制性片段长度多态法检测130例RSV毛细支气管炎患儿和108例健康儿童IL-4Rα/I50V、Q576R基因多态性,应用化学发光法和酶联免疫吸附法检测血清总IgE和鼻咽分泌物(NPS)IL-4R水平。结果病例组II、IV和VV基因型频率为24.6%、51.5%和23.9%,对照组为27.8%、40.7%和31.5%,差异无统计学意义(χ2=2.960,P0.05);病例组I、V等位基因频率为50.4%、49.6%,对照组为48.1%、51.9%,差异无统计学意义(χ2=0.236,P0.05),II基因型NPS中IL-4R高于IV和VV基因型(Z=2.031,2.034,P0.05)。病例组QQ和QR基因型频率为72.3%、27.7%,对照组为64.8%、35.2%,差异无统计学意义(χ2=0.521,P0.05);病例组Q、R等位基因频率为86.2%、13.8%,对照组为82.4%、17.6%,差异无统计学意义(χ2=1.261,P0.05),R等位基因携带者NPSIL-4R高于Q等位基因携带者(Z=2.205,P0.05)。两个位点基因型间血清总IgE差异无统计学意义(F=1.021,t=0.452,P0.05);基因型频率与病情间亦无关联(χ2=0.322,1.393,P0.05)。结论 IL-4Rα/50II基因型及576R等位基因携带者与RSV毛细支气管炎NPSIL-4R水平增高相关。     

内皮素-3基因表达和启动子甲基化与乳腺癌的相关性研究

目的:检测分析内皮素-3(EDN-3)基因表达及其启动子甲基化在乳腺癌患者各种临床状态的变化。方法:采用实时定量PCR(RT-PCR)和甲基化PCR(MS-PCR)方法检测54例乳腺癌患者(实验组)及60例体检健康女性(对照组)外周血中EDN-3mRNA表达及其启动子甲基化发生率,比较以上两指标变化在乳腺癌患者不同临床状态的统计学差异。结果:实验组EDN-3mRNA表达较对照组显著降低,差异有统计学意义(t=-7.84,P0.01),但这种降低在患者不同年龄、不同肿瘤组织类型和大小、有否区域淋巴结转移及远处转移之间差异均无统计学意义(P0.05)。实验组EDN-3启动子甲基化检出率为55.56%(30/54),对照组未检出甲基化,差异有统计学意义(χ2=45.238,P0.01);EDN-3启动子甲基化在上述不同临床状态时的差异亦无统计学意义(P0.05)。结论:EDN-3mRNA转录下调和启动子甲基化可能与乳腺癌的发生有关,与患者临床病理状态无关。     

3 321例ICU重症患者急性胃肠功能障碍的发生及其预后

目的 总结重症医学科（ICU）重症患者急性胃肠功能障碍的发生及其预后。方法 选取2008年1月—2012年12月收住蚌埠医学院第一附属医院重症医学科的重症患者3 321例为研究对象,观察其急性胃肠损伤（AGI）的发生率;根据AGI严重程度分为AGI Ⅰ～Ⅳ组,观察比较4组重症患者的年龄、性别、急性生理学与慢性健康评估（APACHE）Ⅱ评分等一般指标,以及ICU留治时间和病死率。结果 本组3 321例中,并发AGI者2 261例,发病率68.08%,其中AGI Ⅰ级～Ⅳ级例数依次为1 123例（33.81%）、586例（17.65%）、367例（11.05%）、185例（5.57%）。男/女比例、年龄在AGI Ⅰ～Ⅳ级4组患者间比较,差异无统计学意义（P值均〉0.05）;而APACHEⅡ评分、ICU留治时间在4组间比较,差异有统计学意义（P值均〈0.01）。在纳入研究3 321例重症患者中,病死率为4.73%（157/3 321）;其中AGI Ⅰ～Ⅳ级病死率依次为2.76%（31/1 123）、6.31%（37/586）、9.81%（36/367）、28.65%（53/185）,4组间比较,差异有统计学意义（χ2=170.316,P=0.000）。结论 重症患者的急性胃肠功能障碍发生率高,严重影响患者预后。     

广东省血吸虫病巩固监测情况分析及防治对策探讨

目的了解广东省血吸虫病传播阻断后的疫情动态，探讨新形势下的防治措施。方法建立血吸虫病监测系统，在原疫区对钉螺和传染源进行同步监测。结果1996—2006年共查螺7120．29万平方米．未发现活的钉螺。复查历史病人14893人，复治2747人，复治率为18．44％（2747／14893）；外来人口调查：皮试检查2353人，阳性率为2．42％（57／2353），血清学检查7749人，阳性率为0．70％（54／7749）；低年龄组人群调查：皮试检查9073人，阳性率为3．84％（348／9073），血清学检查11498人，阳性率为5．00％（575／11498），阳性者经粪检复查未发现血吸虫感染者。解剖野鼠1753只，检查耕牛18266头，均未发现血吸虫虫卵阳性。通过被动监测，2004年，2005和2006年分别报告输入性病例46例、8例和36例，以珠江三角洲地区报告病例数最多，占94．44％（82／90）；年龄以15～55岁人群为主，占78．89％（71／90）；职业以工人为主，占30．00％（27／90）；其中急性感染病例2004年和2005年分别有1例和3例。结论目前广东省血吸虫病防治成果巩固，但必须加强监测，重点是输入性传染源及钉螺的监测。     

Development of a rapid,simple dipstick dye immunoassay for schistosomiasis diagnosis

In order to develop a rapid, simple immunodiagnostic assay for schistosomiasis, soluble egg antigen (SEA) of Schistosoma japonicum was conjugated with a blue colloidal dye (D-1) produced in China and used to detect antibodies in the sera of schistosomiasis patients. The antigen-antibody complex was captured by anti-human IgG absorbed onto a nitrocellulose membrane dipstick by means of immunochromatography. The results showed that the sensitivity of the dipstick dye immunoassay (DDIA) was 96.7% in 30 cases of acute schistosomiasis (29/30) and 94.1% (79/84) in 84 cases of chronic schistosomiasis. The specificity of the assay was 96.7% in 60 healthy subjects. Cross-reactions were observed in 10.0% of 20 cases of clonorchiasis and in 70.0% of 20 cases of paragonimiasis. The results were similar to those detected by routine ELISA. In a field evaluation of the DDIA kit, the positive rate of the DDIA was 96.7% in 121 cases of schistosomiasis, compared with 90.1% with the circumoval precipitin test (COPT). The antigen conjugated with dye was stable at room temperature for at least 6 months. The results indicated that the dipstick dye immunoassay provided high sensitivity and good specificity for the detection of schistosomiasis and the assay was rapid, simple and cheap, and did not need any equipment. It was more useful for screening target populations for selective chemotherapy than other immunoassays.     

腹腔镜辅助子宫肌瘤剔除术对不孕患者生殖预后的影响

目的观察腹腔镜辅助子宫肌瘤剔除术的可行性、安全性及对不孕症患者生殖预后的影响。方法选择单纯子宫浆膜下或肌壁间肌瘤因素引起的不孕患者71例为研究组，同期肌瘤大小、数量、部位相匹配，气腹法腹腔镜手术的72倒为对照组。观察两组手术时间、术中出血量、术后恢复、住院天数，术后肌瘤复发、妊娠和分娩的情况。结果两组患者共143例手术均顺利完成，成功率为100％。LAM组患者的手术时间较LM组明显缩短，术中出血量也较少，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。而术后患者肠功能恢复、平均住院天数两组均相似，差异无显著性（P〉0．05）。LAM组妊娠40例（56．3％），自然流产。4例（10．0％），早产2例（5．6％），剖宫产24例（66．7％）。LM组妊娠39例（54．2％），自然流产5例（12．8％），早产3例（8．8％），剖宫产25例（73．5％），两组患者妊娠及分娩期均顺利，无子宫破裂发生，相比较差异无显著性（P〉0．05）。LAM组的1年、3年和平均肌瘤复发率均明显低于LM组的患者，分别为4．2％（3／71）、11．3％（8／71）、7．0％（5／71）与15．3％（11／72）、25．0％（18／72）、19．4％（14／72），两组相比差异有显著性（P〈0．05）。结论腹腔镜辅助子宫肌瘤剔除术可行安全，临床易于操作，微创去除肌瘤后重建的子宫妊娠预后良好，值得在基层医院推广。     

直肠癌远端切缘c—myc、k—ras基因表达与术后局部复发的相关性研究

目的：探讨c-myc、k-ras基因在直肠癌远端切缘表达与直肠癌术后局部复发的相关性。方法采用免疫组织化学 SP 法检测山西医科大学附属肿瘤医院（山西省肿瘤医院）2008年1月至2011年12月间行直肠癌前切除术的47例术后局部复发患者（复发组）和50例术后未复发患者（未复发组,随访2年未发现复发）的瘤组织、近端切缘组织、远端切缘组织c-myc基因和k-ras基因表达情况,并进行比较。结果（1）复发组中k-ras基因在瘤体、近端切缘及远端切缘的表达阳性率分别为76.6%、53.2%、68.1%,在未复发组中的阳性率分别为62.0%、54.0%、66.0%;复发组、未复发组瘤组织、近端切缘组织、远端切缘组织k-ras基因表达情况两组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）;（2）复发组中c-myc基因在瘤组织、近端切缘及远端切缘的表达阳性率分别为66.0%、74.5%、93.6%,在未复发组中的阳性率分别为54.0%、70.0%、58.0%;两组瘤组织、近端切缘组织c-myc基因表达情况比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而远端切缘组织c-myc基因表达情况比较,复发组表达阳性率明显高于未复发组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论c-myc基因在远端切缘组织中的过度表达与直肠癌术后局部复发存在某种相关性。